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相似文献
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1.
核因子κB在人角膜基质细胞中的表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的探讨核因子κB(nuclearfactorκB,NFκB)在人角膜基质成纤维细胞中的基础表达及激活情况。方法取体外培养的第2或3代人角膜基质细胞,同步化后分为2组:无血清的DMEM液培养的不加药组;含质量浓度为10μg/ml脂多糖的DMEM液培养6小时的加药组。均采用免疫荧光抗体染色、流式细胞仪计数法和核蛋白提取物凝胶迁移率法检测。结果流式细胞计数法示,角膜基质细胞内NFκB的基础表达率为9.4%,脂多糖作用后升高2.2倍(300%)。凝胶迁移率法示,刺激后的细胞核内出现了具有DNA结合活性的核转录因子。结论核转录因子存在于人角膜基质细胞中,能够被脂多糖激活,表达量增加,并且转入细胞核内与相应的DNA结合而发挥调控基因转录的作用。  相似文献   

2.
目的 探讨细胞间附分子-1(ICAM-1)在角膜基质细胞中表达,以及炎症介质对其表达的调节作用。方法 采用细胞培养、免疫细胞化学和流式细胞技术、观察人角膜基质细胞ICAM-1的表达及脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)对此表达的影响。结果 体外2的基质中基础表达一定量的ICAM-1、LPS和IFN-γ可上调其表达水平至基础表达的1.4-4.6倍。结论角膜炎症反应中,炎症介质促进基质细胞表达I  相似文献   

3.
目的 比较KN- 5000 型微型角膜刀与Moria 微型角膜刀在LASIK 术中制作角膜瓣时的优缺点。方法 选用连续病例56 例103 眼,随机分KN 组和Moria 组,KN 组28 例53眼,术前近视度数平均为- 9-21±7-41D,散光≤-5-00D,Moria 组28 人50 眼,术前近视度数平均为-10-47±3-73D,散光≤-2-50D,术中分别用KN-5000 微型角膜刀和Moria 微型角膜刀制作角膜瓣。结果 两组病例角膜瓣边缘整齐。基质面:KN组全部术眼光滑、规则,Moria 组部分术眼有“搓衣板”现象。瓣异常:KN组游离瓣2 眼,Moria 组不全瓣5 眼。KN组角膜瓣质量优于Moria 组,瓣异常率低于Moria 组。结论 KN- 5000 微型角膜刀在LASIK术中制瓣时性能及安全性、稳定性优于Moria 组微型角膜刀。KN- 5000 微型角膜刀还具有良好的易学性和进行LASIK角膜板层移植的功能。  相似文献   

4.
张建华 《眼科新进展》1999,19(3):149-151
目的探讨皮质类固醇在准分子激光屈光性角膜切削术(PRK)术后早期对角膜前基质炎症反应的影响。方法新西兰白兔24只,双眼均作-6DPRK切削,术后右眼点FLAREX,左眼作为对照。分3组,分别于术后12、36及72h处死,取PRK切削区角膜,作白细胞计数。结果实验组PMNs计数少于对照组,2组有显著差异。结论皮质类固醇FLAREX有减轻PRK术后早期兔角膜前基质炎症反应的作用  相似文献   

5.
目的探讨核因子闎(NF-кB)在体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞中的基础表达以及吡咯二硫代氨基甲酸乙酯(pyrollidi ne dithiocarbamate,PDTC)、IL-1β对NF-кB表达的影响. 方法体外培养的hRPE细胞经同步化后分2组分别加药(1)无PDTC组分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在hRRE中的基础表达);(2)PDTC组分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在PDTC预处理后hRPE中的表达).免疫荧光抗体染色、流式细胞计数法(flow cytometry, FCM)测定上述2组标本中hRPE的NF-кB的表达率. 结果 NF-кB在hRPE中的基础表达率为8.05 %,IL-1β作用后表达率升高到30.26%; hRPE细胞经PDTC预处理后,NF-кB的表达率下降为3.74%,加入IL-1(10 υg·L-1)作用后表达率为3.66%. 结论 IL-1β可以显著提高NF-кB在hRPE细胞中的表达;PDTC可以显著降低体外培养的hRPE中的NF-кB表达率,PDTC亦可显著抑制由IL-1β诱导的NF-кB的活化过程.  相似文献   

6.
目的探讨核因子闎(NF-кB)在体外培养的人视网膜色素上皮(human retinal pigment epithelium,hRPE)细胞中的基础表达以及吡咯二硫代氨基甲酸乙酯(pyrollidi ne dithiocarbamate,PDTC)、IL-1β对NF-кB表达的影响. 方法体外培养的hRPE细胞经同步化后分2组分别加药:(1)无PDTC组:分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在hRRE中的基础表达);(2)PDTC组:分别加入IL-1β、生理盐水(用于检测NF-кB在PDTC预处理后hRPE中的表达).免疫荧光抗体染色、流式细胞计数法(flow cytometry, FCM)测定上述2组标本中hRPE的NF-кB的表达率. 结果 NF-кB在hRPE中的基础表达率为8.05 %,IL-1β作用后表达率升高到30.26%; hRPE细胞经PDTC预处理后,NF-кB的表达率下降为3.74%,加入IL-1(10 υg·L-1)作用后表达率为3.66%. 结论 IL-1β可以显著提高NF-кB在hRPE细胞中的表达;PDTC可以显著降低体外培养的hRPE中的NF-кB表达率,PDTC亦可显著抑制由IL-1β诱导的NF-кB的活化过程.  相似文献   

7.
KN-5000LASIK微型角膜刀研究   总被引:7,自引:2,他引:5  
目的 评价国产KN- 5000 微型角膜刀在临床角膜瓣技术中的作用,评价治疗高度近视的临床效果,探讨其预测性、安全性和稳定性。方法 选用连续病例24 例44 眼, 随机分为实验组(A 组) 和对照组(B组) 。A 组11 例21 眼,术前平均球镜当量1321 ±473D,最大散光度225D。B 组13 例24 眼,术前平均球镜当量1140 ±263D,最大散光度275D。术中分别用KN- 5000 微型角膜刀和Moria 微型角膜刀制作角膜瓣。结果 术中制瓣安全简捷,制瓣良好率A 组21 /21 ,B 组23/24 ,2 组无明显差异,无术中并发症发生。临床病例随访显示:2 组术后3mo 裸眼视力大于等于05 的比率分别是619 % 和652 % ,术后屈光度按球镜当量计算实验组为- 067 ±184D,对照组- 076 ±175D。术后屈光度在- 1D 之内比率实验组为429 % ,对照组为478 % ,这2 组差异经检验无意义。结论 KN- 5000 微型角膜刀制作角膜瓣稳定性、预测性良好。进一步临床应用有待继续进行  相似文献   

8.
维甲酸对人角膜基质细胞增殖和移行的影响   总被引:3,自引:1,他引:2  
目的 探讨维甲酸对角膜基质创伤愈合的可能的作用。方法 利用细胞计数法、MTT法观察维甲酸对培养的人角膜基质细胞增殖的影响;利用缺损闭合实验观察维甲酸对培养的人角膜基质细胞移行的影响。结果 MTT法和细胞计数法显示,维甲酸抑制体外培养的人角膜基质细胞增殖,抑制作用呈剂量、时间依赖性(F检验,P〈0.05),抑制率在11.4%~39.2%。细胞计数法还显示,0.5%苔芬兰染色示各组活细胞均在90%以上  相似文献   

9.
目的 观察转化生长因子β(TGF-β)对培养的人角膜基质细胞分泌MMP-2和MMP-9的调节作用,探讨TGF-β治疗非感染性角膜溃疡的潜在可能性。方法 采用酶谱法检测人角膜基质细胞MMP-2和MMP-9的分泌,并观察TGT-β对MMP-2和MMP-9分泌的调节作用。结果 培养的人角膜基质细胞分泌MMP-2和MMP-9,TGF-β抑制MMP-9的活性,且TGF-β作为一种MMP-9的抑制剂,在促进非  相似文献   

10.
目的 搪塞角膜中期保存过期中细胞凋亡现象,为改进角膜保存方法提供理论依据。方法采用M-K液、M-K+EGF液和Optisol3种保存2液保存兔和人角膜,用光镜、电镜及T UNEL标记技术检测细胞凋亡发生情况。中保存液保持3、5、7天的兔角膜上皮、项质及内皮细胞层均可见细胞凋亡发生。结论细胞凋 角膜中期保存2过程中细胞失丧失的另外一种可能机制;细胞凋亡的发生对角膜中期保存效果存在一定的影响;表皮生长  相似文献   

11.
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13.
14.
目的探讨二硫代氨基甲酸吡咯烷(PDTC)对绿脓杆菌脂多糖(LPS)诱导的人角膜基质细胞核因子κB(NF—κB)活化与细胞因子释放的干预作用及其机制。方法为实验研究。原代培养人眼角膜基质细胞(HCFs),选取生长良好的传代HCFs分为对照组、LPS刺激组及PDTC预处理组。LPS组给予单纯LPS刺激,PDTC预处理组则在LPS刺激前先加PDTC培养30min,再给予相同浓度的LPS。在LPS刺激1、2、4及8h时,分别收集各组细胞和上清液,Western blot检测HCFs NF—κB的活化表达;酶联免疫吸附实验(EHSA)检测HCFs培养上清液中自细胞介素6(IL-6)和IL-8的分泌情况;逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)检测HCFs IL-6和IL-8 mRNA的表达。结果与对照组相比较,LPS刺激后,HCFs胞核NF—κB p65的表达明显升高,HCFs中IL-6与IL-8蛋白的分泌和mRNA的表达均显著升高。PDTC预处理30min后再给予LPS刺激,可部分抑制HCFs胞核中NF—κB p65的活化表达(t1h=9.3766,t2h=15.9011,t4h=12.5851,t8h=10.8346;均P〈0.01);PDTC预处理可不同程度的下调LPS诱导的HCFs分泌IL-6、IL-8蛋白及IL-6、IL-8 mRNA的表达,二者均明显低于同时间点LPS组HCFs的表达,差异均有统计学意义(IL-6蛋白:t1h=7.9154,t2h=10.8630,t4h=8.2451,t8h=13.5063;IL-8蛋白:t1h=8.5663,t2h=20.5169,t4h=25.1580,t8h=34.8699;IL-6 mRNA:t1h=12.0235,t2h=13.2894,t4h=24.0799,t8h=27.2261;IL-8 mRNA:t1h=20.9424,t2h=24.1314,t4h=29.8580,t8h=47.9442;均P〈0.01)。结论绿脓杆菌LPS可引起HCFs NF—κB活化,促进细胞因子的表达,PDTC可部分抑制LPS对NF-κB的激活,下调相应细胞因子的表达。(中华眼科杂志,2008,44:6146)  相似文献   

15.
16.
目的:探讨紫外线B光(UVB)照射小鼠角膜后核转录因子(NF-κB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达变化及NF-κB在角膜损伤中的意义。方法:ICR小鼠随机分为对照组、低剂量UVB照射组(300mJ/cm2)及高剂量UVB照射组(1200mJ/cm2),裂隙灯下观察角膜病变,评分以判断角膜损伤程度。UVB照射后不同时间点(6h、24h及72h)分别取角膜,凝胶电泳迁移法(EMSA)检测角膜NF-κB的活性,酶联免疫吸附(ELISA)测定角膜TNF-α的表达水平,光镜及电镜检查角膜的病理改变。结果:低剂量照射组角膜基质轻度水肿,在72h内基本消退,高剂量照射组角膜基质混浊明显增强且持久。正常对照组小鼠角膜NF-κB的活性水平低,照射组角膜组织出现NF-κB表达的活化,并随剂量的增加活性明显增加,不同剂量组间差异有显著统计学意义。同时,照射后角膜组织TNF-α的表达也明显增强,其变化趋势与NF-κB的活性变化类似。电镜显示低剂量组仅角膜上皮及浅层基质细胞受损,高剂量组角膜损伤累积全基质细胞及内皮细胞。结论:UVB照射小鼠角膜后激活NF-κB,并引发促炎性细胞因子TNF-α的表达。随着角膜损伤程度的加重,NF-κB的活性水平增强,提示NF-κB的激活可能在紫外线造成的角膜损伤中起着重要的作用  相似文献   

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18.
目的 探讨转录因子E2F1在人视网膜色素上皮 (retinal pigment epithelium,RPE) 细胞中的表达及活化。 方法 培养的人RPE细胞经同步化后分为两组:无血清组和含20%新生牛血清的血清组。采用Western blot蛋白印迹法检测两组细胞中转录因子E2F1蛋白的表达。用凝胶迁移率变动分析法(EMSA)检测其与DNA的结合活性。 结果 在RPE细胞核抽提物中检测到相对分子质量为60×103的E2F1蛋白,血清刺激使其表达增加(P<0.001)。EMSA分析示在血清刺激下,E2F1核蛋白与DNA的结合活性增强。 结论 转录因子E2F1存在于人RPE细胞的细胞核中,血清刺激可诱导其表达增加,并增强其与DNA的结合活性,发挥其调控基因转录的作用。 (中华眼底病杂志, 2002, 18: 224-226)  相似文献   

19.
Human corneal endothelial cells (HCEC) do not mitose extensively in vivo after damage to the endothelial layer. However, HCEC will divide in vitro if cultured under appropriate conditions. We measured the ability of various sera, plasma, growth factors, and nutritional substances to stimulate mitosis of HCEC during 5 days of organ culture after a central freeze injury to the endothelium. Supplementation of a chemically defined medium (CDM) with 20% fetal human serum (FHS) induced significantly higher numbers of mitotic figures or labeled nuclei of human or cat corneas compared with paired corneas cultured in CDM alone. Furthermore, addition of 20% FHS produced more labeled nuclei than did addition of 20% fetal bovine serum or 20% adult human serum. Dialyzed fetal human serum failed to stimulate mitosis, indicating that one or more components of fetal human serum with molecular weight less than 12,000 are essential for mitosis. Human plasma also failed to stimulate mitosis, but an extract of human platelets significantly stimulated high levels of nuclear labeling, suggesting that growth factors contained in platelet granules were responsible for serum-stimulated mitosis of HCEC. Addition of 100 nM epidermal growth factor (EGF) or 10 microM insulin to CDM supplemented with low levels of adult human serum (0.5%) stimulated significantly higher numbers of labeled nuclei compared with paired corneas cultured with 0.5% adult human serum. Supplementation of corneal storage media (K-Sol and CSM) with a mixture of chemically defined agents consisting of EGF, insulin, transferrin, selenium, linoleic acid, and albumin stimulated significantly higher numbers of labeled nuclei compared with paired corneas cultured in the unsupplemented corneal storage media.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)  相似文献   

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