慢性刺激对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠的影响

目的观察慢性刺激(CMS)对大鼠糖尿病(DM)发病及进程的影响及其在DM发生、发展中的作用。方法应用链脲佐菌素(STZ)加高脂高糖饮食诱导DM大鼠的过程中,增加CMS因素,观察CMS对大鼠生化指标和行为学的影响。结果与正常组相比,DM组和DM+CMS组大鼠血糖及血清胰岛素水平均升高(P0.05),出现了明显的胰岛素抵抗现象;与正常组大鼠相比,CMS组、DM组及DM+CMS组大鼠的上窜时间均缩短,不动时间延长(均P0.05);DM+CMS组大鼠进入开放臂的次数和停留时间亦明显缩短(P0.05);与正常组相比,各实验组大鼠血清皮质醇水平均明显升高(P0.05)。结论慢性刺激本身并不能直接诱发DM,但它的存在可加重大鼠的胰岛素抵抗,促进DM的发生和发展。     

硒对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠骨密度的影响试验

试验通过给SD大鼠(1925年,美国斯泼累格-多雷(Sprague Dawley)农场用Wistar大鼠培育而成,下同)注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ),破坏其胰脏以复制糖尿病模型。通过在饲料中添加不同浓度和形态的硒,研究了硒对患鼠骨密度(BMD)的影响。试验结果,糖尿病大鼠容易继发骨质疏松,胫骨、肱骨骨密度最早下降;低硒促进骨密度下降;高硒能延缓骨密度下降;硒的形态对糖尿病患鼠骨密度影响差异不显著(P>0.05)。     

依那普利对糖尿病大鼠肾脏NF-κB、TGF-β_1表达的影响

目的通过观察依那普利对糖病尿大鼠肾脏中核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1)表达的影响,探讨其对糖尿病肾病的作用及可能的机制。方法①健康雄性SD大鼠(n=60)适应性喂养2周后随机分为两组。链脲佐菌素作用于待造模组(n=50),剂量为一次性35 mg/kg,之后2周继续给予高糖高脂饲料,进行糖尿病造模。成模大鼠(n=40)随机分为依那普利干预组(n=20)和模型组(n=20)。依那普利干预组给予依那普利10 mg/(kg·d)灌胃;正常组和模型组以等量蒸馏水灌胃。模型组和依那普利干预组继续高脂高糖饲料喂养。②各组分别干预8周后,对比以下指标:一般状况、血液生化指标、肾脏组织切片HE染色结构变化、行免疫组织化学染色测定肾脏中NF-κB、TGF-β_1表达。结果①雄性SD大鼠的最终存活数:正常组10只、模型组8只、依那普利干预组10只。②正常组的体重为(407.86±23.0)g/只,TC、TG、FBG、HbA1c值分别为(1.67±0.22)mmol/L、(0.68±0.11)mmol/L、(5.07±0.30)mmol/L、(4.44±0.66)%。与正常组比,模型组[(313.18±21.72)g/只和依那普利干预组(334.65±26.23g/只)体重明显减轻(P0.05);模型组和依那普利干预组TC、TG、FBG、HbA1c值分别为(2.77±0.23)mmol/L和(2.66±0.33)mmol/L、(2.05±0.17)mmol/L和(2.01±0.19)mmol/L、(14.11±1.54)mmol/L和(13.91±1.43)mmol/L、(11.37±0.67)%和(10.73±1.28)%,较正常组有明显升高,差异有统计学意义(P0.01)。③肾脏切片HE染色可见模型组有肾脏组织病理损害的改变,而依那普利干预组改变介于正常组和模型组之间;④免疫组化染色后可见模型组肾小球内着色明显,肾间质、肾小管着色明显较正常组深,NF-κB、TGF-β_1含量增高,差异有统计学意义(P0.01),依那普利干预组低于模型组,差异有统计学意义(P0.01),高于正常组,差异有统计学意义(P0.01)。结论①依那普利可以延缓糖尿病肾脏硬化及纤维化的过程;②依那普利可以通过下调DM大鼠肾脏组织中NF-κB和TGF-β_1的表达改善DM肾脏病变。     

活血化瘀类中药对链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠各器官的影响

目的探讨活血化瘀类中药对链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠各脏器的影响。方法称取巴天酸模(50 g)、三七(30 g)、红花(15 g)、生姜(25 g)、冰片(5 g)、菊花(5 g)、川芎(5 g)分别通过水提法获取粗提物。粗提液经浓缩按比例混合,混合液与白醋按4∶1混合后与水按1∶15制成中药复方制剂。Wistar大鼠15只,随机分为正常组、模型组、中药复方制剂组(干预组)。高脂饲料喂养4 w后,模型组和干预组腹腔注射STZ(25 mg/kg)制备糖尿病大鼠模型。7 d后测空腹血糖≥7.8 mmo/L为模型复制成功。干预组每天灌胃该复方中药5 ml,正常组和模型组每天给予9%生理盐水灌胃。4 w后,监测体重、血糖,通过HE染色观测该复方中药对心脏、肾脏和肝脏的保护作用。结果与正常组相比,模型组体重下降(P<0.05);干预组体重升高(P<0.05)。模型组血糖较正常组升高明显(P<0.05);而干预组血糖较模型组有所降低(P<0.05)。模型组心脏、肝脏和肾脏损伤;干预组心脏、肝脏和肾脏组织的损伤程度逐渐减轻。结论该活血化瘀类中药可能具有降低血糖,对糖尿病大鼠各脏器具有保护作用。     

硼替佐米对大鼠肝纤维化动物模型NF-κB和TGF-β1表达的调控

目的:研究蛋白酶体抑制剂硼替佐米(bortezomib,Bor)对大鼠肝纤维化动物模型肝纤维化肝细胞损害的保护作用,并探讨其保护机制.方法:将30只SD大鼠随机分为正常饮食组(normal diet group,ND组)、肝纤维化对照组(liver fibrosis group,LF组)和Bortezomib干预组(bortezomib group,Bor组),每组处死大鼠后收集肝脏标本,分别进行HE和Masson染色了解肝纤维化水平、p65免疫组织化学染色检测核因子κB(nuclear factor-kappa B,NFκB)活性、实时定量PCR检测转化生长因子β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1m RNA水平、Western blot检测TGF-β1蛋白表达.结果:HE和Masson染色发现Bor组的肝纤维化水平较LF组低;Bor组的NF-κB p65亚基阳性染色率(4.72±1.20)明显低于LF组(9.05±1.33)(P<0.05);实时定量PCR显示Bor组TGF-β1 m RNA相对表达量(0.96±0.23)明显低于LF组(1.64±0.26)(P<0.05);Western blo检测结果显示Bor组(1.34±0.06)明显低于LF组(1.72±0.14)(P<0.05).结论:Bor可以通过下调TGF-β1表达、降低核因子NF-κB的活性,减少肝细胞凋亡的发生,减轻肝纤维化程度,从而降低肝纤维化造成的肝细胞损害程度.     

链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠视网膜的免疫损伤

分别用免疫组化、免疫荧光方法和计算机图像分析技术研究糖尿病（DM）大鼠视网膜组织中IgA、IgG和IgM的沉积情况。与对照组相比，DM大鼠视网膜组织中IgA、IgG和IgM的沉积增加，有统计学意义（均P〈0．05），说明免疫损伤可能参与了糖尿病视网膜病变的发生发展。     

链脲佐菌素诱导自发性高血压大鼠糖尿病模型的研究进展

糖尿病并存高血压可加速和增加心血管病、脑卒中、糖尿病肾病及视网膜病变等的发生和发展;加大对高血压合并糖尿病的研究具有重要意义;建立相应的动物模型是十分必要的,可为高血压合并糖尿病提供临床依据。目前高血压并糖尿病动物模型主要有以下几种:(1)以手术致SD(Spra-gue Da     

链脲佐菌素糖尿病大鼠的肝脏损伤

本实验旨在通过建立链脲佐菌素(STZ)糖尿病大鼠模型,观察该实验模型的肝脏损伤,并探讨其可能的相关因素。     

链脲佐菌素糖尿病大鼠的心肌病变

在40只链脲佐菌素糖尿病大鼠和40只正常对照鼠中,观察和比较不同病理时血糖、血脂、血浆果糖胺、左心室心肌酶含量、电镜下心肌改变、光镜下冠状动脉及其分枝的改变。在4周病程时,糖尿病大鼠心肌线粒体开始肿胀变性,8周时心肌酶含量明显降低,心肌病变显著,心肌排列不齐、断裂和心肌收缩带形成等。在11周病程中有持久性血糖过高和血脂过高,但未见冠状动脉及其分枝的病变。结果表明心肌病变系糖尿病特异性,作为糖尿病心脏病的一个重要独立组成部分而存在。     

环孢素A对链脲菌素诱导糖尿病大鼠心脏MMP-2和MMP-9表达的影响

观察环孢素A对糖尿病大鼠心肌基质金属蛋白酶(MMP)表达的影响.发现糖尿病大鼠心肌MMP-2、MMP-9 mRNA和蛋白表达均明显上调(P＜0.05或P＜0.01),环孢素A可下调上述异常表达(P＜0.05或P＜0.01).提示环孢素A可能具有减轻糖尿病心肌细胞损伤的作用.     

链脲佐菌素诱导的1型糖尿病大鼠肾脏脂联素受体的表达

目的 观察链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠在不同时期其血清脂联素和脂联素受体(AdipoR)在肾脏组织的表达水平.方法 64只雌性SD大鼠按随机数字表法分为对照组和实验组(分别为2、6、10、12周,共8组):实验组大鼠32只,一次性空腹腹腔注射STZ 60 mg/kg,诱导糖尿病大鼠模型;对照组大鼠32只,腹腔注射等体积的枸橼酸缓冲液.分别于糖尿病大鼠成模后第2、6、10、12周两组各取8只,测体重、肾重、空腹血糖、24 h尿白蛋白定量;心内采血,离心取血清,检测血肌酐,空腹血清胰岛素;ELISA方法检测血、尿脂联素浓度.取左肾常规病理组织行糖原染色,在光镜下观察肾脏的病理组织学改变,免疫组化SP法检测肾脏2种受体AdipoR1和AdipoR2表达.结果 (1)实验组6、10、12周大鼠血清和尿脂联素高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.01);且血清脂联素与24 h尿白蛋白排泄率、尿脂联素呈正相关(r值分别为0.806、0.696,均P＜0.01);尿脂联素与24 h尿白蛋白定量呈显著正相关(r=0.728,P＜0.01);逐步回归分析提示血清脂联素受24 h尿白蛋白定量影响最大(β=0.806,P＜0.01);(2)免疫组化半定量分析显示,AdipoR1和AdipoR2在正常大鼠肾组织中均有表达,主要分布于肾小管上皮细胞和肾小球内皮细胞.实验组造模成功6周时肾脏组织AdipoR1和AdipoR2表达,与对照组比较表达有所增强(F值分别为11.68、23.20,均P＜0.01),且与血清脂联素呈显著正相关(r值分别为0.666、0.684,均P＜0.01).结论 血清和尿脂联素水平与糖尿病肾病病程和AdipoR呈正相关,推测脂联素通过AdipoR直接作用于肾脏,尤其是作用于肾小管,在1型糖尿病肾脏病变中发挥保护作用.     

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠垂体－甲状腺轴形态学研究

对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠（持续高血糖３个月）的甲状腺和垂体的促甲状腺激素（ＴＳＨ）分泌细胞，进行形态定性及计量研究。通过光镜及电镜观察，发现糖尿病大鼠的甲状腺有形态学改变，而垂体ＴＳＨ分泌细胞的细胞器无器质性改变，其分泌ＴＳＨ的功能受损。结果说明，糖尿病时甲状腺功能低下，与该疾病对甲状腺所产生的形态学改变有关，而垂体分泌促激素功能受损也可能为致病因素之一。     

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠垂体—甲状腺轴形态学研究

对链脲菌素诱导的糖尿病大鼠（持续高血糖３个月）的甲状腺和垂体的促甲状腺激素分泌细胞，进行形态定性及计量研究。通过光镜及电镜观察，发现糖尿病大鼠的甲状腺有形态学改变，而垂体ＴＳＨ分泌细胞的细胞器无器质性改变，其分泌ＴＳＨ的功能受损。结果说明，糖尿病时甲状腺功能低下，与该疾病对甲状腺所产生的形态学改变有关，而垂体分泌促激素功能受损也可能为致病因素之一。     

NF-κB、TGF-β1在糖尿病大鼠心肌及主动脉中的表达

目的:探讨链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病(DM)大鼠心肌及主动脉核转录因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。方法:用HE及MASSON染色观察DM大鼠心肌及主动脉的病理改变,用免疫组化的方法检测上述免疫因子的表达。结果:DM大鼠心肌、主动脉NF-κB、TGF-β1表达均明显高于正常对照组(CON),差异有统计学意义(P0.01)。结论:NF-κB和TGF-β1在DM心血管并发症的发生发展机制中起重要作用。     

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠心肌缺血/再灌注损伤

目的 研究链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠缺血/再灌注(I/R)心肌的损伤,从心电图、心肌梗死面积、心肌大体和超微结构观察损伤的程度并分析其可能的作用机制.方法 采用STZ(45 mg/kg)诱导大鼠糖尿病4周后制备心肌缺血30 min再灌注120 min模型,连续检测心电图变化,用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法测定心肌梗死面积、HE染色和电镜下观察心肌组织结构的改变.结果 糖尿病大鼠由I/R损伤引起的心肌梗死面积并没有增加,但是HE染色和电镜下均发现糖尿病心肌损伤更为严重,肌纤维结构消失、心肌细胞膜和细胞核损伤、线粒体降解、血管淤滞、内皮损伤.结论 STZ诱导糖尿病4周的大鼠缺血/再灌注后心肌损伤较非糖尿病大鼠加重.     

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肝脏G6Pase mRNA表达的变化

建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组和糖尿病组。饲养2周后取出肝脏，以半定量RT-PCR方法测定肝脏G6pasemRNA的表达，蒽酮比色法测定肝脏糖原含量。结果：糖尿病组肝脏C-6pase催化亚基及转运亚基。RNA的辉度高于正常对照组（P〈0．05），而肝脏糖原含量低于正常对照组（P〈0．05）。结论：在糖尿病状态下肝脏C-6paSe催化亚基及转运亚基mRNA表达均增加，使得6-磷酸葡萄糖向葡萄糖的转化增加，从而肝糖输出增多，由此可见肝脏G6pase表达的增加在高血糖形成中起到了重要作用。     

链脲佐菌素诱导糖尿病大鼠肝脏G6Pase mRNA表达的变化

建立糖尿病大鼠模型并将之分为正常对照组和糖尿病组.饲养2周后取出肝脏,以半定量RT-PCR方法测定肝脏G6pase mRNA的表达,蒽酮比色法测定肝脏糖原含量.结果糖尿病组肝脏G6pase催化亚基及转运亚基mRNA的辉度高于正常对照组(P＜0.05),而肝脏糖原含量低于正常对照组(P＜0.05).结论在糖尿病状态下肝脏G6pase催化亚基及转运亚基mRNA表达均增加,使得6-磷酸葡萄糖向葡萄糖的转化增加,从而肝糖输出增多,由此可见肝脏G6pase表达的增加在高血糖形成中起到了重要作用.     

牛磺酸对链脲佐菌素糖尿病大鼠胰岛β细胞的保护作用

利用链脲佐菌素诱导的Wistar糖尿病大鼠观察牛磺酸对其的防治作用。结果表明：①正常大鼠口服牛磺酸（8g·kg-1／d）对血糖和血清胰岛素浓度无明显影响；②糖尿病大鼠服用牛磺酸后可明显抑制其高血糖效应（P＜0．05，0．01，0．001）；③对链脲佐菌素诱致的大鼠血清胰岛素浓度的降低，牛磺酸具有明显的反转作用（P＜0．05，0．01，0．001）；④免疫组化结果表明，经牛磺酸防治的糖尿病大鼠表达胰岛素的胰岛数量较对照组显著增多（P＜0．05）。提示牛磺酸具有对抗和修复链脲佐菌素所引起的大鼠胰岛β细胞损伤的作用。     

甘氨酸减少糖基化终产物对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠肾脏损伤的影响研究

目的探讨甘氨酸对糖尿病大鼠AGEs及肾脏损伤的影响。方法Wistar大鼠随机分为正常对照(Con)组、正常+甘氨酸(CG)组、糖尿病(DM)组、糖尿病+甘氨酸治疗(DG)组,喂养12周后杀检。检测尿微量白蛋白与肌酐比值(UACR)、血清糖化白蛋白(GB/GALB)及AGEs,观察肾脏组织形态,检测肾组织AGEs、AGEs受体(RAGE)、转化生长因子β1(TGF-β1)表达。结果与Con组比较,DM组UACR、血清GB/GALB和AGEs升高[14.86(6.16,26.75)vs 172。38(38.68,949.42)mg/g,(12.37±0.85)%vs(51.01±14.16)%,(6610.07±996.90)vs(8547.31±875.271),P0.05],肾小球系膜区扩张,基底膜明显增厚,肾组织AGEs、RAGE和TGF-β21表达增加。与DM组比较,DG组UACR、血清GB/GALB和AGEs降低[172.38(38.68,949.42)vs117.63(20.17,294.48)mg/g,(51.01±14.16)%vs(40.38±10.41)%,(8547.31±875.27)vs(6585.19±1406.13),P0.05],肾小球系膜区扩张减轻,基底膜厚度下降,肾组织AGEs、RAGE和TGF-β1表达降低。结论甘氨酸可减少STZ大鼠AGEs的产生,抑制肾组织RAGE及TGF-β1的表达,改善肾脏损伤。     

对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠壁细胞和G细胞的体视学研究

采用ＨＥ染色和免疫组化方法结合生物体视学技术，对链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠在胃底腺的壁细胞和幽门部胃粘膜的Ｇ细胞进行立体计量研究。结果显示：糖尿病状态的早期，壁细胞和Ｇ细胞的体积均明显增大，数量却显著减少。根据正常情况下壁细胞和Ｇ细胞的细胞动力学变化、胃泌素的生物学作用和上述实验结果，认为大鼠胃底腺峡部的干细胞向壁细胞分化成熟的功能及Ｇ细胞的分裂增殖活动，在胰岛素缺乏的情况下受到一定程度的抑制，而这种功能的抑制是糖尿病状态下易出现胃粘膜萎缩、胃酸分泌减少和胃轻瘫的重要原因之一。