视网膜下液体对人视网膜神经胶质细胞生长的刺激作用与PVR关系

研究了２８例孔源性视网膜脱离患者视网膜下液（ＳｕｂｒｅｔｉｎａｌＦｌｕｉｄＳＲＦ）对人视网膜神经胶质细胞（ＲｅｔｉｎａｌＧｌｉａｌＲＧ）生长的刺激作用。结果表明：所有标本通常具有刺激ＲＧ细胞增殖能力，但存在较大范围的活动性，增殖率范围在基线上３６．４～１８１．８％，ＳＲＦ促ＲＧ细胞增殖能力与ＰＶＲ程度呈平行关系，ＰＶＲ在Ｃ级以上，促ＲＧ细胞增殖活力显著性加强（Ｐ＜０．０１）。     

表皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子对人视网膜色素上皮细胞DNA合成的影响

目的探索表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）对培养的人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞促进ＤＮＡ合成的最佳刺激浓度，并对两种因子的协同作用进行探讨。方法培养的人ＲＰＥ细胞第６代用于本实验。应用氚标胸腺嘧啶核苷（３Ｈ－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ，３Ｈ－ＴｄＲ）掺入试验及放射自显影检测ＥＧＦ、ｂＦＧＦ对ＲＰＥ细胞的促ＤＮＡ合成作用。结果ＥＧＦ、ｂＦＧＦ均可引起剂量依赖的促有丝分裂作用。在含２％血清的培养液中，ＥＧＦ、ｂＦＧＦ作用最佳浓度为１ｎｇ／ｍｌ，明显低于无血清培养液中ＥＧＦ、ｂＦＧＦ作用的最佳浓度（１０ｎｇ／ｍｌ）。联合应用１０ｎｇ／ｍｌＥＧＦ、１０ｎｇ／ｍｌｂＦＧＦ约提高ＲＰＥ细胞合成ＤＮＡ能力２．９６倍。结论ＥＧＦ、ｂＦＧＦ对培养的人ＲＰＥ细胞具有促进ＤＮＡ合成作用，且两者可产生协同效应。     

生长因子对培养人眼视网膜色素上皮细胞增殖的调控作用

目的探讨生长因子对人眼视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞增殖的调控作用。方法建立人眼ＲＰＥ细胞培养体系，利用３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和细胞计数观察表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ－ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂ－ＦＧＦ）、胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＩＧＦ－Ｉ）对培养ＲＰＥ细胞的作用。结果（１）ＥＧＦ，ｂ－ＦＧＦ，ＩＧＦ－Ⅰ与对照组比较，可明显增强人眼ＲＰＥ细胞ＤＮＡ合成６．６～１２．２倍，增强能力为ＥＧＦ＞ｂ－ＦＧＦ＞ＩＧＦ－Ⅰ。（２）当生长因子联合作用时，可数倍明显增强３Ｈ－ＴｄＲ掺入，能较单一因子更有效地刺激人眼ＲＰＥ增殖。结论结果提示，生长因子的协同作用可能是增殖性视网膜病变发生的重要机理之一。     

视网膜神经节细胞体外培养、纯化及生物学特性研究

目的 建立体外视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｎｃｅｌｌｓ,ＲＧＣｓ）培养和纯化模型。方法 出生后１－３天Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ（ＳＤ）乳鼠,ＲＧＣｓ在ｂａｓａｌｍｅｄｉｕｍｅａｇｌｅ（ＢＭＥ）培养基中培养,相差显微镜下观察细胞生长规律。羊抗鼠单克隆抗体ＦＩＴＣ－Ｔｈｙ－１,１鉴定ＲＧＣｓ并通过Ｔｈｙ１．１单抗进行ＲＧＣｓ的分离纯化,四唑盐（ｍｏｎｏｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ,ＭＴＴ     

生长因子与视网膜神经节细胞

视网膜神经节细胞（ＲＧＣｓ）是青光眼的主要损伤细胞，ＲＧＣｓ的死亡常导致视功能发生不可逆性损害。新近研究的某些生长因子能促进ＲＧＣｓ的存活和轴突再生。本文着重介绍了神经生长因子（ＮＧＦ）、脑源性神经营养因子（ＢＤＮＦ）、神经营养蛋白－３（ＮＴ－３）、ＮＴ－４／５、睫状神经营养因子（ＣＮＴＦ）、成纤维细胞生长因子（ＦＧＦ）及靶源性生长因子等对ＲＧＣｓ的作用，为ＲＧＣｓ的实验研究和临床研究提供基础。     

大鼠视网膜神经节细胞的培养

目的建立视网膜神经节细胞（ｒｅｔｉｎａｌｇａｎｇｌｉｏｎｃｅｌｓ,ＲＧＣｓ）的体外培养方法,为ＲＧＣｓ的体外实验研究奠定基础。方法采用胰酶消化法将１６只生后２～３天的ＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙ大鼠视网膜制成细胞悬液后,接种于涂以鼠尾胶原的２４孔培养板,预先置入１ｃｍ×１ｃｍ的载玻片。细胞数约４×１０５个／孔,在３７℃、体积分数为５％的ＣＯ２培养箱中培养。于第１、３及５天行抗大鼠ＴＨＹ１单克隆抗体免疫细胞化学检查以鉴定ＲＧＣｓ,镜下计算每１０个高倍镜下（ｈｉｇｈｐｏｗｅｒ,ＨＰ）ＲＧＣｓ的细胞数和其轴突生长率。结果在鼠尾胶原上培养的ＲＧＣｓ生长良好,部分细胞伸出突起,且有些突起相互连接成网。培养第１天,ＲＧＣｓ数和轴突生长百分率分别为（４０１±９）个／１０ＨＰ和（２５．３４±０．７２）％,第３天为（３５１±６）个／１０ＨＰ和（３５．１６±２．２２）％,第５天为（１０９±８）个／１０ＨＰ和（６９．８４±０．９７）％。结论ＲＧＣｓ的体外培养能获成功,鼠尾胶原是ＲＧＣｓ体外生长的良好支持物。     

Mechanisms of apoptosis in retinal pigment epithelial cells

目的了解诱导视网膜色素上皮（ＲＰＥ）细胞在体外发生凋亡的因素，以推测该细胞凋亡在体内发生的可能机理。方法培养的人ＲＰＥ细胞分别给予低氧（３％），肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）抑制剂及抗Ｆａｓ抗体处理２４～７２ｈ，同时也观察了纤维母细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对体外凋亡诱导因子所致ＲＰＥ细胞凋亡的保护作用。以琼脂糖ＤＮＡ电泳及流式细胞计数法检测细胞凋亡，采用免疫组化染色及流式细胞计数法决定Ｆａｓ在ＲＰＥ细胞的表达。结果所用的细胞凋亡诱导剂均可使ＲＰＥ细胞发生典型的凋亡（ＤＮＡ片段形成），ｂＦＧＦ具有较强的抑制ＲＰＥ细胞凋亡发生的作用。３Ｈ胸腺嘧啶摄入表明，所有细胞凋亡诱导剂均能抑制ＲＰＥ细胞的生长。结论不同的诱导因子可诱导ＲＰＥ细胞在体外发生凋亡，其发生与多种凋亡信号系统调控和交互反应有关，因此，调节ＲＰＥ细胞凋亡可能会给某些视网膜变性类疾病提供新的治疗手段。     

8—氯腺苷对生长因子诱导的视网膜色素上皮细胞增殖抑制作用的研究

目的探讨８氯腺苷（８ｃｈｌｏｒｏａｄｅｎｏｓｉｎｅ,８ＣＬＡ）对生长因子诱导的视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＲＰＥ）细胞增殖的抑制作用。方法通过ＲＰＥ细胞培养,采用３ＨＴｄＲ掺入测定８ＣＬＡ对肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ,ＴＮＦα）、白细胞介素１β（ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ,ＩＬ１β）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ,ｂＦＧＦ）诱导的ＲＰＥ细胞ＤＮＡ合成的抑制作用。结果三种因子单独使用均可使ＲＰＥ细胞３ＨＴｄＲ掺入每分钟计数（ｃｏｕｎｔｐｅｒｍｉｎｕｔｅ,ＣＰＭ）值明显增高（Ｐ＜０．０５）,８ＣＬＡ在其终浓度为２～１６μｍｏｌ／Ｌ时可使三种因子刺激的ＲＰＥ细胞３ＨＴｄＲＣＰＭ值明显降低（Ｐ＜０．０５）。在ＴＮＦα、ＩＬ１β、ｂＦＧＦ和８ＣＬＡ组,分别于１６、８、２μｍｏｌ／Ｌ时,ＣＰＭ值与基础值相近（Ｐ＞０．０５）。结论８ＣＬＡ可抑制生长因子诱导的ＲＰＥ细胞增殖,为抗增殖药物提供了新的途径     

表皮生长因子,碱性成纤维细胞生长因子及5—氟尿嘧啶对培养？…

定量观察表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）、碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ｂＦＧＦ）及５－氟尿嘧啶（５－ｆｌｕｏｒｏｕｒａｃｉｌ，５－Ｆｕ）对人视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞迁移与增殖能力的影响，探讨ＥＧＦ，ＢＦＧＦ及５－Ｆｕ在增殖玻璃体视网膜病变（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔ     

表皮生长因子对牛眼小梁细胞c—fos基因表达的诱导

目的研究表皮生长因子（ｅｐｉｄｅｒｍａｌｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＥＧＦ）对小梁细胞的作用。方法应用分子杂交技术研究ＥＧＦ对体外培养的牛眼小梁细胞ｃ－ｆｏｓ基因表达的诱导和３Ｈ胸腺核苷酸（３Ｈ－ｔｈｙｍｉｄｉｎｅｉｎｃｏｒｐａｒａｔｉｏｎ，３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察细胞ＤＮＡ的合成。结果小梁细胞的３Ｈ－ＴｄＲ掺入率随着ＥＧＦ浓度不同而变化，浓度为２０～１５０ｎｇ／ｍｌ时，细胞掺入率随浓度增加升高（Ｐ＜０．０１）。与对照组相比，ＥＧＦ刺激停止生长的小梁细胞０．５小时后，ｃ－ｆｏｓ基因开始表达，１小时后达高峰，至２小时后消失。不同浓度ＥＧＦ刺激小梁细胞１小时后，ｃ－ｆｏｓ基因表达呈浓度依赖性。结论实验结果表明ＥＧＦ刺激小梁细胞增殖或进入生长状态，可能与ｃ－ｆｏｓ基因产物的信号传递作用有关。     

Homeostasis of the retinal micro-environment: I. Magnesium,potassium and calcium distributions in the avian eye

The concentrations of Mg²⁺, K⁺ and Ca²⁺ in the intraocular fluids (IOFs) and blood plasma of chickens and pigeons were determined by atomic absorption spectrophotometry. The Mg²⁺ concentration in the IOFs of both species was greatest in the liquid vitreous adjacent to the retina followed by aqueous > blood plasma > plasma dialysate. In contrast the concentration of K⁺ in the IOFs of both chickens and pigeons was greater in the aqueous than in the liquid vitreous. The concentrations of Ca²⁺ in all IOF compartments of chicken eyes were virtually identical and were lower than that of blood plasma. The concentrations of Mg²⁺ in the IOFs of the chicken, especially in the liquid vitreous, was remarkably stable; experimentally lowering or raising the plasma Mg²⁺ concentration over a relatively wide range had little or no effect on the Mg²⁺ concentration in the IOFs of these animals. We can conclude that a high Mg²⁺ and low K⁺ concentration in the extracellular fluids of the retina is maintained in the avian eye, as in the mammalian eye, by active transport processes across the blood-retinal barrier systems. Because the avian retina is completely avascular, the site of these homeostatic transport processes must be the epithelium of the retinal choroid and/or the pecten. These findings support the concept that the contribution of the vitreous to the homeostasis of the retinal micro-environment is inversely related in vertebrates to the degree of retinal vascularization.     

Vergleich der Durchmesserreaktion retinaler Arterien und Venen auf Flickerlicht

ZusammenfassungZiel In dieser Studie soll die durch Flickerlicht verursachte Durchmesserreaktion retinaler Arterien und Venen hinsichtlich Ausmaß und zeitlichem Ablauf verglichen werden.Methoden In die klinische Studie wurden 26 gesunde Probanden einbezogen. Der Durchmesser der retinalen Gefäße jeweils eines Auges wurde kontinuierlich mittels eines Retinal vessel analyzer gemessen. Jede Untersuchung bestand aus 100 s Baseline sowie 5 Perioden von 20 s Flickerlichtstimulation, gefolgt von 80 s Beobachtung.Ergebnisse Unmittelbar nach Flickerlicht dilatierten die Arterien um 6,9±2,8% (MW±STD) und die Venen um 6,5±2,8% (Unterschied nicht signifikant). Der Quotient aus arterieller und venöser Dilatation (AVDQ) betrug 1,25±0,69 (Spannweite 0,2 bis 2,8). Es konnte keine signifikante Altersabhängigkeit der arteriellen bzw. venösen Dilatation oder des AVDQ nachgewiesen werden. Die arterielle Dilatation ging nach 25,9±10,8 s in eine leichte Konstriktion von –2,7±1,4% über. Im Gegensatz dazu waren die Venen zum Zeitpunkt des individuellen Konstriktionsmaximums noch um 0,5±1,3% dilatiert (p<0,001).Schlussfolgerungen Die flickerlichtinduzierte Durchmesserreaktion retinaler Arterien und Venen unterscheidet sich bei Gesunden nicht in ihrem mittleren dilatativen Maximum, aber in Form und zeitlichem Verlauf des Abklingens der Dilatation.Unterstützung durch: BMBF 13N7999.Vortrag gehalten auf der 101. Jahrestagung der DOG, Berlin, September 2003.     

Acute Multifocal Placoid Pigment Epitheliopathy Associated with Cavernous Sinus Thrombosis

Acute multifocal placoid pigment epitheliopathy (AMPPE) has been associated with disease of the central nervous system. In this case report, we discuss a patient presenting with AMPPE in the setting of a new central nervous system association: cavernous sinus thrombosis.     

Dual nonlinearities regulate contrast sensitivity in pattern discrimination tasks

Many current psychophysical models propose that visual processing in cortex is hierarchical, with nonlinearities sandwiched between linear stages of processing. In earlier publications, we proposed a model of this type to account for masking effects found with spatial frequency and orientation discriminations. Our model includes two nonlinear mechanisms that regulate contrast sensitivity in early cortical mechanisms. The first is a local within-pathway nonlinearity that accelerates at low contrasts but is compressive at high. The second is a pooled nonlinear gain control process that operates over a broad range of neurons with different tuning characteristics. Here, we test predictions of the model for spatial frequency discriminations. The model predicts that at low contrasts, adding a grating mask oriented parallel to test gratings will improve discrimination performance via operation of the within-pathway nonlinearity, analogous to the "dipper effect" found with contrast discriminations. Adding an orthogonally oriented mask is predicted to have no effect at low contrasts, where pooled gain control processes contribute little to performance. At high contrasts, the model predicts that performance will asymptote and become independent of contrast with either parallel or orthogonal masks. The results confirm model predictions.