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1.
目的建立多色流式方法,检测艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)中的辅助性T细胞亚群。方法用3种细胞表面抗体CD3、CD4、CD8,6种细胞内因子抗体γ干扰素(IFN-γ)、粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、IL-2、L-10,建立多色流式染色方案。根据多色流式荧光搭配原则,制定最佳配色方案。用1例HIV/AIDS病人外周血标本分别进行最适检测电压调节、荧光补偿设定、减一阴性对照(FMO对照)。确定条件后,对3例HIV/AIDS病人外周血标本进行检测分析。结果根据阴性细胞确定检测电压,用补偿微球(CompBeads)单色染色与细胞单色染色确定适宜补偿,减一阴性对照确定阴性边界,建立了九色流式方法检测HIV/AIDS病人外周血中辅助性T淋巴细胞亚群的方案,在单细胞水平同时检测多个因子。结论建立的多色流式方案可检测HIV/AIDS病人外周血中的辅助性T细胞亚群,能在单细胞水平同时检测多个因子,所需样品少,操作简便、相对快速并能准确定量。  相似文献   

2.
目的建立多色流式胞内细胞因子检测方法,明确慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B,CHB)免疫清除期患者外周血Th淋巴细胞亚群细胞因子的分泌特点,探讨CHB患者多重细胞因子的表达模式。方法选取2017年3月至2017年4月就诊于首都医科大学附属北京地坛医院的CHB免疫清除期患者10例及健康对照者10例为研究对象。根据多色流式荧光搭配原则,确立外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8及细胞因子GM-CSF、TNF-α、IFN-γ的六色流式细胞配色方案。利用健康对照者外周血单个核细胞(peripheral blood mo-nonuclear cell,PBMC)调节最适检测电压及荧光补偿,明确PMAIonomycin的体外刺激方案。分离10例CHB患者外周血PBMC细胞,PMA-Ionomycin体外刺激5小时后,行多重流式细胞因子染色,利用多色流式细胞仪LSR Fortessa获取细胞,Flowjo10.0流式细胞软件分析健康对照者及CHB患者外周血Th细胞亚群胞内细胞因子共表达水平。采用Graph Pad Prism 7.0对所得数据进行统计分析。结果建立了多重细胞因子的胞内染色方案,明确了GM-CSF、TNF-α、IFN-γ在Th细胞上的共表达分析策略,确认存在分泌双重细胞因子GM-CSF~+TNF-α~+、GM-CSF~+IFN-γ~+的Th细胞亚群。通过检测CHB患者外周血样本,发现CHB患者分泌GM-CSF、GM-CSF~+TNF-α~+、GMCSF~+IFN-γ~+的Th细胞亚群百分率均显著高于健康对照组,差异具有统计学意义(t=2.576、4.208、2.671,P均0.05)。结论建立的多色流式细胞因子胞内染色方案可用于明确CHB患者外周血分泌双重细胞因子的Th细胞亚群的分布模式;双重细胞因子分泌的Th细胞亚群的检测可能为临床上CHB患者免疫状态的评估提供可靠依据。  相似文献   

3.
目的了解艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(HIV/AIDS病人)淋巴细胞表面CCR5、CX-CR4、HLA-DR和CD38表达,分析其与疾病进展的关系,探讨HIV感染的免疫学基础。方法收集50例HIV/AIDS病人及14例健康对照的抗凝全血,用流式细胞仪检测CCR5、CXCR4、HLA-DR和CD38表达,并分析其与疾病进展情况的相关性。结果艾滋病组、HIV感染者和正常对照CCR5/CD4,CXCR4/CD4,CD38/CD4,CCR5/CD8,CD38/CD8和HLA-Dr/CD8表达有显著性差异,CXCR4/CD4和CD38/CD4与疾病进程呈明显正相关,CCR5/CD8和CD38/CD8与疾病进程呈明显负相关。结论 HIV/AIDS病人淋巴细胞表面CCR5、CXCR4和CD38表达与疾病进展密切相关。  相似文献   

4.
目的 在单细胞水平上,研究类风湿关节炎(RA)患者滑液及外周血中单核/巨噬细胞,T淋巴细胞上趋化因子受体CCR5及CXCR3的表达。并测定CCR5的配体MIP-1β。激活正常T细胞表达和分泌因子(RANTES)及T细胞亚群,探讨其在RA发病中的作用机制。方法 分离RA患者滑液单个核细胞(SFMC),外周血单个核细胞(PBMC)及正常人PBMC(对照),以三色荧光素标记物进行流式细胞术分析CD14^ ,CD3^ 细胞膜表面趋化因子受体CCR5,CCR3及细胞内趋化因子MIP-1β,RANTES和细胞因子白细胞介素(IL)-4,干扰素(IFN)-γ的表达率。结果 与PBMC相比,RA患者SFMC中的单核/巨噬细胞,T细胞上趋化因子受体CCR4及CEXR3表达显著增高;且单核/巨噬细胞分泌趋化因子MIP-1β,RANTES的百分比较高;SFMC中Th1细胞亚群(即IFN-γ^ T细胞)的表达率与滑液及外周血中T淋巴细胞上趋化因子受体CCR4及CXCR3的表达率显著相关。结论 趋化因子受体CCR5^ ,CXCR3^ 的单核/巨噬细胞,T细胞积聚在RA患者的病变关节内,且单核/巨噬细胞分泌较多趋化因子;CCR5,CXCR3可能参与调节细胞移动。与Th1细胞亚群及其“伙伴”细胞在RA关节内积聚有关;可能与RA的发病相关。  相似文献   

5.
目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)活动期患者Th红胞亚群平衡的改变及其意义.方法以趋化因子受体CCR5和CCR3为Th红胞亚群表面标记,利用三色流式细胞分析法对SLE患者外周血单个核细胞(PBMCs)中CD4+T细胞亚群平衡变化进行分析.结果活动期SLE患者外周血CC4+CCR5+CCR3-细胞百分比与正常人比较差异无显著性(P>0.05).CD4+CCR5-CCR3+和(或)CD4+CCR5+CCR3-细胞百分比异常升高者出现组织脏器损伤的概率较高.肾上腺糖皮质激素治疗可使异常升高的CD4+CCR5-CCR3+和(或)CD4+CCR5+CCR3-细胞百分比有所降低.结论多数活动期SLE患者体内存在Th2细胞优势,Th2和(或)Th1细胞的改变与组织脏器损伤有一定的相关性.  相似文献   

6.
目的探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血CD4 T细胞比例变化情况及其对关节局部趋化的机制。方法流式细胞术分析RA患者外周血单个核细胞(PBMC)中CD4 T细胞的比例,并分析CD4 T细胞比例与RA疾病活动性评分系统(DAS28)评分间的关系。激光共聚焦方法检测RA患者滑膜局部浸润CD4 T细胞情况。流式细胞术分析RA患者CD4 T细胞表面趋化因子受体表达情况。结果与对照组相比,RA患者外周血PBMC中CD4 T细胞的比例显著降低(P0.01),且RA患者外周血CD4 T细胞比例与DAS28评分呈明显负相关(r=-0.753 0,P=0.001 2)。关节局部CD4 T细胞浸润的激光共聚焦结果显示,与对照组相比,RA患者滑膜中具有更多的CD4 T细胞浸润。趋化因子受体分析结果显示,RA患者外周血CD4 T细胞表面CCR5、CXCR1和CXCR3的表达显著升高(P0.01)。结论 RA患者外周血CD4 T细胞表面表达升高的CCR5、CXCR1和CXCR3可能参与外周血CD4 T细胞向滑膜局部的趋化。  相似文献   

7.
目的 探讨HIV/AIDS外周血T淋巴细胞活化水平与病情进展的关系.方法 检测105例HIV/AIDS患者外周血可溶性CD27(sCD27)水平,CD28+CD8+、CD28+CD4+、HLA-DRCD8+和CD38+CD8+比例以及CD4+T淋巴细胞计数,并在正常体检人群中随机抽取15名健康人作为对照组.分别用流式细胞技术和ELISA方法检测和分析T细胞活化指标(CD2+CD8+、CD28+CD4+、CD38+CD8+、HLA-DRCD8+、sCD27)与疾病分期、CD4+T淋巴细胞计数的相关性.结果 HIV/AIDS的sCD27水平和HLA-DRCD8+和CD38+CD8+比例较正常人显著升高(P<0.05),sCD27在AIDS C3期患者中明显升高,与B3期患者比较有显著性差异,CD28+CD4+、CD28+CD8+、HLA-DRCD8+和CD38+CD8+比例在CD4+T淋巴细胞计数超过200/ul的患者中显著升高(P<0.05).结论 T淋巴细胞活化水平与AIDS病情进展密切相关,HIV/AIDS的T淋巴细胞活化水平明显升高,CD4+T淋巴细胞计数超过200/μl患者的T淋巴细胞活化水平高于CD4+T淋巴细胞计数低于200/μl的患者.  相似文献   

8.
目的 研究人类免疫缺陷病毒/获得性免疫缺陷综合征(HIV/AIDS)患者血清白细胞介质(IL)-18浓度的变化,及其与病毒载量、CD4^+T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4表达的相关性。方法 应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对42例HIV/AIDS患者及12例正常对照者的血清IL-18浓度进行定量检测,分析其变化,并对其变化与病毒载量的相关性进行分析。应用流式细胞仪检测全部HIV/AIDS患者CD4^+ T细胞表面辅助受体CCR5/CXCR4的表达情况,并分析其与病毒载量及血清IL-18浓度变化之间的相关性。结果 42例HIV/AIDS患者血清平均IL-18浓度显著高于正常对照组(P〈0.01),且按美国疾病控制与预防中心(CDC)1993年标准,CDCC期显著高于A期(P〈0.01)。所有患者血清IL-18浓度变化与HIV病毒载量之间呈正相关(P〈0.05),与辅助受体CX-CR4的表达也呈正相关(P〈0.01)。HIV病毒载量与辅助受体CXCR4的表达具有正相关性(P〈0.05)。结论 HIV/AIDS患者体内持续增长的IL-18加剧了其免疫功能的紊乱和低下,IL-18可能与疾病本身的致病机制有关。  相似文献   

9.
目的探讨糖尿病足(DFU)患者外周血中T细胞分化情况及其功能。方法采用流式细胞术分析DFU患者外周血中CD4~+、CD8~+T细胞亚群分布情况,包括初始T细胞、活化T细胞及效应T细胞;分析DFU患者外周血CD4~+、CD8~+T细胞迁移分子CC趋化因子受体(CCR)5、CCR4、CXC趋化因子受体(CXCR)3的表达情况;分析DFU患者外周血CD4~+、CD8~+T细胞分泌炎症因子干扰素(IFN)γ,白细胞介素(IL)2,肿瘤坏死因子(TNF)-α情况。结果与对照组比较,DFU患者外周血初始CD4~+、CD8~+T细胞比例显著降低,活化与效应T细胞比例显著升高(P<0.05);迁移分子受体CCR4表达无显著差异(P>0.05),CCR5与CXCR3表达在DFU患者中显著降低(P<0.05);DFU患者中,炎症因子IFNγ在活化T细胞中高表达,在效应T细胞中几乎不表达,而IFNγ与TNF-α在效应T细胞中高表达,在初始T细胞中几乎不表达。结论DFU患者外周血T细胞亚群发生变化,其分泌的炎症因子影响了T细胞的免疫功能发挥。  相似文献   

10.
目的 研究高效联合抗逆转录病毒治疗(HAART)对HIV/AIDS患者NK细胞和γδT细胞的重建作用,比较HAART对获得性免疫和固有免疫重建规律的异同.方法 对59例接受规律HAART的HIV/AIDS患者于治疗前、治疗后1、3、6、9、12个月末进行随访,采用分支DNA(bDNA)法检测血浆病毒载量,经流式细胞仪检测患者外周血淋巴细胞亚群.以56例健康献血员作为正常对照.结果 基线时HIV/AIDS患者CD4+T细胞中位数为45(164,13)个/μl,NK细胞和γδT细胞中位数分别为96(135,56)个/μl和30(45,19)个/μl,与正常对照组相比均显著减低(P<0.001).HAART开始后1个月,血浆病毒载量降低了2.33 lg拷贝/ml(P<0.001),CD4+T细胞数增长了111个/μl(P<0.001),主要以记忆CD4+T细胞的快速增长为主,而NK细胞和γδT细胞与基线相比无显著变化.在HAART后3个月NK细胞和.γδT细胞数量出现增长,分别较基线增加26个/μl(P=0.007)和15个/μl(P<0.001).治疗12个月,CD4+T细胞、NK细胞及γδT细胞计数分别达到271(365,134)个/μl、166(281,108)个/μl和46(66,34)个/μl,但仍低于正常对照.结论 HAART可以重建HIV/AIDS患者固有免疫,但NK细胞和γδT细胞数量的增加晚于CD4+ T细胞,HAART对固有免疫的重建作用机制有待进一步研究.  相似文献   

11.
Most adenomas and carcinomas of the small intestine and extrahepatic bile ducts arise in the region of the papilla of Vater. In familial adenomatous polyposis (FAP) it is the main location for carcinomas after proctocolectomy. In many cases symptoms due to stenosis lead to diagnosis at an early tumor stage. In about 80%, curative intended resection is possible. Operability is the most relevant prognostic factor. Most ampullary carcinomas resp. carcinomas of the papilla of Vater develop from adenomatous or flat dysplastic precursor lesions. They can be sited in the ampulloduodenal part of the papilla of Vater, which is lined by intestinal mucosa. They also can develop in deeper parts of the ampulla, which are lined by pancreaticobiliary duct mucosa. Intestinal-type adenocarcinoma and pancreaticobiliary-type adenocarcinoma represent the main histological types of ampullary carcinoma. Furthermore, there exist unusual types and undifferentiated carcinomas. Many carcinomas of intestinal type express the immunohistochemical marker profile of intestinal mucosa (keratin 7?, keratin 20+, MUC2+). Carcinomas of pancreaticobiliary type usually show the immunohistochemical profile of pancreaticobiliary duct mucosa (keratin 7+, keratin 20?, MUC2?). Even poorly differentiated carcinomas, as well as unusual histological types, may conserve the marker profile of the mucosa they developed from. These findings underline the concept of histogenetically different carcinomas of the papilla of Vater which develop either from intestinal- or from pancreaticobiliary-type mucosa of the papilla of Vater. Molecular alterations in ampullary carcinomas are similar to those of colorectal as well as pancreatic carcinomas, although they appear at different frequencies. In future studies, molecular alterations in ampullary carcinomas should be correlated closely with the different histologic tumor types. Consequently, the histologic classification should reflect the histogenesis of ampullary tumors from the two different types of papillary mucosa.  相似文献   

12.
Summary Palmitic acid oxidation in rat diaphragm homogenate is depressed by biguanide concentrations that are still incapable of inhibiting oxidative phosphorylation. Glucose oxidation is not directly effected by the same biguanide concentrations: however, the inhibitory effect of palmitic acid on glucose oxidation is partly removed by biguanides. Inhibition of fatty acid oxidation, which accounts for most of the metabolic effects caused by these drugs, can be regarded as the fundamental mechanism of action of biguanides. There is some evidence suggesting that these drugs might interact with carnitine, thus preventing long-chain fatty acids from being transported across the mitochondrial membrane to the site of oxidation. Traduzione a cura degli AA.  相似文献   

13.
14.
目的胰岛素瘤是最常见的胰腺神经内分泌肿瘤,因其临床表现多样,导致诊断困难。影像学诊断尤其是超声内镜(EUS)在胰岛素瘤的诊断中起着重要作用,拥有较高的敏感性和特异性。本研究拟通过明确胰岛素瘤的解剖分布特点,以期有助于提高影像学的诊断准确率和降低漏诊率,尤其是在教育和培训实践中对于EUS的学习者更具有指导价值。 方法回顾性分析解放军总医院第一医学中心病案资料数据库1993年1月至2019年11月经外科手术、病理确诊为胰岛素瘤的患者的临床资料,检索方法采取搜索术后病理诊断为"胰岛素瘤"的病例,通过查阅病例的方法,提取出胰岛素瘤的大小和解剖分布等数据,进一步分析其特点。 结果共检索到确诊为胰岛素瘤的患者116例,其中,男45例、女71例,年龄13~76岁,平均年龄(44.4±14.85)岁。胰岛素瘤单发110例(94.8%)、多发6例(5.2%)。位置分布:头颈部46例(39.7%),单发45例、多发1例;体尾部68例(58.6%),单发65例、多发3例;全胰腺多发2例(1.7%)。病变大小特点:最大径0.4~3.4 cm,平均大小(1.53±0.58)cm。≤1 cm 29例、>1 cm而≤1.5 cm41例、>1.5 cm而≤2.0 cm28例,≤3 cm 15例,>3 cm 3例。年龄与肿瘤的大小相关,≤44岁患者肿瘤平均大小为(1.36±0.51)cm、>44岁患者肿瘤平均大小为(1.70±0.60)cm,P<0.05。头颈部的肿瘤大于体尾部的肿瘤,头颈部肿瘤平均大小(1.66±0.63)cm,体尾部(1.42±0.52)cm,P<0.05。 结论胰岛素瘤在胰腺体尾部较头颈部更好发;绝大多数单发,但可以全胰腺多发;多数小于1.5 cm,肿瘤的大小与患者年龄和肿瘤的解剖分布相关。  相似文献   

15.
氯硝柳胺悬浮剂的毒性评价   总被引:2,自引:2,他引:2  
目的评价氯硝柳胺悬浮剂的毒性,为现场大规模应用灭螺提供依据。方法按照中华人民共和国国家标准GB 15670-1995《农药登记毒理学试验方法》和鱼类毒性试验方法进行。结果经口、经皮肤的LDso雌、雄性大鼠均>5 000 mg/kg,经呼吸道的LCso雌、雄性大鼠均>5 000mg/m3,该药经口、经皮肤、经呼吸道毒性均属微毒类药物;兔眼用药后,观察期内无不良反应,对眼无刺激性;皮肤用药后对皮肤无刺激性。与氯硝柳胺原药、氯硝柳胺乙醇胺盐原药和氯硝柳胺乙醇胺盐可湿性粉剂相比,氯硝柳胺悬浮剂对鱼急性毒性最低。结论氯硝柳胺悬浮剂属微毒类药物,对鱼的毒性低于其乙醇胺盐可湿性粉剂,适合于现场应用。  相似文献   

16.
目的:研究急性肺动脉栓塞(APE)的临床心电图动态演化规律,阐明其多样性表现的机制。方法:收集42个APE病例的心电图系列,每一例按记录时间顺序对7个特征性指标(心率,SⅠ、QⅢ、TⅢ、TV1,、STV、RV1或r'V1波)采样。分析该7个特征指标的时变特征,并总结归纳出APE心电图的多指标关联时变模式。结果:该时变理论模式表明,典型APE患者心电图随病程的动态变化,以TV1波倒置达峰时间为界,可化分为3个阶段。发病至TV1波倒置达峰前为第一阶段,TV1波倒置逐渐加深,表现为下降线,其它各指标在该阶段即已迅速完成上升或下降的演变而进入快速回复期,其时变模式曲线呈"反S"型或"S"型;第二阶段即为TV1波倒置达峰阶段,其时间大概处于TVI波总演变时间的前1/3处;自TVI波倒置达峰后至回复发病前水平为第三阶段。结论:临床APE心电图表现之多样性,是不同阶段各指标的联合表现特征和形式多样性的反映。该时变模式曲线可应用于临床判断疾病阶段。  相似文献   

17.
目的 探索布鲁菌病(布病)患者临床特征及治疗转归情况,为临床诊治提供参考。方法 收集并分析115例成人布病患者的人口学和流行病学资料、临床表现、血液学指标及治疗与转归情况。结果 布病患者常常伴有发热、乏力、多汗、关节疼痛、肝脾肿大等临床症状,其HGB、红细胞压积(hematocrit,HCT)、嗜酸性粒细胞(eosinophil,EO)、红细胞分布宽度(red blood cell distribution width,RDW)和CRP异常率较高。而WBC、PLT、中性粒细胞计数、淋巴细胞计数、单核细胞计数、平均细胞体积、血小板分布宽度、ESR和降钙素原的异常率较低。治疗上大部分患者[53.04%(61/115)]接受利福平联合多西环素治疗,部分患者尤其是合并骨质侵犯患者常使用三联抗菌素治疗。其中47例并发骨关节痛患者,经规范足疗程治疗后皆好转或痊愈。结论 布病患者常伴有发热、乏力、多汗、关节疼痛、肝脾肿大等临床症状,其HGB、HCT、EO、RDW和CRP异常率较高,可作为布病的辅助诊断指标。布病临床表现多样,明确诊断后应尽早给予规范的抗菌治疗,抑制疾病进展,减少并发症发生。  相似文献   

18.
BACKGROUND AND AIM: Both the clinical presentation and the degree of mucosal damage in coeliac disease vary greatly. In view of conflicting information as to whether the mode of presentation correlates with the degree of villous atrophy, we reviewed a large cohort of patients with coeliac disease. PATIENTS AND METHODS: We correlated mode of presentation (classical, diarrhoea predominant or atypical/silent) with histology of duodenal biopsies and examined their trends over time. RESULTS: The cohort consisted of 499 adults, mean age 44.1 years, 68% females. The majority had silent coeliac disease (56%) and total villous atrophy (65%). There was no correlation of mode of presentation with the degree of villous atrophy (p=0.25). Sixty-eight percent of females and 58% of males had a severe villous atrophy (p=0.052). There was a significant trend over time for a greater proportion of patients presenting as atypical/silent coeliac disease and having partial villous atrophy, though the majority still had total villous atrophy. CONCLUSIONS: Among our patients the degree of villous atrophy in duodenal biopsies did not correlate with the mode of presentation, indicating that factors other than the degree of villous atrophy must account for diarrhoea in coeliac disease.  相似文献   

19.
补阳还五汤注射液对脑梗死体积和脑电图的影响   总被引:3,自引:0,他引:3  
目的:评价补阳还五汤注射液对脑梗死的治疗效果。方法:40只Wistar大鼠用线栓法造成大脑中动脉供血区梗死模型后,随机分为对照组和补阳还五汤组,每组20只。分别评价神经功能缺损评分、梗死灶体积和脑电图的改变。结果:补阳还五汤注射液能减少梗死灶体积,减轻神经功能缺损程度,增加梗死侧脑电图波幅。结论:补阳还五汤注射液是一种值得进一步研究的治疗脑梗死的药物。  相似文献   

20.
G. Rock 《Vox sanguinis》2011,100(2):169-178
Introduction Current methods for pathogen inactivation of plasma involve four major processes using solvent–detergent (SD), methylene blue (MB), amotosalen and riboflavin as additives. Three of these methods involve the use of visible or ultraviolet light. Methods A comparison of the four methods was made using publications in Medline, Pubmed, Embase and Biosis to obtain data on the logistics of use, the quality of the plasma proteins and the effectiveness of pathogen inactivation. Results Three of the methods, MB, amotosalen and riboflavin, are designed for use in a blood bank; the SD method is generally applied at a centralized manufacturing centre and involves large plasma pools. All methods result in a reduction in protein values with the per cent retention of FVIII activity in the range of 67–78% and fibrinogen of 65–84%. Protein S and alpha2‐antiplasmin are lower following solvent–detergent treatment. Alterations in fibrinogen structure have been reported with methylene blue. Discussion Three of the methods are designed for small volume use in a blood bank. All four methods have some effect on the coagulant proteins; however, the final concentrations are within regulated limits. While there is variability in the effectiveness against pathogens, direct comparison is difficult because of the methodologies used. Nonetheless, all are effective in inactivating HIV and other lipid‐enveloped pathogens. Clinical studies on the effectiveness of these products are surprisingly sparse, and no randomized clinical trials have yet been performed with amotosalen or riboflavin plasmas.  相似文献   

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