抗线粒体抗体及其在原发性胆汁性肝硬化中的意义

抗线粒体抗体在诊断原发性胆汁性肝硬化中具重要意义。本文着重探讨抗线粒体抗体的异质性,尤其是抗M2的成份以及在诊断原发性胆汁性肝硬化中的作用。     

抗线粒体抗体及其在原发性胆汁性肝硬化中的意义

抗线粒体抗体在诊断原发性胆汁性肝硬化中具重要意义，本文着重探讨抗线粒体抗体的异质性，尤其是抗Ｍ２的成份以及在诊断原发性胆汁性肝硬化中的作用。     

抗线粒体抗体对原发性胆汁性肝硬化诊断价值研究进展

原发性胆汁性肝硬化是一种原因不明的慢性胆汁淤积性肝病,抗线粒体抗体检测对其诊断有较高的特异度和灵敏度。近年来,随着临床医师认识的提高以及自身抗体检测的普及,原发性胆汁性肝硬化的发病率及患病率有逐年增加的趋势,早期诊断及治疗干预对该病的预后有重要意义。本文重点讨论抗线粒体抗体及其分型在原发性胆汁性肝硬化诊断中的意义。     

原发性胆汁性肝硬化与抗线粒体抗体间的关系

现已知原发性胆汁性肝硬化与抗线粒体抗体密切相关,现从临床相关性、抗线粒体抗体作用及原发性胆汁性肝硬化的发病机制三方面对两者间的相关性进行探讨。     

抗线粒体抗体与原发性胆汁性肝硬化

原发性胆汁性肝硬化（PBC）是一种慢性进行性胆汁淤积性肝病，多见于40～60岁女性，临床多表现为疲劳和瘙痒，生化检查以碱性磷酸酶、转肽酶升高为主，肝脏组织学特征为慢性进行性非化脓性毁损性小胆管炎。抗线粒体抗体（AMAs）尤其AMAs—M2亚型阳性是此病的一个血清学特点，约90％～95％的阳性率。在此将AMAs针对的抗原、产生机制、致病作用以及临床意义作一阐述．以提高对AMAs在临床应用和基础研究方面的认识。     

抗线粒体抗体与原发性胆汁性肝硬化

1957年起人们陆续在原发性胆汁性肝硬化（primary biliary cirrhosis．PBC）患者体内检测出高滴度的补体结合物，8年后Walker等用免疫荧光法使该物特征性显示于PBC患者富含线粒体的组织细胞内，他们发现经鼠肝线粒体预处理后可阻断这种间接免疫荧光反应，证实该物是针对线粒体的抗体（antimitochondrial antibody，AMA）。     

抗线粒体抗体阴性原发性胆汁性肝硬化患者的临床及病理学特点

目的 分析抗线粒体抗体(AMA)阴性的原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者临床及病理学特点.方法 对208例PBC患者的临床及病理学资料进行分析,并将AMA阴性PBC患者与典型PBC和自身免疫性肝炎(AIH)患者进行比较.非正态连续变量的比较使用Mann Whitney U检验,分类资料构成比的比较使用Chi-Square检验.结果 208例PBC患者中,AMA阴性者30例,占14.4%.AMA/AMA-M2阳性PBC和AMA阴性PBC患者在一般情况,临床表现、体征、肝功能(ALT、AST,碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶和总胆红素)和肝组织学表现上的差异均无统计学意义(P值均>0.05).AMA/AMA-M2阳性PBC组患者γ-球蛋白、IgG、IgM和IgA明显升高,中位数(P25,P75)分别为8.6(6.6,10.9)g/L,16.8(13.7,19.4)g/L、3.6(2.7,5.4)g/L和2.9(2.2,3.8)g/L,与AMA阴性组[分别为7.1(5.6,7.9)g/L、14.1(11.3,17.6)g/L、2.7(1.9,4.5)g/L和2.1(1.5,3.4)g/L]相比,差异有统计学意义(Z值分别为-2.088、-2.177、-2.372和-2.764,P值均<0.05);两组间总胆固醇差异无统计学意义(P>0.05).AMA阴性PBC患者中,29例(96.7%)呈抗核抗体(ANA)阳性,其中胞质颗粒型14例(48.3%)、核膜型8例(27.6%)、着丝点型6例(20.7%)、均质型1例(3.4%).与AIH患者比较,AMA阴性PBC患者以胆汁淤积表现为主,碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转移酶、IgM和胆固醇水平均较AIH组明显升高(P值均<0.05),而血清AST,IgG和IgA水平低于AIH患者(P值均<0.05).结论 在以胆汁淤积表现为主,IgM和胆固醇水平升高、ANA为非均质型为主要表现的患者中,AMA虽阴性仍需考虑PBC的可能.

Abstract：

Objective To explore the clinical and pathological features of primary biliary cirrhosis (PBC) patients with negative anti-mitochondria antibody (AMA). Methods Two hundreds and eight PBC patients were enrolled. The clinical and histological data of the negative AMA cases were compared with the AMA/AMA-M2 positive cases. Results 30 out of the 208 cases (14.4%) were AMA negative patients in our study. The general status, biochemical tests and histological findings between the two groups had no significant difference (P> 0.05). The γ -globulin, IgG, IgM and IgA levels of AMA/AMA-M2 positive PBC patients were higher than that of the AMA negative cases (P < 0.05). The abnormal rate of cholesterol in AMA negative PBC patients was 65.4% as compared to 50.4% in AMA/AMA-M2 positive cases, no significant difference existed between (P > 0.05). Anti-nuclear antibody (ANA) was observed in 29 (96.7%) AMA negative PBC patients, including 14 (48.3%) with granular pattern, 8 (27.6%) with nuclear membrane pattern, 6 (20.7%) with kinetochore pattern and 1 (3.4%) with homogeneous pattern. AMA negative PBC patients had elevated serum ALP, GGT, IgM and cholesterol levels, and decreased serum AST, IgG and IgA levels as compared with that of autoimmune hepatitis patients (P < 0.05, respectively). Conclusion In cholestatic patients with elevated IgM and cholesterol levels, ANA positive with non-homogeneous pattern, the diagnosis of PBC should be suspected, albeit AMA negative. The clinical, biochemcial and histological features of the AMA negative PBC patients were similar to classic PBC patients, but quite different from autoimmune hepatitis.     

抗线粒体抗体-M2在原发性胆汁性肝硬化诊断中的重要意义

观察抗线粒体抗体M2亚型(AMA-M2)在原发性胆汁肝硬化(PBC)诊断中的重要意义。对已确诊为PBC的患者与其他原因导致的肝硬化患者各30例患者的年龄、性别、ALP、GGT、AMA-M2进行对比,PBC组ALP升高率、GGT升高率、AMA-M2升高率显著高于对照组(P<0.005)。对于中老年女性患者,出现原因不明的肝硬化,特别是ALP、GGT明显升高,要注意PBC之诊断,应进一步做AMA-M2检测。     

原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体M2亚型检测方法和临床评估

目的　研究抗线粒体抗体 (AMA)M2 亚型检测对原发性胆汁性肝硬化 (PBC)的诊断价值。方法　应用酶联免疫吸附试验 (ELISA) ,检测人血清中M2 抗体含量。共检测正常人 2 0名 ,PBC患者 3 7例 ,其他肝病患者 5 0例。结果　ELISA法检测M2 抗体重复性好 ,灵敏度高 ,特异性强。 3 7例PBC患者中有 3 6例阳性 (>5U/ml) ,只有 1例阴性。而其它肝胆系患者 5 0例 ,3例为假阳性。灵敏度为 97.3 % ,特异性为 94.0 %。正常人均为阴性。PBC患者M2 抗体滴度为 (73 .66± 5 5 .93 )U/ml,较正常人 (1.60± 1.13 )U /ml显著升高 (P <0 .0 1) ,其他肝胆系患者M2 抗体滴度 (2 .90±3 .16)U/ml与正常人相比无显著差别 (P >0 .0 5 )。结论　M2 抗体检查可作为临床诊断PBC的重要血清免疫学指标     

45例原发性胆汁性肝硬化的临床特征

目的　分析原发性胆汁性肝硬化患者的临床特征 ,以指导对该病的诊断。方法　对 4 5例原发性胆汁性肝硬化患者的一般资料、病程、临床表现、生物化学、免疫学及病理学等改变进行分析。结果　本组患者中女性 4 2例 ,确诊时的平均年龄为 (5 0 8± 8 1)岁 ,初诊至确诊的时间平均为 2年 (2个月～ 12年 )。临床症状以乏力最为多见 (6 6 7% ,30 / 4 5 ) ,其次为黄疸 (5 5 6 % ,2 5 / 4 5 )和皮肤瘙痒 (40 % ,18/ 4 5 ) ,9例患者 (2 0 % )无症状 ,9例患者 (2 0 % )合并其他自身免疫性疾病 [干燥综合征和(或 )类风湿关节炎 ]。所有患者血清碱性磷酸酶及γ 谷氨酰转肽酶水平明显升高 [分别为 (498 5±36 9 8)IU/L和 (5 95 2± 5 18 4 )IU/L],而血清ALT、AST水平仅轻中度升高 [分别为 (83 9± 5 8 8)IU/L和(10 0 8± 4 8 8)IU/L],5 5 6 % (2 5 / 4 5 )的患者血清总胆红素水平≥ 34 2 μmol/L ,88 9% (40 / 4 5 )患者血清IgM升高 ,95 6 %患者 (43/ 4 5 )线粒体抗体和 (或 )线粒体抗体M2亚型阳性。结论　在中国 ,原发性胆汁性肝硬化可能并非少见 ,主要累及中年女性 ,最常见的症状为乏力 ,部分早期患者可无症状 ,血清碱性磷酸酶及γ 谷氨酰转肽酶水平升高及抗线粒体抗体和 (或 )线粒体抗体M2亚型阳性有助于诊断     

抗线粒体抗体阴性原发性胆汁性肝硬化患者的临床、生化和病理学特点

目的 分析抗线粒体抗体（AMA）阴性的原发性胆汁性肝硬化（PBC）患者的临床、生化和病理学特点.方法 76例PBC患者,将间接免疫荧光法测定AMA及酶联免疫吸附法检测AMA-M2均为阳性的患者归为AMA阳性组,均为阴性的为AMA阴性组.观察两组临床表现;检测血清学和免疫学指标,如血清总胆红素（TBil）、直接胆红素（DBil）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、球蛋白（GLO）、免疫球蛋白（IgG、IgM、IgA）、抗核抗体（ANA）、抗平滑肌抗体（SMA）、抗线粒体抗体（AMA）、抗可溶性酸性磷酸化核蛋白抗体（sp100）及抗核孔膜糖蛋白抗体（gp210）;行肝穿刺肝组织学检查,并进行比较.结果 76例PBC患者中,AMA阴性15例,占19.7％.AMA阴性组与AMA阳性组临床表现、肝功能各项指标、病理分期及组织学表现上比较P均＞0.05.AMA阴性组、AMA阳性组IgG中位数分别为1 780、1 590 mg/L,IgM中位数分别为384.0、481.5 mg/L,GLO中位数分别为39、42 g/L,两组比较P均＜0.05.AMA阴性组、AMA阳性组ANA阳性率分别为93.3％、23.0％,SMA阳性率分别为20.0％、1.6％,sp100阳性率分别为33.3％、24.6％,gp210阳性率分别为40.0％、29.5％,两组ANA、SMA阳性率比较P均＜0.05,但两组sp100、gp210阳性率比较P均＞0.05.结论 AMA阴性PBC的临床表现、肝功能和病理学特点与AMA阳性PBC相似,但IgG水平和SMA、ANA阳性率较高,IgM和GLO水平较低.     

原发性胆汁性肝硬化31例临床分析

目的　对原发性胆汁性肝硬化患者的临床特征进行回顾性分析 ,以提高对该病诊治的认识。方法　分析 31例原发性胆汁性肝硬化患者的一般资料、临床表现、生化、免疫学及病理学等改变。结果　本组患者中女性 2 5例 ,确诊时的平均年龄为 (4 9.2± 10 .7)岁。症状以黄疸最为多见 (74 .2 % ) ,其次为皮肤瘙痒 (5 1.6 % )和乏力 (32 .3% ) ,3例患者 (9.7% )合并腹水。所有患者血清碱性磷酸酶、γ 谷氨酰转肽酶及胆红素水平明显升高 [分别为 (388.9± 2 77.5 )U/L、(381.6± 2 13.2 )U/L和 (176 .4± 176 .1) μmol/L],血清丙氨酸转氨酶 (ALT)、天冬氨酸转氨酶 (AST)水平呈轻至中度升高 [分别为(79.7± 4 6 .3)U/L及 (119.8± 6 1.2 )U/L],患者血清IgM升高 (3.0± 1.9)g/L ,行线粒体抗体检查者92 % (2 3/ 2 5 )阳性 ,6 1.3%患者熊去氧胆酸治疗短期内显示一定疗效。结论　原发性胆汁性肝硬化主要累及中年女性 ,血清碱性磷酸酶及γ 谷氨酰转肽酶水平升高、抗线粒体抗体阳性、血清IgM升高有助于诊断本病 ,肝活检病理学检查有助于进一步确诊及组织学分期     

中国人原发性胆汁性肝硬化的前瞻性研究

目的对自1958年至2001年确诊的40例原发性胆汁性肝硬化(PBC)病人作较详细的前瞻性观察,以唤起国内同道的注意.方法从1958年诊断第1例起,至今已收集了40例,对其临床过程作了长期的随访.诊断标准(1)临床表现和肝生化检查符合淤胆;(2)除外其他原因的肝内或肝外淤胆;(3)血清抗线粒体抗体阳性;(4)肝活检符合PBC的组织学改变;(5)经1年以上随访,符合PBC的自然病程.结果自1958年至2001年共确诊PBC 40例,1958～1990年间仅9例,余者在1991～2001年间诊断.29例系上海市常住户口,8例系来自外地,另3例系外籍华人.本组发病时平均年龄为(47.9±9.1)岁,确诊时年龄为(51.5±9.8)岁.女性39例,男性仅1例.本病起病隐匿和缓慢,不易觉察.有14例发病时无明显症状,系在体检时发现肝功能(LFL)异常或高血脂就诊.初起时主诉为乏力、皮肤搔痒、尿深和轻度黄疸.PBC的临床表现随着病程的进展而变化,一般病程大于5年或以上,往往有黄疸、眼睑黄疣、肝脾肿大、肝掌和蜘蛛痣.长期黄疸病人脸色呈黄色、黄褐色或黑色.起病时LFL的异常率如下ALP 97.5%,GGT 95%,ALT80%,AST 70%,高胆红素血症52%.免疫荧光法测线粒体抗体20例,其中17例阳性;酶免疫法M2抗体试验测定31例,30例阳性,1例阴性;IgM增高者为88.6%.28例有肝组织学资料.病理学分期Ⅱ期8例,Ⅲ期12例,Ⅳ期8例.并发病自身免疫性肝炎2例,口眼干燥征7例,Ⅱ型糖尿病4例,类风湿性关节炎4例,自身免疫性溶血性贫血、甲状腺功能亢进、多肌炎和自身免疫性胃炎各1例.治疗单用皮质激素、氨甲蝶呤或秋水仙碱无效,16例应用熊去氧胆酸12个月以上,12例有明显缓解.随访和转归8例死亡,死亡原因为肝衰竭和(或)上消化道大出血,29例仍存活,3例失访,平均存活期为9.17年.结论PBC在中国人中并非罕见,提高本病的早期诊断,给予有效治疗,可改进预后和生存质量.     

原发性胆汁性肝硬化抗线粒体抗体M2亚型的诊断价值

目的探讨抗线粒体亚型（AMA亚型）对原发性胆汁性肝硬化（PBC）的诊断价值。方法应用酶免疫斑点法检测血清中AMA-M2、M4、M9亚型。13例经临床诊断为PBC患者，44例非PBC肝胆病患者。结果13例PBC患者M2均阳性、M4及M9均阴性；44例非PBC肝胆病患者M2、M4、M9均阴性。5例PBC者肝活检4例为Ⅱ期、1例为Ⅳ期。结论血清AMA-M2抗体检测可作为临床诊断PBC的重要血清免疫学指标。     

The Western immunoblotting pattern of anti-mitochondrial antibodies is independent of the clinical expression of primary biliary cirrhosis

Anti-mitochondrial antibodies are the serological markers of primary biliary cirrhosis. We analysed the detailed anti-mitochondrial antibodies patterns to see whether the immunological specificities detected at the time of the diagnosis correlate with the histological, clinical and immunological expression of the disease. One hundred and thirty primary biliary cirrhosis patients were studied at the time of presentation/diagnosis. Anti-mitochondrial antibodies reactivity was dissected and evaluated by Western immunoblotting with bovine heart submitochondrial particles as antigenic source. Six different Western immunoblotting patterns have been identified with the following hierarchy: pattern A (anti-PDC-E2+anti-E3BP, 38.5%), pattern B (anti-PDC-E2+anti-E3BP+anti-OGDC-E2, 20.8%), pattern C (anti-PDC-E2+anti-E3BP+anti-BCOADC-E2+anti-OGDC-E2, 13.1%), pattern D (anti-PDC-E2+anti-E3BP+anti-BCOADC-E2, 6.9%), pattern E (anti-BCOADC-E, 6.1%) and pattern F (anti-mitochondrial antibodies negative primary biliary cirrhosis, 14.6%). The different patterns were neither associated with peculiar clinical, biochemical, histological and immunological features nor with the Mayo Risk Score. The anti-mitochondrial antibodies pattern at presentation is independent of the stage of the liver disease; therefore, the Western immunoblotting characterisation of anti-mitochondrial antibodies does not seem to be helpful in identifying the clinical, biochemical or histological expression of primary biliary cirrhosis at the time of the diagnosis.     

Diagnosis of primary biliary cirrhosis

Primary biliary cirrhosis is the archetypal autoimmune liver disease, with the disease label describing a chronic granulomatous lymphocytic small bile duct cholangitis, which now most commonly presents asymptomatically and at an early pre-cirrhotic stage. Disease is more common than thought, with 1 in 1000 women over the age of 40 affected. Characteristic immunologic features of the disease assist clinicians in ready non-invasive diagnosis of patients, even if asymptomatic with only anicteric/cholestatic liver biochemical profiles. Over 90% of patients are anti-mitochondrial antibody positive, and for those negative, a significant proportion have highly specific anti-nuclear antibody profiles. Liver biopsy remains useful in certain settings where clarity is needed to confirm diagnosis, exclude alternative disease, and assess the relative contribution of PBC to other co-existent liver injury, and seeks to demonstrate in particular the classic bile duct lesions, as well as the degree of interface activity.     

抗线粒体抗体-M2阳性体检人群原发性胆汁性肝硬化相关指标的调查分析

目的 通过对抗线粒体抗体(AMA)-M2型阳性体检人群原发性胆汁性肝硬化(PBC)相关指标的分析,揭示PBC早期主要临床症状及体征的分布状况. 方法 对20 970例健康体检者进行调查,采用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA);采用免疫印迹法检测AMA-M2.率的比较用x2检验,P＜ 0.05为差异有统计学意义. 结果 ANA滴度＞1∶320阳性1 243例,其中AMA-M2阳性156例,阳性率0.74％,男性阳性率为0.3 (32/10 550),女性阳性率为1.2％ (124/10 420),二者差异有统计学意义(x2=55.85,P＜0.05);肝功能异常66例,其中碱性磷酸酶升高58例,可明确诊断为PBC;血常规异常72例;有胆囊疾病病史者47例,糖尿病史者49例,过敏史者22例;有腹部不适者75例,乏力者38例,黄疸者3例,瘙痒者11例.与对照组比较,差异均有统计学意义.结论 亚健康人群如发现血常规及肝功能异常应尽早行AMA-M2等自身抗体检测,以利于PBC早期诊断及病情控制,提高患者生活质量,延长寿命.     

19例男性原发性胆汁性肝硬化患者临床分析

目的分析男性原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的临床特征及预后。方法回顾性分析19例男性PBC患者的临床资料。结果本组患者平均年龄54±17岁,其中17例(89%)为中老年;确诊时无症状者为7例(36.7%),失代偿期肝硬化9例(47.4%);100%患者血GGT和ALP升高,78.9%ALT和AST轻中度升高;2例(10.5%)合并干燥综合征;13例(68.4%)患者AMA阳性,14例(73.7%)AMA-M2阳性。经熊去氧胆酸治疗,早期患者病情有不同程度的好转。结论男性PBC患者起病隐匿,特异性自身抗体检测阳性率略低,早期诊断困难较大。     

Immunoreactivity to M2 proteins in antimitochondrial antibody-negative patients with primary biliary cirrhosis

Abstract Although antimitochondrial auto-antibodies are characteristically present in the serum of patients with primary biliary cirrhosis (PBC), there is a discrepancy between the positivity for antimitochondrial antibody (AMA) and that for anti-M2 auto-antibody. In an attempt to explain the discrepancy, this study investigates the relationship between the AMA titre, determined by indirect immunofluorescence, and immunoreactivity to four inner mitochondrial membrance proteins (M2 proteins) with molecular weights of 70, 50, 47, and 40 kDa in 129 patients with PBC. Antimitochondrial antibody positivity was identified in 114 (88%) of 129 patients with clinically and histologically confirmed PBC. There were no significant differences between the AMA-negative and AMA-positive groups in clinical characteristics or histologically determined disease stage. Immunoblot analysis showed that all patients had anti-M2 auto-antibodies to one or more of the four M2 proteins. Nine (60%) of the 15 AMA-negative patients had antibodies to only one M2 protein (either 70 or 47 kDa). In contrast, 34 (53%) of the 64 patients with high AMA titres ( 1: 320) had antibodies to all four M2 proteins. There was a significant rank correlation between the AMA titre and the number of antibodies to M2 proteins ( P < 0.01). These findings indicate that the AMA titre is not influenced by the immunogenicity of M2 protein but by the number of M2 proteins that elicit an antibody response and that decreased immunoreactivity to M2 proteins may induce AMA negativity in PBC serum samples.