淫羊藿苷对S-亚硝基化谷胱甘肽诱导损伤的内皮细胞的保护作用

目的探讨淫羊藿苷对S-亚硝基化谷胱甘肽诱导损伤的内皮细胞的保护作用。方法内皮细胞(EA.hy926)预先给予不同浓度ICA(高浓度:10μmol/L,中浓度:1μmol/L,低浓度:0.1μmol/L),之后给予S-亚硝基化谷胱甘肽(1mmol/L)损伤,建立模型。采用:噻唑兰染色法检测细胞存活率,通过对乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、活性氧、细胞色素C、Caspase-3等相关指标的测定进行分析。结果淫羊藿苷可明显提高内皮细胞内超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制活性氧的产生,降低细胞色素C的释放以及Caspase-3的活性,从而减少细胞的凋亡,差异有统计学意义(P<0.01),对S-亚硝基化谷胱甘肽诱导损伤的内皮细胞起到保护作用。结论淫羊藿苷对S-亚硝基化谷胱甘肽诱导损伤的内皮细胞具有保护作用,其机制可能与淫羊藿苷可提高细胞内超氧化物歧化酶以及谷胱甘肽过氧化物酶的活性,抑制活性氧的产生和减少细胞色素C的释放有关。     

活化血小板释放产物对内皮细胞的损伤及丹酚酸B的保护效应

目的探讨活化血小板释放产物(PLTaRP)对内皮细胞的损伤作用及丹酚酸B的保护效应。方法分离健康人外周血血小板,以二磷酸腺苷激活后提取PLTaRP,并与EA.hy926人脐静脉内皮细胞株共培养,分为对照组、模型组、阳性对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,检测各组细胞活力及乳酸脱氢酶(LDH)释放水平。DAPI染色观察细胞核形态,比较各组细胞凋亡率。结果与对照组比较,模型组12 h内LDH含量持续升高,并呈时间依赖趋势(P<0.01),模型组、阳性对照组、低剂量组和中剂量组细胞存活率明显减低(P<0.05,P<0.01),高剂量组细胞存活率差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,低、中、高剂量组LDH含量明显降低(P<0.01)。结论 PLTaRP可刺激EA.hy926细胞株LDH释放增加,并呈时间依赖趋势,刺激12 h可使细胞活力明显下降。丹酚酸B可减少PLTaRP造成的LDH释放。高剂量丹酚酸B可明显抑制细胞凋亡。     

对乙酰氨基酚对过氧化氢诱导的人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用

目的 探讨对乙酰氨基酚对体外过氧化氢诱导人脐静脉内皮细胞损伤及凋亡的保护作用及机制.方法 用体外培养的人脐静脉内皮细胞株传代后进行实验,分为正常对照组、过氧化氢损伤组(0.1 mmol/L)、药物处理加对乙酰氨基酚低浓度(25 μmol/L)、中浓度(50 μmol/L)和高浓度(100 μmol/L)预处理1 h组.用噻唑蓝比色法检测内皮细胞活力,用试剂盒检测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性,用蛋白免疫印迹法检测Caspase-3的表达,用流式细胞仪分析细胞凋亡率.结果 与正常对照组比较,过氧化氢能明显造成内皮细胞损伤(P<0.05),表现为细胞活力降低,丙二醛含量增加,超氧化物歧化酶活性下降,Caspase-3表达增加,细胞凋亡率增加.对乙酰氨基酚可干扰过氧化氢对内皮细胞的损伤作用,使内皮细胞活力增加,丙二醛含量减少,超氧化物歧化酶活性升高,Caspase-3表达降低,细胞凋亡率减少(P<0.05).结论 对乙酰氨基酚可降低过氧化氢对人脐静脉内皮细胞的损伤作用,抑制过氧化氢引起的内皮细胞凋亡,其保护作用可能与抗氧化及抑制Caspase-3有关.     

乔松素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响

目的探讨蜂胶乔松素对脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法用消化灌注法收集人脐静脉内皮细胞进行体外原代培养,于培养液中给予10 mg/L脂多糖处理以建立细胞凋亡模型,乔松素处理组于模型条件培养液中分别加入不同浓度的乔松素(50、100和200 mg/L)干预,共同孵育24 h。光镜下观察细胞形态,MTT法测定细胞存活率以观察细胞增殖变化,缺口末端标记技术TUNEL法检测细胞凋亡率,免疫细胞化学法检测信号转导系统核因子κB亚基p65核易位变化。结果模型组内皮细胞凋亡率明显高于阴性对照组,不同浓度乔松素组细胞凋亡率均低于模型组,同时细胞存活率增高(P0.01)。加入不同浓度乔松素能显著降低脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞核因子κB p65核易位活性(P0.01)。结论乔松素可通过抑制脂多糖诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡而保护内皮细胞功能,其机制可能与抑制核因子κB p65活化有关。     

褪黑素对过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及其机制

目的:研究不同浓度褪黑素（melatonin,MLT）对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)活力的影响,以及对过氧化氢(H2O2)诱导血管内皮细胞损伤的拮抗作用及机制。方法: 分别用不同浓度（125、250、500 μmol/L）的MLT处理体外培养的HUVECs 2 h、4 h和6 h后,用噻唑蓝（MTT）比色法检测不同浓度的MLT对HUVECs存活率的影响。以300 μmol/L的H2O2建立HUVECs损伤模型,用125、250、500 μmol/L的MLT与H2O2（300 μmol/L）共同处理HUVECs 2 h、4 h和6 h后,分别用噻唑蓝（MTT）比色法测细胞的存活率、细胞黏附实验评价细胞黏附能力、酶活性测定法检测细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的释放量和细胞超氧化物歧化酶(SOD)的活力。用Griess法测定细胞培养液中NO-2的浓度来反映HUVECs的一氧化氮(NO)释放量。结果: 以不同浓度的MLT处理内皮细胞 2 h、4 h和6 h后,内皮细胞的存活率无统计学差异。MLT能明显提高H2O2损伤的内皮细胞的存活率、黏附能力及细胞内SOD的活力（P<0.01）,增加培养液中NO含量（P<0.01）,降低内皮细胞LDH的释放（P<0.01）。以500 μmol/L的MLT效果最明显。结论: 不同浓度的MLT对HUVECs的存活率均无影响,提示MLT药物浓度的安全范围较大。MLT对H2O2诱导HUVECs损伤的拮抗作用可能与其抗氧化能力和促进内皮细胞合成NO有关。     

cAMP反应元件结合蛋白在高糖所致内皮细胞损伤中的作用

目的探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在高糖致内皮细胞损伤中的作用。方法建立高糖诱导的血管内皮细胞损伤模型,将内皮细胞ECV304分为对照组、高糖组、转染PCI组、转染PCI+高糖组、转染PCI-CREB组和转染PCI-CREB+高糖组,采用MTT法检测细胞存活率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,黄嘌呤氧化酶法检测细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果转染PCI-CREB组和转染PCI组内皮细胞存活率、SOD活性、MDA含量和细胞凋亡率与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,高糖组内皮细胞存活率和SOD活性明显下降,而MDA含量和细胞凋亡率明显增加(P<0.05);转染PCI+高糖组内皮细胞存活率、SOD活性、MDA含量和细胞凋亡率与高糖组相比差异无统计学意义(P>0.05);与高糖组相比,转染PCI-CREB+高糖组细胞存活率和SOD活性明显高于高糖组(P<0.05),而MDA含量和细胞凋亡率明显低于高糖组(P<0.05)。结论过表达CREB对高糖诱导的内皮细胞损伤具有保护作用。     

同型半胱氨酸对NIT-1细胞凋亡及细胞内SOD活性的影响

目的探讨同型半胱氨酸（Hcy）对克隆的胰岛β细胞NIT-1细胞株的存活率和凋亡的影响，以及对细胞内超氧化物歧化酶（SOD）的影响。方法将不同浓度的Hcy作用于NIT-1细胞后，用MTT的方法检测细胞生存率；用流式细胞仪Annexin V/PI双染色法和琼脂糖凝胶电泳检测不同浓度的Hcy作用不同时间对NIT-1细胞凋亡的影响；用黄嘌呤氧化酶法和WST结合的方法检测Hcy作用后的NIT-1细胞内SOD的活性。结果Hcy以时间、剂量依赖性的方式抑制NIT-1细胞的存活率（P〈0.01）。Hcy可诱导NIT-1细胞的凋亡，随作用时间的延长和Hcy浓度增加NIT-1细胞的凋亡率逐渐增加，浓度为100μmol／L的Hcy作用24h细胞凋亡明显增加，凋亡率为7、21％（P〈0．01），250μmol／L的Hcy作用12h后细胞凋亡率达8．91％（P〈0．01）。100μmol／L的Hcy作用24h后NIT-1细胞内SOD活性较正常组细胞下降20．2％（P〈0．01）。结论Hcy可抑制NIT-1细胞的存活率，并以时间和剂量依赖性的方式诱导细胞凋亡；这些有害作用可能是通过抑制细胞内的SOD的活性而发挥作用，为研究保护胰岛细胞功能提供一种新的思路。     

槲皮素对血管内皮细胞损伤的保护作用

目的 :研究槲皮素对血管内皮细胞损伤的保护作用及机制。　　方法 :实验分对照组、模型组和槲皮素组 ,用过氧化氢诱导血管内皮细胞损伤 ,四甲基偶氮唑蓝比色法检测细胞存活数量 ,放射免疫法测定细胞培养液中的内皮素及前列环素含量 ,用荧光法检测细胞内脂质过氧化产物丙二醛以评价脂质过氧化程度。　　结果 :槲皮素 5、2 0、40、80和 10 0 μmol/ L 促进培养的正常血管内皮细胞增殖 ,增加前列环素生成 ,减少内皮素基础释放量 ;75 μmol/ L过氧化氢可损伤培养的血管内皮细胞 ;槲皮素 5、2 0和 80 μmol/ L 可抑制过氧化氢损伤的血管内皮细胞释放乳酸脱氢酶、内皮素及促进损伤的内皮细胞释放前列环素。　　结论 :槲皮素具有保护血管内皮细胞损伤的作用 ,其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物EET抑制脂多糖诱导的内皮细胞凋亡

目的研究花生四烯酸经细胞色素P450表氧化酶代谢产物一表氧化二十碳三烯酸 (epoxyeicosatrienoic acids,EETs)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的牛主动脉内皮细胞(bovine aortic endothelial cells,BAECs)凋亡的影响。方法原代分离培养BAECs。分别在细胞培养基中加入 8,9-,11,12-,和14,15-EET1 h后,用LPS(100 ng／ml)诱导内皮细胞凋亡。用MTT法检测LPS对 BAECs的毒性作用,再通过细胞形态学(吖啶橙／溴化乙锭染色)和流式细胞仪计数检测其凋亡变化。结果LPS对BAECs的毒性作用呈剂量依赖性和时间依赖性。LPS可明显诱导BAECs凋亡,但8, 9-,11,12-,和14,15-EET干预的BAECs凋亡细胞数分别为(37．03±3．014)％、(33．45±7．918)％和 (35．75±7．858)％明显少于溶媒对照组(47．33±3．154)％。结论这些结果证明了花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶代谢产物EETs能明显的抑制LPS诱导的BAECs凋亡。这表明细胞色素P450 表氧化酶可能有保护心血管系统,防止其受到炎症损伤和粥样硬化的作用。     

促红细胞生成素对Aβ25～35诱导神经细胞损伤保护作用的体外实验

目的 探讨促红细胞生成素(EPO)对β淀粉样肽(Aβ)诱导神经细胞毒性的保护作用.方法 取对数生长期的PC12细胞分为3组:空白对照组、模型组、EPO预处理组.细胞培养24 h后,EPO预处理组加入终浓度为25 U/ml的EPO预处理8 h,再与模型组同时加入终浓度为10 μmol/L Aβ25～35,继续培养48 h收集细胞检测指标.采用MTT比色法分析细胞存活率,碘化丙啶(PI)流式细胞仪检测凋亡,免疫组化检测细胞色素C(CytC)和Bcl-2表达.结果 MTT显示EPO处理组细胞存活率明显高于模型组(P<0.05),并且中剂量存活率最高;凋亡率较模型组明显下降(P<0.05);免疫组化显示:EPO处理组Bcl-2阳性表达细胞较Aβ25～35处理组明显增加(P<0.05),而EPO处理组CytC阳性染色细胞较模型组明显减少(P<0.05).结论 EPO可以提高细胞存活率,降低凋亡率,对Aβ诱导神经细胞毒性起保护作用,其机制主要通过上调Bcl-2的表达,从而抑制CytC释放,阻止细胞凋亡,促进PC12细胞存活.     

不同砷化合物对人皮肤成纤维细胞系的毒性研究

目的探讨不同砷化合物对人皮肤成纤维细胞系（CCC-ESF-1）的细胞毒性与氧化应激的关系。方法培养的CCC-ESF-1分别暴露于0.0～400.0μmol/L三氧化二砷（As2O3,iAsⅢ）、砷酸氢二纳（Na2HAsO4.7H2Oi,AsⅤ）和二甲基砷酸钠（C2H6AsO2Na.3H2O,DMAV）48 h,应用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测定细胞生存率;检测砷化物对丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。结果不同剂量范围内的iAsⅢ（≥12.5μmol/L）i、AsⅤ（≥12.5μmol/L）和DMAV（≥50.0μmol/L）均能显著降低CCC-ESF-1的细胞生存率（P〈0.05,P〈0.01）,且在一定剂量范围内具有剂量-效应关系;iAsⅢi、AsⅤ和DMAV暴露48 h的CCC-ESF-1细胞的50%生存率（IC50）分别为16.52μmol/L、55.47μmol/L和〉500.0μmol/L;12.5、50.0μmol/L As2O3（iAsⅢ）,200.0μmol/L Na2HAsO4.7H2O（iAsⅤ）显著升高MDA含量（P≤0.05）;与对照组相比,≥12.5μmol/L As2O3,200.0μmol/L Na2HAsO4.7H2O和≥12.5μmol/LC2H6AsO2Na.3H2O显著降低SOD活力（P〈0.01,P≤0.05）,1.05、0.0μmol/L Na2HAsO4.7H2O显著升高SOD活力（P≤0.05）,其剂量-反应关系呈倒U形曲线。结论不同砷化物对CCC-ESF-1细胞有不同程度细胞毒性,其中As2O3（iAsⅢ）毒性较强,毒性机制之一可能与氧化应激损伤有关。     

20（R）-人参皂苷Rg_3对肿瘤坏死因子-α诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

目的探讨20（R）-人参皂苷Rg3对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）损伤的保护作用及其机制。方法用肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）诱导HUVEC损伤,采用噻唑蓝（MTT）法观察20（R）-人参皂苷Rg3对HUVEC活性的影响;Fura-2/AM荧光探针负载细胞,用双波长荧光分光光度法测定HUVEC细胞内游离钙离子浓度;用酶联免疫吸附测定（ELISA）法测定培养的细胞上清液中组织型纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator,t-PA）、1型纤溶酶原激活物抑制物（type-1plasminogen activator inhibitor,PAI-1）浓度的变化。结果 （1）TNF-α损伤HUVEC的条件为：TNF-α的质量浓度为20μg/L,损伤时间为24h。（2）20μg/L TNF-α可显著降低HUVEC的吸光度A值,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;而10～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3处理后再加入TNF-α的各组细胞吸光度A值与模型组比较,均明显升高,差异有统计学意义（P〈0.01）。（3）HUVEC受到TNF-α的刺激后细胞内游离钙浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）;用10～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3预处理,则TNF-α诱导的内皮细胞细胞内游离钙浓度升高的幅度均显著降低,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,其半数抑制浓度为67.2μmol/L。（4）TNF-α20μg/L刺激内皮细胞24h后,与对照组比较,培养上清t-PA浓度显著降低,PAI-1浓度明显升高,差异均有统计学意义（P〈0.01）;20～80μmol/L的20（R）-人参皂苷Rg3预处理后,细胞培养上清中t-PA浓度明显升高,同时可降低PAI-1的分泌,与模型组比较,差异有统计学意义（P〈0.01）,其抑制PAI-1浓度的半数抑制浓度为36.9μmol/L。结论 20（R）-人参皂苷Rg3对TNF-α诱导的HUVEC损伤具有保护作用,其机理可能与降低细胞内钙离子浓度、抑制PAI-1产生和提高t-PA水平密切相关。     

沙棘总黄酮对人脐静脉血管内皮损伤细胞增殖及细胞周期的影响

目的探讨沙棘总黄酮对损伤人脐静脉血管内皮细胞株（CRL-1730）的保护作用。方法采用H2O2诱导CRL-1730细胞损伤模型,并将细胞随机分为四组,正常组不予任何干预;模型组加入250μmol/L H2O2;沙棘组加入沙棘总黄酮终浓度分别为50、100、200μg/m l,继续培养24 h后加入H2O2（剂量同上）;丹参组加入丹参注射液终浓度2.5 mg/m l,继续培养24 h后加入H2O2（剂量同上）。细胞干预4 h后用MTT比色法检测各组细胞活性,并用流式细胞仪测定各组细胞周期。结果与正常组比较,模型组细胞增殖活性下降,S期细胞比率降低,G2/M期细胞比率增加。与模型组比较,沙棘组及丹参组细胞增殖活性升高,G0/G1期细胞比率降低,S期及G2/M期细胞比率均增加。结论沙棘总黄酮对受损血管内皮细胞有保护作用,可提高细胞增殖活性,增加S期细胞比率。     

辛伐他汀对高糖诱导乳鼠心肌细胞过氧化损伤的保护作用

目的探讨辛伐他汀对高糖所致乳鼠心肌细胞氧化应激损伤的保护作用。方法分离SD乳鼠心肌细胞原代培养72h后,随机分为5组并加入相应的处理药物,即对照组（control组）;高浓度葡萄糖刺激组（GS组）;不同浓度的辛伐他汀干预组,分别为GS＋10^-7MSim组、GS＋10^-6MSim组和GS＋10^-5MSim组。测定各组心肌细胞活力及心肌细胞培养基中丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力及细胞内总谷胱甘肽（GSH）含量。结果辛伐他汀呈剂量依赖性地提高高糖损伤乳鼠心肌细胞的细胞活力（P〈O．01）;培养基中MDA的生成减少（P〈0．05）,而SOD活力及GSH含量明显增高（P〈0．05）。结论辛伐他汀可能通过稳定细胞膜、抗脂质过氧化反应及提高清除氧自由基,对高糖所致的心肌细胞过氧化损伤发挥剂量依赖性的保护作用。     

他莫昔芬体外促进HepG2细胞脂肪变性观察

目的：研究他莫昔芬（TAM）对体外培养的HepG2细胞脂肪变性以及脂类代谢调控关键因子表达的影响。方法应用油酸（50μmol/L）处理HepG2细胞,诱导细胞脂肪变性体外模型,同时给予不同浓度的TAM （5～20μmol/L）干预72 h;采用油红O染色和甘油三酯含量测定检测HepG2细胞内脂质聚集情况;应用蛋白印迹法检测固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）、脂肪酸合成酶（FAS）、硬脂酰辅酶A去饱和酶（SCD）、肉酯软脂酰基转移酶（CPT1）和微粒体甘油三酯转移蛋白（MTP）的表达;采用细胞活性检测试剂盒测定细胞活性。结果在干预72 h后,模型组细胞内甘油三酯含量为（16.53＆#177;0.17） mg/100 mg蛋白质,在5μmol/L TAM处理细胞内甘油三酯含量为（17.77＆#177;0.05） mg/100mg蛋白质,与模型组无显著性差异,但在10μmol/L和20μmol/L TAM处理组较模型组分别增加了31%[（21.57＆#177;0.16） mg/100 mg蛋白质]和44%[（23.82＆#177;0.44） mg/100 mg蛋白质],（P＆lt;0.05）;TAM上调细胞内SREBP-1c、FAS、SCD和MTP蛋白表达,但并不改变CPT1蛋白表达;TAM在5～20μmol/L范围内不影响HepG2细胞活性。结论 TAM可促进油酸诱导的HepG2细胞脂肪变性,其主要机制可能是通过上调SREBP-1c及其下游基因,如FAS和SCD的表达而增加了脂肪酸的合成。     

曲古霉素A和5-氮杂胞苷对高糖诱导损伤的胰岛β细胞的保护作用

目的 探讨高糖诱导下曲古霉素A（TSA）和5-氮杂胞苷（5-AzaC）对胰岛β细胞增殖、凋亡及功能的影响. 方法 体外培养大鼠胰岛素瘤（RIN-m5f）细胞至指数增长期,根据干预方案分为空白对照（NC）组、高糖诱导（HG）组、0.05、0.10 μmol/L TSA干预组、0.63、1.25 μmol/L 5-AzaC干预组、0.10 μmol/L TSA＋1.25 μmol/L 5-AzaC联合干预组.检测RIN-m5f细胞增殖活性、细胞凋亡率、葡萄糖刺激胰岛素分泌能力. 结果 0.05、0.10 μmol/L TSA干预组、0.63、1.25 μmol/L 5-AzaC干预组及联合干预组的细胞增殖活性均高于HG组,而细胞凋亡率均低于HG组（P＜0.05）.在3.3 mmol/L及25 mmol/L葡萄糖刺激时,各组葡萄糖刺激胰岛素分泌量均高于HG组（P＜0.05）. 结论 TSA和5-AzaC可抑制高糖诱导的胰岛β细胞凋亡和恢复β细胞的胰岛素分泌功能.     

Protective effects of trimetazidine against vascular endothelial cell injury induced by oxidation

Objective To explore the protective effects of trimetazidine on vascular endothelial cells injury induced by hydrogen peroxide (H2O2) and its pharmacological mechanisms of anti-oxidation. Methods Human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) were injured by H2O2. Next, the cells were treated with three different concentrations of trimetazidine (1μmol/L,10μmol/L,100μmol/L, respectively). The viability of cells was detected by methyl thiazoeyl tetrazolium (MTT) assay. In addition, malondialdehyde (MDA) contents, superoxide dismutase (SOD) and secretion of NO were measured. Results Trimetazidine could enhance the viability of the injured HUVECs induced by oxidation, decrease the level of MDA, enhance the SOD activity, and increase the secretion of nitrogen monoxide. These effects were in a certain dose-dependent manner and the difference was significant among the three concentrations (P<0.05). Conclusions Our results suggest that trimetazidine may protect lipid peroxidation and prevent oxidation-induced cellular dysfunction of HUVECs.     

丙泊酚对过氧化氢诱导的H9c2细胞损伤的保护作用

目的观察丙泊酚对过氧化氢诱导的H9c2细胞损伤的保护作用。方法本实验通过使用过氧化氢（H2O2）在体外诱导H9c2细胞氧化应激反应,给予不同浓度的丙泊酚（5,10,20,50μM）作用后,分别测定细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）释放,细胞内活性氧（ROS）释放,超氧化物歧化酶（SOD）活性,过氧化氢酶（CAT）活性及蛋白表达量。结果处理丙泊酚（10,20μM）能够抑制由H2O2诱导的细胞死亡,提高细胞存活率（P〈0.01）;抑制LDH释放（P〈0.01）和细胞内ROS释放（P〈0.01）;提高SOD活性,提高CAT活性和蛋白表达量（P〈0.01）。结论丙泊酚可能是通过提高内源性抗氧化酶的活性及蛋白表达量,抑制氧化应激反应,从而产生心脏保护作用。     

内吗啡肽对糖基化终末产物致人脐静脉内皮细胞表达一氧化氮、一氧化氮合酶、内皮素1的影响

目的探讨内吗啡肽（EMs）对糖基化终末产物（AGEs）培养条件下人脐静脉内皮细胞（HUVEC）合成分泌一氧化氮（NO）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、内皮素1（ET-1）的影响。方法体外制备AGEs修饰的牛血清白蛋白（AGEs—BSA）;分别用AGEs—BSA、EMs（1×10-5、1×10-6、1×10-7、1×10-8mol／LEM1或EM2）＋AGEs—BSA及EMs（1×10-5mol／LEMl或EM2）＋纳洛酮＋AGEs．BSA共同干预HUVEC,同时以只加BSA的HUVEC作为阴性对照。噻唑蓝（MTT）法检测各组HUVEC存活率;放射免疫法检测各组NO、eNOS水平;酶联免疫吸附实验（ELISA）法测定各组ET-1表达量;实时荧光定量聚合酶链反应（RT—PCR）法检测各组eNOS、ET-1mRNA的表达。采用单因素方差分析及t检验进行数据统计。结果与AGEs—BSA组相比,1×10-5mol／LEM1干预组HUVEC存活率增加,NO分泌量减少[分别为0．89±0．05VS0．67±0．02和（14．8±1．4）VS（23．0±0．7）μmol／L,t值分别为9．86、13．18,均P〈0．05],ET-1产生及其mRNA表达降低[分别为（0．85±0．01）VS（0．99±0．01）μg/L和10．6±0．7VS25．6±1．6,t值分别为31．36、50．18,均P〈0．05],eNOS活性及其mRNA表达增加[分别为（2．53±0．20）VS（0．61±0．09）U／ml和0．35±0．00VS0．05±0．00,t值分别为21．50、16．80,均P〈0．05],EM1其他浓度组和EM2各浓度组上述各指标与AGEs—BSA组比较结果相似,差异亦均有统计学意义（t值为2．24～102．4,均P〈0．05）;纳洛酮组上述指标与AGEs—BSA组差异无统计学意义（t值为0．56—2．05,均P〉0．05）,而与各浓度EM1或EM2干预组差异有统计学意义（t值为2．24～64．96,均P〈0．05）。结论EMs可提高AGEs—BSA条件下HUVEC的存活率,降低NO、ET-1浓度,提高eNOS浓度;纳洛酮可阻断EMs的上述作用,提示EMs是通过μ阿片受体发挥作用的。     

柚皮苷通过调控p38MAPK通路保护H9c2心肌细胞对抗多柔比星引起的炎症反应

目的 探讨柚皮苷（naringin,NRG）能否通过调控p38丝裂原激活蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路保护H9c2心肌细胞对抗多柔比星（doxorubicin,DOX）引起的炎症反应.方法 应用5μmol·L-1 DOX处理H9c2心肌细胞建立DOX心肌毒性损伤模型.CCK-8比色法检测细胞存活率;Westem blot法测定p38MAPK蛋白表达水平;酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒检测肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-1β（IL-1β）和白细胞介素-6（IL-6）浓度.结果 在5μmol·L-1 DOX处理H9c2心肌细胞前,应用1μmol·L-1 NRG预处理150 min能明显抑制DOX引起的心肌细胞毒性,使细胞存活率升高,并能抑制5μmol·L-1 DOX对磷酸化（p）p38MAPK表达的上调作用;5μmol· L-1 DOX能引起H9c2心肌细胞产生炎症反应,表现为肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6水平明显升高;1μmol· L-1 NRG预处理150 min或3μmol·L-1 SB203580（为p38MAPK抑制剂）预处理60 min均能抑制DOX对肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6水平的升高作用及抑制DOX诱发的心肌细胞毒性.结论 NRG通过抑制p38MAPK通路保护H9c2心肌细胞对抗DOX引起的炎症反应及细胞毒性.