小泛素样修饰蛋白4基因163A／G多态性与2型糖尿病肾病的相关性研究

目的探讨小泛素样修饰蛋白4（SUMO4）基因163A／G多态性与2型糖尿病肾病（DN）的相关性。方法运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法对232例T2DM患者,其中正常白蛋白尿103例（N-UAIb组）、微量白蛋白尿65例（M-UAlb组）、大量白蛋白尿64例（L-UAlb组）,以及102名健康对照（NC组）的SUM04基因163A／G多态性进行检测,并比较各组间基因型频率、等位基因频率及相关临床资料。结果NC组和T2DM组基因型和等位基因频率无统计学差异;M-UAlb和L-UAlb组的GA基因型频率高于N—UAlb组（P〈0．05）。结论在昆明地区汉族人群中,SUM04基因GA基因型可能是DN发生的危险因素。     

前列地尔对SUMO介导的2型糖尿病大鼠脑组织病变的作用

目的：探讨小泛素样修饰蛋白（SUMO）化修饰对核因子（NF）-κB通路激活的负性调控在2型糖尿病大鼠脑部病变中的干预作用,为前列地尔对其病变的早期干预提供依据。方法：随机抽取40周龄的lO只GK大鼠为前列地尔组（前列地尔2．5μg／g,尾尖静脉注射给药,1次／d,共10d）、10只为糖尿病对照组,另取10只Wistar雄性大鼠作为正常对照组。正常对照组和糖尿病对照组给予等剂量生理盐水,均为尾尖静脉注射给药。三组均给予普通饲料。测定和观察血糖、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）变化及NF-κB抑制因子（IκB）、NF-κB、SU—M01的水平变化。结果：（1）糖尿病对照组、前列地尔组大鼠的血糖、TG、TC均显著高于正常对照组（P均〈0．05）;（2）HE染色观察：正常对照组脑组织细胞形态正常,糖尿病对照组、前列地尔组脑组织可见细胞肥大,疏松样改变,前列地尔组病变较轻;（3）免疫组化测定的IκB、NF-κB、SUM01：正常对照组少许阳性表达,糖尿病对照组、前列地尔组表达均显著增加（P〈0．05或〈0．01）,但前列地尔组较糖尿病对照组IκB[（0．242±0．034）比（0．268±0．017）]、NF-κB[（0．373±0．015）比（0．486±0．013）]表达显著减少,SUM01[（0．463±0．015）比（0．343±0．018）]表达显著增加（P均〈0．05）。结论：小泛素样修饰蛋白在糖尿病大鼠脑组织表达增多,在前列地尔组表达更多,前列地尔对糖尿病大鼠脑组织病变有一定改善作用。     

SUMO4、NF-κB、IκB在2型糖尿病大鼠肾脏中的表达及意义（英文）

目的：探讨2型糖尿病大鼠肾脏组织小泛素相关修饰蛋白4（SUMO4）、核转录因子（NF）-κB、NF-κB的抑制因子（IκB）的表达及意义。方法：取10只40周龄的无特定病原体（SPF）级雄性自发性糖尿病（GK）大鼠,10只40周龄的SPF级雄性Wistar大鼠,通过HE染色法观察肾组织病变、免疫组化法观察肾组织的SUMO4与IκB、SUMO4与NF-κB表达情况。结果：GK大鼠的肾小球毛细血管球肥大,基底膜轻度增厚,肾小球系膜细胞增生、肥大,肾小管上皮细胞肥大。与正常Wistar大鼠比较,GK大鼠的肾脏NF-κB[（0.232±0.034）比（0.634±0.058）]、IκB[（0.242±0.027）比（0.712±0.078）]及SUMO4[（0.160±0.031）比（0.545±0.045）]的表达水平均明显升高（P均〈0.01）。结论：NF-κB、IκB及SUMO4在GK大鼠肾脏组织表达增多。从而推断在2型糖尿病大鼠肾脏SUMO可能抑制NF-κB转录活性,SUMO化可能成为治疗糖尿病肾脏微血管病变的一个新靶点。     

2型糖尿病大鼠心肌SUMO1、NF-κB、TNF-α表达的研究（英文）

目的：探讨在2型糖尿病大鼠心肌损伤时肿瘤坏死因子（TNF）-α、核转录因子（NF）-κB介导的炎症反应中小泛素相关修饰蛋白1（SUMO1）可能的作用。方法：20只自发性糖尿病（GK）大鼠被随机分为DM1组（单纯糖尿病组,n=10）、DM2组（糖尿病＋高脂饮食组,n=10）,另10只Wistar大鼠为健康对照组,以免疫组织化学法检测SU-MO1、TNF-α和NF-κB的表达。结果：1、DM1、DM2组血糖及TG水平明显高于健康对照组,DM2的又显著高于DM1组的（P均〈0.05）;2、光镜下：DM1组心肌细胞排列整齐,无明显肥大;DM2组心肌细胞肥大呈疏松样排列;3、免疫组化显示：SUMO1表达在DM2组和DM1组较健康对照组明显增加[（44.5±1.1）比（27.2±2.2）比（21.7±3.0）],且DM2组的较DM1组的显著增加（P均〈0.01）;TNF-α表达在DM2组和DM1组较健康对照组明显增加[（27.5±1.5）比（20.2±2.7）比（13.1±1.6）],且DM2组的较DM1的显著增加（P均〈0.01）;NF-κB表达在DM2组和DM1组较健康对照组明显增加[（30.1±1.7）比（40.7±1.5）比（16.0±2.6）],但DM1组的较DM2组的显著增加（P均〈0.01）。结论：2型糖尿病大鼠存在着明显的糖脂代谢紊乱,伴有与人类糖尿病心肌病变相似的心肌组织形态学改变;且血SUMO1、TNF-α和NF-κB的表达均显著增加,提示SUMO1参与了2型糖尿病大鼠心肌病变由NF-κB、TNF-α介导的炎症反应,并有抑制NF-κB,保护心肌的作用。     

CTLA-4基因外显子1A/G49多态性与1型糖尿病的相关性研究

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA－4）基因外显子1的49位点A／G多态性与中国汉族人1型糖尿病（DM）的关系。方法 采用多聚酶链式反应限制性片段长度多态性（PCR－RFLP）技术对33例典型1型DM患者、57例成人晚发自身免疫性糖尿病患者（LADA)和84例健康对照者分析CTLA－4基因外显子1的49位点基因型。结果 1型DM患者的CTLA－4／G^49等位基因频率显著高于对照组（P=0.0005)，而典型1型DM和LADA两组间无显著性差异（P＝0.097)；ICA和GADAb阳性率与G^49无明显相关性（分别为P＝0.065,P=0.066)。结论 CTLA－4基因外显子1多态性与中国汉族人1型DM有关，G^49等位基因是1型DM的独立危险因素之一。     

ACE2基因A9570G多态性与2型糖尿病及糖尿病心肌病的相关性研究

目的 探讨血管紧张素转化酶2(angiotensin l converting enzyme 2,ACE2) 基因A9570G多态性与2型糖尿病(Type 2 diabetes,T2DM)及糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)的相关性.方法选择广东地区无血缘关系的T2DM患者共358例,其中84例并发DMC,所有病人按是否并发DMC分为DMC组和DM组,应用聚合酶链反应和限制性内切酶片段长度多态性的方法检测ACE2基因A9570G多态性,并结合临床、生化指标及超声心动图参数进行分析.结果在男性,对照组和T2DM组等位基因频率及基因型构成差异无统计学意义(χ2=0.002,P=0.964),但DCM组G等位基因频率/G基因型分布高于对照组及T2DM组,差异有统计学意义(χ2=4.409,P=0.036,χ2=6.105,P=0.013).在女性,三组间等位基因频率及基因型构成差异无统计学意义(χ2=0.037,P=0.981及χ2=0.890,P=0.926).根据不同基因型对DMC组患者进行亚组分析发现,男性G基因型患者反映心脏早期舒张功能的室间隔舒张末期厚度(IVSTd)值明显高于A等位基因,差异有统计学意义(t=2.243,P=0.029);女性则未观察到这种差异(F=1.156,P=0.324).结论 ACE2基因A9750G多态性可能与男性T2DM并发DCM的遗传易感性相关,并且与其早期舒张功能不全严重程度有一定关系.     

醛糖还原酶基因多态性与糖尿病微血管并发症的相关性研究

目的　探讨醛糖还原酶（ＡＲ）基因多态标记（ＡＣ）ｎ 与中国人２ 型糖尿病微血管并发症之间的关系。方法　用３２Ｐ引物末端标记法,经聚合酶链反应变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,检测３６２ 例中国人（２１７ 人为２ 型糖尿病,其中１５６ 人合并肾病或视网膜病变,１４５ 人为非糖尿病对照）ＡＲ 基因的二核苷酸（ＡＣ）ｎ 串联重复序列多态标记,比较各组间的等位基因频率和基因型频率。结果　（１）在非糖尿病对照者和２ 型糖尿病患者中,见到七种ＡＲ 基因的等位基因,其中以（ＡＣ）２４（１３８ｂｐ） 等位基因（Ｚ）最常见。（２）同时合并肾病和视网膜病变的２ 型糖尿病组与无并发症的２ 型糖尿病组相比,Ｚ＋ ６等位基因频率显著减少（Ｆｉｓｈｅｒ 确切, Ｐ＝０ ．０３８）, 含Ｚ＋ ６ 等位基因的基因型频率也显著减少（Ｐ＝０．００４）。（３） 无并发症的２ 型糖尿病组与对照组比较其Ｚ＋ ６ 等位基因频率显著增加（ Ｐ＝ ０．０４４） 。（４）２ 型糖尿病合并肾病伴肾功能不全者与不伴有肾病的２ 型糖尿病者相比,Ｚ－ ２ 等位基因频率显著增加（ Ｐ＝ ０ ．０３９）,同时含Ｚ－ ２ 等位基因的基因型频率也呈增加趋势。结论　ＡＲ 的Ｚ－ ２ 等位基因是促进中国人２ 型糖尿病并发严     

降钙素基因相关肽与糖尿病微血管病变

降钙素基因相关肽(CGRP)是目前已知体内最强的舒血管多肽,参与许多重要功能的调节.糖尿病微血管病变是糖尿病常见的慢性并发症,主要累及肾脏和眼,CGRP强大的扩张血管、抑制血管平滑肌细胞增殖、保护内皮细胞、抑制内皮素收缩血管的作用参与了糖尿病肾病的发展过程及糖尿病视网膜病变新生血管的发生并在两者的发生、发展中起了重要作用.通过研究CGRP在微血管病变中的变化趋势,可以为糖尿病微血管病变的早期诊治提供依据.     

抵抗素基因299G/A多态性与2 型糖尿病的相关性研究

2001年Steppan等研究罗格列酮药理作用时发现并提出抵抗素可能是连接肥胖和糖尿病(DM)之间的桥梁。迄今已发现30多个抵抗素基因多态性位点，Osawa等认为其中的内含子2区299G／A多态性可能与2型糖尿病(T2DM)某种表型相关。本研究拟探讨抵抗素基因299G／A多态性与中国汉族人T2DM的相关性。     

血管内皮生长因子基因多态性与糖尿病视网膜病变相关性

目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)+450基因的多态性与糖尿病视网膜病变(DR)的关系.方法 运用PCR-RFLP技术检查2型糖尿病(T2DM)患者249例,单纯T2DM患者120例,DR患者129例,及体检的98例对照者的基因型,比较各组的基因型和等位基因的频率.结果 DR组CC基因型及C等位基因频率显著高于T2DM组和健康对照组(P＜0.01,P＜0.05);CC基因糖尿病(DM)患者VEGF产量高.结论 VEGF+450C/G基因多态性可能与DR的发生发展有关,C等位基因可能是DR的易感基因.     

环氧化酶2基因-765G／C多态性与昆明地区汉族2型糖尿病患者糖尿病肾病发生、发展的关系

目的 探讨环氧化酶2基因启动子区-765G/C多态性与昆明地区汉族2型糖尿病患者糖尿病肾病发生、发展的相关性.方法 选取2008年1月至12月昆明医学院第一附属医院糖尿病科收治住院的2型糖尿病患者252例,根据24 h尿白蛋白排泄率或随机尿白蛋白/肌酐比值分至无糖尿病肾病组（n=100）、隐性糖尿病肾病组（n=78）、显性糖尿病肾病组（n=74）.运用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测环氧化酶2基因启动子区-765G/C多态性.检测血糖、血脂和其他生化指标.运用χ^2检验比较各组基因型频率和等位基因频率,运用方差分析比较各组相关临床及生化指标,采用logistic回归分析评价影响糖尿病肾病发生、发展的危险因素.结果 两糖尿病肾病组-765GG基因型频率与无糖尿病肾病组存在明显差异（0.901 vs 0.810;χ^2=4.309,P＜0.05）.糖尿病肾病患者中,-765GG基因型携带者空腹血糖、餐后2 h血糖与非携带者存在明显差异[分别为（7.9±4.0）vs（5.9±1.7）mmol/L,（12±5）vs（9±4）mmol/L;t值分别为0.001、0.020,均P＜0.05＝.logistic回归分析提示,-765GG基因型是糖尿病肾病发生的独立危险因素之一[比值比（OR）=3.25,95%可信区间（CI）为1.336～7.901].结论 在昆明地区汉族2型糖尿病患者中,环氧化酶2基因启动子区-765GG基因型与糖尿病肾病的发生、发展有关.     

内皮型一氧化氮合酶基因多态性与糖尿病肾病的关系

目的 探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因27bp数目可变的串联重复序列(VNTR)多态性与糖尿病肾病(DN)的关系。方法 应用PCR方法检测了32名健康对照者与84例2型糖尿病(T2DM)患者的eNOS基因a／b基因型，用硝酸盐还原酶法测定上述人群空腹血清一氧化氮代谢物(NOx)水平。并根据24h尿白蛋白排泄率(UAER)将84例T2DM患者分为正常白蛋白尿(UAlb)组(DMl)，微量UAlb组(I)M2)和大量UAlb组(I)M3)。结果 (1)T2DM各组a等位基因频率显著高于对照组，T2DM各组aa ab基因型频率明显高于对照组。DMl组a等位基因频率及aa ab基因型频率高于DM2及DM3组，但差异无显著意义。(2)NC组aa ab基因型空腹血清NOx明显低于bb基因型。(3)血清NOx在DMl组较NC组有明显的升高，但在DM2、DM3组却较NC组显著降低。(4)T2DM患者中，aa ab基因型UAER和血清肌酐(Scr)水平显著高于bb基因型。结论 eNOS基因27bpVNTR多态性与DN发生有关，eNOS基因a等位基因是DN发生和发展的有用的预测标志。     

经颅多普勒检测糖尿病大血管和微血管病变的应用价值

目的 探讨经颅多普勒（TCD）在2型糖尿病患者脑部大血管、微血管病变中的临床应用价值。方法 用TCD比较糖尿病组与正常对照且、糖尿病组中糖尿病微血管并发症组与糖尿病无并发症组间检测动脉的脉动指数（PI）、平均血流速度值（Vm)。结果 糖尿病患者各检测动脉的PI值及颈内动脉颅外起始段（ICA）、大脑中动脉（MCA）、基底动脉的Vm值明显高于对照组（P＜0．001）,微血管并发症组ICA、MCA的PI值显著高于无并发症组（P＜0．001）。结论 PI、Vm对糖尿病脑部大血管病变有良好的敏感性;ICA、MCA的PI值异常增高可作为糖尿病脑部微血管病变的一项指标。     

Association of diabetic neuropathy with Na/K ATPase gene polymorphism

Summary Diabetes mellitus induces a decrease in Na/K ATpase activity in man and animals, and this decrease plays a role in the development of diabetic neuropathy. Na/K ATPase is encoded by various genes, of which the ATP1 A1 gene is expressed predominantly in peripheral nerves and in erythrocytes. To investigate whether a polymorphism in the Na/K ATPase genes could explain the predisposition of some patients with insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM) to develop polyneuropathy, a restriction fragment length polymorphism (RFLP) of the ATP1 A1 gene was studied together with erythrocyte Na/K ATPase activity in 81 Caucasian patients with more than 10 years' duration of IDDM. Associations with diabetic neuropathy, retinopathy and nephropathy were sought. Digestion of the first intron of the ATP1 A1 gene by the Bgl II restriction enzyme revealed a dimorphic allelism. Frequency of the restricted allele was 0.18 in this selected series (however, it was 0.10 in representative samples of IDDM patients and of normal subjects in our area). Mean erythrocyte Na/K ATPase activity was lower in diabetic patients than in 42 control subjects (292 ± 10, vs 402 ± 13 nmol Pi · mg protein^{− 1}· h^{− 1}, p < 0.0001) and was not related to HbA_1c value or to diabetes duration. It was lower in the group of the 28 patients bearing the restricted allele (241 ± 10 vs 319 ± 11 nmol Pi · mg protein^{− 1}· h^{− 1}, p < 0.0001). Neuropathy was absent in 50 patients, mild in 15 and severe in 16. When classified accordingly the three groups of patients did not differ with respect to sex, age and duration of diabetes. The respective frequency of the restricted allele among the groups was 10, 73 and 81 %, (p < 0.0001) and mean erythrocyte Na/K ATPase activity was respectively: 322 ± 10.7 nmol Pi · mg protein^{− 1}· h^{− 1}, 268 ± 15 and 229 ± 17, (p < 0.001). A borderline association between renal status or retinal status and repartition of polymorphism and a borderline correlation between renal status and Na/K ATPase activity were found, but significance disappeared after checking for the presence or absence of neuropathy. IDDM patients bearing the ATP1 A1 variant detected by Bgl II RFLP are much more frequently affected by neuropathy (relative risk 6.5, with 95 % CI 3.3–13). Identification of this risk factor may help to prevent this complication. It is suggested that the restricted allele is in linkage disequilibrium with a genomic mutation allowing diabetes to induce a greater impairment of Na/K ATPase activity which could in turn favour the development of neuropathy. [Diabetologia (1997) 40: 506–511] Received: 26 August 1996 and in revised form: 28 January 1997     

舒洛地特对SUMO4介导的2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的：探讨舒洛地特对小泛素养修饰蛋白（SUMO）4介导的2型糖尿病大鼠肾脏功能的保护作用.方法：将20只GK大鼠按数字表法随机均分为糖尿病组（DM组）、舒洛地特治疗组（DM＋S组）,SPF级同龄雄性Wistar大鼠10只作为健康对照组,DM＋S组给予舒洛地特10mg· kg-1·d-1腹腔注射,连续8周,其余两组给予等体积生理盐水注射.分别于用药前1d和用药结束后次日测定24 h尿微量白蛋白量,光镜下观察肾脏组织的结构变化,免疫组化法检测三组大鼠肾脏组织中核转录因子-κB（NF-κB）、SUMO4、NF-κB抑制剂（IκB）的表达.结果：（1）用药前DM组与DM＋S组大鼠的血糖及24 h尿白蛋白排泄率显著高于健康对照组（P＜0.01）;用药后DM＋S组24 h尿白蛋白排泄率显著低于DM组[（146.90±10.92）％比（314.63±20.42）％,P＜0.01];（2）与健康对照组相比,光镜下GK大鼠的肾脏肾小球毛细血管球肥大,基底膜轻度增厚,肾小球系膜细胞增生、肥大,肾小管上皮细胞肥大.未见典型的结节性肾小球硬化,似为糖尿病肾损害的早期改变,DM＋S组肾脏组织病理改变较DM组明显减轻;（3）免疫组化示：DM＋S组和DM组SUMO4、NF-κB、IκB表达显著高于健康对照组;与DM组比较,DM＋S组SUMO4[（29.8±0.6）比（34.2±0.7）]、IκB[（25.5±0.7）比（37.3±0.6）]表达显著增加,NF-κB[（43.9±0.9）比（27.0±0.6）]表达显著减少,P均＜0.05.结论：（1）小泛素养修饰蛋白4、NF-κB抑制剂在糖尿病GK大鼠肾脏组织表达增多;（2）舒洛地特对糖尿病GK大鼠肾脏组织有一定的保护作用.     

亚甲基四氢叶酸还原酶基因677C/T多态性与上海地区2型糖尿病合并大血管并发症的关系

目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶（MTHFR）基因677C／T多态性与糖尿病大血管并发症（脑梗死和冠心病）之间的关系。方法 在416例中国人受试者中：大血管病变患者（AS组，即脑梗死亚组和冠心病亚组总和）216例，其中脑梗死亚组（CI）111例，该亚组中伴及不伴糖尿病患者分别为50例及61例；冠心病亚组（CHD）105例，该亚组中伴及不伴糖尿病患者分别为48例及57例。糖尿病无大血管病变者（DM）100例，正常对照（C）100例。研究方法采用PCR／酶解鉴定基因变异及群体关联分析。结果 大血管病变组中MTHFR基因的677C／T的TT基因型和T等位基因频率显著增高。Logistic回归分析表明MTHFR基因参与大血管病变（AS）的致病过程。大血管病变各组内糖尿病和非糖尿病两亚组间相互比较基因型频率差异没有显著性。大血管病变不同亚组按有无糖尿病及性别分层后可见高密度脂蛋白胆固醇及舒张压水平随基因型不同而差异有显著性。结论 在中国人中，不论有无糖尿病，MTHFR基因均参与大血管病变（脑梗死或冠心病）的致病过程。     

IL-6基因启动子区-634C/G多态性与糖尿病肾病的相关性

目的 探讨白细胞介素6（IL-6）基因启动子区-634C／G多态性与糖尿病肾病（DN）的关系。方法 在昆明地区汉族人中，应用PCR—RFLP方法和等位特异PCR（ASPCR）方法，对246例2型糖尿病（T2DM）患者（正常白蛋白尿组88例，微量白蛋白尿组93例，大量白蛋白尿组65例）和101例健康对照者（NC组）的IL-6基因启动子区-634C／G多态性进行检测。结果 （1）微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组、微量、大量白蛋白尿组的G／G基因型频率均高于正常白蛋白尿组（P=0．001），大量白蛋白尿组亦高于微量白蛋白尿组（P=0．045）。（2）大量白蛋白尿组和大量、微量白蛋白尿组的G等位基因频率均高于正常白蛋白尿组（P=0．031），大量白蛋白尿组亦高于微量白蛋白尿组（P=0．005）。（3）T2DM组中，GG基因型组UAER明显高于CG、CC基因型组（P〈0．01）。（4）Logistic回归分析表明：IL-6基因启动子区-634G／G基因型、病程是DN发生的危险因素。结论在昆明地区汉族人中，IL-6基因启动子区-634G／G基因型可能是DN发生的危险因素，此基因型携带者UAER明显增高；G等位基因可能是DN发展的危险因素之-。     

解偶联蛋白2基因多态性与糖尿病肾病的相关性研究

本研究应用PCR技术检测了201例有不同程度白蛋白尿的糖尿病患者的解偶联蛋白2基因(UCP2)的多态性。结果显示在不同程度白蛋白尿的糖尿病患者，UCP2基因第8外显子的3’-UTR 45bp的插入／缺失基因型分布及频率差异无显著性。