小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子基因和蛋白表达及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨黄芪甲甙对小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA表达和蛋白质产生的影响.方法 Balb/c小鼠50只随机分为5组,空白对照组,腹腔无菌注射不含病毒的Eagle's培养基0.1 mL,在腹腔注射病毒培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;病毒性心肌炎对照组,小鼠每只腹腔注射0.1 mL内含1×105TCID50柯萨奇B3病毒的Eagle's培养基,在腹腔注射含病毒的Earle's培养基30 min后,以生理盐水0.1 mL灌胃,共7 d;黄芪甲甙低、中、高剂量干预组,在腹腔注射病毒30 min后,用黄芪甲甙剂量分别为0.07、0.2和0.6 ms/(kg·d)0.1 mL灌胃,共7 d.14 d后处死全部小鼠并取其心脏.心脏组织一半用于逆转录聚合酶链反应法测定心脏细胞因子mRNA表达.另一半用Western blot测定细胞因子蛋白质生成量.结果 空白对照组上述细胞因子均无明显表达,心肌炎对照组肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β,白细胞介素6和白细胞介素10 mRNA和蛋白产生均显著高于空白对照组;同心肌炎对照组比较,高剂量黄芪甲甙组的肿瘤坏死因子α,白细胞介素1β.白细胞介素6 mRNA和蛋白生成均显著下降,而白细胞介素10mRNA和蛋白明显升高.结论 黄芪甲甙明显降低小鼠柯萨奇B3病毒性心肌炎心脏的致炎症细胞因子肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β和白细胞介素6,而升高炎症保护因子白细胞介素10.     

病毒性心肌炎心肌颗粒酶B表达的实验研究

目的探讨颗粒酶B在柯萨奇病毒B组病毒介导的病毒性心肌炎心肌病变及发病机制中的作用。方法将36只5周～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成两组:正常组10只,模型组26只。模型组以病毒液0.1mL腹腔注射建立模型,正常组予0.1mL不含病毒的Eagle′s基本必需培养基液腹腔注射。于第11d处死小鼠取出心脏,分别在肉眼下、光镜下和电镜下观察心肌的病变并计分;以半定量逆转录酶聚合酶链反应和免疫组化方法检测心肌颗粒酶B的表达。结果模型组心肌大体病变计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(3.2±1.6)分vs.(0.2±0.1)分,P<0.01]。光镜下模型组心肌病理计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(8.4±4.5)分vs.(0.3±0.1)分,P<0.01]。电镜下模型组心肌细胞超微结构损害严重,正常组心肌细胞超微结构均正常。免疫组化显示模型组每高倍视野颗粒酶B阳性细胞数显著高于正常组,差异有统计学意义[(2.7±1.1)个vs.(0.0±0.0)个,P<0.01]。直线相关与回归分析表明,模型组小鼠心肌浸润细胞颗粒酶B阳性细胞数与心肌病理计分呈显著正相关(r=0.859,P<0.01)。逆转录酶聚合酶链反应...     

单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预研究

目的 探讨单核细胞趋化蛋白1在病毒性心肌炎中的作用及黄芪甲甙干预后的变化.方法 55只雄性Bal/c小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型对照组(n=15)、低剂量干预组(n=15)及高剂量干预组(n=15),后3组小鼠经腹腔接种0.1mL柯萨奇病毒B3建立病毒性心肌炎模型,低剂量干预组和高剂量干预组于病毒接种后当天分别以0.01g/L、0.09g/L黄芪甲甙0.1mL灌胃,正常对照组和模型对照组均以羧甲基纤维素钠溶液灌胃,第15天处死全部存活小鼠,心脏石蜡切片HE染色计算病理积分,免疫组织化学染色检测单核细胞趋化蛋白1蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应检测单核细胞趋化蛋白1mRNA表达.结果 正常对照组、模型对照组、低剂量干预组及高剂量干预组死亡率分别为0、46.7%、40.0%、13.3.0%,高剂量干预组死亡率明显低于模型对照组和低剂量干预组(P<0.05).模型对照组心肌单核细胞趋化蛋白1mRNA及蛋白表达水平均明显高于正常对照组(P<0.01),高剂量干预组病理积分及单核细胞趋化蛋白1mRNA、蛋白表达量较模型对照组、低剂量干预组显著降低(P<0.05或0.01).结论 单核细胞趋化蛋白1参与病毒性心肌炎发病过程,黄芪甲甙对病毒性心肌炎的治疗作用可能与其抑制单核细胞趋化蛋白1表达有关.     

病毒性心肌炎心肌颗粒酶B表达的实验研究

目的 探讨颗粒酶B在柯萨奇病毒B组病毒介导的病毒性心肌炎心肌病变及发病机制中的作用.方法 将36只5周～6周龄雄性BALB/c小鼠随机分成两组:正常组10只,模型组26只.模型组以病毒液0.1 mL腹腔注射建立模型,正常组予0.1 mL不含病毒的Eagle's基本必需培养基液腹腔注射.于第11 d处死小鼠取出心脏,分别在肉眼下、光镜下和电镜下观察心肌的病变并计分;以半定量逆转录酶聚合酶链反应和免疫组化方法 检测心肌颗粒酶B的表达.结果 模型组心肌大体病变计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(3.2±1.6)分 vs. (0.2±0.1)分,P<0.01].光镜下模型组心肌病理计分显著高于正常组,差异有统计学意义[(8.4±4.5)分vs. (0.3±0.1)分,P<0.01].电镜下模型组心肌细胞超微结构损害严重,正常组心肌细胞超微结构均正常.免疫组化显示模型组每高倍视野颗粒酶B阳性细胞数显著高于正常组,差异有统计学意义[(2.7±1.1)个 vs.(0.0±0.0)个,P<0.01].直线相关与回归分析表明,模型组小鼠心肌浸润细胞颗粒酶B阳性细胞数与心肌病理计分呈显著正相关(r=0.859,P<0.01).逆转录酶聚合酶链反应产物电泳条带的半定量分析表明,模型组心肌颗粒酶B扩增产物产量高,而正常组无颗粒酶B表达.结论 心肌浸润细胞中颗粒酶B的表达在病毒性心肌炎心肌损伤中起一定作用,其表达水平与心肌病理损害严重程度一致.     

细胞间黏附分子-1在心肌炎小鼠心肌中的表达及黄芪的干预作用

目的研究细胞间黏附分子-1(ICAM-1)在病毒性心肌炎小鼠心肌组织中的表达,并探讨黄芪对其表达的影响.方法每只BALB/c小鼠腹腔接种半数组织感染率(TCID50)为108/mL的柯萨奇B3病毒0.1 mL.黄芪治疗组于接种病毒后24 h起灌喂黄芪30mg/g,每日1次,共5d.接种病毒后第7天、第14天、第21天分别处死小鼠,免疫组化法检测心肌组织ICAM-1表达.结果心肌炎小鼠心肌细胞和血管内皮细胞ICAM-1表达明显,而正常对照组仅少量血管内皮细胞表达ICAM-1,黄芪治疗可下调ICAM-1表达.结论病毒性心肌炎小鼠心肌组织ICAM-1表达增强,早期黄芪治疗有减弱ICAM-1表达的作用.     

益心饮对感染柯萨奇B3病毒小鼠心肌组织穿孔素和颗粒酶B基因表达的影响

本实验在小鼠急性病毒性心肌炎模型上观察了益心饮对心肌穿孔素和颗粒酶BmRNA表达水平的影响。1 .材料与方法 :雄性Balb/c小鼠、4～ 6周龄、体重 (2 0±2 ) g ,1 2 0只 ,分为正常对照组 ,病毒模型组 ,病毒 黄芪对照组 ,病毒 益心饮低、中、高剂量组 ,每组各 2 0只。除正常对照组外 ,均于实验当日在小鼠腹腔注射柯萨奇B3病毒(CVB3 )稀释液 0 2ml复制病毒性心肌炎动物模型。正常对照组腹腔注射 0 2ml不含病毒的稀释液。实验当日在病毒接种 30min后 ,各组灌胃黄芪注射液 1 0 g·kg-1 ·d-1 、益心饮 2 5g·kg-1 ·d-1 、5g·kg-1 ·d-…     

硫氧还蛋白对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞保护的抗氧化机制

目的 探讨硫氧还蛋白保护病毒性心肌炎的抗氧化作用及其调节转录因子的作用.方法 选用Balb/C小鼠24只,随机分为3组:对照组、硫氧还蛋白(TRX)保护组、病毒感染组.病毒感染组、TRX保护组给予腹腔注射1000TCID50柯萨奇B3病毒(CVB3)0.1 ml,TRX保护组同时给予尾静脉注射rhTRX(2 mg/kg),而病毒感染组同时给予生理盐水作对照.14 d后处死动物,光镜下观察心肌病理形态学变化;用免疫组化法检测心肌组织NF-κB的含量,同时检测血清过氧化脂质(LPO) 含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性.结果 光镜下可见病毒感染组小鼠出现局灶性心肌坏死和炎细胞浸润,对照组和TRX保护组心肌细胞未见异常.病毒组小鼠血清中丙二醛(MDA)含量与对照组相比明显增高,差异有统计学意义(P<0.01),保护组与病毒组相比MDA 含量明显下降(P<0.01);血清GSH-Px活性与对照组比较明显下降(P<0.01),而TRX保护组与病毒组比较则明显升高(P<0.01).病毒组心肌组织中NF-κB的表达与对照组相比明显增高,而保护组心肌组织中NF-κB的表达与病毒组相比明显下降(P<0.01).结论 重组人硫氧还蛋白能够减轻心肌细胞的损伤,其机制与清除自由基、提高谷胱甘肽过氧化物酶活性以及调节转录因子的表达密切相关.     

黄芪总黄酮对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠心肌病理改变和超微结构的影响

目的 探讨黄芪总黄酮（TFA）对柯萨奇B3病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌病理改变的影响.方法 Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇B3病毒感染建立VMC小鼠模型,予黄芪总黄酮（TFA）高、中、低剂量灌胃治疗,于14 d观察心肌病理及超微结构改变,计算心肌病理组织学积分.结果 模型组心肌超微结构改变重于黄芪总黄酮组,黄芪总黄酮组与模型组比较病理积分下降明显,尤其是高剂量组,差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 黄芪总黄酮能有效地维护小鼠心肌纤维及膜系统的稳定性.     

巨噬细胞炎性蛋白-2在病毒性心肌炎小鼠中的表达及黄芪的干预作用

目的：探讨巨噬细胞炎性蛋白-2（MIP-2）在病毒性心肌炎（VMC）小鼠心肌中的表达及黄芪的干预作用。方法：将40只雄性Bal b/c小鼠随机分为正常对照组[腹腔接种不含柯萨奇B3病毒（CVB3）的Eagle’培养液,10例]、模型组（15例）和治疗组（15例）,模型组和治疗组腹腔接种CVB3建立VMC模型,治疗组腹腔注射黄芪注射液（10g/kg.d）,其余两组注射等容积生理盐水。第14d处死小鼠,行苏木素伊红（HE）染色计算心肌病理积分,用化学发光法检测肌钙蛋白（cTnI）,蛋白质免疫印迹法检测MIP-2蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测MIP-2 mRNA表达。结果：14d后,治疗组生存率较模型组明显升高（80.0%∶53.33%,P〈0.05）;与正常对照组比较,模型组病理积分[0分∶（2.57±0.48）分]、血清cTnI水平[（0.27±0.04）ng/mL∶（0.62±0.17）ng/mL]、心肌MIP-2 mRNA[（0.31±0.06）∶（0.92±0.23）]及蛋白表达[（0.24±0.05）∶（0.67±0.18）]水平均明显提高（P〈0.01）,且MIP-2蛋白表达与病理积分和cTnI呈正相关（r=0.89,P〈0.01;r=0.74,P〈0.05）;治疗组病理积分[（1.42±0.27）分]、cTnI[（0.39±0.11）ng/mL]、MIP-2 mRNA[（0.71±0.18）]及蛋白表达[（0.43±0.12）]较模型组明显降低（P均〈0.05）。结论：病毒性心肌炎MIP-2表达显著增加,其表达水平与心肌病变严重程度密切相关,提示MIP-2参与病毒性心肌炎发病过程,减少其产生可能是黄芪治疗病毒性心肌炎的机制之一。     

果王素对大鼠阿霉素心肌损伤的保护作用及抗氧化机制

目的观察果王素对大鼠阿霉素心肌损伤的保护作用,并探讨其作用机理。方法40只SD大鼠随机分为4组:对照组大鼠胃饲和腹腔注射生理盐水,阿霉素组大鼠胃饲生理盐水和腹腔注射阿霉素,阿霉素 果王素低剂量组(ADR Lg组)大鼠胃饲低剂量果王素和腹腔注射阿霉素,阿霉素 果王素高剂量组(ADR Hg组)大鼠胃饲高剂量果王素和腹腔注射阿霉素。观察大鼠心率和体重变化,计算死亡率;测定各组大鼠肌酸激酶同工酶、谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和铜—锌—超氧化物歧化酶活力;免疫组织化学与半定量逆转录聚合酶链反应分别检测铜—锌—超氧化物歧化酶蛋白及其mRNA表达水平。结果与阿霉素组比较,阿霉素 果王素高剂量组心率变化率显著下降(P<0.05),体重无显著性变化(P>0.05),肌酸激酶同工酶显著性下降(P<0.01),谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和铜—锌—超氧化物歧化酶活力增加(P<0.05),铜—锌—超氧化物歧化酶蛋白及其mRNA表达增加(P<0.05),死亡率下降;与阿霉素组比较,阿霉素 果王素低剂量组以上指标均无显著性差异。结论果王素对大鼠阿霉素心肌损伤有明显疗效,其疗效成剂量依赖性,可能为一种有效的心脏保护药物。其机制可能与其清除氧自由基、抑制氧化应激等作用有关。     

ADAMTS-1与小鼠急、慢性病毒性心肌炎心肌纤维化相关性的初步研究

目的检测ADAMTS-1（adisintegrinandmetalloproteasewitIlthrombospondintype1motifs）在急、慢性柯萨奇病毒取（CVB,）心肌炎小鼠心肌组织中的表达,并分析其与心肌纤维化的关系。方法以CVB,单次感染或重复增量感染Balb／c小鼠分别建立急性病毒性心肌炎（n=20）及慢性病毒性心肌炎（n=25）模型,同期小鼠腹腔无菌注射等剂量不含病毒的EMEM液作为各自正常对照组（n均=10）。以苦味酸天狼猩红行心肌胶原组织特异性染色,并运用图像分析软件计算心肌组织中的胶原容积积分（CVF,％）。用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组织化学方法分别检测小鼠心肌组织中ADAMTS。1基因水平和蛋白水平的表达。结果两组病毒性心肌炎小鼠心肌组织中CVF显著增加,并以慢性组更为显著（P〈0．01）。急、慢性病毒性心肌炎组ADAMTS-1mRNA分别比其对照组明显高,尤以慢性组更为显著（P〈0．05）。免疫组织化学检测结果显示ADAMTS-1在心肌组织细胞胞浆内表达,各实验组小鼠心肌组织中ADAMTS-1mRNA的表达与CVF呈正相关。结论ADAMTS-1在急、慢性病毒性心肌炎心肌组织中呈进行性增加并与胶原增生密切相关,表明ADAMTS-1可能通过调节胶原代谢参与了心肌纤维化的发生发展。     

肌球蛋白致自身免疫性心肌疾病的实验研究

目的　探索在没有病毒感染的情况下 ,自身免疫机制在心肌炎和心肌病发病中的作用。方法　 (1)猪心肌肌球蛋白致BALB/C鼠自身免疫性心肌疾病模型的复制 :实验组 (n =32 )于实验的第 0 ,7和 30天 3次注射肌球蛋白 ,对照组 (n =2 0 )与实验组同样的时间注射弗氏完全佐剂 ,于初次免疫后的第 15 ,2 1和 12 0天分别留取血清和心肌标本。 (2 )病毒性心肌炎模型的复制 :病毒接种组 (n =2 2 )给予 10 3 TCID50 / 0 1mlCVB3 溶液腹腔注射 ,对照组 (n =10 )给予Vero细胞冻融液 0 1ml腹腔注射 ,接种时间及采样时间同肌球蛋白免疫组。 (3)抗体检测 :ELISA法检测小鼠血清抗肌球蛋白抗体。结果　病理结果显示 ,肌球蛋白致心肌炎小鼠急性期 (15和 2 1d)以心肌纤维变性坏死和淋巴细胞浸润较明显 ,间质病变较轻 ,内膜和心瓣膜无明显改变 ;慢性期 (12 0d)仅见心肌纤维化 ,急慢性期均可检测到高滴度的抗肌球蛋白抗体 (P <0 0 0 1) ,对照组为正常心肌 ,抗体滴度低。病毒接种组慢性期亦显示成纤维细胞增生。结论　心肌肌球蛋白可以作为自身抗原刺激机体产生自身免疫反应 ,在没有病毒感染的情况下 ,单一的自身免疫机制即可导致心肌炎向心肌病的转化。     

柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体和连接蛋白43的表达

目的观察柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)表达变化,探讨病毒性心肌炎(VMC)室性心律失常发生机制。方法40只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为VMC组(n=20)和对照组(n=20)。VMC组小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株悬液0.1ml,对照组小鼠腹腔注射不含病毒的RPMI1640培养基0.1ml,分别于接种病毒后第14天无痛苦处死全部小鼠并留取心脏。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心室肌组织pri-miRNA-1的表达,免疫组织化学法检测Cx43蛋白水平表达,并进行半定量分析。结果①VMC组小鼠心室肌组织pri-miRNA-1表达量明显高于对照组(0.82±0.04vs0.63±0.07,P(0.01);②VMC组小鼠心室肌组织炎症病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,Cx43蛋白表达明显低于对照组(0.27±0.01vs0.42±0.02,P(0.01);③VMC组小鼠心室肌组织的pri-miRNA-1表达量与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=-0.868,P(0.01)。结论CVB心肌炎小鼠急性期心肌组织pri-miRNA-1表达上调,Cx43蛋白表达下降,miRNA-1可能通过抑制Cx43表达促进室性心律失常的发生。     

白细胞介素-17A调节转化生长因子β1对病毒性心肌炎小鼠心肌纤维化的影响

目的 在小鼠病毒性心肌炎（viral myocarditis,VMC）心肌纤维化的发展过程中,观察白细胞介素-17A（interleukin-17A,IL-17A）是否通过调节转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）参与心肌纤维化.方法 IL-17A基因敲除（IL-17A-deficient,IL-17A-/-）Balb/c小鼠和野生型（wild-type,WT） Balb/c小鼠分别按电脑随机数字表法分为4组,腹腔注射TCID50为10-5的柯萨奇病毒B3 （coxsackie virus B3,CVB3） 0.1 mL培养液建立小鼠VMC模型,于注射病毒后第0、14、28和42天处死小鼠,然后无菌取心脏组织,苏木素-伊红和Masson染色观察心肌组织形态学,并分别计算心肌病理积分和胶原容积积分（CVF）.实时荧光定量聚合酶链反应检测心肌组织TGF-β1mRNA的表达;酶联免疫吸附测定法检测心肌组织TGF-β1蛋白的表达水平.结果 WT小鼠的心肌纤维化随着VMC的病程发展不断加重,TGF-β1于14 d表达显著升高,28 d和42 d后逐渐下降,但仍高于正常水平,差异有统计学意义（P＜0.05）.与同时点WT小鼠相比,IL-17A-/-小鼠心肌组织的心肌纤维化程度明显减轻,TGF-β1mRNA和蛋白的表达水平明显降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 IL-17A参与VMC的心肌纤维化过程,并可能通过调节TGF-β1的表达而参与这一过程.     

重组人硫氧还蛋白对小鼠病毒性心肌炎的保护作用

目的 观察重组人硫氧还蛋白(TRX)对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用.方法 给予Balb/c小鼠腹腔注射0.1 ml 100TCID50(50%细胞感染率)的柯萨奇B3m病毒(CVB3m),建立病毒性心肌炎模型,同时给予尾静脉注射2 mg/kg的重组人TRX加以保护,对照组给予等量的生理盐水,7 d后处死动物,检测血清乳酸脱氢酶(LDH) 活性,采用光镜观察心肌组织损伤情况.结果 病毒感染组小鼠血清LDH活性[(313030±390.57)U/L)]明显高于对照组[(1617.86±155.42)U/L]和TRX保护组[(1959.43±540.75)U/L],两两比较差异有统计学意义(P<0.05);TBX保护组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05).光镜结果显示,病毒感染组8只小鼠有5只检出心肌病变,小鼠心脏病理切片可见局灶性心肌坏死和炎细胞浸润;而TRX保护组小鼠未出现心肌损伤.结论 重组人TBX可以减轻CVB3m病毒感染导致的心肌损伤,起到心肌保护作用.     

中药芪芍五味合剂对病毒性心肌炎小鼠心肌细胞凋亡和坏死的影响

取 2 4 0只 4周龄 Balb/ c雄性小鼠 ,随机等分为 6组 (每组 4 0只 ) ,即 :正常对照组 (A组 )、中药对照组 (B组 )、病毒对照组 (C组 )、中药治疗组 (D组 )、维生素 C治疗组 (E组 )、病毒唑治疗组 (F组 )。 A、B两组每只小鼠均腹腔接种 0 .1ml不含病毒的 Eagle's液 ,C～F组每只小鼠服腔接种 0 .1ml10 7.5TCID/ ml的柯萨奇 B3(CVB3)病毒液。根据分组分别给予不同的药物治疗。结果 :病毒性心肌炎时心肌细胞的凋亡率和坏死率均显著增加。心肌细胞凋亡高峰在CVB感染后 7～ 10天 ,而心肌坏死高峰出现在 CVB3感染后 14天 ,并且与组织形态学观察一致。应用中药黄芪、赤芍治疗后 ,心肌细胞凋亡率和坏死率均显著降低 (P <0 .0 5 ) ,维生素 C和病毒唑均可降低心肌细胞坏死率 ,但对心肌细胞凋亡影响不大。 CVB感染 3～ 7天内 ,各感染组心肌细胞凋亡率和坏死率均与心肌内病毒滴度呈正相关 (r =0 .76、P <0 .0 1,r=0 .5 4、 P <0 .0 5 ) ;而感染 10～ 30天 ,凋亡率及坏死率与病毒含量无相关性。各感染组心肌细胞凋亡率与坏死率均与心肌病理积分呈正相关 (r=0 .5 5、P <0 .0 5 ,r=0 .76、P<0 .0 1)。中药黄芪、赤芍、五味子可明显减轻病毒性心肌炎小鼠的病理损害程度 ,显著降低病毒性心肌炎心肌细胞凋亡率和坏死率 ,对     

病毒性心肌炎小鼠白细胞介素17和γ干扰素双阳性细胞的变化

目的 观察病毒性心肌炎(VMC)小鼠不同时间点白细胞介素17和γ干扰素双阳性细胞(IL-17 +/IFN-γ+细胞)的变化,探讨其在VMC发病中的作用.方法 雄性Balb/c小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3( CVB3)建立VMC小鼠模型(VMC组),对照组注射等量磷酸盐缓冲液,在注射的第0、1、2、3、4和6周苏木精-伊红染色观察心肌病理改变并计算心肌病理积分,流式细胞仪检测小鼠IL-17+/IFN-γ+细胞占CD4+T细胞的比例.结果 VMC组小鼠心肌组织病理积分于第1周升高(1.8±0.5),第2周达到最高(2.8±0.5),第3周开始逐渐降低,VMC组各时点与对照组相应时点比较差异均有统计学意义(P均＜0.05).VCM组小鼠各时点脾IL-17+/IFN-γ+细胞维持在低水平,与对照组相应时点比较差异均无统计学意义(P均＞0.05),Spearman相关性分析显示IL-17+/IFN-γ+细胞与心肌病理积分无显著相关(P＜0.05).结论 VMC小鼠中存在少量IL-17 +/IFN-γ+细胞,但可能与VMC的炎性过程无关.     

病毒性心肌炎中树突状细胞的体内迁移及机制

目的观察树突状细胞（DCs）在小鼠急性病毒性心肌炎（VMC）中的迁移途径及趋化因子的作用。方法雄性Balb／c小鼠随机分为正常对照组60只和VMC组80只。VMC组腹腔注射柯萨奇B组病毒（CVB3）,正常组腹腔注射等容积不含病毒的EMEM液。趋化实验分析DCs对CCL4、CCL19的趋化反应;检测心肌组织中DCs相应的趋化因子CCL4、CCL19及其受体CCR5、CCR7的表达变化以及脾脏中CCL19和CCR7的表达情况。DCs体外感染CVB3后检测CCR5和CCR7表达。结果VMC组DCs对趋化因子CCL4、CCL19的趋化反应能力增强（P〈0．05）;VMC组心肌组织中CCR5和CCR7及CCL4和CCL19表达增加（P〈0．05）,脾脏中CCR7和CCL19表达均增加（P〈0．05）。DCs体外感染CVB324小时后CCR5和CCR7表达明显上升。结论DCs在急性病毒性心肌炎小鼠体内发生定向迁移,和趋化因子与趋化因子受体相互作用有关。