激素和生长因子对无血清培养成纤维细胞调控作用的实验研究

研究激素和生长因子对体外无血清培养３Ｔ３和Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２成纤维细胞增殖的调控作用，发现加胰岛素，胰高血糖，表皮生长因子（ＥＧＦ）和成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）各组细胞数均明显高于单纯无血清对照组，且加激素各组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值均高出对照组３～６倍（Ｐ＜０．０５），其中ＥＧＦ＋ＦＧＦ以及上述四种激素混合使用，二细胞＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入值超过对照组３０倍以上。     

表皮生长因子对人衰老成纤维细胞EGFR基因及HER－2基因表达的诱导

人胚肺成纤维细胞（２ＢＳ）的３Ｈ脱氧胸苷（ＴｄＲ）掺入率，衰老细胞明显低于中年和年轻细胞（Ｐ＜０．０１）。表皮生长因子（ＥＧＦ）对三种细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入均有促进作用，衰老细胞的反应性明显降低。Ｎｏｒｔｈｅｒｎ及斑点杂交法显示衰老细胞的ＨＥＲ－２ｍＲＮＡ较年轻细胞明显降低，ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ水平仅在极端衰老时才下降，ＥＧＦ可诱导年轻细胞ＨＥＲ－２基因表达，而衰老细胞却难以诱导。     

莲心碱对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞增殖及对PDGF—B,bFGF,c …

用［＾３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（［＾３Ｈ］ＴｄＲ）掺入法、电镜、免疫组化和原位杂交方法，在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）观察了莲心碱（Ｌｉｌｅｎ）对血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）增殖的作用及对生长因子ＰＤＧＦ－Ｂ、ｂＦＧＦ及其相关癌基因ｃ－ｓｉｓ和ｃ－ｍｙｃ表达的影响。结果发现Ｌｉｅｎ在降低ＳＨＲ血压同时，能减少ＶＳＭＣ的线粒体，粗面内质网和［＾３Ｈ］ＴｄＲ掺入量，并能逆转ＶＳＭＣ增殖对ＰＤＧＦ０Ｂ、ｂＦＧＦ抗     

非酶糖化蛋白对体外培养血管内皮细胞生长的影响

目的 观察糖代蛋白终末产物（ＡＧＥｓ）及高糖对体外培养人血管内皮细胞增殖的影响。方法 采用＾３Ｈ标记的腺嘧啶（＾３－ＴｄＲ）掺入法测定细胞增殖情况。结果 在含ＡＧＥｓ的培养液（５μｇ／ｍｌ）中增培养的新生儿脐带静脉内皮细胞,其２小时＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入对照组的２．９５倍（Ｐ〈０．０１）,而在含３０ｍｍｏｌ／Ｌ葡萄糖的２液中培养的人胚胎脐带静脉内皮细胞,其２小时＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入对照组（１１ｍｍｏｌ／     

表皮生长因子对类风湿关节炎滑膜细胞的作用

目的 观察表皮生长因子（ＥＧＦ）对类风湿关节炎（ＲＡ）滑膜细胞的作用和细胞中有丝分裂素激活的蛋白激酶（ＭＡＰＫ）的激活情况。方法 ３～５代体外培养的ＲＡ滑膜细胞,＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入检测ＥＧＦ对细胞ＤＮＡ合成的影响;ＥＧＦ刺激后裂解细胞,收获蛋白,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＭＡＰＫ的活化。结果 ＥＧＦ刺激组和对照组每分钟计数值差异有显著性（Ｐ〈０．００１）。ＥＧＦ能引起细胞内明显ＭＡＰＫ活化。结论     

钙通道阻滞剂对环孢素A所致内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究钙通道阻滞剂异搏定对环孢素Ａ（ＣｓＡ）所致内皮细胞（ＥＣ）所致内皮细胞（ＥＣ）损伤的保护作用。 方法：在培养的ＥＣ中加入ＣｓＡ１００μｇ／Ｌ的同时加入异搏定１００μｇ／Ｌ作用２４ｈ，以直接计数粘附细胞数观察细胞分离；光镜、电镜观察细胞形态；Ｈ＾３－ＴｄＲ掺入法及流式细胞仪观察ＤＮＡ抑制；Ｆｕｒａ－２ＡＭ荧光负载法检测细胞内游离钙（［Ｃａ＾２＋］ｉ）；放射免疫法检测细胞上清中内皮素（ＥＴ）     

脂质体包裹EGFR反义寡脱氧核苷酸抑制人大肠癌细胞的增殖

目的研究用表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）反义寡脱氧核苷酸（ＡＳＯＤＮ）抑制人大肠癌细胞株ＨＲ８３４８的生长增殖，探讨大肠癌治疗的新途径．方法人工合成的ＥＧＦＲ反义ＯＤＮ及无关对照ＯＤＮ经脂质体包裹后作用ＨＲ８３４８细胞，采用ＭＴＴ法，［３Ｈ］ＴｄＲ掺入试验，细胞周期分析，裸鼠体内接种等方法测定细胞体内外增殖的变化．结果经ＥＧＦＲ反义ＯＤＮ处理的ＨＲ８３４８细胞与对照组ＨＲ８３４８细胞相比，体外增殖速度减慢（细胞增殖抑制率达７１％）、ＤＮＡ合成受抑（细胞增殖指数为０３６１ｖｓ０７８４，Ｓ期细胞数为３４８％ｖｓ５９９％）、裸鼠体内成瘤率下降（２５％ｖｓ１００％）．结论ＥＧＦＲ反义ＯＤＮ可有效抑制大肠癌细胞的体内外生长增殖，可用于实验性肿瘤基因治疗研究     

rIFN－a对胃癌细胞表皮生长因子受体表达的调节

用中性红吸收分析法和放射配体结合法分析基因重组干扰素－α（ｒＩＦＮ－α）对胃癌细胞（ＳＧＣ７９０１、ＫＡＴＯⅢ）增殖及其表皮生长因子受体（ＥＧＦ－Ｒ）表达的影响。结果显示ｒＩＦＮ－α可明显抑制ＳＧＣ７９０１细胞增殖，与作用时间、剂量相关，而对ＫＡＴＯⅢ增殖无明显抑制作用。采用氯胺Ｔ法自行标记表皮生长因子（ＥＧＦ），配体结合实验Ｓｃａｔｃｈａｒｄ分析结果ＳＧＣ７９０１、ＫＡＴＯⅢ均高表达单一亲和性的ＥＧＦ－Ｒ。ｒＩＦＮ－α降低ＳＧＣ７９０１细胞ＥＧＦ－Ｒ数量，与作用时间、剂量相关，ＥＧＦ－Ｒ亲和性无变化，而对ＫＡＴＯⅢ细胞ＥＧＦ－Ｒ的数量及亲和性均无明显影响。结果提示ｒＩＦＮ－α抑制胃癌细胞生长可能和其下调细胞ＥＧＦ－Ｒ相关。     

去甲肾上腺素,人参皂甙和硝苯啶对大鼠动脉平滑肌细胞增殖和D…

目的 血管的老化与血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）的异常增殖有关，我们拟探讨其增殖机制并寻求有效防治措施。 方法 应用噻唑蓝（ＭＴＴ）染色法和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法观察去甲肾上腺素（ＮＥ）、硝苯啶（Ｎｉｆ）以及人参皂甙（Ｇｉｎ）对老年（１８月龄）和青年（３月龄）大鼠培养的主动脉平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）增殖和细胞内ＤＮＡ合成的影响。 结果 （０．１￣５）×１０＾－５ｍｏｌ／Ｌ的ＮＥ可明显促进ＡＳＭＣ呈剂量依赖     

钙拮抗剂对系膜细胞增殖的抑制作用

观察钙拮抗剂维拉帕米、硝苯地平、恬而心，在不同浓度是地对系膜细胞增殖及肥大的作用。方法：体外对人体系膜细胞进行二维培养，选第４－６代系膜细胞置９６孔培养板进行研究。用促有丝分裂剂ＰＤＧＦ（５μｇ／Ｌ）、促其增殖，加或不加三种不同类型钙拮抗剂：维拉帕米、硝苯地平、恬而心，观察对以上刺激的抑制作用，加入同素＾３Ｈ－ＴｄＲ、＾３Ｈ－Ｕｒ（１μＣｉ／孔）、＾３Ｈ－Ｌｅｕ（１μｇＣｉ／孔），液闪计仪测定ｍｉ