采用异源双链泳动法进行HIV-1亚型分析的研究

目的 探索一种简单、敏感、特异和成本低的HIV-1亚型亚型测定方法。方法 采用改良的异源双链泳动法(HMA)与DNA序列分析法对14份HIV-1抗体阳性者样本进行亚型测定、分析和比较。结果 用HMA改良法明确测定了14份样本中的13份样本的亚型。在14份样本中对13份样本进行DNA序列分析有12份的结果与HMA的相符,符合率达92.3％。结论 改良的HMA测序法是一种简单、敏感、特异和经济的HIV-1亚型测定方法,可在广大的基层单位推广应用。     

检测HIV-1耐药株的异源双链泳动分析技术的建立及临床应用

目的探讨利用异源双链泳动分析技术(HMA)检测HIV-1耐药株的可行性和临床应用。方法从接受高效抗逆转录病毒治疗(HAART)的HIV-1感染者血浆中抽提RNA,采用套式RT-PCR方法扩增HIV-1的PR和RT基因片段,并对扩增的基因片段进行异源双链泳动分析。结果本方法对血清中HIV-1RNA含量2000copies/ml以上的样本都能有效扩增。在18例参加HAART治疗的HIV感染者中,17例的HMA结果在聚丙烯酰氨凝胶电泳上,没有出现有意义的异源双链泳动带。1例发现有异源双链二聚体,这1例后经序列测定证实,确定有耐药位点的基因变异。结论异源双链泳动分析技术能够及时、间接地反映HIV-1在治疗过程中耐药株的存在。该方法的建立能在临床上为临床医生制定治疗方法提供参考依据。     

重庆市HIV—1样本的亚型分析及G亚型HIV—1毒株在我国的发现

目的 分析重庆市高危人群中ＨＩＶ－１亚型的流行情况。方法 对采自重庆市经性传播和静脉吸毒途径感染的３倍ＨＩＶ－１阳性外周血分离ＰＭＢＣ,扩增ｅｎｖ基因Ｃ２－Ｖ３区核酸片段,并进行核苷酸疗列分析,结果 在其中一孕妇体内发现一株Ｇ亚型ＨＩＶ－１毒株。结论 这表明ＨＩＶ在重庆市高危人群口民有流行并且流行情况复杂。     

深圳市HIV—1B亚型感染毒株env基因序列测定和分析

应用巢式－ＰＣＲ方法，对深圳检出的２份ＨＩＶ－１感染者的外击血单核细胞样本进行扩增，获得ＨＩＶ－１膜蛋白基因核酸片段，并对其Ｃ２－Ｖ３区及邻区３５０￣４５０个核苷酸序列进行测定和分析。     

陕西省HIV—1流行株膜蛋白基因C2—V3区序列特征和亚型分析

目的 了解陕西省HIV－1毒株的流行情况和亚型特征。方法 用套式聚合酶链反应（Nested-PCR)对6份采集于陕西省经确认为HIV－1感染者或艾滋病病人外周血淋巴细胞（PBMC）提取核酸,从6份样品中获得了HIV－1膜蛋白（ENV）基因的核酸片段进行扩增,并测定和分析了C2－V3及其邻区共312个核苷酸序列。结果 6份血样,2份中HIV－1A亚型毒株感染（SHX7、SHX8）;4份为HIV－1B’亚型（泰国B’亚型）毒株感染（SHX1、SHX5、SHX6、SHX9）。SHX1、SHX5、SHX6、SHX9彼此问基因离散率为5．62％,SHX7与来自卢旺达的U08794之间的基因离散率仅为2．41％。结论 陕西省目前存在HIV－1A、B’两种亚型的毒株,HIV－1 B’亚型由邻近地区传入,HIV－1A亚型为非常人接触传入。     

应用长片段PCR扩增全长HIV— 1DNA的研究

目的 探讨长征段ＰＣＲ（ＬＤ－ＰＣＲ）扩增特点,并将它用于对全长ＨＩＶ ＤＮＡ的研究。方法 应用ＬＴＤ（Ｕ５）／ＬＴＤ（Ｒ）,ＣＬ－ＮＳＣ／ＣＬ－ＮＥＦ和ｇａｇＡｌ／ｇａｇＡ２等不同引物,＾３２Ｐｇａｇ,ｐｏｌ,ｎｅｆ和ｔａｔ等为片段探针,对克隆有ＨＩＶ－１完整基因片段,部分基因片段的质粒和ＨＶＩ感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中的ＨＩＶ－１ ＤＮＡ进行扩增。结果 ＬＤ－ＰＣＲ对０．４－９ｋｂ的第     

不同病期HIV—1感染者的血浆中和抗体研究

目的：了解HIV－1感染者体内中和抗体状况,探讨HIV－1感染的病理机制,方法：病毒的分离和培养采用共培养（co-culture)方法,从29例HIV－1感染者的外周血淋巴细胞（PBMC）分离了29株HIV－1原代病毒,中和实验采用病例血浆中和分离的相应病毒株,再感染经PHA刺激活化后的正常人PBMC,培养5天检测其HIV－1 p24抗原含量以判断中和效果。结果：29例研究中,24例是无症状感染者,5例为AIDS患者,我们发现17例无症状感染者的ID50≥8,其中10例ID90≥8,4例产生高滴度中和抗体ID90≥64,交叉中和实验结果表明这4例感染者的血浆对异体 病毒均有不同程度的中和效应,其中尤以s7,s28作用最强,而AIDS患者中仅2例ID50≥8,其中1例ID90≥8,无1例产生高滴度中和抗体。结果：通过对HIV－1感染者血浆中和效应的观察,表明多数感染者对自身同血源病毒的中和抗体滴度较低,但也有少数感染者能产生较高滴度的中和抗体,有必要深入研究其广泛的中和病毒效应,此外,早期无症状的感染者似比晚期有症状者对自体病毒的中和效应强,提示抗病毒治疗应于感染早期进行,以免机体体液免疫反应的进一步恶化。     

新疆地区静脉吸毒人群中HIV—1感染者细胞免疫特征的研究

目的 通过测定新疆地区静脉吸毒人群中ＨＩＶ－１（１型人免疫缺陷病毒）感染者ＣＤ４细胞、血浆细胞因子（ＩＬ－２,ＩＮＦγ,ＩＬ－４和ＩＬ－１０）水平和末梢血单核细胞（ＰＢＭＣ）产生细胞因子的活性,了解该人群中ＨＩＶ－１感染者细胞免疫学特征及其病程的关系。方法 将３６例ＨＩＶ－１感染者分为２组,第一组ＣＤ４细胞≥５００／ｕｌ,第二组ＣＤ４细胞〈５００／ｕｌ。ＣＤ４细胞和细胞因子分别采用流氏细胞仪和ＥＬ     

ELISA检测HIV感染者尿液标本中抗HIV—1抗体结果分析

目的 利用尿液标本检测抗HIV-1抗体。方法 通过ELISA方法检测50例抗HIV-1抗体阳性感染者及100例抗HIV-1抗体阴性对照组尿液中抗HIV-1抗。结果 显示在50例HIV感染者中有49例尿液抗HIV-1抗体阳性,1例阴性;对照组中尿液中均未检测出抗HIV-1抗体,以血液标本为标准,检测尿液抗HIV-1抗体的灵敏性为98.0%,特异性为100%,尿液标本与血液标本检测的一致性达99.3%。结论 本实验提示在采集血液标本不便的情况下。可通过尿液抗HIV-1抗体的检测对高危人群的HIV感染情况进行监测和筛查。     

套式PCR对HIV—1 env基因检测的敏感度分析

采用套式ＰＣＲ对含ＨＩＶ－１膜蛋白基因的Ｂ亚型质粒和ＨＩＶ－１感染者外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）进行ｅｎｖ基因部分片断的扩增,套式ＰＣＲ则扩增出全部样品中ＨＩＶ－１膜蛋白基因片断。     

抗—HIV ELISA试验中双抗原夹心法与间接法的对比分析

我们对 31例恶性胸腔积液患者采用力尔凡胸腔注射治疗 ,取得良好的近期疗效 ,现报告如下。临床资料 :本组男 18例 ,女 13例 ;年龄 2 3～ 6 9岁。均通过胸腔射层、胸液生化、癌细胞及 CT等检查确诊 ,其中肺癌2 7例 ,肝癌 3例 ,乳腺癌 1例。积液部位为双侧 5例 ,右侧 15例 ,左侧 11例。积液量为中等量 17例 ,大量 14例。积液性质为渗出液 2 0例 ,漏出液 8例 ,血性 3例。患者均经化疗 (肝癌为局部 ,其他是全身性 )、利尿剂、白蛋白及支持治疗等 ,并行胸腔穿刺抽液 1～ 3次 ,胸腔积液无明显减轻者 ,于胸腔注射力尔凡。方法 :首次使用前应做皮试…     

深圳地区艾滋病病毒感染人群的HIV—1抗性基因多态性研究

目的 研究HIV－1相关的等位基因CCR5△32、CCR5m303、CCR2b和SDF1在艾滋病病毒感染人群中的分布,为深入分析这些遗传突变在HIV－1感染、艾滋病发病进程中的作用提供理论依据。方法 收集深圳地区近年来艾滋病毒感染者的血液标本共91份,提取基因组DNA。经PCR或PCR－ RFLP分析,计算遗传突变频率、纯合子和杂合子的构成比例。采用x^2检验或t检验进行群体分布的拟合度和差异的显著性分析。结果 在所有被检测的91例HIV－1感染者的个体中,未发现有CCR5△32和CCR5m303的遗传突变,CCR2b－641和SDF1－3’A的突变频率较高,分别为21．43％和25．82％。与中国普通汉族人的结果相近。结论 研究结果提示深圳地区的艾滋病病毒感染者本身对HIV－1病原体可能具有较大的遗传易感性。由于他们具有较高的CCR2b-641和SDF1－3’A突变频率,后者在艾滋病发病过程中的影响值得进一步研究。