紫草素对刀豆蛋白A诱导的急性肝损伤的作用及初步机制

目的探索紫草素对刀豆蛋白A(concanavalin A,Con A)诱导的急性肝损伤的保护作用及其可能机制.方法通过尾静脉注射Con A建立急性肝损伤模型.小鼠随机分为正常组、肝损伤模型组、紫草素低剂量组(12.5 mg/kg)、紫草素中剂量组(25 mg/kg)、紫草素高剂量组(50 mg/kg),共计5个分组.检测不同分组之间的谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)水平;HE染色比较不同分组之间的病理改变;一氧化氮检测试剂盒检测不同分组之间的一氧化氮水平;Western blot测定一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)、IκBα和IκBβ的表达.结果与正常组相比,模型组中血清中的ALT和AST水平显著升高(P0.05);模型组肝组织坏死明显,坏死率差异具有统计学意义;模型组肝组织中NO的合成增多(P0.05);模型组肝组织中iNOS和NF-κB表达增多,IκBα和IκBβ的表达减少.与模型组相比,紫草素(50 mg/kg)显著降低小鼠血清中的ALT和AST水平,并减少肝细胞坏死率;同时减少iNOS和NF-κB表达,IκBα和IκBβ的表达则增多.低剂量组(12.5 mg/kg)和中剂量组(25 mg/kg)与模型组比较无统计学差异.结论紫草素(50 mg/kg)可以显著改善Con A诱导的急性肝损伤,且可能是通过抑制NF-κB信号通路激活,进而减少NO合成来实现的.     

基于TLR4/NF-κB信号通路研究调肝理脾方联合熊去氧胆酸干预原发性胆汁性胆管炎小鼠的作用机制

目的:通过研究肿瘤坏死因子-a(TNF-α)及Toll样受体4/核转录因子κB(TLR4/NF-κB)信号通路相关基因在原发性胆汁性胆管炎(PBC)模型小鼠回肠组织中的表达情况,探讨中药调肝理脾方(TGLP)联合熊去氧胆酸(UDCA)干预PBC小鼠的作用机制。方法:将100只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常组、模型组、阳性组(UDCA 0.1g·kg~(-1)·d~(-1))、中药组(TGLP 5.4g·kg~(-1)·d~(-1))、联合组(TGLP 5.4g·kg~(-1)·d~(-1)+UDCA 0.1g·kg~(-1)·d~(-1)),每组20只;采用聚肌胞苷酸(poly l:C)5mg/kg复制PBC小鼠模型;给药8w、16w后颈脱位法处死小鼠,采集末端回肠,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法及实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测回肠组织中TLR4、TNF-α的表达水平,RTPCR法测定回肠组织中TLR4、NF-κB mRNA的相对表达水平。结果:与模型组比较,正常组小鼠回肠组织中NF-κB、TNF-α表达水平较低,差异有显著性意义(P0.01);经治疗后3个治疗组小鼠TLR4、NF-κB、TNF-α表达水平均较模型组降低,差异有显著性意义(P0.01或P0.05),且联合组小鼠TLR4、NF-κB、TNF-α表达水平下降最显著;与联合组相比,中药组小鼠NF-κB表达水平较高,差异有显著性意义(P0.01或P0.05)。结论:负性调节小鼠回肠组织中TLR4/NF-κB信号通路并抑制TNF-α因子的释放可能是TGLP联合UDCA干预PBC模型小鼠的作用机制之一。     

小檗碱通过Toll样受体4/核因子κB信号通路对小鼠病毒性心肌炎发挥保护作用

目的探讨小檗碱对病毒性心肌炎小鼠的保护作用,并研究其对Toll样受体4(TLR4)、核因子κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。方法将40只BALB/c小鼠按数字随机法均分为正常组、模型组、小檗碱低剂量组与高剂量组。除正常组外,其余组小鼠腹腔注射嗜心性柯萨奇病毒B3,建立病毒性心肌炎模型。小檗碱低剂量组与高剂量组分别腹腔注射小檗碱50 mg/kg与100 mg/kg。苏木素-伊红染色观察心肌组织病理学变化;用酶联免疫吸附测定试剂盒检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、心肌肌钙蛋白(cTnT)和TNF-α水平;免疫印迹法和实时荧光定量PCR分别检测心肌组织中TLR4与NF-κB的蛋白表达和mRNA表达。结果与模型组相比,小檗碱治疗组心肌组织的炎性细胞浸润与心肌细胞坏死程度显著减轻,血清CK-MB、cTnT和TNF-α水平明显降低,心肌组织TLR4与NF-κB的蛋白表达和mRNA表达显著下调。结论小檗碱可通过调控TLR4/NF-κB信号通路,从而对病毒性心肌炎小鼠的心肌组织具有保护作用。     

免疫介导再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞NF-κB表达变化

目的:探讨核因子κB(NF-κB)在获得性再生障碍性贫血(AA)发病机制中的作用.方法:将35只BALB/C小鼠随机分为2组,其中正常对照组15只,模型组20只.复制免疫介导AA小鼠模型,采用Q-PCR、免疫组织化学等方法检测小鼠骨髓单个核细胞NF-κB mRNA水平、蛋白表达及活性变化.结果:与正常对照组相比,AA小鼠骨髓单个核细胞NF-κB mRNA水平未见明显改变(P>0.05),NF-κB/p65蛋白表达增加,而p-κBα表达明显下降(P<0.01).结论:NF-κB蛋白表达异常及活性改变在AA的发病机制中具有一定的意义.     

鸢尾素对载脂蛋白E基因敲除小鼠动脉粥样硬化的影响

目的研究鸢尾素对载脂蛋白E基因敲除(ApoE~(-/-))小鼠动脉粥样硬化的影响。方法将ApoE~(-/-)小鼠随机分为正常对照组、动脉粥样硬化模型组、鸢尾素组,每组10只,分别给予普通饮食+生理盐水、高脂饮食+生理盐水、高脂饮食+鸢尾素,饲养至12周后处死,处死前测体重,用化学法测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量。采用HE染色和整体油红O染色分析主动脉粥样斑块面积大小,实时荧光定量(qRT-PCR)检测主动脉CD36、NF-κB p65的mRNA表达,Western blot检测主动脉CD36、NF-κB p65、SOD的蛋白表达。结果动脉粥样硬化模型组主动脉斑块面积明显高于正常对照组,内膜明显增厚,而鸢尾素组较动脉粥样硬化模型组斑块面积减少,内膜增厚程度下降。与正常对照组比较,动脉粥样硬化模型组小鼠体重、TC、TG、LDLC、MDA水平升高,NF-κB p65、CD36mRNA和蛋白表达增加,而血清SOD活性、HDLC水平减低(P0.05)。与动脉粥样硬化模型组比较,鸢尾素组小鼠体重、TC、TG、LDLC、MDA水平降低,NF-κB p65、CD36 mRNA和蛋白表达下调,而血清SOD活性、HDLC水平升高(P0.05)。结论鸢尾素能减轻ApoE~(-/-)小鼠动脉粥样硬化的发生发展,这可能与其降低小鼠体重和血脂、抑制炎症反应、抗氧化应激有关。     

原发性胆汁性胆管炎小鼠肠黏膜损伤机制的实验研究

目的基于肿瘤坏死因子-α(TNF-α)介导的Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路,初步探讨原发性胆汁性胆管炎(PBC)模型小鼠的肠黏膜损伤机制。方法将40只C57BL/6雌性小鼠随机分为正常组和模型组,每组20只。采用聚肌胞苷酸[poly(I∶C)]5 mg/kg复制PBC小鼠模型。分别于给药8周、16周时处死小鼠(处死前禁食1 d),采集末端回肠以备检测。采用苏木精-伊红(HE)染色法观察回肠组织的病理变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测回肠组织中TNF-α的表达水平,实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(qRT-PCR)方法测定回肠组织中TLR4mRNA、NF-κB mRNA的相对表达水平。结果随着造模时间的延长,模型组肠黏膜绒毛萎缩、变短、断裂,可见上皮下间隙增大、扩张,大量炎性细胞浸润于黏膜固有层甚至肌层,上皮层与固有层分离,伴随固有层毛细血管暴露,甚至出现固有层破坏、不完整,Chiu氏评分明显高于同期正常组(P均0.01)。模型组肠组织中TNF-α水平高于同期正常组(P0.01);与同期正常组相比,模型组肠组织中TNF-α、TLR4、NF-κB mRNA的表达水平较高(P均0.01)。结论 PBC模型小鼠肠黏膜损伤机制与肠组织中TNF-α介导的TLR4/NF-κB信号通路密切相关。     

芳香新塔花对动脉粥样硬化模型小鼠Tol样受体-4/核因子-κB信号通路的影响

目的:通过研究芳香新塔花(新塔花)对动脉粥样硬化模型载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉Toll样受体-4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨新塔花防治动脉粥样硬化的作用机制。方法:选取40只8周龄ApoE-/-小鼠和10只同品系C57小鼠,适应性喂养1周后予以高脂饲料喂养12周。同时在适应性喂养后,将C57小鼠设为空白对照组;ApoE-/-小鼠随机分为模型组、他汀组、新塔花高剂量组和新塔花低剂量组,每组10只。5组小鼠每天灌胃1次,持续12周:空白对照组和模型组均给予蒸馏水(0.4 ml/10 g),他汀组给予阿托伐他汀[3.0 mg/(kg·d)],新塔花高剂量组给予新塔花水提物[1.8 g/(kg·d)],新塔花低剂量组给予新塔花水提物[0.9 g/(kg·d)]。每周记录小鼠体质量变化,并调整用药量。灌胃12周后处理小鼠,采集主动脉。胸主动脉用于苏木精-伊红(HE)染色观察病理变化。腹主动脉采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测TLR4、NF-κB的信使RNA(mRNA)相对表达水平;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测TLR4、NF-κB蛋白表达水平。结果:qRT-PCR结果显示,与空白对照组比较,模型组TLR4、NF-κB的m RNA相对表达水平升高,差异均有统计学意义(P均<0.05);与模型组比较,他汀组、新塔花高剂量组和低剂量组TLR4、NF-κB的m RNA相对表达水平降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。Western Blot结果显示,与空白对照组比较,模型组TLR4、磷酸化NF-κB p65蛋白水平上调,他汀组、新塔花高剂量组和低剂量组TLR4、磷酸化NF-κB p65蛋白水平下调,差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论:新塔花具有防治动脉粥样硬化的作用,其机制可能与调控TLR4/NF-κB信号通路、改善内皮功能、抑制炎症反应有关,需进一步深入研究证实。     

布地奈德雾化吸入对支气管哮喘小鼠肺组织NF-κB及OSM表达的影响

目的探讨布地奈德雾化吸入对支气管哮喘小鼠肺组织核因子-k B(NF-κB)及抑瘤素M(OSM)表达的影响。方法选取30只6-8周龄健康SPF级BALB/c小鼠作为本次研究对象,按随机数表法分为三组,即对照组、哮喘组(哮喘模型)、BUD组(哮喘模型行布地奈德干预),每组各10只。对照组采用生理盐水进行致敏和激发,哮喘模型建立采用腹腔注射卵清蛋白和氢氧化铝致敏以及雾化吸入卵清蛋白溶液激发哮喘,BUD组在致敏后BUD每次激发前雾化吸入布地奈德。于末次激发后24h内,取小鼠肺组织行RT-PCR及免疫组化,检测三组小鼠肺组织NF-ΚB和OSM mRNA和蛋白的表达水平。结果哮喘组和BUD组NF-κB、OSM阳性细胞百分比以及NF-κB、OSM mRNA水平均高于对照组,而BUD组上述指标均较哮喘组降低,组间比较差异具有统计学意义(P 0. 05)。结论支气管哮喘小鼠肺组织NF-κB及OSM表达增加,这可能是导致哮喘发生的机制之一。BUD可通过抑制NF-κB及OSM的表达水平而起到治疗哮喘的作用。     

灭幽汤对幽门螺杆菌相关性胃炎脾胃湿热证模型小鼠TLRs/NF-κB65信号通路的影响

目的:观察灭幽汤对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)相关性胃炎脾胃湿热证模型小鼠Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)、TLR4、核转录因子-κB65(nuclear factorkappa B 65,NF-κB65)蛋白及mRNA,白介素(interleukin,IL)-6、IL-8表达的影响,探讨灭幽汤治疗H.pylori相关性胃炎脾胃湿热证的机制.方法:将70只BALB/c小鼠随机分为对照组、模型组、高浓度灭幽汤组(高灭组)、低浓度灭幽汤组(低灭组)、胃三联组(替硝唑+克拉霉素+枸橼酸铋钾颗粒),每组14只;采用复合因素(肥甘食物+湿热环境+H.pylori)建立BALB/c小鼠H.pylori相关性胃炎脾胃湿热证模型;造模成功后连续给药14 d后,分别采用免疫组织化学检测TLR2、TLR4、NF-κB65蛋白,qPCR检测TLR2 mRNA、TLR4mRNA、NF-κB65 mRNA的表达情况,采用ELISA检测血清IL-6、IL-8的表达.结果:模型组TLR2、TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清IL-6、IL-8含量表达均高于对照组,差异有统计学意义;通过药物治疗后,低灭组、高灭组、胃三联组TLR2、TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清IL-6、IL-8含量表达均低于模型组,差异有统计学意义;高灭组TLR2、TLR4、NF-κB65的蛋白及mRNA、血清IL-6、IL-8含量表达虽低于胃三联组,但差异无统计学意义.结论:灭幽汤可能通过干预TLRs/NF-κB65信号通路抑制TLR2、TLR4、NF-κB65及下游因子的表达以达到治疗H.pylori相关性胃炎脾胃湿热证的目的.     

藏红花素减轻皮质神经元缺氧复氧损伤与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关

[目的]探讨藏红花素对皮质神经元缺氧复氧损伤的影响及其分子机制。[方法]分离并培养SD大鼠皮质神经元,设对照组、模型组、藏红花素(50 mg/L)组、藏红花素(50 mg/L)+脂多糖(TLR4激活剂,100μg/L)组。对照组常规培养,模型组建立缺氧4 h复氧24 h模型,藏红花素组和藏红花素+脂多糖组分别给药干预24 h后造模。通过CCK-8法、Annexin V-FITC/PI双染法检测神经元活力和凋亡率,ELISA法检测培养液中炎症因子水平,Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核因子κB p65(NF-κB p65)、p-NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白α(IκBα)、p-IκBα、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、cleaved Caspase-3、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达。[结果]与对照组比较,模型组大鼠皮质神经元活力明显降低(P<0.05),凋亡率、培养液中TNF-α、IL-1β、IL-6水平、神经元TLR4、HMGB1、cleved Caspase-3表达量及p-NF-κB p65/NF-κ...     

阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠的保护作用及对TLR4/TRAF6通路的影响

目的探究阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠的保护作用及对Toll样受体4(TLR4)与肿瘤坏死因子受体活化因子6(TRAF6)通路的影响。方法将雄性BALB/c小鼠平均分为正常组(A组)、模型组(B组)、阿那白滞素低剂量组(C组)与阿那白滞素高剂量组(D组)4组,每组10只。A组小鼠腹腔注射不含柯萨奇病毒B3(CVB3)稀释液;B组小鼠腹腔注射CVB3病毒悬浮液制备病毒性心肌炎模型;C组、D组均在B组基础上分别注射0.02mL/g、0.2mL/g的阿那白滞素。采用酶联免疫法测定心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)水平;制备心肌组织石蜡切片进行苏木素-伊红染色(HE染色)以及马松染色(Masson染色),细胞流式仪检测心肌细胞凋亡;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质印迹(Westernblot)法测定心肌组织中TLR4、TRAF6、核因子-κB(NF-κB)、髓样分化蛋白88(MyD88)、TIR结构域接头分子(TRIF)mRNA表达。结果与A组比较,B组血清cTnT、CK-MB、MDA水平升高,SOD水平降低,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组、D组cTnT、CK-MB、MDA水平降低,SOD水平升高,且D组较C组变化明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。HE染色以及Masson染色显示,与A组比较,B组心肌组织病理评分、心肌纤维比例升高,与B组比较,C组、D组心肌组织病理评分、心肌纤维比例降低,且D组降低程度较C组明显,差异均有统计学意义(P<0.05)。C组、D组心肌组织凋亡率低于B组,D组心肌组织凋亡率低于C组,差异均有统计学意义(P<0.05)。与A组比较,B组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达均升高;与B组比较,C组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达降低,与C组比较,D组TLR4、TRAF6、NF-κB、MyD88、TRIF的mRNA、蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论阿那白滞素对病毒性心肌炎小鼠心肌组织具有保护作用,可能与抑制TLR4/TRAF6信号通路相关。     

雷公藤甲素对雨蛙素诱导的慢性胰腺炎小鼠模型胰腺纤维化的影响

目的基于NF-κB/IL-6信号通路研究雷公藤甲素对雨蛙素诱导的慢性胰腺炎(CP)小鼠模型胰腺纤维化的影响。方法随机将15只C57BL/6雄性小鼠分为对照组(生理盐水处理,n=5)、雨蛙素组(雨蛙素诱导CP模型,n=5)和雷公藤甲素组(雨蛙素诱导+雷公藤甲素治疗,n=5)。6周后采集样本进行检测。对小鼠胰腺称重;苏木素-伊红染色、天狼猩红及马松染色观察胰腺组织形态及胶原沉积;ELISA检测血清中IL-6的表达;免疫组化检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、NF-κB/p65的表达情况;蛋白质免疫印迹检测NF-κB/p65、IL-6及α-SMA的表达。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果3组间胰腺组织重量,IL-6水平,病理评分,天狼猩红染色、马松染色、α-SMA阳性信号、NF-κB/p65阳性信号的平均光密度值比较差异均有统计学意义(F值分别为64.87、15.85、145.33、141.80、121.77、250.22、69.22,P值均<0.001)。与雨蛙素组相比,雷公藤甲素组胰腺重量明显增加,IL-6的表达明显降低,胰腺组织纤维化及胶原沉积明显减弱,α-SMA与NF-κB/p65表达量降低(P值均<0.05)。蛋白质免疫印迹检测结果显示,3组间NF-κB/p65、IL-6、α-SMA表达水平比较差异均有统计学意义(F值分别为8.86、6.74、16.23,P值均<0.05),雷公藤甲素组胰腺组织NF-κB/p65、IL-6及α-SMA表达量明显低于雨蛙素组(P值均<0.05)。结论雷公藤甲素可抑制NF-κB/p65及IL-6蛋白的表达,缓解雨蛙素诱导的CP小鼠模型的胰腺纤维化。     

基于Toll样受体4/核因子-κB信号通路研究莪术醇抗肝纤维化的分子机制

目的研究莪术醇对肝窦内皮细胞TLR4/NF-κB信号通路的作用,以此来分析莪术醇抗肝纤维化的分子机制。方法将50只清洁级KM小鼠随机分为空白组(n=10)、模型组(n=19)以及莪术醇组(n=21),除去建模过程中死亡的小鼠,最后每组各10只;细胞分为空白对照组、阳性对照组、莪术醇干预组以及PDTC(NF-κB特异性抑制剂)组。用HE和Masson染色观察各组小鼠肝脏结构的改变,用Western Blot和实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组细胞TLR4/NF-κB信号通路上关键分子TLR4和NF-κB mRNA和蛋白的表达水平,用免疫荧光检测各组细胞NF-κB的表达及入核情况。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 RT-PCR检测发现莪术醇干预组TLR4 mRNA和NF-κB mRNA表达水平较阳性对照组下降,差异均有统计学意义(P值均0. 05); Western Blot检测发现莪术醇干预组TLR4和磷酸化NF-κB的表达水平较阳性对照组下降,差异均有统计学意义(P值均0. 05);免疫荧光检测发现莪术醇干预组NF-κB入核较阳性对照组明显改善。结论莪术醇抑制TLR4/NF-κB信号通路的活动,可能是其抗肝纤维化作用机制之一。     

肾上腺髓质素对实验性溃疡性结肠炎小鼠作用的研究

目的观察肾上腺髓质素(adrenomedullin,AM)对实验性溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠的作用,并探讨其可能的作用机制。方法 30只清洁级C57BL/6小鼠,随机分为正常对照组、模型组、AM干预组,每组10只。模型组和AM干预组给予质量浓度为40 g/L的葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)水溶液自由饮用7 d,建立小鼠急性UC模型。评估模型建立成功后,对照组和模型组给予0. 5 ml生理盐水灌肠,AM干预组给予0. 5 ml AM灌肠,实验期间观察各组小鼠精神、毛发、饮食、大便性状等变化,记录小鼠体质量改变,对3组小鼠的疾病活动指数(DAI)、肠黏膜及组织学损伤进行评分。HE染色评估小鼠结肠病理变化,Western blotting检测结肠组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白的表达; ELISA检测血清NF-κB、TNF-α、IL-6表达。结果模型组小鼠DAI、肠黏膜及组织学损伤评分均显著高于正常对照组和AM干预组,差异有统计学意义(P 0. 01)。与正常对照组相比,模型组TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及炎症因子TNF-α、IL-6的表达均明显增加(P 0. 05),给予AM干预后,TLR4、MyD88、NF-κB蛋白及炎症因子TNF-α、IL-6的表达均下调(P 0. 05)。结论 AM干预能减轻UC小鼠结肠损伤情况,其机制可能是通过抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路,下调TNF-α、IL-6等炎症因子表达从而对UC小鼠发挥治疗作用。     

异甘草酸镁对CCl4诱导小鼠急性肝损伤的保护作用

目的:研究异甘草酸镁(MI)对CCl4诱导急性肝损伤小鼠的保肝降酶作用与及其对肝组织中核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达的影响.方法:30只♂昆明小鼠(284±2.2g),随机分为3组,即正常对照组、模型组和异甘草酸镁组.正常对照组ip生理盐水(0.1 mL/10 g),模型组ip 0.1?l4(0.1 mL/10g),异甘草酸镁组于ip 0.1?L4(0.1 mL/10 g)前15 min予MI(15mg/kg体质量)ip,1次/d,共5次.采用生化法测定血清ALT、AST及肝组织MDA和SOD含量.采用HE染色观察肝组织病理损伤.SP免疫组化染色检测NF-κB、ICAM-1表达.结果:肝损伤组ALT、AST及MDA较正常组显著升高(465.10±35.90 kU/L vs 47.40±4.13 kU/L;582.37±25.63 kU/L vs 116.06±12.82 kU/L;4.07±0.38 nmol/mg vs 1.39±0.03nmol/mg;均P＜0.01),SOD明显降低(29.71±2.25U/mg vs 87.02±4.84U/mg,P＜0.01).在正常组织中无NF-κKB、ICAM-1表达,肝损伤模型组中NF-κB有较强表达,ICAM-1在肝坏死区强表达.MI组ALT、AST及MDA(263.51±22.89 kU/L,292.56±26.01 kU/L,2.17±0.03nmol/mg)较肝损伤组显著降低(P＜0.01),SOD(58.04±2.56 U/mg)明显升高(P＜0.05),NF-κB、ICAM-1表达均较肝损伤组减弱,肝组织坏死程度也轻.结论:NF-κB、ICAM-1在CCl4诱导小鼠急性肝损伤中表达明显增强,MI可减少NF-κB及ICAM-1表达并减轻肝损伤程度.     

SIRT1/TLR4/NF-κB在丹参素治疗大鼠心肌梗死的保护作用

目的 探讨SIRT1/TLR4/NF-κB在丹参素治疗大鼠心肌梗死的保护作用。方法 构建SD大鼠心肌缺血再灌注损伤模型,随机分为:对照组,模型组、丹参素组(2 mg/kg)三组,每组15只。HE染色法观察心肌组织病理学改变;TTC双染法测定心肌梗死面积;免疫组织化学法检测SIRT1表达;采用Western blot法检测SIRT1、TLR4、NF-κB、Bcl-2、Caspase3蛋白的表达;ELISA法检测心肌组织IL-6和TNF-α表达。结果 丹参素组大鼠心肌凋亡数量、心肌梗死面积比模型组显著降低(P0.05)。丹参素组SIRT1表达平均光密度显著升高(P0.05)。丹参素组TLR4、NF-κB、Caspase3蛋白表达明显下降,SIRT1、Bcl-2蛋白含量表达比模型组显著上升(P0.05);丹参素组心肌组织IL-6和TNF-α表达显著下降(P0.05)。结论 丹参素可通过促进SIRT1表达,抑制TLR4/NF-κB信号通路来改善大鼠心肌梗死,对心肌起到营养和保护的作用。     

大黄素对急性胰腺炎大鼠胰腺核因子-κB活化的影响

目的观察大黄素对急性胰腺炎(AP)大鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化的影响,初步阐明大黄素治疗AP的分子作用机制.方法雄性SD大鼠采用持续输注雨蛙素(5μg·kg-1·h-1)法建立急性水肿性胰腺炎模型,分为注射后5、30 min及1、2、4、6 h组,停止输注后6 h组;造模前2 h大鼠腹腔注射大黄素(10、30、100 mg/kg)组及生理盐水对照组.采用电泳迁移率改变分析实验检测NF-κB DNA结合活性,Westem blot检测NF-κB抑制蛋白(IκBs)的IκBα和IκBβ降解水平,Northern blot检测NF-κB信号下游效应分子单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)和细胞间粘附分子-1(ICAM-1)基因表达.结果超生理剂量的雨蛙素可诱导大鼠胰腺NF-κB发生双相活化,活化高峰出现在雨蛙素注射30min和4 h后,其相对面积灰度值分别为正常对照的(3.9±2.0)和(7.7±3.2)倍(n=4,P值均＜0.01).大黄素10、30和100 mg/kg剂量治疗组大鼠胰腺NF-κB活性较AP模型组分别下降45%,62%和84%(30min)和28%,74%和80%(4h,n=4,P值均＜0.01).同时,大黄素(100 mg/kg)可明显抑制雨蛙素诱导的胰腺IκBα和IκBβ蛋白降解(n=4,P值均＜0.01).与其对NF-κB活化的抑制作用一致,大黄素剂量依赖性地抑制雨蛙素诱导的胰腺MCP-1和ICAM-1基因表达.结论大黄素可抑制胰腺内IκBs/NF-κB信号转导通路活化,从而抑制炎性细胞因子和粘附分子基因表达,发挥其对AP的治疗作用.     

异丁司特对脂多糖诱导小鼠急性呼吸窘迫综合征的保护作用及机制

目的：探讨异丁司特（AV411）对脂多糖（LPS）诱导的急性呼吸窘迫综合征（ARDS）小鼠的保护作用及作用机制。方法：将24只BALB/c小鼠随机分为正常组、模型组及治疗组,每组8只。模型组和治疗组小鼠尾静脉注射LPS诱导建立ARDS小鼠模型,造模成功后治疗组小鼠给予15mg/kgAV411灌胃,正常组及模型组小鼠用等量生理盐水灌胃,3组均3次/d,治疗15d后处死。经苏木素伊红(HE)染色观察3组小鼠肺组织病理变化;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测3组小鼠肺泡灌洗液中白介素1β（IL1β）、肿瘤坏死因子α（TNFα）、白介素10（IL10）等炎症因子水平;采用实时定量聚合酶链反应(qRTPCR)及免疫蛋白印迹（WB）检测AV411对组织Toll样受体4（TLR4）表达影响及3组小鼠肺组织中IL1β、TNFα、IL10、核因子κB的抑制蛋白α（IκBα） 的mRNA及蛋白表达水平。结果：治疗组小鼠肺泡、肺泡隔结缔组织炎性细胞浸润较模型组显著减少;与模型组比较,治疗组小鼠肺组织中TLR4蛋白及TLR4 mRNA表达水平显著降低,肺泡灌洗液中IL1β、TNFα水平显著降低,IL10、IκBα水平升高;肺组织IL1β、TNFα的mRNA及蛋白表达量显著降低（均P<0.05）。结论：AV411可能通过诱导ARDS小鼠肺组织TLR4表达降低,抑制IκBα蛋白降解及相关炎症因子表达,发挥对ARDS小鼠的治疗作用。     

高良姜素通过抑制细胞凋亡和炎性反应改善心肌梗死后心脏重构与心功能障碍

目的 探讨高良姜素对心肌梗死(MI)后心脏重构和心功能的影响。方法 选取32只雄性C57/BL6小鼠(8～10周龄),全部参与造模,最终成功入组24只,按照造模方式及灌胃处理的不同分为对照组[假手术+羟基纤维素钠(CMC-Na)]、模型组(MI+CMC-Na)和实验组(MI+高良姜素),每组8只。MI术后,实验组予以40 mg/kg高良姜素灌胃4周,对照组与模型组予以同体积(0.4 ml)的CMC-Na溶液灌胃。苏木精-伊红染色法评价MI范围。实时荧光定量PCR检测心脏炎性因子信使RNA水平。蛋白质免疫印迹检测相关信号通路蛋白的表达。免疫荧光染色检测梗死边缘区炎性细胞浸润。原位末端标记法染色检测梗死边缘区细胞凋亡情况。结果 MI 4周后,与对照组比较,模型组小鼠MI面积、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、磷酸化(p)-P65、p核因子κB抑制蛋白α(p-IκBα)、Bax以及细胞凋亡率升高,心功能指标左心室短轴缩短率(FS)和左心室射血分数(LVEF)、B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)表达降低(P<0.05);与模型组比较,实验组小鼠MI面积[(1...     

蛇床子素对四氯化碳诱导小鼠脂质过氧化反应的影响

目的:研究蛇床子素(Ost)对四氯化碳(CCl_4)诱导小鼠脂质过氧反应的影响.方法:40只昆明种小鼠随机平均分为4组:正常对照组、模型组、Ost治疗1组(50 g/kg)、Ost治疗2组(100 g/kg).除对照组外,其余各组腹腔注射1 g/L CCl_4花生油溶液.16 h后分别测定血清SOD和T-AOC及肝组织MDA,NO和T-AOC.结果:与模型组相比,50 g/kg Ost显著升高肝组织NO含量(F=6.171,P=0.01);100 g/kg Ost显著降低CCl_4中毒小鼠肝组织中MDA含量(F=3.547,P=0.04),升高NO(F=3.698,P =0.009)和T-AOC(P=0.000)以及血清中提高SOD活性(F=4.797,P=0.04)和T-AOC(F= 3.103,P=0.02).结论:蛇床子素有抗脂质过氧化作用.