3-硝基丙酸诱导沙土鼠脑缺血耐受时海马区胶质纤维酸性蛋白的表达

目的　观察 3 硝基丙酸 (3 nitropropionicacid ,3 NPA)预处理后缺血再灌注不同时间海马区胶质纤维酸性蛋白(glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP)分布、表达的动态变化 ,探讨其与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受的关系。方法　阻断沙土鼠双侧颈总动脉造成前脑缺血模型 ,应用免疫组织化学方法观察星形胶质细胞的反应。结果　GFAP的分布随再灌注时间而变化 ,GFAP阳性星形胶质细胞在海马CA1区主要分布于多形细胞层、辐状层、腔隙层、分子层。 3 NPA预处理后脑缺血再灌注 3dGFAP表达增强 ,7、14d维持在较高水平 ,2 8d时有所下降 ,但与对照组比较仍保持在较高水平。结论　 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受中 ,GFAP的表达增强保持在较高水平 ,表明星形胶质细胞增生、活化可能与 3 NPA预处理诱导脑缺血耐受有关。     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达的影响,探讨星形胶质细胞活化在脑缺血耐受中的意义.方法 36只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为缺血预处理再缺血组、缺血组和对照组,每组12只,前2组分别在2 h大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)前3 d给予10 min的MCAO预处理或假手术,第2次MCAO后24 h处死,对照组仅给予2次间隔3 d的假手术.比较各组脑梗死体积、组织病理学变化和GFAP表达.结果 缺血预处理后再缺血组和缺血组梗死体积分别为(136.85±14.51)mm3和(281.37±29.93)mm3,前者较后者显著缩小53.15%(P=0.007);同时,缺血预处理再缺血组神经元变性坏死显著减轻,并伴有GFAP表达显著上调(2组免疫组化染色平均吸光度分别为102.66±8.39和86.28±6.19,P=0.009).结论 缺血预处理可诱导脑缺血耐受,促进GFAP表达,星形胶质细胞活化可能是脑缺血耐受产生的机制之一.     

缺血预处理对脑缺血再灌注大鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白表达的影响

Objective To observe the effect of focal cerebral ischemic preconditioning on the expression of glial fibrillary acidic protein (GFAP) and to investigate the significance of astrocyte activation in cerebral ischemic tolerance.Methods Thirty-six healthy male SpragueDawley rats were randomly divided into reischenmic,ischemic and control groups (n = 12 in each group) after ischemic preconditioning.The former two groups received 10 minutes middle cerebral artery occlusion (MCAO) preconditioning or sham operation 3 days before the 2-hour MCAO.The rats were killed 24 hours after the second MCAO.The control group only receivedthe two sham operations with an interval of three days.The infarct volume,histopathological changes,and GFAP expression in each group were compared.Results The infarct volume after ischemic preconditioning in the reischenmic and ischemic groups was 136.85 ± 14.51 mm3and 281.37 ± 29.93 mm3 respectively.The former was significantly reduced 53.15%compared to the latter (P =0.007).At the same time,neuronal degeneration and necrosis was reduced significantly,and GFAP expression was upregulated significantly (the mean absorbance for immunohistochemical staining in both groups was 102.66 ± 8.39 and 86.28 ± 6.19respectively,P = 0.009) after ischemic preconditioning in the reischemic group.Conclusions Focal ischemic preconditioning may induce brain ischemic tolerance and promote GFAP expression.The activation of astrocytes may be one of the mechanisms of cerebral ischemic tolerance.     

Humanin及衍生物对阿尔茨海默病小鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨Humanin(HN)及衍生物[Gly14]-humanin(HNG)在体内是否存在对实验性阿尔茨海默病(AD)小鼠的神经保护作用及可能的机制。方法选择健康雄性小鼠84只,随机分为假手术组(9只)、β淀粉样蛋白(Aβ)模型组(15只)、HN治疗组(30只)和HNG治疗组(30只)。HN组又分为10 μmol/L HN组和100μmol/LHN组,HNG组又分为10 nmol/L HNG组和100 nmol/L HNG组,4组均于3、7、14天应用免疫组织化学方法观察海马胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的变化。结果 HN治疗组和HNG治疗组3、7、14天GFAP阳性细胞的表达较假手术组和Aβ模型组均减少。3、14天100 μmol/L HN组GFAP阳性细胞数少于10 μmol/L HN组(P<0.05);3、7、14天100 nmol/L HNG组GFAP阳性细胞数少于10 nmol/L HNG组(P<0.05)。3天100 nmol/LHNG组GFAP阳性细胞数少于100μmol/L HN组(P<0.05)。结论在体内,HN和HNG可以减少因Aβ_(25-35),毒性引起的GFAP的表达,这种改变有时间及剂量依赖性,证实了它们具有神经保护作用。     

阿魏酸钠对反复前脑缺血再灌注大鼠海马及额叶胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的 探讨内皮素(ET)受体拮抗剂阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注后海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响.方法 双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑缺血再灌注模型,HE染色观察阿魏酸钠治疗前后海马CA1区神经元形态学改变,免疫组化法检测缺血再灌注后2、4、6 w海马和额叶胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达.结果 阿魏酸钠治疗组海马神经元缺失、变性、坏死较对照组轻,缺血再灌注后海马和额叶GFAP的表达随时间延长逐渐增多,阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多,较缺血再灌注组减少,差异显著(P<0.05).结论 大鼠前脑缺血再灌注后GFAP表达增多,阿魏酸钠能够降低其表达,对脑缺血性损伤具有保护作用.     

吡格列酮对脑缺血大鼠海马CA1区胶质纤维酸性蛋白和周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptor-γ,PPARγ)激动剂吡格列酮对脑缺血大鼠海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)和周期蛋白D1表达的影响.方法 54只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和吡格列酮干预组,每组18只.采用改良线栓法制作大鼠大脑中动脉闭塞再灌注模型.吡格列酮干预组在模型制作前连续5d吡格列酮灌胃(0.65 mg/kg,1次/d).在模型制作后1d、3d和7d时(每个时间点6只)处死大鼠取脑.HE染色观察海马CA1区神经元病理学变化.免疫组化染色法检测海马CA1区GFAP和周期蛋白D1表达.结果 缺血再灌注组海马CA1区神经元存活数量在缺血再灌注3d和7d时均较假手术组显著减少(P均＜0.01),GFAP和周期蛋白D1在各个时间点表达均较假手术组显著上调(P均＜0.01).吡格列酮干预组海马CA1区神经元存活数量在缺血再灌注3d和7d时均较缺血再灌注组显著增多(P均＜0.01),GFAP和周期蛋白D1在各个时间点表达均较缺血再灌注组显著下调(P均＜0.01).结论 PPARγ激动剂吡格列酮对脑缺血再灌注大鼠海马CA1区神经元具有明显的保护作用,其机制可能与抑制GFAP和周期蛋白D1表达有关.     

脑缺血后胶质纤维酸性蛋白表达的变化

胶质纤维酸性蛋白 (glialfibrillaryacidicprotein ,GFAP )是脑内星形胶质细胞 (astrocyte ,Ast)中间纤维的结构蛋白组成成分 ,由Eng等 (1971)首先从脑内星形胶质细胞中分离出来 ,逐渐被人们看做成熟和反应性星形胶质细胞的特征性标记物 ,Zilles(1991)将其作为全脑所有Ast的特异性免疫组化标记物〔1〕。GFAP在脑缺血后不同时间、不同脑区的表达有明显差异 ,反映了Ast活化程度不同。本文就脑缺血后GFAP的表达作一综述。1　GFAP的生物学特点GFAP是一种线性结构蛋白质 ,与波形蛋白、巢状蛋白一起组成Ast的中间纤维。人GFAP是由 43 …     

急性脑出血患者血清胶质纤维酸性蛋白含量及临床意义

目的研究急性脑出血患者血清中胶质纤维酸性蛋白(GFAP)含量及临床意义。方法采用ELISA法检测发病后1 d内脑出血患者(56例,脑出血组)及健康体检者(50例,对照组)血清GFAP含量,分析脑出血患者血清GFAP含量与美国国立卫生研究院脑卒中量表(NIHSS)、血肿体积、血肿周围水肿体积及预后之间的关系。结果脑出血组患者发病第1天血清GFAP含量明显高于对照组,差异有统计学意义[(9.41±2.17)ng/L vs (1.17±0.41)ng/L,P0.01];大量出血患者血清GFAP含量明显高于少量出血患者,差异有统计学意义[(16.08±3.61)ng/L vs (5.19±2.06)ng/L,P0.01];血清GFAP含量与NIHSS、血肿体积、血肿周围水肿体积及预后呈正相关(r=0.7912,0.4920,0.4870,0.8032,P0.01);ROC曲线分析,以血清GFAP含量4.5 ng/L为标准评估预后,敏感性为0.82,特异性为0.77。结论脑出血后血清GFAP含量增高,在一定程度上反映了患者的病情程度,有助于早期预后的评估。     

阿魏酸钠对大鼠脑白质胶质纤维酸性蛋白表达的影响

目的探讨阿魏酸钠对大鼠前脑缺血再灌注（I/R）后白质胶质纤维酸性蛋白表达的影响。方法双侧颈总动脉夹闭法制备大鼠前脑I/R模型。雄性Wistar大鼠45只，随机分为假手术组（n=15），I/R组（n=15），I/R阿魏酸钠治疗组（n=15），每组按I/R2、4、6w3个时间点再分为3组（n=5）。模型制备免疫组化法检测I/R后2、4、6w胼胝体、内囊和脑室周围GFAP的表达。结果I/R后胼胝体、内囊和脑室周围GFAP的表达随时间延长逐渐增多，阿魏酸钠治疗组GFAP的表达较假手术组多，较缺血再灌注组减少，6w差异最显著（P〈0.05）。结论大鼠前脑缺血再灌注后白质GFAP表达增多，阿魏酸钠对脑白质缺血性损伤具有保护作用，其机制可能与调节星形胶质细胞活化状态，减轻内皮素对血管损伤有关。     

血清tau蛋白和巨噬细胞炎性蛋白1α及胶质纤维酸性蛋白与高血压脑出血后血脑屏障的关系

目的 探究血清tau蛋白、巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)水平与高血压脑出血后血脑屏障损伤的关系。方法 纳入2020年8月至2022年12月阳光融和医院收治的高血压脑出血患者180例作为研究组,选取同期来我院体检的健康人群180例作为对照组。根据白蛋白商值(QAlb)评估患者血脑屏障损伤,将研究组180例患者分为轻度组83例(QAlb 7.5～10)、中度组54例(1030)。对研究组180例患者展开6个月随访,根据改良的Rankin量表(mRS)评分评估预后,分为预后良好组119例(mRS评分0～2分)和预后不良组61例(mRS评分3～6分)。检测血清tau蛋白、MIP-1α和GFAP水平,分析血清tau蛋白、MIP-1α和GFAP水平与患者血脑屏障损伤和预后的关系。结果 研究组血清tau蛋白、MIP-1α和GFAP水平显著高于对照组(P<0.01)。中度组、重度组tau蛋白水平显著高于轻度组,重度组MIP-1α和GFAP水平显著高于轻度组(P<0.05)。预后不良组血清tau蛋白...     

艾司西酞普兰通过降低血清白细胞介素-18水平减轻大鼠卒中后抑郁

目的探讨艾司西酞普兰对卒中后抑郁（post—stroke depression,PSD）模型大鼠血清促炎细胞因子白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）和IL-18水平的影响。方法24只雄性Sprague—Dawley大鼠随机分为假手术组、大脑中动脉闭塞（middlecerebralarteryocclusion,MCAO）组、PSD组和艾司西酞普兰组,每组6只。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）模型,并在此基础上结合慢性不可预见性温和应激（chronicunpredictablemildstress,CUMS）加孤养建立PSD模型。假手术组和MCAO组不CUMS也不孤养,PSD组CUMS并孤养,艾司西酞普兰组在开始CUMS和孤养时给予艾司西酞普兰干预[10mg／（kg·d）,腹腔注射,共3周]。在基线以及CUMS后7、14和21d利用蔗糖溶液消耗和旷野试验进行抑郁样行为学评估。应用酶联免疫吸附法检测CUMS后22d时血清促炎细胞因子IL-6、TNF—α和IL-18水平。结果CUMS后21d时,PSD组体重、蔗糖溶液消耗、垂直运动得分和水平运动距离均较假手术组和MCAO组显著性降低和缩短（P均〈0．01）,艾司西酞普兰组体重、蔗糖溶液消耗和水平运动距离均较PSD组显著性增加（P〈0．05或P〈0．01）。CUMS后22d时,PSD组血清IL-18水平较假手术组和MCAO组显著性升高（P〈0．05或P〈0．01）,艾司西酞普兰组血清IL-18水平较PSD组显著性降低（P〈0．05）,但各组间IL-6和TNF-α水平均无显著性差异。相关分析显示,CUMS后22d时,血清1L-18水平与蔗糖溶液消耗（r=-0．415,P=0．044）、旷野试验中水平运动距离（r=-0．508,P=0．011）均呈显著负相关,但与垂直运动得分（r=-0．390,P=0．059）和体重无显著相关性（r=-0．216,P=0．311）。结论PSD模型大鼠血清IL-18水平显著性升高,艾司西酞普兰能显著性降低PSD大鼠血清IL-18水平并改善抑郁样行为,提示IL-18可能在PSD的发病机制中起-定的作用。     

大鼠脑缺血模型

本文对目前常用的大鼠脑缺血模型制作方法做一总结,并对各种方法的优缺点进行评述,为脑缺血基础和应用研究中动物模型的选择提供参考.     

Sex and regional differences in estradiol content in the prefrontal cortex, amygdala and hippocampus of adult male and female rats

In general, the behavioral and neural effects of estradiol administration to males and females differ. While much attention has been paid to the potential structural, cellular and sub-cellular mechanisms that may underlie such differences, as of yet there has been no examination of whether the differences observed may be related to differential uptake or storage of estradiol within the brain itself. We administered estradiol benzoate to gonadectomized male and female rats, and compared the concentration of estradiol in serum and brain tissue found in these rats to those of gonadectomized, oil-treated rats and intact rats of both sexes. Long-term gonadectomy (3 weeks) reduced estradiol concentration in the male and female hippocampus, but not in the male or female amygdala or in the female prefrontal cortex. Furthermore, exogenous treatment with estradiol increased estradiol content to levels above intact animals in the amygdala, prefrontal cortex and the male hippocampus. Levels of estradiol were undetectable in the prefrontal cortex of intact males, but were detectable in all other brain regions of intact rats. Here we demonstrate (1) that serum concentrations of estradiol are not necessarily reflective of brain tissue concentrations, (2) that within the brain, there are regional differences in the effects of gonadectomy and estradiol administration, and (3) that there is less evidence for local production of estradiol in males than females, particularly in the prefrontal cortex and perhaps the hippocampus. Thus there are regional differences in estradiol concentration in the prefrontal cortex, amygdala and hippocampus that are influenced by sex and hormone status.     

蛛网膜下腔出血大鼠大脑皮质周期蛋白依赖激酶5的表达

目的 探讨蛛网膜下腔出血（subarachnoid hemorrhage,SAH）后大鼠大脑皮质细胞周期蛋白依赖性激酶5（cyclin-dependent kinase 5,Cdk5）的表达和细胞定位.方法 52只雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组（n=12）和SAH组（n=40）,后者再随机分为SAH后6h、12 h、24 h、2d和3d组,每组8只.采用大鼠视交叉前池注血制备大鼠SAH模型.应用蛋白质印迹法、免疫组化法检测大鼠脑皮质Cdk5表达.双标记免疫荧光染色法检测Cdk5蛋白在大脑皮质的细胞定位,神经元核抗原标记神经元,胶质纤维酸性蛋白标记星形胶质细胞.结果 蛋白质印迹显示,SAH后12 h时大鼠脑皮质Cdk5蛋白表达上调（t=3.709,P=0.001）,1d时达高峰（t=3.475,P=0.002）.免疫组化显示,SAH后Cdk5阳性细胞比例也逐渐增高,且时程变化与蛋白质印迹结果一致,于1d时达高峰（=4.320,P=0.000）.双标记免疫荧光检测显示,假手术组Cdk5主要表达于神经元细胞质,而SAH组Cdk5向神经元细胞核中移位.Cdk5主要与星形胶质细胞和神经元之间存在共定位.结论 SAH可使大脑皮质Cdk5蛋白表达上调,Cdk5可能参与了SAH后早期脑损伤.     

大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素与胶质纤维酸性蛋白的共表达

目的观察大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型血管生长素(ANG)表达水平的变化及其与胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的共表达现象。方法将成年雄性SD大鼠30只,随机分为对照组、缺血2h后再灌注1、3、7及14d组,每组6只大鼠。线栓法制作大鼠局灶性脑缺血-再灌注模型。采用免疫荧光双标法结合激光共聚焦显微镜检测脑缺血-再灌注不同时间点ANG、GFAP的表达水平及其二者的共表达情况。结果脑缺血-再灌注1、3、7d脑缺血区ANG表达水平(ANG荧光强度)分别为56±21、73±22和76±21,对照组为35±17;GFAP表达水平(GFAP荧光强度)分别为94±32、115±35和74±31,对照组为62±22。缺血各时间点ANG及GFAP表达与对照组比较,差异均有统计学意义(P<0.01)。激光共聚焦显微镜观察到部分ANG与GFAP共表达现象。结论脑缺血可诱导缺血脑区ANG和GFAP的表达上调。     

抑制 AMP 活化的蛋白激酶对局灶性脑缺血再灌注小鼠皮质和海马细胞色素 c表达的影响

目的：研究抑制 AMP 活化的蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)活性对小鼠脑缺血再灌注后皮质和海马细胞色素 c(cytochrome c, CytC)的影响。方法36只雄性 C57BL/6小鼠,采用随机数字法分为假手术组、缺血再灌注组和 compound C 组,每组12只。 compound C 组在缺血时腹腔注射 AMPK 特异性抑制剂 compound C(20 mg/kg)。采用改良线栓法制作大脑中动脉闭塞模型,再灌注24 h后采用蛋白印迹法测定缺血侧皮质和海马 AMPK、磷酸化 AMPA(phosphorylated-AMPK, p-AMPK)和细胞质 CytC 表达水平。结果假手术组、缺血再灌注组和 compound C 组皮质 p-AMPK/AMPK 分别为0．701±0．197、1．408±0．322和0．930±0．229(F =12．000,P =0．001),海马分别为0．685±0．228、1．507±0．418和0．964±0．378( F =8．530,P =0．003),缺血再灌注组皮质( P <0．001)和海马(P =0．001)均显著高于假手术组,compound C 组皮质(P =0．005)和海马(P =0．017)均显著低于缺血再灌注组。假手术组、缺血再灌注组和 compound C 组皮质 CytC 水平分别为0．496±0．278、1．461±0．321和1．018±0．175( F =19．915,P <0．001),海马分别为0．511±0．257、1．610±0．441和0．921±0．228(F =17．795,P <0．001),缺血再灌注组皮质(P <0．001)和海马(P <0．001) CytC 水平均显著高于假手术组,而 compound C 组皮质(P =0．011)和海马(P =0．002)细胞质 CytC水平均显著低于脑缺血再灌注组。结论抑制 AMPK 活性能下调小鼠脑缺血再灌注后缺血侧皮质和海马细胞质 CytC 表达。     

慢性脑低灌注大鼠的侧支循环研究现状

侧支循环可能是缺血性卒中的潜在治疗靶点,但针对改善侧支循环的治疗目前尚未得到可靠地临床验证.因此,首先在慢性脑低灌注动物模型中开展侧支循环研究具有重要的现实意义.文章对大鼠慢性脑低灌注模型制作方法、神经行为评价、脑灌注评定、侧支循环途径以及改善侧支循环的实验研究现状进行了综述.