DNA甲基转移酶3A基因在胃癌中的表达及其临床意义

目的 研究DNA甲基转移酶3A（DNMT3A）在天津汉族人群胃癌（GC）组织中的表达,并分析DNMT3A的表达与胃癌临床病理因素之间的关系,探讨其在胃癌发生发展中的作用.方法 用免疫组织化学法检测DNMT3A在130例胃癌组织及256例胃炎组织中的表达,将两者进行对比并分析其与胃癌临床病理之间的关系.结果 DNMT3A蛋白在胃癌组织中的阳性细胞表达率（78.4％）明显高于胃炎组织的表达率（64.4％）,两者间比较差异有统计学意义（P＜0.05）.DNMT3A蛋白的异常表达与胃癌患者年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度无明显相关,与组织分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关（P＜0.05）.结论 在胃癌组织中,DNMT3A蛋白呈高表达状态,并与肿瘤组织分化、淋巴结转移及TNM分期有关,DNMT3A的高表达可能与胃癌的发生、发展有关,且可能是胃癌发生的早期诊断指标.     

DNA甲基转移酶3b在人胰腺癌组织中的表达及其意义

目的 检测人胰腺癌组织中DNA甲基化转移酶3b( DNMT3b)的表达,分析其与肿瘤临床病理特征的相关性.方法 应用蛋白质印迹法检测12例配对人胰腺癌和癌旁组织中DNMT3b的表达;免疫组织化学法检测59例胰腺癌组织中DNMT3b的表达,并分析其与肿瘤临床病理特征的相关性结果 蛋白质印迹法结果显示,胰腺癌及癌旁组织DNMT3b蛋白表达量分别为0.69 ±0.13和0.14 ±0.03,癌组织的表达量明显高于癌旁组织(t=4.464,P＜0.05).免疫组化结果显示,胰腺癌组织DNMT3b阳性高表达率为59％,癌旁组织阴性表达.肿瘤组织DNMT3b表达强度与TNM分期和淋巴结转移相关.结论 DNMT3b在胰腺癌组织中高表达,其表达与肿瘤的恶性生物行为有关.     

DNA甲基转移酶1蛋白在人胃癌黏膜组织中的表达及其临床意义

背景：肿瘤组织存在DNA甲基化紊乱．包括与细胞增殖周期密切相关的癌基因低甲基化和抑癌基因高甲基化等。DNA甲基转移酶（Dnmt）参与甲基化的形成（主要是Dnmt3a和Dnmt3b）和维持（主要是Dnmt1），但目前对胃癌Dnmt蛋白的表达情况仍知之甚少，更缺乏其与肿瘤生物学行为和临床参数关系的研究。目的：探讨癌区、癌旁和外周正常黏膜组织中Dnmt1蛋白表达的差异及其临床意义。方法：收集38例胃癌患者标本，取癌区、癌旁和外周正常黏膜组织各1．2块，应用免疫组化SP法分析各黏膜组织中Dnmt1蛋白的表达．并探讨其与胃癌浸润和转移的关系。结果：在38例胃癌黏膜组织中，Dnmt1蛋白的表达阳性率为81．6％，显著高于相应癌旁（39．5％）和正常黏膜组织（10．5％）（P〈0．001）。阳性切片中可见Dnmt1蛋白表达弥散分布于肿瘤或腺体的细胞质和细胞核，染色较均匀。Dnmt1蛋白表达与胃癌患者的年龄、肿瘤分化程度和有无淋巴结转移无明显相关性（P〉0．05），与性别呈一定的相关性（P=0．007）。结论：Dnmtl蛋白过表达在人胃癌的发生和发展中起一定作用。     

DNA甲基转移酶1在胰腺癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)在胰腺癌组织中的表达及其临床意义.方法 收集手术切除的30例胰腺癌组织和配对癌旁组织.采用实时定量PCR法检测DNMT1 mRNA的表达;免疫组织化学法检测DNMT1蛋白的表达;分析胰腺癌组织DNMT1蛋白表达强度与临床病理参数之间的关系.结果 胰腺癌组织中DNMT1 mRNA的表达量为2.32(1.17～5.17),显著高于配对癌旁组织的0.78(0.07～3.14,P＜0.05).胰腺癌组织中导管细胞DNMT1蛋白表达阳性率为(54.5±21.2)%,显著高于癌旁组织(10.9±15.0)%的表达阳性率(P＜0.01).以胰腺癌导管细胞DNMT1阳性率54.5%为界,分为高表达组(19例)和低表达组(11例).DNMT1表达强度和临床分期(x2=6.897,P=0.029)、淋巴结转移(x2=4.739,P=0.029)、神经浸润与否(x2=5.44,P=0.020)相关,而与年龄、性别、肿瘤位置、肿瘤大小、肿瘤分化、血清CEA和CA19-9浓度无关.结论 胰腺癌组织DNMT1 mRNA和蛋白表达明显增加,DNMT1蛋白表达强度与胰腺癌的侵袭力、淋巴结转移和神经浸润相关.     

DNA甲基转移酶3b和microRNA-29b在胰腺癌细胞株中的表达及其相关性

目的 明确胰腺癌细胞株甲基转移酶( DNMT)3b和microRNA-29b(miR-29b)的表达,分析两者的相关性.方法 应用实时定量PCR法检测人胰腺癌细胞株PANC1、BxPC3、CFPAC、AsPC-1、Capan-2的DNMT3b mRNA和miR-29b表达.采用Pearson直线相关分析法分析两者表达量的相关性.结果 PANC1、BxPC3、CFPAC、AsPC-1、Capan-2的DNMT3b mRNA相对表达量分别为0.497±0.184、0.420±0.168、0.439±0.217、0.122 ±0.111和0.731±0.387;miR-29b的相对表达量分别为0.745±0.596、0.464±0.430、0.797±1.000、1.836±1.623和0.216 ±0.335,DNMT3b mRNA的表达量和miR-29b的表达量呈负相关关系(r=-0.922,P=0.026).结论 DNMT3b和miR-29b均参与了胰腺癌的发生发展,两者呈负相关关系.     

miR-145在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨微小RNA-145(miR-145)在胃癌中的表达及与临床病理特征和预后的关系.方法:收集62例胃癌患者肿瘤组织和配对癌旁组织标本,采用实时荧光定量-聚合酶链反应(q RT-PCR)方法检测miR-145的相对表达量,并分析其与临床病理资料和预后的关系.生存分析采用Kaplan-Meier法,并以Log-rank法比较组间差异,应用Cox模型进行多因素分析.结果:miR-145在胃癌组织中的表达水平显著低于配对癌旁组织(P0.01).miR-145的表达水平与临床分期、浸润深度及淋巴结转移呈明显相关(P0.05),与患者的年龄、性别、肿瘤大小、分化程度、民族均无明显相关(P0.05).miR-145高表达者生存时间明显高于低表达组(P0.05).多因素分析未显示单一的因素与患者的生存相关.结论:miR-145在胃癌组织中呈低表达,且与预后相关,可能参与了胃癌的发生、发展过程,可成为胃癌诊断及预后判断的指标.     

Bmi-1在胃癌中的表达及其意义

目的探讨Bmi-1在胃癌和癌旁组织中的表达水平及其与临床病理特征的关系，初步评价Bmi-1在胃癌发生、发展中的作用及其意义。方法收集20例胃癌患者的癌组织和癌旁组织，采用Western印迹法和RT-PCR检测Bmi-1表达。同时收集2002-2004年146例有3年以上完整随访资料的胃癌术后患者，采用免疫组化法对手术标本进行染色，检测Bmi-1蛋白表达。结果Western印迹和RT-PCR结果均显示，胃癌组织中Bmi-1表达水平明显高于癌旁组织。免疫组化分析也表明，Bmi-1蛋白在胃癌中阳性表达率为67．8％（99／146）。Bmi-1的表达与胃癌大小、临床分期、淋巴结转移和浸润深度密切相关（P〈0．05），而与患者性别、年龄、肿瘤分化程度等无关（P〉0．05）。结论Bmi-1在胃癌组织的表达状态与胃癌生长和浸润转移关系密切，可作为反映胃癌生物学行为的有效指标。     

DNA甲基转移酶1和组蛋白脱乙酰基酶1在胰腺组织中的表达及其临床意义

背景：近年针对DNA甲基化和组蛋白乙酰化修饰的表观遗传学研究是探索胰腺癌发生机制的新热点。目的：研究DNA甲基转移酶1（DNMT1）和组蛋白脱乙酰基酶1（HDAC1）在胰腺上皮内瘤变（PanIN）和胰腺癌组织中的表达．探讨其可能的临床意义。方法：以免疫组化SP法检测DNMT1、HDAC1在10例正常胰腺组织、39例证实含有PanIN的胰腺癌旁组织和54例胰腺导管腺癌（PDAC）组织中的表达。结果：DNMT1和HDAC1在胰腺组织中的阳性表达率均随组织异型程度的增加而逐渐增高，即正常胰腺导管（0％）〈PanIN—IA（7．2％±1．2％，10．7％±5．0％）〈PanIN-1B（24．5％±9．6％，40．1％±8．0％）〈PanIN-2（30．0％±11．9％，51．2％±13．4％）〈PanIN-3（46．7％±11．2％，73．1％±11.3％）〈PDAC（56．7％±27．5％，82．5％±19.4％），差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：DNMT1和HDAC1表达增强是胰腺癌发生的早期事件．两者共同促进了胰腺癌的进展，可能成为胰腺癌早期诊疗的新靶点。     

甲基转移酶3B基因在胰腺癌中的表达

目的检测胰腺癌组织中甲基转移酶3B（DNMT3B）基因表达,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系。方法应用实时定量PCR和免疫组织化学方法检测42例胰腺癌组织及相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中DNMT3B mRNA和蛋白表达。结果胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织DNMT3B mRNA表达量分别为9．4±5．9、1．02±0．71和0,相差非常显著（P〈0．05）;DNMT3B蛋白表达阳性率分别为83．3％、14．3％和10．0％,相差也非常显著（P〈0．01）。DNMT3B mRNA表达与临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关（P〈0．05或P〈0．01）;DNMT3B蛋白表达与肿瘤的部位、淋巴结转移有关（P〈0．01或P〈0．05）;DNMT3B mRNA和蛋白表达均与年龄、性别、神经浸润、肿瘤大小、血CEA和CA19—9浓度无关。结论胰腺癌DNMT3B mRNA和蛋白高表达提示胰腺癌已发生淋巴结转移,预后较差。     

甲基转移酶3B基因在胰腺癌中的表达

目的 检测胰腺癌组织中甲基转移酶3B(DNMT3B)基因表达,分析其与胰腺癌临床病理参数的关系.方法 应用实时定量PCR和免疫组织化学方法检测42例胰腺癌组织及相应癌旁组织、10例正常胰腺组织中DNMT3B mRNA和蛋白表达.结果 胰腺癌组织、癌旁组织和正常胰腺组织DNM33B mRNA表达量分别为9.4±5.9、1.02±0.71和0,相差非常显著(P<0.05);DNMT3B蛋白表达阳性率分别为83.3%、14.3%和10.0%,相差也非常显著(P<0.01).DNMT3B mRNA表达与I临床分期、肿瘤分化程度和淋巴结转移密切相关(P<0.05或P<0.01);DNMT3B蛋白表达与肿瘤的部位、淋巴结转移有关(P<0.01或P<0.05);DNMT3B mRNA和蛋白表达均与年龄、性别、神经浸润、肿瘤大小、血CEA和CA19-9浓度无关.结论 胰腺癌DNMT3B mRNA和蛋白高表达提示胰腺癌已发生淋巴结转移,预后较差.     

血管紧张素转移酶mRNA在胃癌中的表达

目的 定量分析血管紧张素转移酶(ACE)mRNA在胃癌组织和癌旁组织的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测34例胃癌组织及对应癌旁组织ACE mRNA表达水平,分析其与分化程度、临床分期和转移状态等临床病理特征的相关性.结果 ACE mRNA在胃癌组织中的表达显著高于癌旁组织(P=0.003).胃癌组织ACE mRNA表达与分化程度、临床分期和转移状态等临床病理特征无相关性(P＞0.05).结论 ACE mRNA在胃癌组织中呈明显高表达,提示其与胃癌的发病密切相关.     

Semaphorin6D在胃癌中的表达及其意义

目的:探讨Semaphorin6D在胃癌中的表达及其意义.方法:应用RT-PCR和Westenblot检测30例胃癌患者的癌组织及胃切缘正常胃黏膜Semaphorin6D的mRNA和蛋白表达.结果:胃癌组织中的Semaphorin6D蛋白及mRNA的表达明显高于胃正常黏膜(0.26±0.09vs0.20±0.10,P=0.0194;0.24±0.06vs0.19±0.07,P=0.013).结论:Semaphorin6D在胃癌发生、发展中发挥重要作用.     

人宫颈癌基因在胃癌中的表达及其意义

目的 探讨人宫颈癌基因(human cervical cancer oncogene,HCCR)在人胃癌组织和胃癌细胞株中的表达及其与临床病理特征的关系,初步评价HCCR在胃癌发生中的作用及其意义,为寻找胃癌新的诊断标志物另辟新径.方法 采用Western blot方法检测SGC-7901、BGC-823胃癌细胞系中HCCR蛋白表达;采用免疫组化法检测30例胃癌患者的癌组织和10例癌旁正常组织中HCCR蛋白表达.结果 HCCR蛋白在两种不同分化程度的胃癌细胞株中均有阳性表达;胃癌组织中HCCR阳性表达率为73.3%(22/30),其表达位于细胞的胞膜和胞质,10例癌旁正常组织均为阴性表达,两者差异具有统计学意义(P＜0.01).HCCR的表达与胃癌患者的年龄、性别、浸润深度、组织分型、肿瘤分化程度及有无淋巴结转移均无显著相关性(P＞0.05).结论 HCCR与胃癌的发生密切相关,可能是反映早期胃癌发生的重要生物学指标之一.     

Autotaxin基因在人胃癌中的表达及其意义

本研究采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (ＲＴ ＰＣＲ)检测Ａｕｔｏｔａｘｉｎ(ＡＴＸ)ｍＲＮＡ在胃癌中的表达 ,分析其表达水平与胃癌临床病理特征的关系 ,探讨ＡＴＸ基因表达在判断胃癌浸润、转移及预后中的意义。材料和方法一、实验材料人胃癌标本取自 1999年 1～ 8月在南京医科大学南京第一医院外科手术切除 ,经病理组织学证实的胃癌患者 ,共36例。男 2 2例 ,女 14例 ;年龄为 30～ 79岁 ,<6 0岁 15例(平均 49.9岁 ) ,≥ 6 0岁 2 1例 (平均 6 7.9岁 ) ;肿瘤 <3ｃｍ 15例 (平均 2 .4ｃｍ) ;≥ 3ｃｍ 2 1例 (平均 4.3ｃｍ) ;分化程度 :高分…     

miR-25在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨miR-25在胃癌组织中的表达及与临床病理因素和预后之间的关系.方法 用茎-环RT-qPCR检测86例胃癌组织和20例正常胃组织中miR-25的表达情况,分析miR-25的表达与胃癌临床病理特征和预后的关系.结果 茎-环RT-qPCR能特异扩增miR-25.miR-25在胃癌组织中的表达量高于正常胃组织(7.495±1.073vs 1.083±0.126,P＜0.001);在有淋巴结转移的胃癌组织中的表达高于无淋巴结转移的胃组织(8.589±0.964 vs 5.649±1.257,P ＜0.001);在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期胃癌组织中的表达高于Ⅰ～Ⅱ期(8.117±1.002vs 6.273±1.215,P＜0.001).miR-25高表达组的中位生存期和3年生存率低于miR-25低表达组(34.9个月vs 43.8个月,38.7％ vs66.2％,P=0.006).结论 胃癌组织高表达miR-25,miR-25可能是胃癌的诊断、预后判断标志和治疗靶标.     

蛋白激酶B在胃癌中的表达及其生物学意义

目的研究丝氨酸／苏氨酸蛋白激酶（Akt）在胃癌中的表达、活化情况及其与血管内皮生长因子C（VEGF—C）的关系，以初探Akt表达和活化的生物学意义及其可能的机制。方法采用RT—PCR法检测20例新鲜胃癌及癌旁正常组织标本中Akt1、Akt2和Akt3 mRNA的表达；Western印迹法检测Akt和磷酸化Akt（pAkt）蛋白的表达；免疫组化检测pAkt蛋白和VEGF-C在55例胃癌配对组织中的原位表达。结果20例胃癌及相应癌旁正常组织中Akt1、2、3mRNA的表达阳性率皆为100％，且三者在癌和正常组织中的表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹显示Akt蛋白在胃癌组织中的表达水平为正常组织的2．7倍（P〈0．001），而pAkt蛋白的表达水平为癌旁正常组织的4．1倍（P％0．01）。免疫组化分析表明，pAkt表达于67．3％（37／55）的胃癌组织，且较高表达于组织分化较差（X^2=9．751，P％0．01）和TNM分期较晚（X^2=7．684，P〈0．05）者；VEGF—C在胃癌组织中的表达阳性率为61．8％（34／55），其表达与肿瘤的TNM分期（X^2=9．298，P〈0．01）及淋巴结转移（X^2=7．605，P〈0．05）密切相关，统计分析表明，pAkt与VEGF—C的表达呈显著性正相关（Pearson r=0．524，P〈0．05，Spearman，rho=0．747，P〈0．01）。结论Akt及pAkt蛋白特异性过表达于胃癌组织，可能是蛋白翻译水平和（或）代谢水平改变的结果。Akt蛋白的磷酸化可能促进胃癌细胞的恶性转化和淋巴结转移，VEGFC可能在其中发挥重要的介导作用。     

DNA甲基转移酶1和3A在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理的关系

目的:探讨DNA甲基转移酶1(DNMT1)和DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)在结直肠正常组织、腺瘤、腺癌中的表达,及其可能的临床病理意义.方法:以免疫组织化学SP法检测DNMT1和DNMT3A在正常结直肠组织、腺瘤、腺癌中的表达.通过计算染色指数(SI),评估两者的表达水平与年龄、肿瘤大小、分期、分化等临床病理特征之间的关系.采用Kaplan-Meier法进行生存分析.结果:DNMT3A在正常组织和腺瘤中表达明显低于癌组织(SI:10.5±5.7vs20.2±9.9,P<0.05).DNMT1在三者中的表达呈递增趋势,SI分别为10.3±2.7、14.7±6.8、20.1±9.1.淋巴结转移病例DNMT1表达高于未转移病例(18.1±7.9vs12.0±6.3,P<0.05),浸润深度超过肌层病例DNMT1和DNMT3A表达高于未超过肌层病例,差异均有统计学意义(20.1±10.1vs15.8±7.9;19.9±8.5vs15.4±4.7,均P<0.05).结论:DNMT1和DNMT3A是结直肠癌发生的早期事件,两者共同促进结直肠癌的发生发展,可能成为结直肠癌治疗的新靶点.     

mTOR信号通路抑制剂和DNA甲基转移酶抑制剂对人胃癌细胞株Syk表达的影响

背景：哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（roTOR）信号途径和DNA甲基化均参与肿瘤的发生、发展。脾酪氨酸激酶（Syk）是一种候选抑癌基因,与肿瘤发生有关。目的：研究mTOR信号通路抑制剂和DNA甲基转移酶抑制剂对人胃癌细胞株Syk表达的调控作用。方法：分别单独或联合应用mTOR抑制剂雷帕霉素（RAPA）、DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷（5-Aza—dC）、磷脂酰肌醇-3-激酶／丝苏氨酸蛋白激酶（P13K／Akt）抑制剂LY294002干预人胃癌细胞株MKN45和SGC7901,以细胞计数法检测细胞增殖能力,实时定量PCR法检测Syk表达情况,亚硫酸氢盐修饰后测序法检测DNA甲基化改变。结果：单独应用5-Aza—dC对细胞增殖抑制不明显,与RAPA、LY294002联合则显著抑制细胞增殖。单独应用5-Aza-dC可通过抑制DNA甲基化上调胃癌细胞的Syk表达,联合应用5-Aza—dc、RAPA和LY294002则显著上调Syk表达,但未进一步抑制DNA甲基化。结论：抑制mTOR信号通路可间接增强DNA甲基转移酶抑制剂上调Syk表达,从而抑制胃癌细胞生长。     

HIF-1α在胃癌组织中的表达及其意义

目的 探讨缺氧诱导因子-1α( HIF-1α)在胃癌组织中的表达及其意义.方法 选择120例胃癌标本(胃癌组)、68例正常胃黏膜组织(对照组),采用SP法检测两组HIF-1α的表达,并分析HIF-1α的表达与临床病理特征的关系.结果 胃癌组HIF-1α阳性表达率为70.83％,对照组不表达,两组比较P＜0.01.胃癌组中不同肿瘤分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移间HIF-1α阳性表达率差异均有统计学意义(P均＜0.01).结论 HIF-1α可作为评估胃癌发展、转移及预后的参考指标.