IL-1β导致的免疫凋亡在2型糖尿病发病中的作用

白细胞介素(IL)-1β足导致1型和2型糖尿病β细胞凋亡的关键细胞因子。高血糖、肥胖、脂代谢紊乱等是2型糖尿病中影响IL-1β升高的主要因素，其中诱导凋亡的机制涉及一氧化氮合酶、核因子κB等信号转导途径。深人研究IL-1β在2型糖尿病发病中的作用，从免疫学的角度研究2型糖尿病的发生、发展，将有助于开发防治2型糖尿病的新药。     

黄连素抑制JNK激酶活性缓解Aβ_(1～42)诱导的细胞凋亡

目的探讨黄连素(BR)能否缓解Aβ1~42诱导的细胞凋亡及其可能机制。方法在人胚肾细胞-293(HEK293)稳定转染转Aβ前体蛋白(APP)的细胞系(HEK293/APP)中给予不同浓度聚集状Aβ1~42处理,研究Aβ1~42的细胞毒性。HEK293/APP细胞预先给予20μg/ml的黄连素24 h处理后给予Aβ1~42处理12 h。通过CCK8检测细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡,Western印迹检测蛋白变化。结果 BR能够显著改善HEK293/APP细胞由Aβ1~42所诱导的细胞毒性和凋亡(P0.05),抑制JNK和Caspase-3的激活(P0.05)。结论 BR能够缓解Aβ1~42诱导的凋亡,其可能机制是通过抑制JNK激活进而抑制Caspase-3的活化来对抗凋亡。     

K+通道阻断剂四乙胺对小鼠胰岛β细胞凋亡的影响

目的研究K 通道阻断剂四乙胺(TEA)对胰岛β细胞凋亡的影响。方法以γ干扰素(IFNγ) 白细胞介素1β(IL1β)或链脲佐菌素(STZ)作用于小鼠胰岛细胞(NIT细胞),同时加入TEA,通过AnnexinV碘化丙啶(PI)、PI、Rhodamine123染色,采用流式细胞仪检测细胞凋亡与细胞膜电势;用MTT法检测细胞活性。结果IFNγ IL1β或STZ可明显诱导NIT细胞凋亡,诱导组细胞存活率、凋亡率与未诱导组及TEA组差异均有统计学意义(均P<0.01);TEA能抑制诱导的NIT细胞凋亡(均P<0.01)。结论胰岛β细胞凋亡过程中可能也存在K 外流现象,K 通道在胰岛β细胞的凋亡中可能起着重要作用;TEA可抑制凋亡刺激剂诱导的胰岛β细胞凋亡,其效应可能与阻止K 外流有关。     

原花青素对β-淀粉样肽(25-35)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的 探讨原花青素(pmcyanidins，PC)对β-淀粉样肽(25-35)[βamyloid pepfide-(25-35)，Aβ25-35]诱导PC12细胞凋亡的保护作用。方法 采用MTT比色法分析细胞存活率，Hoechst 33258-PI荧光染色法检测凋亡，流式细胞仪检测分析细胞凋亡率变化情况。结果 不同剂量PC预处理PC12细胞1h可剂量依赖性对抗Aβ25-35引起的PC12细胞凋亡，提高细胞的存活率，减少Aβ25-35引起的核固缩、凝聚和碎裂，降低细胞凋亡率。结论 PC可剂量依赖性对抗Aβ25-35对PC12细胞的毒性作用。     

IL-1β参与调控BCG感染RAW264.7细胞凋亡的研究北大核心CSCD

目的白细胞介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)属多肽类生长因子,主要由单核细胞和巨噬细胞分泌。IL-1β可参与细胞分化、增殖等多种细胞的生命活动,并参与调控细胞凋亡过程。本研究旨在探讨IL-1β参与卡介苗(Bacillus Calmette-Guerin,BCG)诱导的小鼠巨噬细胞RAW264.7凋亡作用及其机制。方法设计并合成IL-1β的小干扰RNA(si-IL-1β),转染小鼠巨噬细胞RAW264.7后并用BCG感染,采用MTT法检测RAW264.7细胞存活率,ELISA法检测细胞培养液上清中IL-1β的分泌水平,DCF法检测细胞内ROS水平,AnnexinV-FITC/碘化丙啶(propidine iodide,PI)双荧光染色法结合流式细胞仪检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR和Western blot法检测凋亡相关因子Caspase3、Bad、Bax以及Mcl-1蛋白及其基因(mRNA)的表达。结果 BCG感染巨噬细胞24 h后,IL-1β表达水平极显著上调,并且呈时间梯度依赖性(P<0.01);同时,与对照相比,BCG感染后巨噬细胞存活率下降,约为33%,而凋亡率显著上调到58.56%(P<0.01),并且凋亡关键调控因子Caspase3、Bad、Bax的mRNA及蛋白表达水平显著上调(P<0.01),而抑凋亡蛋白Mcl-1的表达水平显著下调(P<0.01),细胞内ROS富集(P<0.05),而si-IL-1β处理可显著逆转由BCG诱发的细胞凋亡、ROS含量富集及凋亡相关蛋白表达水平上调等。结论 BCG可诱导细胞内IL-1β的表达;IL-1β通过上调促凋亡蛋白Bad、Bax表达,下调抑凋亡蛋白Mcl-1表达,上调细胞内ROS的表达并参与调控BCG诱导的巨噬细胞RAW264.7细胞凋亡。这为阐明IL-1β在BCG诱导的细胞凋亡中的作用奠定了分子基础。     

1型糖尿病和β细胞凋亡

1型糖尿病是以胰岛 β细胞破坏为特征 ,由T细胞介导的自身免疫性疾病 ,β细胞凋亡在其发病中起一定的作用 ,Fas FasL系统参与 β细胞凋亡。Fas由死亡诱导信号复合物 (DISC)或前配体结合聚集区 (PLADS)作用途径形成三聚体来传递凋亡信号。由浸润的T淋巴细胞、巨噬细胞等分泌的细胞因子包括白介素 (IL) 1β、肿瘤坏死因子 (TNF) α、干扰素 (IFN) γ直接或间接通过诱导一氧化氮 (NO)合酶产生高浓度NO而对β细胞起破坏作用。对于 β细胞破坏机制的研究可能为 1型糖尿病的防治提供新的措施。     

胰高血糖素样肽1抑制胰岛β细胞凋亡的研究进展

随着对糖尿病基础研究的不断深入，发现β细胞凋亡在糖尿病的发病中起着重要作用。抑制或延缓β细胞凋亡可能会有效预防或治疗糖尿病。近年来研究发现胰高血糖素样肽1（GLP-1）具有抗β细胞凋亡的作用。本文就GLP-1和胰岛β细胞凋亡的研究进展作一综述。     

Exendin-4与β细胞功能

胰岛β细胞的数目减少和（或）分泌功能障碍是导致2型糖尿病发病的中心环节。β细胞凋亡异常增多及β细胞分裂、增殖和分化障碍是导致β细胞数目减少的重要原因。有效抑制β细胞凋亡，增加2型糖尿病患者β细胞总量，将为2型糖尿病防治开辟新途径。因此，减少β细胞凋亡、促进β细胞的增生、分化，增加β细胞数量的治疗方法将成为糖尿病研究领域的重点。近年研究发现胰升糖素样肽1（GLP-1）和Exendin-4（Ex-4）能够刺激β细胞新生和增生、抑制β细胞凋亡，从而增加胰岛β细胞数量，促进胰岛素合成及分泌。于是，GLP-1和Ex-4成为糖尿病治疗研究的新热点。本文就Ex-4对胰岛β细胞功能影响的研究进展作一综述。     

NF-κB和糖尿病β细胞凋亡

核因子κB(NF-κB)通过促进细胞因子、活性氧簇和Fas相关基因的表达介导的β细胞凋亡，可以诱发1型糖尿病。阻断依赖NF-κB的信号通路，对抗β细胞凋亡，能为糖尿病(特别是1型糖尿病)的防治提供新的手段。     

蛋白激酶B信号通路的干预在慢性脑低灌注大鼠中的作用及对海马细胞凋亡的影响

目的探讨蛋白激酶B/糖原合成酶激酶3β(Akt/GSK3β)信号通路是否参与慢性脑低灌注(CCH)大鼠海马细胞凋亡过程。方法选择SD大鼠60只,随机分为假手术组、CCH组、LY294002组、胰岛素样生长因子1(IGF-1)组,每组15只,后3组制作大鼠CCH模型,LY294002组和IGF-1组分别以抑制剂LY294002及激动剂IGF-1进行干预。采用TUNEL检测海马细胞凋亡;Western blot法检测Akt、GSK3β、磷酸化Akt(P-Akt)和磷酸化GSK3β(P-GSK3β)表达。结果与假手术组比较,CCH组、LY294002组及IGF-1组细胞凋亡水平均升高(P<0.05);与CCH组比较,LY294002组细胞凋亡数明显增高(20.33±1.52 vs 15.00±1.00,P<0.05),而IGF-1组细胞凋亡数降低(12.00±1.73 vs 15.00±1.00,P<0.05)。与假手术比较,CCH组和IGF-1组P-Akt,P-GSK3β均明显增高(P<0.05),而LY294002组无明显变化(P>0.05);与CCH组比较,IGF-1组P-Akt,P-GSK3β表达量均升高(P<0.05);LY294002组均降低(P<0.05)。结论 Akt/GSK3β信号通路参与CCH大鼠海马细胞凋亡过程,上调该通路Akt与GSK3β这2种蛋白的磷酸化表达水平,可能是拮抗这种细胞凋亡方式之一。     

白藜芦醇对白细胞介素-1β诱导的软骨细胞凋亡及增殖能力的影响

目的通过体外培养兔软骨细胞,研究白藜芦醇对重组人白细胞介素-1β(rh IL-1β)诱导体外骨关节炎(OA)软骨细胞凋亡及增殖能力的影响。方法采用分阶段酶消化法体外培养兔软骨细胞,加入不同浓度白藜芦醇含药血清,1 h后,以10 ng/ml IL-1β刺激,24 h后,通过TUNEL法和Hoechst 33342荧光染色检测软骨细胞凋亡;以MTT和流式细胞仪检测细胞增殖能力。结果白藜芦醇能明显抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,呈剂量依赖性;MTT和流式细胞仪检测显示白藜芦醇能恢复OA软骨细胞的增殖能力。结论白藜芦醇可以抑制IL-1β诱导的软骨细胞凋亡,并能明显拮抗IL-1β对软骨细胞增殖的抑制。     

1型糖尿病和β细胞凋亡

1型糖尿病是以胰岛β细胞破坏为特征，由T细胞介导的自身免疫性疾病，β细胞凋亡在其发病中起一定的作用，Fas-FasL系统参与β细胞凋亡。Fas由死亡诱导信号复合物（DISC）或前配体结合聚集区（PLADS）作用途径形成三聚体来传递凋亡信号。由浸润的T淋巴细胞、巨噬细胞等分泌的细胞因子包括白介素（IL）－1β、肿瘤坏死因子（TNF）－α、干扰素（IFN）－γ直接或间接通过诱导一氧化氮（NO）合酶产生高浓度NO而对β细胞起破坏作用。对于β细胞破坏机制的研究可能为1型糖尿病的防治提供新的措施。     

β淀粉样蛋白1～42促进U87细胞凋亡作用的研究

目的研究重组人β淀粉样蛋白(Aβ)1~42对人神经胶质瘤细胞U87毒性作用机制。方法用MTT检测代谢率,倒置显微镜、投射电镜以及流式细胞术技术研究Aβ1~42对U87细胞的损伤作用机制。结果用Aβ1~42处理U87细胞24 h后,Aβ1~42剂量依赖性地引起U87细胞的MTT代谢率减少。倒置显微镜及透射电镜观察发现经Aβ1~42处理的U87细胞表现出凋亡细胞的特征。流式细胞仪检测表明10、20、50μmol/L的Aβ1~42组U87细胞的凋亡率分别为35.6%,42.2%,58.1%。结论 Aβ1~42致U87细胞发生损伤主要是通过细胞凋亡的途径。     

Aβ_(1~42)海马注射致大鼠海马细胞凋亡作用及黄精多糖干预的作用

目的探讨Aβ1~42海马直接注射对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马细胞的影响及黄精多糖干预的作用。方法用SD雄性大鼠作为研究对象,采用Aβ1~42海马直接注射,用16%黄精多糖溶液连续灌胃45 d干预。采用TUNEL法检测海马组织神经细胞凋亡的表达。观察Aβ及黄精多糖干预对上述指标的影响。结果注射组海马组织细胞出现明显的细胞凋亡,黄精多糖干预组(PP组)海马TUNEL阳性神经细胞数目(74.20±1.58)个比模型组(Aβ组)(107.87±1.25)个明显减少。结论 Aβ海马注射可以引起大鼠海马组织细胞凋亡。黄精多糖可显著改善AD大鼠海马的细胞凋亡。     

NF-κB和糖尿病β细胞凋亡

核因子κB(NF-κB)通过促进细胞因子、活性氧簇和Fas相关基因的表达介导的β细胞凋亡,可以诱发1型糖尿病。阻断依赖NF-κB的信号通路,对抗β细胞凋亡,能为糖尿病(特别是1型糖尿病)的防治提供新的手段。     

肥胖型2型糖尿病OLETF鼠胰岛β细胞凋亡在发病中的意义

目的　了解肥胖型 2型糖尿病 OL ETF鼠胰岛β细胞是否存在凋亡及β细胞凋亡与糖尿病发生发展的关系。　方法　 OL ETF及对照鼠 L ETO各 2 0只 ,胰腺切片用 HE染色和 TU NEL方法观察胰岛β细胞凋亡的情况。　结果　 (1) OL ETF鼠糖尿病发病率为 95 % ,L ETO未发生糖尿病。 (2 )仅在 OL ETF鼠胰腺切片中观察到凋亡的β细胞数目增高的现象。 (3)各周龄 OL ETF鼠胰岛β细胞凋亡的百分数明显高于 L ETO鼠 (P=1.2 6× 10 - 1 7)。 (4) OL ETF鼠胰岛β细胞凋亡的百分数在糖尿病发病后 4周较糖尿病发病前增高。　结论　 OL ETF鼠胰岛β细胞在糖尿病发病前存在高水平的凋亡 ,糖尿病发病后进一步增高     

脑室应用β-淀粉样蛋白对大鼠脑细胞凋亡的影响

目的通过脑室应用β-淀粉样蛋白(βAP)能否诱发脑细胞凋亡以探讨弥散性βAP是否具有神经毒性.方法成年大鼠随机分为两组,一组双侧脑室各注射Aβ1-42 5 μl(各30 nmol),另一组注射同体积的生理盐水,饲养1 w后,取脑组织以荧光细胞核染色技术、透射电子显微镜及TUNEL(TdT-mediated dUTP nick end labeling)法观察凋亡细胞.结果βAP组大鼠脑组织凋亡细胞明显多于对照组(P<0.01).结论弥散性βAP具有神经毒性作用,脑细胞凋亡为其表现之一.     

转化生长因子-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响

目的:探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡的影响。方法:采用大鼠颈部心脏移植模型,随机分为3组:对照组、移植组、TGF-β1组,分别于术后第1、3、5、7天各取4只移植心脏,原位末端标记(TUNEL)法染色检测心肌细胞凋亡,以心肌细胞凋亡阳性细胞数占总心肌细胞数的百分比作为心肌细胞凋亡指数(AI)。用免疫组化方法观察Bcl-2、Bax的表达情况。结果:移植组心肌细胞于术后第1天即出现凋亡,第3天明显增加,第7天达高峰。TGF-β1组各时间点心肌细胞AI明显小于对应的移植组(均P<0.01)。与移植组相比,TGF-β1组心肌细胞Bax表达明显降低(P<0.01)。结论:TGF-β1对心脏移植排斥反应中心肌细胞凋亡有显著抑制作用,可能与其下调Bax表达,提高Bcl-2/Bax比值有关。     

聚肌胞对人脐血内皮祖细胞增殖和凋亡的影响及其机制

目的观察Toll样受体3(TLR3)的配体聚肌胞(Poly I∶C)对人脐血内皮祖细胞(EPC)增殖、凋亡的影响并阐明其具体机制。方法采用不同浓度的聚肌胞持续干预EPC,通过流式细胞术检测聚肌胞对EPC细胞周期时相分布及细胞凋亡的影响。利用CCK-8细胞增殖试验分别检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)对细胞凋亡的影响,以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶Caspase 8、Caspase 9的抑制剂、IL-1β受体的中和抗体对聚肌胞诱导EPC凋亡的作用。结果与对照组相比,较高浓度的聚肌胞(1、10 g/L)显著减少S期和G2/M期细胞比例,并通过下调细胞周期蛋白A、B1、D1、E的表达阻滞细胞周期于G0/G1期;同时聚肌胞还呈剂量依赖性诱导EPC凋亡。Caspase 8和Caspase 9的抑制剂并不能抑制聚肌胞诱导的细胞凋亡;TNF-α对EPC的凋亡率无影响;IL-1β呈剂量依赖性诱导EPC凋亡;而使用IL-1β受体的中和抗体anti-IL-1R1预先封闭IL-1β的结合位点后,再加入聚肌胞干预,结果发现高浓度的anti-IL-1R1可以部分抑制聚肌胞诱导的细胞凋亡。结论高浓度的聚肌胞通过将细胞周期阻滞于G0/G1期并诱导细胞凋亡从而抑制EPC增殖。聚肌胞活化TLR3后通过上调IL-1β的表达诱导EPC凋亡,而内、外源性细胞凋亡途径及TNF-α均不参与聚肌胞诱导的细胞凋亡。     

NF-κB和糖尿病β细胞凋亡

核因子κB(NF-κB)通过促进细胞因子、活性氧簇和Fas相关基因的表达介导的β细胞凋亡,可以诱发1型糖尿病.阻断依赖NF-κB的信号通路,对抗β细胞凋亡,能为糖尿病(特别是1型糖尿病)的防治提供新的手段.