核转录因子E2Fs家族研究进展

核转录因子E2Fs家族 (E2F转录因子 )是视网膜母细胞瘤相关基因 (RB/E2F)通路中调控细胞有丝分裂事件的重要因子 ,E2F是否进入核内发挥核转录因子作用取决于RB蛋白的磷酸化状态 ,E2F调控的下游基因分为激活与抑制两种方式 ,涉及细胞周期调控、生长与凋亡、增殖与分化等重要生命活动。E2F在细胞周期中的功能失调将导致细胞上述机能的改变并有可能与肿瘤发生有关 ,深入研究无疑将对完整阐述细胞周期调控及肿瘤发生机制乃至寻求新的肿瘤治疗靶点提供帮助。     

转录因子E2F与血管再狭窄的研究进展

E2F是调控细胞周期进程一个关键的转录因子,而且在血管再狭窄的病理过程中也起着非常重要的作用.对上述问题的了解,将有助于血管再狭窄防治的研究.     

胃癌微卫星不稳定性及其与转录因子E2F4基因突变关系的研究

癌的发生发展是涉及多步骤、多阶段和多基因参与的复杂过程 ,其中细胞的周期调控起着重要的作用。转录因子Ｅ2Ｆ家族与细胞周期尤其是Ｇ1期至Ｓ期的调控有关 ,Ｅ2Ｆ4是其家族成员之一 ,能反向激活细胞增殖所需要的基因。微卫星是广泛分布于基因组中的短串联重复ＤＮＡ序列 ,微卫星的不稳定性 (ＭＳＩ)可能是肿瘤发生的另一种机制[1 ,2 ] 。为此 ,我们研究胃癌转录因子Ｅ2Ｆ4基因编码区内三核苷酸(ＡＧＣ) ｎ 重复序列的突变及其与ＭＳＩ发生的关系 ,探讨它们在胃癌发生发展过程中的作用。一、材料与方法1 .组织标本 :选用我院 1 997年 1月至…     

肺鳞癌中E2F1、E2F6及TPX2的表达及临床意义

目的 探究E2F1、E2F6及Xklp2靶蛋白(TPX2)在肺鳞癌中的表达情况及临床意义.方法 选取2019年2月至2020年10月于本院收治进行手术的肺鳞癌患者58例.取肺鳞癌组织作为研究样本,取癌旁正常组织作为对照样本.采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法检测E2F1、E2F6、TPX2的相对表达量,卡方检...     

转录因子活化蛋白-2在颞叶癫痫模型小鼠海马的表达变化

目的观察海人酸(KA)致癫痫模型小鼠海马转录因子活化蛋白-2(AP-2)的表达变化。方法雄性C57小鼠32只,随机分为对照组(8只)和模型组(24只),模型组再依据造模后小鼠处死时间分成3 h、8 h、24 h共3组。采用KA侧脑室注射建立癫痫动物模型,建模成功后观察癫痫发作情况,采用RT-PCR检测小鼠造模后各时间点海马AP-2 mRNA转录情况,Western印迹法测定小鼠造模后各时间点AP-2的含量,并与对照组比较。采用免疫组化检测小鼠造模后各时间点AP-2在海马的表达,并且采用免疫荧光观察AP-2在海马组织中与神经元共表达情况。结果与对照组比较,模型组小鼠海马AP-2蛋白含量在癫痫发作后3 h即上升,8 h达高峰,24 h已有降低(P0.05)。基因、蛋白、免疫组化、行为学结果均呈正相关(P0.05)。AP-2在海马神经元中有共表达。结论致痫小鼠脑内存在AP-2上升,可能进一步诱发神经凋亡,成为癫痫发病重要机制之一。     

老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达变化及与预后的关系

目的 探讨N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)、E2F8转录因子8(E2F8)蛋白表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法 选取46例老年乳腺癌患者,术中取癌组织和癌旁组织,用免疫组化染色法检测组织中YTHDF1、E2F8蛋白表达。随访患者并记录随访期间肿瘤复发、转移及死亡时间。用Spearman秩相关分析乳腺癌组织YTHDF1与E2F8蛋白表达的相关性;Kaplan-Meier法分析YTHDF1、E2F8蛋白表达与患者无进展生存预后的关系;Cox回归分析老年乳腺癌患者无进展生存预后的影响因素。结果 乳腺癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于癌旁组织（P均<0.05）,二者蛋白表达呈正相关（r=0.706,P<0.05）。TNM分期Ⅱ期、肿瘤最大径>2 cm、合并淋巴结转移老年乳腺癌患者癌组织中YTHDF1、E2F8蛋白阳性表达率高于TNM分期Ⅰ期、肿瘤最大径≤2 cm、无淋巴结转移的癌组织（P均<0.05）。32例患者发生肿瘤进展,YTHDF1、E2F8蛋白表达阳性患者5年无进展生存率低于其蛋白表达阴性患者（P均<0.05）。T...     

核转录因子E2相关因子2启动子CpG岛甲基化对其蛋白表达及COPD的影响

核转录因子E2相关因子2 (nuclear factor erythroid-2-related factor 2,Nrf2)在人体氧化与抗氧化平衡过程中起了重要的作用.氧化与抗氧化失衡是COPD的重要发病机制之一.近来有研究发现 Nrf2启动子CpG岛甲基化能够影响 Nrf2蛋白的表达,从而影响抗氧化防御过程.明确 Nrf2启动子CpG岛甲基化与 Nrf2蛋白表达及COPD的关系,对今后临床上治疗 COPD寻找新途径具有重要意义.     

核转录因子E2Fs家族研究进展

核转录因子E2Fs家族(E2F转录因子)是视网膜母细胞瘤相关基因(RB／E2F)通路中调控细胞有丝分裂事件的重要因子，E2F是否进入核内发挥核转录因子作用取决于RB蛋白的磷酸化状态，E2F调控的下游基因分为激活与抑制两种方式，涉及细胞周期调控、生长与凋亡、增殖与分化等重要生命活动。E2F在细胞周期中的功能失调将导致细胞上述机能的改变并有可能与肿瘤发生有关，深入研究无疑将对完整阐述细胞周期调控及肿瘤发生机制乃至寻求新的肿瘤治疗靶点提供帮助。     

肺鳞癌组织中MDM2和E2F1蛋白表达的相关性分析

2002-2004年,我们采用SP免疫组化方法检测了66例肺鳞癌患者癌组织MDM。和E2F1蛋白表达情况,以探讨二者的相关性及其与临床病理特征之间的相关性。     

新生期小鼠胰岛细胞凋亡及其机制的研究

目的 观察新生期小鼠胰岛细胞凋亡的变化特点并分析细胞凋亡相关基因的表达差异,初步探讨相关机制.方法 采用胶原酶消化法分离纯化第1、3和8周小鼠胰岛细胞,以磷脂结合蛋白V-绿色荧光素/碘化丙啶双染法流式细胞术检测细胞凋亡率.透射电镜观察胰岛细胞凋亡形态,原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（Tunel）/胰岛素免疫荧光双染法检测凋亡.采用实时定量PCR技术检测凋亡相关基因mRNA的表达.采用Western blotting技术检测促凋亡基因和抗凋亡基因的表达.多组间统计数据比较采用单因素方差分析.结果 （1）新生期小鼠胰岛细胞凋亡率在3周时显著增加,明显高于1周和8周[分别为（10.53±2.61）％、（1.80±0.69）％、（3.26±0.94）％,F=32.09,P＜0.01].透射电镜结果显示新生第3周小鼠胰岛细胞核出现凋亡早期改变.3周时Tunel/胰岛素双阳性细胞数明显高于1周和8周.（2）新生期小鼠胰岛细胞凋亡相关基因的表达呈动态变化,3周时,促凋亡基因Fas和FasL的mRNA表达均明显高于1周和8周（分别为1.53±0.21、1.00±0.00、0.46±0.24,F=24.85,P＜0.01;2.63±0.56比1.00±0.00、0.52±0.14,F=32.77,P＜0.01）,抗凋亡基因Bcl-2 mRNA表达明显低于1周和8周（分别为0.30±0.23、1.00±0.00、1.71±0.00,F=78.06,P＜0.01）.（3）3周时,Fas、FasL和裂解的Caspase-3蛋白表达均明显高于1周和8周（分别为2.05±0.16、1.00±0.00、0.59±0.24,F=61.47,P＜0.01;3.54±0.86、1.00±0.00、0.72±0.26,F=27.04,P＜0.01;5.74±0.59比1.00±0.00、3.11±0.20,F=128.79,P＜0.01）;Bcl-2蛋白表达明显低于1周和8周（0.62±0.13比1.00±0.00、1.90±0.10,F=151.08,P＜0.01）.结论 Fas/FasL以及Bc1-2介导的细胞凋亡信号通路可能参与新生期小鼠胰岛细胞凋亡的调控.     

围妊娠期小鼠胰岛细胞增殖及Survivin表达变化的研究

目的 观察围妊娠期小鼠胰岛β/α细胞量、细胞增殖、Survivin表达变化以及大鼠胰岛细胞瘤细胞株INS-1干扰Survivin表达后催乳素刺激细胞增殖的变化,探讨Survivin与妊娠期胰岛细胞扩增的关系.方法 采用免疫组化染色法检测C57 BL/6雌性小鼠非妊娠对照组（NP）和妊娠10.5、14.5、18.5 d（P10.5、P14.5、P18.5）、产后4、8 d（AP4、AP8）（每组各25只）胰岛β/α细胞量的变化.采用胶原酶消化法分离纯化小鼠胰岛,以流式细胞术检测细胞周期,实时定量聚合酶链反应及Western blotting法检测Survivin mRNA和蛋白的表达.采用脂质体转染siRNA方法干扰INS-1细胞Survivin的表达,催乳素刺激后检测细胞周期.多组数据组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用最小差异显著性分析.结果 妊娠期胰岛β/α细胞量均显著增加,高峰在P18.5,与NP组相比,β细胞量增长2.1倍（3.84±0.38比1.81 ±0.09,t =4.75,P＜0.05）,α细胞量增长1.6倍（0.92±0.13比0.56 ±0.08,t =2.69,P＜0.05）,至AP8恢复至NP水平.妊娠期小鼠胰岛细胞增殖显著增加,高峰在P14.5,与NP组相比,增殖指数增长2.7倍（23.07±1.88比7.72±1.12,t=10.89,P＜0.05）,产后恢复正常.Survivin mRNA表达水平在妊娠期明显增高,高峰在P14.5,与NP组相比,增长6.7倍（6.69±1.61比1.00 ±0.00,t =4.57,P＜0.05）,产后恢复正常.P10.5时Survivin蛋白开始表达,高峰在P14.5,与P10.5相比增长3.6倍（3.63±0.26比1.00±0.00,t=9.98,P＜0.05）,P18.5时表达逐渐下降,P20.5时表达消失.催乳素可显著刺激INS-1细胞增殖,而siRNA干扰INS-1细胞Survivin表达后,细胞增殖受阻.结论 妊娠期小鼠胰岛细胞出现明显扩增,并伴有Survivin的动态表达.Survivin介导催乳素刺激的胰岛β细胞扩增作用.     

miR-363靶向调控E2F3表达影响HepG2细胞增殖和凋亡研究*

目的 探讨微小RNA-363（miR-363）靶向调控E2F转录因子3（E2F3）的表达对HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法 体外培养HepG2细胞,采用Lipofectamine法将miR-363抑制剂或其阴性对照转染到HepG2细胞,继续培养48 h,收获细胞,采用四噻唑蓝（MTT）法测定细胞增殖率,使用流式细胞术法检测细胞凋亡率,采用实时荧光RT-PCR法检测HepG2细胞miR-363 mRNA水平,采用Western Blot法检测HepG2细胞E2F3、BAX和Caspase-3蛋白表达水平。结果 对照组HepG2细胞增殖率为（96.4±9.7)%,显著高于抑制剂处理组【（72.3±6.5）%,P<0.05】,凋亡率为（8.2±1.4）%,显著低于抑制剂处理组【（9.7±0.8）%,P<0.05】;对照组HepG2细胞miR-363 mRNA相对水平为（1.0±0.1）,显著高于抑制剂处理组【（0.6±0.2）,P<0.05】,E2F3蛋白表达量为（1.0±0.1）,显著高于抑制剂处理组【（0.6±0.1）,P<0.05】,而对照组HepG2细胞Bax和Caspase-3蛋白表达量分别为（0.4±0.0）和（0.5±0.1）,均显著低于抑制剂处理组【（0.6±0.1）和（0.7±0.0）,P均<0.05】。结论 miR-363可靶向调控E2F3的表达,抑制HepG2细胞增殖,诱导其凋亡。本研究结果为肝癌靶向治疗提供了一定的理论依据。     

A potential oncogenic role of the commonly observed E2F5 overexpression in hepatocellular carcinoma

AIM: To explore the expression pattern of E2F5 in primary hepatocellular carcinomas (HCCs) and elucidate the roles of E2F5 in hepatocarcinogenesis. METHODS: E2F5 expression was analyzed in 120 primary HCCs and 29 normal liver tissues by immunohistochemistry analysis. E2F5-small interfering RNA was transfected into HepG2, an E2F5-overexpressed HCC cell line. After E2F5 knockdown, cell growth capacity and migrating potential were examined. RESULTS: E2F5 was significantly overexpressed in primary HCCs compared...