急、慢性病毒性心肌炎小鼠辅助T淋巴细胞亚群动态观察及药物干预的影响

目的 :观察 BAL B/ c小鼠在感染柯萨奇病毒后辅助 T淋巴 (Th)细胞—— Th1 、Th2 细胞的动态变化以及抗柯注射液 (RSF)的干预治疗对其影响。方法 :将 15 6只 BAL B/ c小鼠分别制备成急性心肌炎、慢性心肌炎模型 ,各模型随机分为正常组、病毒对照组和 RSF治疗组 ,用 EL ISA法检测各组小鼠 Th1 、Th2 类细胞因子。结果 :在急性心肌炎模型中 ,病毒对照组在感染后第 3天 Th1 达到高峰 ,后逐渐下降 ,到第 12天仍高于正常 ,而 Th2 基本于正常范围 ;RSF治疗组除第 3天外 ,Th1 均下降 ,Th2 则表现为有明显的触发效应。慢性心肌炎模型中 ,各组Th1 与 Th2 类细胞因子均增高。结论 :在急、慢性心肌炎中 ,Th1 类细胞在病程中起着主导地位 ,Th2 类细胞则有利于疾病的改善。 RSFA对 cox B3m心肌炎有显著的治疗作用 ,其作用机制可能是通过对 Th亚群的调节来实现——即抑制 Th1 细胞 ,增高 Th2 细胞的表达来进行免疫调节。     

苦瓜蛋白对柯萨奇B3病毒性心肌炎小鼠半胱天冬酶3活性及凋亡的抑制作用

为研究苦瓜蛋白对凋亡的关键酶半胱天冬酶 3及凋亡的调节作用 ,用已经建立起来的方法从苦瓜果肉中提取苦瓜蛋白。将BALB/C小鼠分为 4组 :病毒对照组、正常对照组、药物对照组和药物治疗组 ,分别在第 0天、第 3天、第 7天和第 14天各处死 5只小鼠 ,第 2 1天全部处死动物 ,心肌组织半胱天冬酶 3活性测定按照CAL BIOCHEM公司的试剂说明书进行 ,并稍加改正 ,凋亡鉴定按照Oncogene公司的TdT DNA裂解片断末端原位标记试剂说明书进行。结果发现 ,①病毒对照组第 7天开始出现半胱天冬酶 3活性 (0 .6 3± 0 .2 1pmol/min ,n =5 ) ,第 14天的活性 (10 .9± 1.5pmol/min ,n =5 )显著高于第 7天 ,第 2 1天的活性 (12 .6± 1.3pmol/min ,n =5 )又高于第 14天。②药物治疗组 ,只有一个第 2 1天的标本有半胱天冬酶 3活性 (0 .4 1pmol/min) ,其它两组均未检测到此酶的活性。③DNA裂解片断末端原位标记法发现 ,病毒对照组在第 7天心肌中有少数细胞凋亡 ,第 14天、第 2 1天凋亡细胞明显增多 ,在非病变区域可发现单个凋亡的心肌细胞。治疗组未发现凋亡细胞 ,其它两组也未发现凋亡细胞。结果提示 ,CVB3病毒性心肌炎中发现有明显的凋亡现象 ,凋亡和半胱天冬酶 3发现于第 7天 ,且随着时间增加而逐渐加重(增强 ) ;苦瓜蛋白可显     

柯萨奇病毒B3感染培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道mRNA表达的变化

目的:观察柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道mRNA表达的影响。方法:用柯萨奇病毒B3感染原代培养新生大鼠心室肌细胞,合成大鼠心室肌细胞L-型钙通道各亚单位引物,通过逆转录-聚合酶链反应技术,以β-actin为内参照,测量钙通道各亚单位mRNA表达量在病毒感染前后的变化。结果:病毒感染组心室肌细胞L-型钙通道α_1(4.00±0.07 vs 2.21±0.41,p<0.01),β(2.06±0.06 vs 1.22±0.30,p<0.05)亚单位mRNA表达量较正常对照组显著增加,而α2/δ(4.12±0.19 vs 4.13±0.27,P>0.05)亚单位mRNA表达量变化无统计学意义。结论:柯萨奇病毒B3感染心室肌细胞钙通道mRNA表达量增加,可能是病毒介导心室肌细胞L-型钙电流变化的分子基础。     

重组人硫氧还蛋白对小鼠病毒性心肌炎的保护作用

目的 观察重组人硫氧还蛋白(TRX)对病毒性心肌炎小鼠心肌损伤的保护作用.方法 给予Balb/c小鼠腹腔注射0.1 ml 100TCID50(50%细胞感染率)的柯萨奇B3m病毒(CVB3m),建立病毒性心肌炎模型,同时给予尾静脉注射2 mg/kg的重组人TRX加以保护,对照组给予等量的生理盐水,7 d后处死动物,检测血清乳酸脱氢酶(LDH) 活性,采用光镜观察心肌组织损伤情况.结果 病毒感染组小鼠血清LDH活性[(313030±390.57)U/L)]明显高于对照组[(1617.86±155.42)U/L]和TRX保护组[(1959.43±540.75)U/L],两两比较差异有统计学意义(P<0.05);TBX保护组与对照组比较,差异无统计学意义(P0.05).光镜结果显示,病毒感染组8只小鼠有5只检出心肌病变,小鼠心脏病理切片可见局灶性心肌坏死和炎细胞浸润;而TRX保护组小鼠未出现心肌损伤.结论 重组人TBX可以减轻CVB3m病毒感染导致的心肌损伤,起到心肌保护作用.     

肾上腺皮质激素对柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌的保护作用

目的 探讨肾上腺皮质激素对柯萨奇岛病毒感染小鼠心肌损害的治疗作用。方法将200只4周龄Balb／c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组和病毒感染后早期激素治疗组、中期激素治疗组及晚期激素治疗组，每组加只。在病毒感染后不同时期计算心肌病理积分，空斑形成单位法测定心肌细胞病毒滴度，化学发光法检测血清肌钙蛋白I水平。结果病毒感染后7-10天，柯萨奇B3病毒感染各组小鼠心肌病理积分均显著高于正常对照组，而各感染组之间无显著性差异。病毒感染后14天，中期激素治疗组小鼠心肌病理积分显著低于其他病毒感染组，30天后中期激素治疗组小鼠心肌已完全正常，而其他各组小鼠心肌仍有病变。病毒感染后早期激素治疗组心肌病毒滴度显著高于其他各组，且消失慢。病毒性心肌炎小鼠血清肌钙蛋白I水平显著升高，并与病理变化呈直线正相关。结论肾上腺皮质激素可以明显减轻病毒性心肌炎时心肌的病理损害，对心肌细胞有保护作用，尤以病毒感染中期使用激素治疗疗效最好。     

柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌硫氧还蛋白的表达

目的研究硫氧还蛋白(thioredoxin,Trx)在柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌炎模型中表达的变化,探讨Trx在病毒性心肌损伤中的作用。方法建立柯萨奇B3病毒感染鼠心肌炎模型,采用光镜检测心肌形态改变,应用RT鄄PCR技术比较接种病毒后不同时间点(7,14,21d)TrxmRNA表达变化。结果7d时心肌病损严重;14d时部分心肌病损开始修复;21d时心肌修复较完全。接种病毒后21d时,硫氧还蛋白mRNA表达与对照组比较明显上调(P<0.01),7d和14d时同对照组相比表达无显著性差异(P>0.05)。结论在急性柯萨奇B3病毒性心肌炎中,Trx可能被急性炎症刺激素特异地诱导,在疾病的后期TrxmRNA表达上调,促进心肌修复,提示适当剂量的Trx可能对急性柯萨奇B3病毒性心肌炎有潜在治疗作用。     

辛伐他汀对柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌早期的保护作用（英文）

目的探讨辛伐他汀对急性柯萨奇B3病毒感染小鼠心肌早期的作用。方法将柯萨奇B3病毒感染小鼠随机分为两组:对照组（n=15）及辛伐他汀治疗组（n=15）,分别给予生理盐水及辛伐他汀14 d。第6天时,各组分别随机处死6只。结果辛伐他汀治疗组其心脏质量（69±13mg）较对照组（96±16mg）减轻（P<0.01）;心肌炎症及坏死程度减轻,心肌病理积分（8.0%±7.3%vs22.9%±10.6%）显著降低（P<0.01）;14 d生存率明显升高（P<0.05）。结论辛伐他汀治疗可减轻心肌病理损害,对早期感染柯萨奇B3病毒小鼠心肌有保护作用。     

柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体和连接蛋白43的表达

目的观察柯萨奇B病毒性心肌炎小鼠急性期心肌组织微小RNA1初始体(pri-miRNA-1)和连接蛋白43(Cx43)表达变化,探讨病毒性心肌炎(VMC)室性心律失常发生机制。方法40只4周龄雄性Balb/c小鼠随机分为VMC组(n=20)和对照组(n=20)。VMC组小鼠腹腔注射柯萨奇病毒B3(CVB3)Nancy株悬液0.1ml,对照组小鼠腹腔注射不含病毒的RPMI1640培养基0.1ml,分别于接种病毒后第14天无痛苦处死全部小鼠并留取心脏。逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测心室肌组织pri-miRNA-1的表达,免疫组织化学法检测Cx43蛋白水平表达,并进行半定量分析。结果①VMC组小鼠心室肌组织pri-miRNA-1表达量明显高于对照组(0.82±0.04vs0.63±0.07,P(0.01);②VMC组小鼠心室肌组织炎症病灶中变性、坏死周围心肌细胞Cx43表达明显减弱,甚至阴性,分布不规则,Cx43蛋白表达明显低于对照组(0.27±0.01vs0.42±0.02,P(0.01);③VMC组小鼠心室肌组织的pri-miRNA-1表达量与Cx43蛋白水平呈显著负相关(r=-0.868,P(0.01)。结论CVB心肌炎小鼠急性期心肌组织pri-miRNA-1表达上调,Cx43蛋白表达下降,miRNA-1可能通过抑制Cx43表达促进室性心律失常的发生。     

柯萨奇B2病毒VP1基因疫苗诱导细胞免疫的初步研究

目的　构建柯萨奇B2 病毒 (CVB2 )VP1侯选基因疫苗 ,评价其诱导细胞免疫的效果。方法　采用逆转录PCR技术扩增CVB2 的主要中和抗原VP1基因 ,通过分子克隆构建 pcDNA3 CVB2 VP1基因免疫质粒并免疫BALB/c小鼠 ,51Cr释放法测定CTL杀伤效应。结果　基因免疫质粒表达载体为 pcDNA3 ,亚克隆片段为CVB2 VP1,pcDNA3 CVB2 VP1接种组CTL特异性杀伤百分率均高于 pcDNA3 组 (P <0 0 1) ,E/T为 5 0∶1时特异性CTL杀伤百分率最高 ,为 (31 2± 6 8) % (P <0 0 5 )。结论　pcDNA3 -CVB2 VP1可诱导小鼠产生细胞免疫。     

柯萨奇B2病毒VP1基因疫苗诱导细胞免疫的初步研究

目的构建柯萨奇B2病毒(CVB2)VP1侯选基因疫苗,评价其诱导细胞免疫的效果.方法采用逆转录PCR技术扩增CVB2的主要中和抗原 VP1基因,通过分子克隆构建pcDNA3-CVB2VP1基因免疫质粒并免疫BALB/c小鼠, 51Cr释放法测定CTL杀伤效应.结果基因免疫质粒表达载体为pcDNA3,亚克隆片段为CVB2VP1,pcDNA3-CVB2VP1接种组CTL特异性杀伤百分率均高于pcDNA3组(P＜0.01),E/T为50∶1时特异性CTL杀伤百分率最高,为(31.2±6.8)%(P＜0.05).结论 pcDNA3-CVB2VP1可诱导小鼠产生细胞免疫.     

高血压降压治疗目标的再认识

根据传统的高血压水平的定义,1993年WHO高血压治疗指南提出血压控制目标为<140/90mm Hg(1mm Hg=0.133kPa),但是并非所有患者都必须将血压降至同一水平,而应根据患者情况进行个体化治疗。Framingham进行的一项长达10～12年的心血管事件研究发现,第5年后,正常上限血压[收缩压(SBP     

Complex of genotypes of cytokines as a genetic factor of risk of development of myocardial infarction of in Europien population of Russia men

Cytokines as regulators of activity of inflammation play significant role in mechanisms of formation of atherosclerotic plaques and in processes of their destabilization. One of leading genetic factors determining level of their production appears to be polymorphism of cytokine genes structure at their promoter loci. We have conducted an analysis of distribution in groups of healthy male and female survivors of myocardial infarction (MI) of combined genetic signs represented as a complex of genotypes of a number of studied cytokine genes : TNF-A863C; TNF-A308G; TNF-A238G; IL1B-C511T; IL1B-C-31T; IL4-C590T; IL6-C174G; IL10A-1082G IL10-A592C. Among these homozygous combinations of cytokine genotypes characterizing a group of men who have lived up to middle and old age without development of MI there are widely represented genotypes associated with high levels of production of both cytokines with pronounced proinflammatory (IL-1) and antiinflammatory (IL-4, IL-10) activity. Absence of such multidirectional combinations in genome of patients with myocardial infarction can be considered one of genetic factors of risk of development of acute distirbances of coronary circulation.     

State of knowledge of helminth fauna of freshwater fishes of Poland

A total 89 fish and lamprey species has been recorded from Polish freshwater habitats. Twenty-seven of them (30.3%) have not been surveyed for parasitic helminthes. Some of the latter fishes are either rare or not easily accessible. Other live only in specific habitats in scattered localities. An important obstacle for studying parasite faunas of some fishes may be their status on an endangered species. Among the non-surveyed fishes, are those which have been relatively recently introduced to Poland or migrated there on their own. The present paper attempts to review all hitherto not studied helminthologically fish species, their habitats, localities and current protection status.