辛伐他汀改善心肌梗死后心肌胶原含量变化及机制的实验研究

目的:探讨辛伐他汀对大鼠心肌梗死后心肌胶原含量的影响及其机制. 方法:建立大鼠心肌梗死模型,24 h后存活大鼠随机分成心肌梗死组(n=9)、辛伐他汀20 mg组[20 ms/(kg·d),n=10]和平伐他汀40 mg组[40 ms/(kg·d),n=9],另设假手术组(n=10).4周后观察血脂水平、左心室重指数和天狼猩红染色分析左心室非梗死区心肌胶原容积分数(表达心肌胶原含量),免疫组化检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2),免疫印迹杂交方法(Western blot)和逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测转化生长因子β1(TGF-β1)在非梗死区的表达. 结果:①各组血脂水平差异无统计学意义,心肌梗死组左心室重苗指数、非梗死区Ⅰ型、Ⅲ型胶原容积分数及Ⅰ型与Ⅲ型胶原容积分数比值较假手术组均明显升高(P均<0.05),差异均有统计学意义;辛伐他汀两组左心室重量指数、非梗死区Ⅰ型、Ⅲ型胶原容积分数及Ⅰ型与Ⅲ型胶原容积分数比值较心肌梗死组均卜降,但仍高于假手术组(P均<0.05),差异均有统计学意义.②心肌梗死组MMP-2和TGF-β1表达较假手术组均显著增加(P均<0.05),而辛伐他汀两组表达则明显降低,但仍高于假手术组(P均<0.05),差异均有统计学意义. 结论:辛伐他汀能有效改善大鼠心肌梗死后心肌胶原含量,机制与其渊脂作用无关,可能与下调MMP-2和TGF-β1的表达有关.     

沙库巴曲缬沙坦通过下调转化生长因子β1/Smads信号通路改善急性心肌梗死大鼠心肌纤维化和心功能

目的探讨沙库巴曲缬沙坦对急性心肌梗死大鼠心肌纤维化和心功能的影响及可能作用机制。方法 32只无特定病原体(SPF)级雄性SD大鼠结扎左冠状动脉前降支建立心肌梗死模型,另取8只作为假手术组(Sham)只开胸不结扎。1周后存活的24只心肌梗死大鼠随机接受沙库巴曲缬沙坦68 mg/(kg·d)[心肌梗死-沙库巴曲缬沙坦组(MI-SV组),n=8]或缬沙坦32 mg/(kg·d)[心肌梗死-缬沙坦组(MI-V组),n=8]或等容量生理盐水[心肌梗死模型组(MI组),n=8],灌胃治疗4周。4周后超声心动图评价心脏结构及功能,天狼猩红苦味酸染色计算梗死区胶原容积分数(CVF),酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测心肌Ⅰ、Ⅲ型胶原含量,Western blot技术测量心肌组织转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad3和p-Smad3的蛋白表达水平。结果与Sham组比较,MI组左心室舒张末期内径(LVEDd)、左心室收缩末期内径(LVEDs)和左心室后壁厚度(LVPWT)增加,左心室射血分数(LVEF)降低,梗死区CVF和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量升高,TGF-β_1和p-Smad3蛋白表达增加(均P0.05);与MI组比较,MI-SV组和MI-V组LVEDd、LVEDs和LVPWT降低,LVEF升高,CVF和Ⅰ、Ⅲ型胶原含量降低,TGF-β_1和p-Smad3蛋白表达降低(均P0.05),且以MI-SV组改善更显著[MI-SV组比MI-V组,LVEDd:(8.00±0.33)比(8.25±0.45)mm; LVEF:(55.23±3.96)%比(48.41±5.34)%;Ⅰ型胶原:(464.40±41.96)比(621.71±23.42)μg/g,均P0.05]。结论沙库巴曲缬沙坦能够降低心肌梗死大鼠心肌纤维化程度,改善心脏功能,其作用机制可能与下调TGF-β_1/Smad3信号通路激活有关,且这一效应优于缬沙坦。     

心衰大鼠IL-6的变化及氟伐他汀的干预作用

目的了解白介素和转化生长因子在心肌梗死大鼠心衰发展过程中的改变,以及氟伐他汀的干预作用。方法选用雄性SD大鼠,随机分为假手术组(Sham组),心梗组(MI组)和心梗他汀组(MI+statin组),经冠状动脉前降支结扎术建立心肌梗死后心衰模型,建模1d后MI+statin组大鼠管饲氟伐他汀4mg·kg-1·d-1,Sham组和MI组大鼠管饲安慰剂。术后3d、4w检测大鼠非梗死区心肌转化生长因子β1(TGFβ1)的含量(免疫组化法),胶原及IL6的改变(ELISA法),以及左室血流动力学改变。结果(1)术后各时点IL6的含量,MI组及MI+statin组显著高于Sham组(P<005),而MI+statin组显著低于MI组(P<005);(2)术后各组各时点非梗死区心肌表达TGFβ1的变化趋势与IL6相同;(3)与MI组比较,MI+statin组心功能明显改善,胶原容积分数(CVF)及Ⅰ/Ⅲ型胶原比值(RatiooftypeⅠ/Ⅲ)降低(P<005)。结论氟伐他汀通过抑制IL6的升高而减轻炎性反应,从而预防心室重构,改善心脏功能。     

红景天苷对大鼠急性心肌梗死后心室重构相关作用及机制的研究

目的评价长期应用不同剂量红景天苷对于急性心肌梗死大鼠心室重构方面相关作用及机制。方法建立结扎SD大鼠左前降支冠脉造急性心梗的模型,随机分为6组:红景天苷低、中、高剂量组(MI+SALL、MI+SALM、MI+SALH),卡维地洛对照组(MI+CAVE),模型组(MI),假手术组(Sham)。灌胃给药干预56 d后超声评价监测心功能变化,计算左心室重量指数(LVW/BW)和全心重量指数(HW/BW),测量左室射血分数(LVEF)、左室缩短率(LVFS)、左心室收缩期内径(LVIDS)。取梗死周边心肌组织,利用HE染色,Masson染色,天狼星红染色分别观察心肌组织病理生理学改变及心肌纤维化面积、非梗死区Ⅰ/Ⅲ型胶原比值。利用Western blot分析检测Wnt/β-catenin信号通路关键的信号分子DVL-1和β-catenin蛋白的表达,整理数据统计分析。结果与Sham组比较,MI组LVEF、LVFS值明显下降(P0.01),LVIDS上升、HW/BW值较高(P0.05),LVW/BW值则处于低水平(P0.01);灌胃后各组大鼠心肌梗死区域室壁总体变薄。HE染色结果显示,左室病理生理学改变显著;Masson染色结果显示,梗死周边区心肌胶原纤维明显增多,纤维瘢痕形成,心肌胶原面积较大;天狼星红染色结果显示有明显Ⅰ型、Ⅲ型胶原的沉积;梗死周边区Wnt/β-catenin Pathway中的关键性信号蛋白DVL-1和β-catenin呈现高表达水平(P0.05)。与MI组比较,各治疗组可见有炎性细胞浸润,纤维组织增生,肌原纤维溶解;其中MI+SALM组LVEF和LVFS、LVW/BW值上升,Ⅰ/Ⅲ型胶原比值下降(P0.05),MI+SALL组和MI+CAVE组心肌胶原面积、Ⅰ/Ⅲ型胶原比值明显下调(P0.01),LVEF和LVFS、LVW/BW值明显升高(P0.01),DVL-1和β-catenin的表达水平均明显下降(P0.05或P0.01)。两组之间无统计学意义(P0.05)。MI+SALH组心肌胶原面积有一定程度减小(P0.05)。各组体重变化及HW/BW值均无统计学意义(P0.05)。结论长期治疗干预下,应用小剂量的红景天苷优于中高剂量,能显著改善实验大鼠急性心梗后心室重构,抑制心肌纤维化。这一机制可能与其参与调控Wnt/β-catenin信号通路传导有关。     

胰岛素治疗对心肌梗死大鼠胶原重构的影响

目的:研究观察胰岛素治疗对心肌梗死大鼠（myocardial infarction,MI）胶原重构的影响。方法:成年雄性SD大鼠34只,随机分为3组,即假手术(Sham)组（n=6）、生理盐水(NS)对照组（n=14）及胰岛素(ISL)治疗组［n=14,缺血20 min后,通过尾静脉以4 ml/(kg·h)的速率输入50 U/L ISL 2 h,并在缺血后1周内,每日皮下注射0.5 U/ml胰岛素1 ml/kg体质量］。分别于术后1周和4周,行心脏超声心动图(UCG)监测左室射血分数（LVEF）,用氯胺T法检测心肌组织中羟脯氨酸（Hyp）的含量,用Western blot检测Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果:术后1周和4周时,对照组的LVEF值较Sham相比明显降低（P<0.01）,而ISL治疗组与对照组相比,LVEF显著升高（P<0.05,P<0.01）。与Sham组相比,对照组心肌胶原的含量升高,ISL治疗组可使胶原的含量显著降低（P<0.05）。1周时,对照组的心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值增加,经ISL治疗后,Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值明显下降（P<0.05）;4周时,对照组Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值增加,而给予ISL治疗后Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值无明显差异。结论:MI后大鼠心肌非梗死区组织出现胶原重构,ISL可影响该过程中心肌Ⅰ/Ⅲ型胶原的比值,从而起到改善心脏功能的作用。     

Smad7的表达对心肌梗死后大鼠心肌纤维化的影响

目的研究心肌梗死（MI）后大鼠心肌Smad7的表达及其与心肌纤维化的关系。方法结扎冠状动脉建立大鼠MI模型,并另设假手术组为对照组。8周后,测定心室的质量/体质量（HW/BW）。以多普勒超声评价心脏功能。以Mallory’s Trichrome染色法检测非梗死区胶原的含量。分别以RT-PCR和Western blot法检测非梗死区左室心肌转化生长因子（TGF）-β1、Smad7 mRNA及蛋白表达的水平。结果与假手术组比较,MI组的HW/BW（P<0.01）、左心室舒张末期内径（LVEDD,P<0.01）、E峰/A峰比值（E/A,P<0.01）、非梗死区胶原的含量（P<0.01）、非梗死区左室TGF-β1mRNA及蛋白的表达（P<0.01）均显著增加;Smad7 mRNA及蛋白的表达（P<0.01）、射血分数（EF,P<0.01）及短轴缩短率（FS,P<0.01）均显著降低。结论MI后大鼠心肌Smad7的表达降低,与MI后的心肌纤维化密切相关。     

辛伐他汀对SHR心肌组织SOD、MDA、NOS、NO及心肌间质胶原含量的影响

目的　观察辛伐他汀对自发性高血压大鼠 (SHR)心肌纤维化的影响。方法 2 0只 16周龄雄性SHR大鼠 ,随机分成 2组 :( 1)辛伐他汀组 (n =10辛伐他汀 2mg/kg·d) ;( 2 )SHR空白对照组 (n =10 ) ;( 3)同龄雄性正常血压WKY大鼠对照组 (n =10 )。给药 12周后称量大鼠左室重量并计算大鼠左室重量指数 ;测定心肌组织丙二醛、超氧歧化酶、一氧化氮及一氧化氮合酶 ;用改良VG染色法使胶原特殊染色 ,计算机图像分析测量心肌间质及心肌小动脉周围胶原的胶原容积分数对心肌纤维化程度进行比较。结果辛伐他汀组与SHR组相比心肌超氧歧化酶无明显改变、丙二醛明显减少而心肌一氧化氮及结构型一氧化氮合酶 (cNOS)活性明显升高 ;辛伐他汀组均未能有效降低SHR血压和左心室肥厚 (P <0 0 5 )但能使心室内、外膜及心肌小动脉周围的胶原减少。结论一氧化氮 /活性氧平衡失调可能是导致高血压心肌纤维化的又一个重要因素 ;辛伐他汀抗纤维化作用可能与其抗氧化作用及改善心肌cNOS活性密切相关     

阿托伐他汀干预对糖尿病心肌梗死后大鼠左室重构和心功能的影响

目的我们的前期研究已经表明,结扎左冠状动脉前降支后,糖尿病大鼠的左心功能恶化及左室重构的速度均较非糖尿病大鼠显著;心肌梗死四周后,糖尿病大鼠心肌纤维化的程度明显高于非糖尿病大鼠。本研究旨在评价阿托伐他汀对糖尿病心肌梗死(AMI)后心力衰竭(HF)大鼠心室重构的干预效应。方法75只雄性SD大鼠经链脲霉素诱导糖尿病成功后随机分成三组,即:心肌梗死对照组(MI,n=30),阿托伐他汀(20mg.kg-1.d-1)干预组(A,n=30),及假手术组(S,n=15)。所有大鼠经腹腔内注射链脲霉素(STZ,65mg/kg)诱导糖尿病,10周后MI组和A组大鼠结扎左冠状动脉前降支建立AMI模型。干预组于术后24h直接灌胃法给药。干预4周后血流动力学测定,之后采血、处死大鼠、取出心脏,观察血脂水平、心脏/体重比值、病理组织形态,苦味酸-天狼猩红染色测定非梗死区Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量及Ⅰ/Ⅲ型胶原比值,免疫组化分析非梗死区基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制物TIMP-2蛋白表达,Western blot检测TGFβ1在非梗死区的蛋白表达。结果(1)各组间血脂水平差异无统计学意义;(2)干预组与对照组比较,心脏体重比值、非梗死区Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量及Ⅰ/Ⅲ型胶原比值均降低,但仍高于假手术组;干预组较对照组MMP-2、TGFβ1表达及MMP-2/TIMP-2比值降低,TIMP-2表达增高;(3)血流动力学检测表明干预组较对照组左室最大压力、左室内压最大上升下降速率、平均动脉压增高,而左室最小压力、左室舒张末压力、舒张常数降低。结论糖尿病大鼠心肌梗死后,长时间(4周)应用阿托伐他汀治疗改善了左心重构和心功能。阿托伐他汀能够减轻非梗死区心肌间质胶原重构,其机制可能与下调MMP-2和TGFβ1的表达及MMP-2/TIMP-2比值,升高TIMP-2表达有关。     

卡维地洛对心梗大鼠远期心室重构的影响及其作用机制

目的:探讨卡维地洛(Carv)对心肌梗死(MI)大鼠心室心肌重构的影响及其作用机制。方法:结扎30只大鼠左冠状动脉建立MI模型后,随机分为Carv组(n=15)及MI组(n=15)。再另设假手术(Sham)组(n=15)。Carv组给予Carv(日剂量2 mg/kg),分2次灌胃;Sham组及MI组均给予等量蒸馏水灌胃。24周后,观察心室重构和左室非梗死区心肌内4-羟基壬烯醛(4-HNE)和过氧化物丙二醛(MDA)的含量及表达。结果:24周后,超声显示,与Sham组比较,MI组大鼠心功能明显降低,左室舒张末期内径(LVEDD)明显增大,左室短轴缩短率(FS)和心脏射血分数(EF)明显降低(P0.05,P0.01)。MI组大鼠左室非梗死区心肌内4-HNE和MDA的含量明显增加,表达明显增强(P0.05,P0.01)。Carv组大鼠左室非梗死区心肌组内4-HNE和MDA的含量比MI组明显降低(P0.05,P0.01)。结论:MI 6月后,心肌内4-HNE、MDA的活性仍然较高,氧化应激反应仍持续,Carv可以促进活性醛的代谢,对心脏具有保护作用,可改善预后。     

Smad表达与心肌梗死后心室重构的关系

目的研究Smad3、Smad7表达与心肌梗死后大鼠心室重构的关系。方法冠状动脉结扎建立心肌梗死模型,假手术组为对照,8周后处死大鼠。测量心室重量／体重,血液动力学,非梗死区胶原含量,逆转录聚合酶链反应检测大鼠心肌各部位转化生长因子（TGF）β1 mRNA、Smad3 mRNA、Smad7 mRNA的表达。结果与假手术组相比,心室重量／体重,左室舒张末压,非梗死区胶原含量均增加;梗死区、梗死边缘区、非梗死区及右室TGFβ1 mRNA和Smad3 mRNA的表达增加,而Smad7 mRNA表达降低。结论TGFβ-Smad传导通路参与心肌梗死后的心室重构过程。Smad3对心室重构有促进作用,而Smad7对心室重构有抑制作用。