还原型谷胱甘肽对早期糖尿病慢性肾脏疾病患者氧化应激、血管新生及免疫功能指标的影响

目的 探讨还原型谷胱甘肽(GSH)对早期糖尿病慢性肾脏疾病(CKD)患者氧化应激(OS)、血管新生及免疫功能指标的影响。方法随机盲法将90例CKD患者分为对照组和治疗组,另选40名健康对照组。检测各组晚期蛋白氧化产物(AOPP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、血管内皮生长因子(VEGF)、内皮抑素(ES)及免疫细胞因子。结果治疗组治疗后BUN、UAER、TG及FPG与其他组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01);AOPP,MDA,VEGF,ES及免疫功能指标中CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD4+/CD8+细胞、CD3-CD19+B细胞与对照组比较,差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。Pearson相关分析显示,AOPP与SOD、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3-CD16+CD56+NK T细胞呈负相关(P0.01),与MDA、VEGF、ES及CD3-CD19+B细胞呈正相关(P0.05或P0.01);SOD与MDA、VEGF、ES负相关(P0.01),与CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3-CD16+CD56+NK T细胞呈正相关(P0.01);MDA与VEGF、ES、CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3-CD16+CD56+NK T细胞呈正相关(P0.05或P0.01),与CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3-CD16+CD56+NK T细胞呈负相关(P0.01);CKD与AOPP、MDA、VEGF呈正相关,与SOD、CD3+T细胞、CD3+CD8+T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞、CD3-CD16+CD56+NK T细胞呈负相关(P0.05或P0.01)。结论GSH能降低CKD患者AOPP、MDA、VEGF的水平,同时能升高ES、SOD及T淋巴细胞、NK细胞因子水平;OS与CKD异常血管新生、细胞免疫应答失衡有关。     

射频消融对原发性肝癌患者外周血T细胞亚群及NK细胞变化的影响

目的探讨射频消融(RFA)对原发性肝癌患者外周血T细胞亚群及自然杀伤(NK)细胞的影响。方法回顾性分析接受RFA治疗的45例原发性肝癌患者的临床资料,同时随机抽选31例健康体检者为对照组,采用流式细胞仪检测RFA组治疗前后及对照组外周血T细胞亚群〔CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、细胞毒性淋巴细胞(CTL)〕及NK细胞水平的变化。结果 45例原发性肝癌患者全部完成RFA治疗,随访3¹0个月,30例(66.67%)无瘤生存,15例(33.33%)术后3个相继出现肝内新发病灶,患者肝区疼痛、腹胀、食欲、精神等自觉症状明显改善;治疗前RFA组CD3+、CD4+、CTL及NK细胞水平,CD4+/CD8+比值(61.5±12.5、32.9±10.9、10.2±6.5、1.4±0.6、4.6±2.1)均显著低于健康对照组,CD8+T细胞水平(27.6±6.3)高于对照组(P<0.05);治疗后1、2 w RFA组CD3+、CD4+、CTL、NK细胞水平,CD4+/CD8+比值(72.3±10.8、39.6±11.6、15.2±6.1、1.7±0.7、10.9±5.2,73.3±11.6、39.0±12.1、13.8±6.6、1.8±0.5、12.1±5.7)均明显高于治疗前,CD8+T细胞水平(22.5±6.1、22.0±5.8)明显低于治疗前(P<0.05);治疗1 w与治疗2 w比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RFA治疗可以通过调节原发性肝癌患者的T细胞亚群水平,升高NK细胞而改善患者的免疫抑制状态。     

大肠癌患者血清转化生长因子β1水平与细胞免疫的关系

目的 探讨大肠癌患者血清TGFβ1水平与外周血T细胞亚群、NK细胞活性的相关性及临床意义.方法50例经病理证实的大肠癌,用ELISA法检测血清TGFβ1水平,用SAP法检测T细胞亚群,用LDH释放法检测NK细胞活性;分析TGFβ1与T细胞亚群、NK细胞活性的相关性及其临床意义.结果大肠癌患者血清TGFβ1水平为40.4±17.6(μg.L-1),高于对照组的19.2±7.9(μg.L-1)(P＜0.05);CD8+细胞明显高于正常对照组45.3±9.9(%)va32.2±7.8(%),P＜0.05;CD3+和CD4+细胞、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性明显低于正常对照组,分别是46.2±8.6(%)vs61.3±9.5(%),36.4±7.6(%)vs47.3±6.9(%),1.2±0.3vs1.7±0.4,24.6±6.6(%)vs31.3±7.1(%),P＜0.05.Ⅲ、Ⅳ期大肠癌患者血清TGFβ1水平、CD8+细胞明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者,分别是50.5±16.1(μg.L-1)vs34.3±9.8(μg.L-1),49.7±9.1(%)vs38.4±9.8(%)(P＜0.05);CD3+和CD4+细胞、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性明显低于Ⅰ、Ⅱ期患者,分别是37.2±9.2(%)vs49.6±8.4(%),28.5±8.3(%)vs42.3±6.7(%),0.6±0.4vs1.5±0.2,16.2±5.9(%)vs28.3±7.8(%)(P＜0.05);TGFβ1与CD3+细胞、CD4+细胞、CD4+/CD8+比值、NK细胞活性呈负相关,与CD8+细胞呈正相关.结论TGFβ1通过抑制患者的免疫功能而促进肿瘤的发生发展、浸润转移,检测血清TGFβ1的水平可为临床治疗提供参考.     

慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞计数变化及其临床意义

目的观察慢性乙型肝炎患者外周血NK细胞和T淋巴细胞数量的变化。方法在56例乙型肝炎肝衰竭、49例HBeAg阳性慢性乙型肝炎和41例乙型肝炎病毒携带者使用流式细胞仪检测外周血CD3+T细胞、CD3+CD4+T细胞、CD3+CD8+T细胞和NK(CD3-CD16+CD56+)细胞占淋巴细胞的比率(%)。结果肝衰竭患者CD3+T细胞和CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比慢性乙型肝炎患者和乙型肝炎病毒携带者显著性降低(P0.05);慢性乙型肝炎患者CD3-CD16+CD56+NK细胞计数比乙型肝炎病毒携带者显著性升高(P0.05)。结论乙型肝炎肝衰竭患者外周血T细胞和NK细胞数量减少,而HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者外周血T细胞数量增多。     

射频消融术治疗原发性肝癌患者外周血淋巴细胞和NK细胞的变化

目的观察肝癌患者经射频消融(RFA)治疗后外周血淋巴细胞亚群和NK细胞的变化,探讨射频消融术对肝癌患者免疫功能的影响。方法采用射频消融治疗仪治疗原发性肝癌患者66例,采用流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群和NK细胞的变化。结果在RFA治疗4 w后,患者外周血CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值和CD16+CD56+细胞百分比分别为(73.3±11.3)%、(41.3±12.5)%、(1.8±0.5)和(18.9±6.1)%,较RFA治疗前的(60.3±9.7)%、(31.5±10.6)%、(1.5±0.6)和(10.1±5.0)%均升高,差异均有统计学意义(P0.05);CD8+和CD19+细胞百分比略升高,但差异无统计学意义(P0.05)。结论原发性肝癌患者细胞免疫功能处于抑制状态,RFA治疗可以激发机体细胞免疫功能,调节淋巴细胞亚群,升高NK细胞,从而改善患者的免疫抑制状态。     

益气生血法联合FOLFOX化疗对胃癌肿瘤标志物和免疫调控的影响

[目的]观察益气生血法联合FOLFOX化疗对胃癌肿瘤标志物和免疫调控的影响。[方法]选取我院68例中晚期胃癌患者作为研究对象,分为观察组、对照组(各34例)。对照组采用FOLFOX化疗方案进行治疗,观察组采用益气生血法联合FOLFOX化疗进行治疗,比较2组的疗效、肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原(CA12-5、CA15-3、CA19-9)、血细胞簇分化抗原(CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+)及自然杀伤细胞(NK)的水平。[结果]观察组总有效率为76.5%(26/34)显著高于对照组的50.0%(17/34)(P0.05)。治疗前2组CEA、CA12-5、CA15-3、CA19-9比较,差异无统计学意义;治疗后2组CEA、CA12-5、CA15-3、CA19-9均下降(P0.05);治疗后观察组CEA、CA12-5、CA15-3、CA19-9均低于对照组(P0.05)。治疗前2组CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+及NK细胞比较差异无统计学意义,治疗后观察组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+及NK细胞均增高,CD8~+下降;对照组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+及NK细胞均下降,CD8~+增高(P0.05);治疗后观察组免疫调控指标均优于对照组(P0.05)。[结论]益气生血法联合FOLFOX化疗改善胃癌的疗效,降低血清中肿瘤标志物的表达,提高机体的免疫功能。     

原发性免疫性血小板减少症患者脾切除术前T淋巴细胞亚群检测的临床意义

目的分析激素治疗无效或停药后复发的原发性免疫性血小板减少症(ITP)患者脾切除术前T淋巴细胞亚群、自然杀伤细胞的变化,探讨其与脾切除后ITP早期复发的关系。方法收集2009年1月-2015年12月于深圳市宝安区人民医院治疗的ITP脾切除患者32例,随访时间3~60个月,按脾切除疗效分为早期复发组(脾切除后6个月内复发,PLT30×109/L)及有效组(脾切除后PLT30×109/L且较切除前PLT增加2倍以上)。应用流式细胞技术检测患者脾切除术前外周血T淋巴细胞亚群(CD3+CD4+、CD3+CD8+、CD3+CD4+/CD3+CD8+、CD3-CD19+)及CD56+CD16+自然杀伤细胞的百分比(CD3-/CD16+CD56+)。计量资料组间比较采用t检验,计数资料组间比较采用χ2检验或Fisher检验。结果早期复发组患者11例(占34.4%),有效组21例(占65.6%)。早期复发组脾切除术前CD3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+明显低于有效组[(21.7±5.4)%vs(32.6±4.1)%,t=6.39,P=0.015;0.65±0.21 vs 1.29±0.36,t=3.92,P=0.003];早期复发组脾切除术前CD3+CD8+明显高于有效组[(34.5±5.9)%vs(26.8±6.6)%,t=-3.20,P=0.030];两组患者CD3-/CD16+CD56+、CD3-CD19+差异均无统计学意义(P值均0.05)。结论行脾切除术治疗前CD3+CD4+、CD3+CD4+/CD3+CD8+低的ITP患者,术后易出现复发,提示T淋巴细胞亚群异常可作为ITP脾切除疗效预测的参考指标之一。     

原发性肝癌根治术后恶性胸腹水患者T淋巴细胞及NK细胞水平观察

目的 观察原发性肝癌根治术后恶性胸腹水患者T淋巴细胞及自然杀伤(NK)细胞水平。方法 2019年3月—2022年3月陕西省榆林市第二医院收治的100例原发性肝癌根治术后胸腹水患者，根据胸腹水良恶性将患者分为恶性组(24例)和非恶性组(76例)。检测胸腹水T淋巴细胞和NK细胞，以受试者工作特征曲线(ROC)分析CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、NK细胞水平诊断恶性胸腹水的价值，以Spearman等级相关系数分析CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、CD3⁺CD8⁺、NK细胞水平与恶性胸腹水发生风险的的相关性。结果 恶性组CD3⁺、CD3⁺CD4⁺、NK细胞水平分别为(61.2±11.3)%、(67.2±13.1)%、(20.4±3.4)%,显著低于非恶性组[分别为(75.3±9.9)%、(73.6±8.5...     

老年肺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和自然杀伤细胞的临床及意义

目的探讨老年肺癌患者T淋巴细胞亚群和自然杀伤(NK)细胞水平及临床意义。方法该校附属医院80例老年肺癌患者作为观察组,回顾分析外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞检测结果,与另选的80例健康受检者(对照组)进行对比分析,并于术后20 d复查肺癌患者的外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞,对比缓解者与未缓解者的检查结果。结果外周血T淋巴细胞亚群与NK细胞表达水平检测中,观察组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+比值与NK细胞水平较对照组明显降低(P0.05),CD8+表达水平明显高于对照组(P0.05)。观察组于术后20 d复查T细胞亚群和NK细胞,根据结果分为两组进行分析,发现缓解组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+和NK表达均较化疗前明显上升,CD8+表达显著降低(P0.05)。而未缓解组各项指标化疗前后无明显变化(P0.05)。结论 NK细胞与外周血T淋巴亚群对诊断、评价肺癌的疗效、判断预后具有重要价值。     

免疫性血小板减少性紫癜35例患者外周血免疫细胞亚群的检测及其临床意义

目的 探讨免疫细胞亚群的变化在免疫性血小板减少性紫癜(ITP)发病机制中的作用及其临床意义.方法 应用流式细胞术检测35例ITP患者治疗前、后及20例正常对照者免疫细胞亚群各指标的变化,包括CD3+、CD4+、CD8+、CD56+、CD19+淋巴细胞及CD4+/CD8+比值.结果 ITP患者CD3+ T淋巴细胞百分比(61.58±6.45)%、CD4+ T淋巴细胞百分比(28.38±4.89)%、CD4+/CD8+比值(0.99±0.22)较对照组[(67.85±4.68)%、(38.00±3.37)%、1.54±0.13]均减低(P值均＜0.05),治疗后3项指标[(69.41±5.03)%、(38.17±3.18)%、1.60±0.15]均升高至正常水平;CD8+ T淋巴细胞百分比(29.20±4.50)%及CD19+ B淋巴细胞百分比(17.74±4.14)%较对照组[(24.82±2.93)%、(12.09±3.51)%]升高(P值均＜0.05),治疗后2项指标[(24.06±3.02)%、(10.90±3.55)%]均降至正常水平;ITP患者CD56+细胞百分比治疗前(15.80±2.85)%、治疗后(15.16±2.77)%与对照组(16.36±2.75)%差异无统计学意义(P＞0.05).结论 免疫细胞亚群紊乱参与了ITP的发病,对其检测可作为ITP的辅助诊断,在指导治疗方面可能有一定的意义.

Abstract：

Objective To explore the clinical significance of immunocyte subsets before and after immunosuppressive therapy in the peripheral blood of patients with immune thrombocytopenic purpura (ITP).MethodsThe percentages of immunocyte subsets in the peripheral blood of 35 patients with ITP and 20 healthy controls were detected by flow cytometry,including CD3+,CD4+,CD8+,CD56+,CD19+ lymphocytes and CD4+/CD8+.Results The percentages of CD3+ T lymphocyte (61.58 ± 6.45 ) %,CD4+ T lymphocyte (28.38 ±4.89)% and the ratio of CD4+/CD8+ 0.99 0.22 in patients with ITP were lower than those in healthy controls[( 67.85 ± 4.68 ) %,( 38.00 ± 3.37 ) %,1.54 ± 0.13,all P ＜ 0.05].After immunosuppressive therapy,the percentages of CD3+ T lymphocyte ( 69.41 ± 5.03 ) %,CD4+ T lymphocyte (38.17 ±3.18)% and the ratio of CD4+/CD8+ 1.60 ±0.15 recovered to control levels.The percentages of CD8+ T lymphocyte (29.20 ±4.50)% and CD19+B lymphocyte ( 17.74 ±4.14)% were higher than those in healthy controls[( 24.82 ± 2.93 ) % and ( 12.09 ± 3.51 ) %,all P ＜ 0.05].After the immunosuppressive therapy,the percentages of CD8+ T lymphocyte ( 24.06 ± 3.02 ) % and CD19+ B lymphocyte ( 10.90 ± 3.55 ) %recovered to control levels.There were no significant difference of the percentage of CD56+ lymphocyte among ITP patients ( 15.80 ± 2.85 )%,ITP patients after immunosuppressive therapy ( 15.16 ± 2.77 )% and healthy controls ( 16.36 ± 2.75 ) %.ConclusionThe aberrant immunocyte subsets are involved in the pathogenesis of ITP,and detection of immunocyte subsets might be helpful for the diagnosis and determination of therapeutic outcome of ITP.     

Graves病和桥本甲状腺炎外周血淋巴细胞亚群的分布与临床意义

目的:研究Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(HT)患者外周血淋巴细胞分布状况与疾病的关系。方法:选择GD患者39例,HT患者32例,正常对照20例。用流式细胞技术检测外周血CD3 总T细胞、CD3 CD4 、CD3 CD8 T细胞亚群,CD3-CD19 B细胞亚群,以及CD3-(CD16 /CD56 )NK细胞的比率。结果:与正常对照组比较,GD患者的CD3-CD19 B细胞数升高26.23%(P<0.05),CD3-(CD16 /CD56 )NK细胞数下降43.60%(P<0.05);HT患者的CD3 的总T淋巴细胞数下降20.22%(P<0.01)。B细胞亚群的改变与甲状腺自身抗体阳性表达有显著相关性(r=0.42,P<0.01)。各组CD3 CD4 和CD3 CD8 的T淋巴细胞群无差异。结论:GD患者和HT患者不同的病理改变和相应的临床征象可能归宿于T、B淋巴细胞和NK细胞亚群的分布存在差异。     

50例肝癌患者外周血淋巴细胞亚群比例与肝功能损伤的关系

目的探讨肝癌患者外周血CD3~+T淋巴细胞、CD4~+T淋巴细胞、CD8~+T淋巴细胞、NK细胞亚群与肝功能损伤的关系。方法回顾性分析上海交通大学医学院附属仁济医院50例肝癌住院患者(原发性肝癌10例,继发性肝癌30例,合并其他肝脏疾病10例)外周血淋巴细胞亚群比例。以10例合并其他肝脏疾病患者作为疾病对照组,40名健康体检者作为健康对照组,结合患者的肝功能指标进行差异性和相关性分析。结果原发性肝癌患者淋巴细胞亚群比例与合并其他肝病组及健康对照组比较差异均无统计学意义。继发性肝癌患者CD4~+T淋巴细胞比例显著低于健康对照组[(29.18±2.11)%比(35.68±0.56)%,P0.05],NK细胞比例显著高于健康对照组[(21.45±1.69)%比(15.78±0.72)%,P0.01],其淋巴细胞亚群比例与合并其他肝病组比较差异均无统计学意义。原发性肝癌患者肝细胞损伤者CD4~+T淋巴细胞比例显著高于未损伤者[(45.90±5.96)%比(30.93±1.76)%,P0.05],CD4~+T淋巴细胞比例与ALT、AST均呈高度正相关(r=0.941、r=0.903,均P0.01),肝脏代谢功能受损者CD8~+T细胞比例显著低于正常者[(27.00±4.63)%比(34.01±7.98)%,P0.05],CD8~+T细胞比例与STB、PT均呈显著负相关(r=-0.596、r=-0.577,均P0.05)。继发性肝癌患者肝细胞损伤者CD4~+T细胞比例显著低于未损伤者[(23.22±3.28)%比(33.24±2.29)%,P0.05],CD8~+T细胞比例显著高于未损伤者[(34.70±4.26)%比(25.84±1.99)%,P0.05],CD4~+/CD8~+比值与ALT、AST均呈显著负相关(r=-0.470、r=-0.424,均P0.05),肝脏代谢功能受损者CD4~+T细胞比例显著高于正常者[(35.64±2.84)%比(25.56±2.57)%,P0.05],CD4~+/CD8~+比值与STB、PT均呈显著正相关(r=0.400、r=0.481,均P0.05)。结论肝癌患者外周血淋巴细胞亚群比例与肝功能损伤密切相关,机体免疫平衡状态的维持对于保护肝癌患者肝脏功能具有重要意义。     

不同免疫状态慢性HBV感染患者的T淋巴细胞及NKG2D表达差异研究

目的探讨慢性HBV感染者在不同免疫状态下的T淋巴细胞及自然杀伤细胞G2D(NKG2D)表达差异。方法根据免疫状态的不同将80例慢性HBV感染患者分为免疫耐受组(28例)、免疫清除组(30例)、低(非)复制组(22例),另选取30名健康体检者作为对照组。对4组研究对象进行外周血T淋巴细胞亚群、NK细胞、NKG2D细胞频率及血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、γ干扰素水平检测。结果4组研究对象的CD3^+T淋巴细胞百分比,差异均无统计学意义(P>0.05)。免疫清除组的CD4^+T淋巴细胞、CD4^+/CD8^+、NK细胞百分比分别为(30.14±5.36)%、(1.10±0.33)%、(9.67±4.31)%,均显著低于另外三组,CD8^+T淋巴细胞、NKG2D+/NK细胞百分比分别为(33.56±5.37)%、(12.96±3.42)%,均显著高于另外三组(P<0.05)。免疫耐受组和低(非)复制组的NKG2D^+/NK细胞百分比分别为(3.46±1.15)%和(3.55±1.07)%均显著低于对照组,免疫清除组的NKG2D+/NK细胞百分比显著高于对照组(P<0.05)。免疫清除组的TNF-α、γ干扰素水平分别为(69.62±16.46)ng/L和(69.85±12.30)ng/L,均显著高于免疫耐受组、低(非)复制组及对照组(P<0.05)。免疫耐受组、低(非)复制组及对照组的TNF-α、γ干扰素水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论慢性HBV感染患者在不同免疫状态下,外周血淋巴细胞及NKG2D细胞表达有明显差异,临床可通过测定HBV感染者外周血T淋巴细胞、NKG2D细胞水平来评估患者的免疫状态,指导临床治疗。     

老年肺癌晚期酪氨酸激酶抑制剂治疗后循环肿瘤细胞与T细胞亚群的相关性

目的探讨晚期老年非小细胞肺癌(NSCLC)患者循环肿瘤细胞的表达与酪氨酸激酶抑制剂(TKI)治疗前后免疫功能变化及预后的相关性。方法晚期老年NSCLC患者66例均予表皮生长因子受体(EGFR)-TKI类药物治疗,观察治疗前后T细胞亚群及NK细胞表达及与预后的相关性。结果循环肿瘤细胞(CTC)高表达组CD3~+、CD4~+显著低于低表达组,CD8~+显著高于低表达组,CD4~+/CD8~+倒置,免疫功能显著低于CTC低表达组(P<0.01)。治疗前后CTC高表达组T细胞亚群及NK细胞差异无统计学意义(P>0.05);CTC低表达组治疗后CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+显著升高,CD8~+、NK水平显著下降(P<0.05)。CD4~+/CD8~+低表达组和高表达组中位生存期(OS)分别为25和13个月,1年生存率分别为75.0%和52.4%;2年生存率分别为54.2%和28.6%;3年生存率分别为20.8%和7.1%;两组差异有统计学意义(P=0.025)。NK高表达组和低表达组中位OS分别为25和12个月,1年生存率分别为77.8%和40.0%;2年生存率分别为55.6%和16.7%;3年生存率分别为22.2%和0.0%;两组差异有统计学意义(P=0.000)。结论 CTC水平与细胞免疫功能呈负相关,与EGFR-TKI治疗后免疫功能恢复呈负相关,CD4~+/CD8~+、NK水平可以作为晚期老年NSCLC患者EGFR-TKI治疗预后指标。     

耐多药和广泛耐药肺结核患者外周血中免疫细胞的表达及其意义

目的 探讨耐多药(MDR)和广泛耐药(XDR)肺结核患者外周血CD3+CD16+CD56+自然杀伤(NK)T细胞、CD3-CD16+CD56+NK细胞和T细胞亚群的表达状态及其意义.方法 对2008年1月至2009年6月在上海市肺科医院住院的316例肺结核患者进行回顾性分析,其中男204例,女112例;年龄17～88岁,平均(44±16)岁;初治119例,复治197例.根据耐药情况分为MDR组146例,其中男102例,女44例,年龄19～84岁,平均(42±16)岁;XDR组77例,其中男42例,女35例,年龄18～88岁,平均(50±16)岁;敏感组93例,其中男60例,女33例,年龄17～83岁,平均(43±19)岁.另按照空洞所占肺野范围分为1～2个肺野组(132例)、3～4个肺野组(49例)和5～6个肺野组(9例).采用流式细胞仪抗体双标法检测患者外周血中NKT细胞、NK细胞和T细胞亚群表达率.两组间比较采用Wilcoxon秩和检验,多组间比较采用Kruskal-Wallis秩和检验.结果 XDR组NKT细胞和NK细胞表达率的中位数(四分位间距)[11%(6%～16%)和7%(4%～12%)]明显高于MDR组[8%(5%～14%)和6%(4%～11%)]和敏感组[7%(4%～11%)和5%(3%～9%)],3组间两两比较,差异均有统计学意义(H值分别为6.478和8.369,均P＜0.05);XDR组男性NKT细胞和NK细胞表达率[(14±9)%和(11±7)%]明显高于女性[(9±5)%和(6±4)%],CD4T细胞表达率和CD4/CD8[(38±10)%和1.9±1.3]明显低于女性[(44±10)%和2.2±0.7],两两比较,差异均有统计学意义(z值为-2.91～2.41,P＜0.05和P＜0.01);1～2个肺野组CD4 T细胞表达率最高[(42±9)%],CD8 T细胞表达率最低[(22±8)%];5～6个肺野组CD4 T细胞表达率最低[(36±11)%],CD8 T细胞表达率最高[(28±12)%],CD4/CD8最低(1.5±0.8),差异均有统计学意义(H值为8.404～16.175,均P＜0.01).结论 NKT细胞和NK细胞表达率随结核病耐药程度加重而升高,但T细胞亚群表达率不随耐药程度加重而变化.肺结核患者的空洞范围越大,其外周血中CD4T细胞和CD4/CD8值越低,CD8T细胞值越高.XDR男性肺结核患者的细胞免疫功能损害更为明显.

Abstract：

Objective To explore the expressions and the significance of CD3+ CD16+CD56+ NKT cells,CD3-CD16+CD56+ NK cells and T lymphocyte subsets in peripheral blood of patients with multi-drug resistant ( MDR-TB ) and extensively drug-resistant ( XDR-TB ) pulmonary tuberculosis. Methods The data of 316patients with pulmonary tuberculosis hospitalized in Shanghai Pulmonary Hospital from January 2008 to June 2009 were retrospectively analyzed, of whom 119 were newly diagnosed, and 197 were retreated patients.There were 204 males and 112 females, aged from 17 -88 years, mean ( 44 ± 16 ) years. According to the results of drug-resistance, these patients were divided into a MDR group, an XDR group and a sensitive group. There were 146 patients in the MDR group, with 102 males and 44 females, aged from 19 - 84years, mean ( 42 ± 16 ) years. There were 77 patients in the XDR group, with 42 males and 35 females,aged from 18 -88 years, mean (50 ± 16) years. There were 93 patients in the susceptible group, with 60males and 33 females, aged from 17-83 years, mean (43 ± 19) years. According to the distribution of cavitation in lung fields, these patients were also divided into 1 -2 lung field affected group (n = 132), 3 -4 lung field affected group ( n = 49 ) and 5 - 6 lung field affected group ( n = 9 ). The frequencies of NKT cells, NK cells and T cells from whole blood were tested by flow cytometry. Rank test (SAS software) was used for statistic analyses. Results The expression rate of NKT cells and NK cells was the highest in the XDR group [11%(6% - 16%) and 7% (4% - 12%)], as compared to the MDR group [8% (5% -14% ) and 6% (4% - 11% ) ], and the susceptible group [7% (4% - 11% ) and 5% (3% -9% ) ], the difference being statistically significant ( H = 6. 478 - 8. 369, P ＜ 0. 05 ). The expression rate of the NKT (14 ± 9)% and NK cells (11 ± 7)% in males of the XDR group was significantly higher than that in females [ NKT (9 ±5)% and NK cell (6 ±4)% ], while CD4(38 ± 10)% and CD4/CD8( 1.9 ± 1.3) were significantly lower than those of the females [ CD4 (44 ± 10) % and CD4/CD8 ( 2. 2 ± 0. 7 ) ], the difference being statistically significant (z = - 2. 91 - - 2. 79, P ＜ 0. 05, P ＜ 0. 01 ). The expression rate of CD4(42 ± 9)% was the highest, but CD8 (22 ± 8)% was the lowest in the 1 -2 lung field group. While in the 5-6 lung field group, the expression rate of CD4 (36 ± 11 )% was the lowest, CD8 (28 ± 12)% was the highest, and CD4/CD8 (1. 5 ±0. 8) was the lowest, the difference being statistically significant (H = 8. 404 -16. 175, P ＜0. 01 ). Conclusions With the increasing level of drug resistance, the expression rate of NKT cells and NK cells increased, while the expression of T cell subsets did not change. The value of CD4 and CD4/CD8 in peripheral blood decreased, but CD8 increased as the extent of cavitation increased in these patients. The impairment of cellular immune function in XDR-TB was more prominent in male patients.     

不同麻醉方式对老年肺癌根治术患者细胞免疫功能的影响

目的探讨不同麻醉方式对老年肺癌根治术患者细胞免疫功能的影响。方法 48例患者随机分为对照组和治疗组各24例,分别采用全麻和全麻复合硬膜外麻醉,记录患者恢复自主呼吸时间、轻呼睁眼时间及拔管时间;术前30 min(T0)、2 h(T1)、12 h(T2)、24 h(T3)、48 h(T4)抽取肘静脉血,流式细胞仪检测,统计CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+和CD3-CD19+表达百分率。结果治疗组患者恢复自主呼吸时间、轻呼睁眼时间及拔管时间明显较短(P<0.05或P<0.01)。与T0相比,两组患者CD3+、CD4+、CD4+/CD8+、CD4+CD25+和CD3-CD19+在T1时开始降低,T2时降至最低值,T3、T4时恢复。组间相比,治疗组CD3+、CD4+CD25+和CD3-CD19+在T2、T3、T4时,及CD4+、CD4+/CD8+在T3、T4时下降幅度明显较小(P<0.05)。结论全麻复合硬膜外麻醉对T、B淋巴细胞亚群影响较小,更适合行肺癌根治术的老年患者。     

培美曲塞联合顺铂化疗方案对老年非小细胞肺癌患者外周血淋巴细胞表型变化的影响

目的探讨培美曲塞联合顺铂(CDDP)化疗方案对老年非小细胞肺癌(NSCLC)外周血淋巴细胞亚群的影响。方法选择年龄≥60岁的NSCLC患者64例,给予培美曲塞500 mg/m2,第1天静脉滴注,顺铂25 mg/m2,第1~3天静脉滴注,21 d为1个周期,每例患者至少治疗治疗两个周期。另以同期健康查体者作为对照组,流式细胞仪检测外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+细胞百分率和CD4+/CD8+比值。结果老年NSCLC患者化疗前CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值显著低于健康对照组(P<0.05),CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率变化与对照组比差异较无统计学意义(P>0.05);化疗后CD4+、CD16+56+细胞百分率及CD4+/CD8+比值较化疗前明显升高(P<0.05),CD3+、CD8+及CD19+细胞百分率较化疗前后无显著差异(P>0.05)。结论培美曲塞联合顺铂化疗可改善老年NSCLC患者的免疫功能。     

国产流式T淋巴细胞检测试剂的精确性和准确性研究

目的 为了获得国产T淋巴细胞检测试剂(同生试剂),在FACSCalibur流式细胞仪上各指标检测结果的准确性和精确性。方法 采用3个批次同生试剂(CD3-FITC/CD4-PE/CD45-PerCP三色荧光单克隆抗体试剂和CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC四色荧光单克隆抗体试剂),对正常值和低值商用质控全血在FACSCalibur流式细胞仪上进行连续20天检测,计算批内和批间变异;对广西206份艾滋病病毒(HIV)感染者全血样本进行平行检测,计算各指标的准确性。结果同生三色试剂各指标的绝对数结果批内变异范围为2.66%~6.33%,百分数为1.12%~4.71%;同生四色试剂的绝对数结果批内变异范围为2.61%~6.38%,百分数为0.97%~4.96%。绝对数和百分数结果批间变异均小于5.72%。与参考方法比,各指标绝对数和百分数相关系数在0.97以上。三色和四色试剂CD4+T淋巴细胞绝对数平均偏差分别为(-0.3±54.2)个/μL和(5.0±55.3)个/μL;CD3+T淋巴细胞绝对数平均偏差分别为(15.0±145.2)个/μL和(0.4±129.2)个/μL;四色试剂CD8+T淋巴细胞绝对数平均偏差为(-22.4±87.1)个/μL;各指标百分数平均偏差均在1.28%以内。结论 同生试剂在各指标FACSCalibur流式细胞仪上具有较高的准确性,可以应用于BD FACScilbur流式细胞仪。     

比较腹腔镜与开腹直肠癌扩大根治术对老年患者细胞免疫功能的影响

目的 探讨腹腔镜直肠癌扩大根治术与传统开腹直肠癌扩大根治术对老年患者T细胞亚群、NKT细胞及NK细胞的影响.方法 选取我科2010年6月至2010年12月老年直肠癌患者31例,分为腹腔镜直肠癌扩大根治术(腹腔镜组)12例和传统直肠癌扩大根治术(开腹组)开腹组19例.于术前1 d及术后1、3、5 d采外周静脉血通过流式细胞仪测定T淋巴细胞亚群(CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+)、NKT细胞、NK细胞的百分比.结果 术后1天,CD3+、CD4+ T细胞、CD4+/CD8+、NK细胞腹腔镜组比开腹组明显升高,两组间存在统计学差异,术后3 d,NK细胞腹腔镜组比开腹组升高,两组存在统计学差异.术后1 d与术前比较:开腹组各指标均明显降低,存在统计学差异,而腹腔镜组仅NKT细胞和NK细胞降低,有统计学差异.结论 开腹手术创伤使老年直肠癌患者术后免疫功能下降,而腹腔镜直肠癌扩大根治术对老年患者细胞免疫功能影响小.     

炎症性肠病患者T淋巴细胞亚群的改变及临床意义

目的探讨炎症性肠病(IBD)患者外周血T淋巴细胞亚群的变化特点及临床意义.方法对临床确诊的18例溃疡性结肠炎(UC)和9例Crohn病(CD)患者,于疾病的不同时期用荧光单克隆抗体标记-流式细胞仪技术检测其外周血T淋巴细胞亚群的变化,并结合临床和病理资料进行综合分析.结果UC患者缓解期时的CD3+、CD8+和自然杀伤(NK)细胞与对照组比较无显著差异;但活动期时,其CD8+和NK细胞数明显下降(CD8+活动期23.1%±1.0%,对照组31.3%±1.2%,P＜0.05;NK活动期9.8%±1.0%,对照组15.1%±1.1%,P＜0.01),CD4+/CDs+比值上升(活动期1.8±0.1,对照组1.4±0.02,P＜0.05);活动期CD患者的CD8+细胞和CD4+/CD8+比值(43.0%±44%和0.6±0.1)变化却与UC组活动期呈相反趋势(P＜0.01).结论T淋巴细胞亚群改变在IBD的发病机制中可能起重要作用;UC和CD的细胞免疫机制不同;外周血CD4+、CD8+、NK细胞和CD4+/CD8+比值可作为检测UC病情变化和疗效考核的敏感指标.