PCR技术在链格孢霉鉴定中的应用

目的应用PCR技术对链格孢霉进行鉴定,以期获得制备链格孢霉变应原制剂的纯菌种。方法采用空气曝皿收获链格孢霉菌种并进行培养,应用PCR技术对其进行鉴定。结果经空气曝皿、形态学鉴定为链格孢霉菌株的PCR产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳分析,紫外灯下鉴定扩增所得条带约580bp;测序结果经Blast比对,544个碱基中543个能够与链格孢霉26s rDNA的545个碱基比对上,缺失1个,不能识别1个,相符率达99％。结论证实待检真菌为链格孢霉。     

大骨节病区粮食中互隔交链孢霉产毒菌株的测定

链格孢霉属(Alternaria)是侵染田间多种作物和收获后谷物的常见真菌之一,不仅产量和品质下降,而且产生毒素,有害于人、畜的健康。Serter(1984)从小麦和高粱上分离的互隔交链孢霉(A.aiternata)产生主要存毒代谢物为互隔交链孢霉醇(Alternariol,AOH)和互隔交链孢霉醇单甲醚(Al-ternariol Melthy Ether,AmE)等。近年来,我国白逢彦等(1990)和郭雄等(1995)分别在青海和陕西大骨节病病区粮食中进行真菌学检查,其优势     

两种链格孢霉变应原提取方法的比较

目的比较传统方法和新方法对链格孢霉变应原浸出液蛋白质含量、组分及生物活性的影响。方法将经空气曝皿获得、中国科学院鉴定为链格孢霉的菌株于26℃恒温下培养4周，取12份5g湿重的菌苔，6份用传统方法（风干，高速粉碎机粉碎后，搅拌提取），6份采用新方法（液氮研磨＋超声破碎。再搅拌提取）提取蛋白质：然后用改良的Bradford法进行蛋白质含量测定；SDS-PAGE分析两种方法提取的蛋白质组分的差别．放射性变应原吸附（RAST）抑制试验比较两者间变应原生物活性的差异。结果传统方法和新方法提取的蛋白质含量分别为（0．205±0．019）和（0．532±0．023）g／ml，所得到变应原的50％抑制率分别为5．96和1．25μg／ml。结论两种提取方法中．新方法能够得到较高的蛋白质含量及更多的蛋白质组分，对于低丰度蛋白的获得及生物学活性即效价的提高具有十分重要的意义。     

交链孢霉甲基醚（AME）对软骨细胞代谢的影响

本文应用ＡＭＥ作用于培养的兔关节软骨细胞，动态观察其对软骨细胞生长代谢的影响。结果表明ＡＭＥ对软骨细胞ＤＮＡ含量无明显影响，而能使软骨基质中葡萄糖醛酸（ＧｌｃＵＡ）含量降低，在培养第９日ＡＭＥ与葡萄糖醛酸含量呈显著负相关关系。提示ＡＭＥ对软骨组织的毒性作用，在于抑制成熟期软骨细胞合成和分泌蛋白多糖。     

大骨节病病区谷物镰刀菌培养物致雏鸡骺板软骨坏死的观察

１９９２年１月作从内蒙古莫力达瓦北巨人村大骨节病患家玉米中分离一株镰刀菌。将该菌接种于非病区玉米，培养３周制成菌粮。将菌糖烘干按１０％比例加入正常饲料，喂养雏鸡３周后５／１５出现膝关节对称性骺板软骨增殖、过渡层细胞发育障碍、堆积、变性、增生等病理改变，５周后７／１５病变更严重，出现骺板软骨带状坏死，且伴有死活死交错的特征性表现。实验结果的特征是，短期现现病变，骺板软骨的发生带状坏死，未见于历来     

钴对体外培养心肌细胞的直接损伤作用

关于钴对心肌的毒害作用报道很多,但都是从整个机体而进行的研究。本文则通过观察用一定剂量钴作用到体外培养心肌细胞,以探讨其对心肌细胞的损伤作用。１材料与方法１.１心肌细胞的培养 取新生１－３天ｗｉｓｔａｒ大鼠心室肌组织,按照Ｌｏａｒｓｅ法［１］进行心肌细胞培养。接种密度为 ３． ５× １０８ｃｅｌｌｓ／Ｌ。１．２培养条件 ＭＥＭ（ＧＩＢＣＯ）营养液（含１５％小牛血清大连生物制品所）, ３６． ５℃, ５％ ＣＯ２＋ ９５％ Ａｉｒ。于培养第 ３天细胞达到融合状态,心肌细胞伴有节律性的跳动,换入新的培养液,加钴…     

用大骨节病病区水粮喂养恒河猴的实验病理学观察

本实验用大骨节病活跃病区水粮喂养恒河幼猴,在关节软骨深层和骺板软骨的肥大层出现了多发性、灶状或带状软骨坏死。在坏死部中心继发有裂隙、囊腔形成,周围出现增生的软骨细胞团,骺板坏死部位还可见来自骨髓腔的纤维组织和血管增生、侵入等修复现象。出现了类似于人类大骨节病早期的病理改变。为进一步研究病因、发病机理提供了借鉴。     

应用原位杂交法对比研究慢型克山病、扩张型心肌病与肠道病毒的关系

本文用生物素标记的柯萨奇B_3病毒(CVB_3)的cDNA探针,通过原位杂交技术检测50例组织学诊断为慢型克山病、14例扩张型心肌病的心肌石蜡包埋切片,并以15例正常心肌标本作阴性对照。结果50例慢型克山病有34例出现阳性结果。14例扩张型心肌病有7例出现阳性结果。15例正常对照心肌标本杂交均为阴性,从而确定慢型克山病的心肌组织中、扩张型心肌病的心肌组织中有肠道病毒核酸存在,表明肠道病毒感染与慢型克山病、扩张型心肌病的发病高度相关。经统计学处理二者之间无明显差异。     

克山病心肌炎扩张型心肌病患者血清尿发中化学元素水平测定

用石墨炉原子吸收、火焰原子吸收、极谱示波法测定克山病、心肌炎、心肌病人血清、尿、发中8种元素含量。结果表明:克山病血清 Cu、Ni 升高,Cr、Se、Ca 降低,Zn/Cu 比增大;尿 Zn、Co、Ca、Mg 升高,Cr、Ni、Se 降低;发 Cu、Zn、Ni、Ca、Mg 升高,Se 降低,Zn/Cu 比增大。心肌炎血清 Zn、Ni 升高,Cr、Se 降低,Zn/Cu 比增大;尿 Cu、Zn、Cr、Ca、Mg 升高,Se 降低;发 Cu、Zn、Co、Ni、Ca、Mg 升高,Cr、Se 降低,Zn/Cu 比增大。心肌病血清 Cu、Ca 升高,Cr、Se 降低;尿 Cu、Zn、Co、Ca、Mg 升高,Se 降低;发 Zn、Co、Ni、Mg 升高,Cr、Se 降低,Zn/Cu 比增大。     

补硒对克山病病区居民红细胞免疫粘附及调节功能的影响

为探讨红细胞免疫与硒水平的关联，８６例克山病病区青少年分成３组，每日分别服硒酵母或亚硒酸钠２００μｇ或普通酵母片１２周后，测定其红细胞硒含量和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性，红细胞免疫粘附（ＲＣＩＡ）功能，血清ＲＣＩＡ调节功能和循环免疫复合物（ＣＩＣ）含量，结果表明，两补硒组红细胞硒含量和ＧＳＨ－Ｐｘ活性明显提高，同时红细胞Ｃ３ｂＲ花环率明显升高，血清ＲＣＩＡ花环抑制率明显降低，但补硒对Ｉ