牛视网膜微血管周细胞和内皮细胞的选择性培养

目的 建立视网膜微血管周细胞（ＰＣ）和内皮细胞（ＥＣ）选择性培养的简便方法。方法 采用含２０％胎牛血清（ＦＢＳ）的ＤＭＥＭ和在该培养基加入５％贫血小板人血浆（ＰＰＰ）及牛视网膜浸出液（２０ｕｌ／ｍｌ）,结合原代培养细胞克隆的分离、除杂。结果 获得的ＰＣ和ＥＣ能连续传代,纯净度〉９５％。ＰＣ形态不规则,无接触性抑制,对３Ｇ５和α－肌动蛋白单克隆抗体染色阳性,Ⅷ因子抗体染色阴性;ＥＣ呈鹅卵石状生长,有接触性抑制,对Ⅷ因子抗体染色阳性,３Ｇ５和α－肌动蛋白抗体染色阴性。结论 用２０％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ或在该培养液中加入５％ＰＰＰ及视网膜浸出液,结合原代细胞克隆的分离、除杂,可分别获得较纯净的ＰＣ和ＥＣ培养物。     

大鼠视网膜微血管内皮细胞的原代培养及鉴定改进

目的探讨大鼠视网膜微血管内皮细胞原代培养改进方法,为研究视网膜新生血管疾病的病理机制奠定基础。设计实验研究。研究对象大鼠视网膜微血管内皮细胞。方法采用机械剪除大鼠视网膜血管联合酶消化分离,用含胎牛血清、内皮细胞培养特制添加剂等的条件培养基培养及纯化大鼠视网膜微血管内皮细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态。应用因子VIII、血小板内皮细胞黏附分子-1（CD31）免疫鉴定细胞。主要指标微血管内皮细胞形态,免疫荧光染色。结果原代培养的大鼠视网膜微血管内皮细胞贴壁后散在分布,呈单层排列,多为梭形,边界清楚,少量呈铺路石样螺旋向外生长,3-5天后融合,呈簇状单层分布。免疫荧光细胞染色显示,因子VIII抗体染色核周出现黄绿色荧光反应,CD31因子抗体染色以胞浆着色为主。细胞纯度较高,荧光染色阳性细胞率为95%。结论采用机械剪除大鼠视网膜血管、胰蛋白酶和胶原酶消化、含特制添加剂培养基的应用、明胶包被培养瓶等综合法可获得较纯的大鼠视网膜微血管内皮细胞。     

鼠视网膜血管内皮细胞体外培养的改良及鉴定

背景视网膜血管内皮细胞（RVECs）的体外培养是进行视网膜血管性疾病研究的基础，人眼球供体的缺乏是限制人血管内皮细胞培养的主要原因，与人高度同源的大鼠血管内皮细胞的培养方法已经建立，但其分离方法对细胞损伤较大，影响细胞的培养效率。目的建立和改良大鼠RVECs的培养方法。方法选取5只SD大鼠眼球，获得视网膜，用组织块培养法，将大鼠视网膜用质量分数0．1％胶原酶消化，并加入质量分数20％胎牛血清、血管内皮生长因子（VEGF）、血管内皮细胞生长添加物（ECGS），用血管内皮细胞培养基中和后充分吹打，制备细胞及组织悬液，接种于人纤维粘连蛋白（FN）包被的培养瓶中。用Ⅷ因子相关抗体鉴定培养的内皮细胞。结果组织块法消化培养2d可见细胞从组织块游出，培养4d可伸出触角呈梭形，5～6d可融合生长，培养14d后的细胞呈单层生长，培养的细胞Ⅷ因子相关抗体染色阳性。传代培养的细胞接种2h可重新贴壁，恢复融合生长状态。结论视网膜组织块培养并用胶原酶消化可获得活性较强的细胞和碎片，再用高选择性的血管内皮细胞培养基和FN促贴壁进行选择性培养，可获得纯度较高的RVECs。     

大鼠视网膜微血管内皮细胞的分离和培养

目的探讨大鼠视网膜毛细血管内皮细胞(rat retinal capillary endothelial cells,RRCEC)的体外分离和选择性培养方法。方法采用单纯视网膜剪碎法获得的视网膜微血管碎片,结合0.25%胶原酶消化,经细胞筛网过滤,原代细胞悬液接种于纤维粘连蛋白(fibronectin,FN)包被的培养皿中,培养液为含20%胎牛血清(FBS)、100×103U·L-1肝素钠、10mg·L-1碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的DMEM液。原代培养5～6d细胞较少时,采用机械除杂法进行细胞分离,而在传代时利用进行选择性消化和贴壁法除杂分离以获得较纯RRCEC。应用Ⅷ因子相关抗体通过免疫组化方法对所培养的RRCEC进行鉴定。结果大鼠视网膜组织经过胶原酶适当消化后,产生大量具有良好生长能力的微血管碎片,贴壁后可见RRCEC自微血管碎片中游出,融合后呈铺路石样单层生长。传代培养时5～6d可融合生长。选择性培养获得的RRCEC纯度高,能连续传代,保持性状不变。对Ⅷ因子相关抗体染色阳性。结论视网膜剪碎、胶原酶、FBS、bFGF、培养皿处理及机械除杂法分离,选择性消化和贴壁等应用可获得较纯的RRCEC,方便简单,具有良好的重复性。     

人脐静脉内皮细胞体外分离培养方法改进的探索及鉴定

目的:建立能大量分离人脐静脉内皮细胞的体外培养的简便方法,分析人脐静脉内皮细胞抗原表达的特点.方法:采用玻璃接管连接医用三通管灌注0.133%胶原酶I法分离脐静脉内皮细胞,培养于10%胎牛血清的人内皮细胞培养液(含β-促内皮细胞生长因子和肝素钠),培养皿用1.5%明胶包被,促进内皮细胞贴壁.培养过程中观察细胞的形态特征,同时行免疫组织化学染色检测第八因子相关抗原、CD31表达情况,鉴定内皮细胞来源.结果:成功获取人脐静脉内皮细胞,原代人脐内皮细胞24 h贴壁,第5日细胞融合;第八因子相关抗原和CD31呈广泛的阳性表达.第八因子相关抗原阳性染色程度高于CD31,证实为人脐静脉内皮细胞.结论:应用玻璃接管连接医用三通管灌注胶原酶消化法分离脐静脉内皮细胞,利用10%优质胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加β-促内皮细胞生长因子和肝素钠,并用1.5%明胶包被培养皿,能简单有效培养人脐静脉内皮细胞.     

视网膜神经节细胞无血清上清培养液诱导大鼠视网膜干细胞的分化

目的　探讨视网膜神经节细胞无血清上清培养液对视网膜干细胞分化的影响。方法　分离大鼠视网膜干细胞和视网膜神经节细胞；采用免疫荧光法鉴定体外培养的大鼠视网膜干细胞与视网膜神经节细胞，视网膜干细胞以Nestin抗体进行鉴定，视网膜神经节细胞以Thy-1抗体进行鉴定；以视网膜神经节细胞无血清上清培养液培养视网膜干细胞，以不加入条件培养液培养的视网膜干细胞为对照组，收集分化细胞，采用qPCR法检测Nestin、Pax6、Thy-1及Brn-3的基因表达。结果　培养的视网膜干细胞Nestin抗体染色阳性，视网膜神经节细胞Thy-1抗体染色阳性。培养视网膜干细胞72 h后，与对照组相比，无血清上清培养液组细胞Nestin和PAX6基因相对表达量降低，差异均有统计学意义（均为P<0.000 1）；Thy-1和Brn-3基因相对表达量升高，差异均有统计学意义（均为P<0.05）。结论　视网膜神经节细胞无血清上清培养液能够诱导视网膜干细胞分化为视网膜神经节样细胞。     

牛视网膜微血管内皮细胞的体外分离培养

目的探讨一种方便可靠的牛视网膜微血管内皮细胞(borein retinal microvas cular endothelial cell,BREC)体外培养方法.方法采用机械剪碎牛视网膜血管,用含牛血清、肝素、血管内皮生长因子(Vascularendothelial growthfactor,VEGF)的条件化培养基培养牛视网膜血管内皮细胞,观察细胞生长状况,制作生长曲线.应用Von Willebrand因子抗体免疫鉴定BREC,并通过透射电镜观察BREC的超微结构.结果添加了VEGF的条件化培养基对BREC有很好的选择刺激作用,初期细胞呈鲤鱼样聚集在微血管碎片周围,对数生长期细胞似铺路石样大片单层生长,存在接触抑制.Von Willebrand因子抗体染色阳性,获得BREC纯度在95％以上,能够连续传代.培养的细胞电镜下符合内皮细胞的特征.结论含VEGF培养基的应用可以获得高纯度、具有良好生长特性的BREC,是一种简便、效果稳定可靠的体外培养牛视网膜微血管内皮细胞的方法.     

人视网膜胶质细胞的原代培养与鉴定方法

背景 人视网膜胶质细胞在视网膜增生性疾病的研究中有重要作用,以往研究者已成功地培养了人视网膜胶质细胞,但方法学有待进一步改进以达到细胞收获量更大的目的. 目的 建立快速、收获量大且纯度高的视网膜胶质细胞的培养方法,对目标细胞的抗原表达特点进行分析. 方法 取正常人角膜移植供体眼球分离视网膜组织,采用质量分数2％胰蛋白酶和质量分数0.133％胶原酶Ⅵ用二步法消化获取人视网膜胶质细胞,用含质量分数10％胎牛血清的人内皮细胞培养液,其中添加内皮细胞生长因子(β-ECGF)和肝素钠,对分离的细胞进行体外培养,培养皿用纤维黏连蛋白(FN)包被以促进人视网膜胶质细胞贴壁.观察收获的目标细胞的形态特征,采用活体显微镜下形态学观察、常规组织学观察法观察目标细胞的生长,同时采用免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、波形蛋白(Vimentin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、S-100、CD34、Ⅷ因子在细胞中的表达以鉴定目标细胞. 结果 应用胰蛋白酶、胶原酶二步消化法可成功获取人视网膜胶质细胞,原代培养的细胞72 h贴壁,第9～10天细胞达到融合状态呈花瓣状;常规组织学观察显示细胞核呈鲜亮蓝色,细胞质(盘膜)呈淡红色,培养细胞GFAP、Vimentin呈强阳性表达,NSE、S100、CD34、Ⅷ因子相关抗原表达呈阴性反应. 结论 应用胰蛋白酶、胶原蛋白酶消化法以及利用10％胎牛血清的人内皮细胞培养基,添加生长因子和肝素钠,并用FN包被培养皿进行体外培养可达到快速、大量分离和纯化人视网膜胶质细胞的目的,鉴定结果提示培养的目标细胞为人视网膜胶质细胞,其形态与以往报道的有所不同,具体特点尚需进一步研究.     

免疫磁珠法原代分离培养大鼠视网膜微血管周细胞

目的建立免疫磁珠法原代分离纯化大鼠视网膜微血管周细胞，并确定其免疫组化特征。方法免疫磁珠法结合传统的胶原酶消化及筛网过滤法分离出大鼠视网膜微血管周细胞，采用含有20％胎牛血清的DMEM培养。通过周细胞的形态和生长方式初步鉴别，再进行细胞α—SMA，vWF，GFAP抗体免疫组织化学特征鉴定，及激光共聚焦显微镜行用细胞PDGFR-β和desmin抗体荧光双标观察。周细胞生长曲线通过MTT法测定。结果本法获得的周细胞纯度可达98％，并能连续传代。原代周细胞约2～3周融合，传代后生长和融合速度加快，细胞形态不规则，胞内可见丝状结构，无接触性抑制。免疫组化证实周细胞胞浆内α-SMA蛋白表达阳性，内皮细胞特异性vWF因子表达阴性，胶质细胞特异性GFAP表达阴性。激光共聚焦显示周细胞PDGFR-β和desmin抗原表达均为阳性。结论本研究首次报道应用免疫磁珠法分离培养大鼠视网膜微血管周细胞。获得高度纯化的周细胞具有明确的免疫组化特征，可用于相关视网膜血管性疾病的进一步研究。     

改良的人视网膜Müller细胞的原代培养方法与鉴定

背景 视网膜Müller细胞是视网膜重要的胶质细胞,也是视网膜干细胞的来源之一,研究Müller细胞的生物学行为对研究视网膜的各种生理病理过程和视网膜干细胞治疗研究具有重要意义,而建立稳定的视网膜Müller细胞培养体系是相关研究的基础. 目的 优化分离培养和纯化人视网膜Müller细胞的方法,为相关的实验研究提供良好优质的Müller细胞来源. 方法 分离人供体眼视网膜组织,然后将剪碎的视网膜组织置入质量分数0.25％胰蛋白酶+100 U透明质酸酶混合溶液中进行消化,添加含体积分数10％胎牛血清的DMEM/F12培养液1～2 ml终止消化,然后加入含体积分数20％胎牛血清的RPMI1640培养液培养72 h,行半量换液,再以含10％胎牛血清的培养液进行传代.光学显微镜下根据细胞的形态特征进行细胞鉴定,并分别采用免疫荧光技术和免疫组织化学法检测胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Müller细胞特异性标志物谷氨酰胺合成酶(GS)的表达,对培养的细胞进行鉴定.结果 应用0.25％胰蛋白酶+100 U(商品单位)透明质酸酶的混合酶消化法可成功获取人视网膜Müller细胞,原代培养后24 h细胞贴壁,培养后9～1Od细胞融合.培养的细胞胞体呈长圆形,细胞质丰富,部分细胞体两端锥状长突起,末端膨隆,细胞核大.传代后的细胞胞体大,呈扁平多角形,符合Müller细胞的形态.细胞免疫组织化学和免疫荧光技术检测显示95％以上的细胞中GFAP呈阳性表达,90％以上的细胞中GS呈强阳性表达. 结论 应用透明质酸酶和胰蛋白酶混合液消化法可以成功分离人视网膜Müller细胞,分别用含20％胎牛血清和含10％胎牛血清的RPMI1640培养液培养和传代的人视网膜Müller细胞产量高且纯度好.     

低温冷冻对角膜缘干细胞生物学特性的影响

目的 评价低温冷冻保存对体外培养兔角膜缘干细胞生物学特性的影响.设计实验研究.研究对象新西兰白兔.方法 新西兰白兔20只（40眼）,制备2 mm周边角膜和2 mm球结膜的环形浅层角膜缘植片,待形成细胞单层后,将培养的细胞低温冻存1个月,然后复苏培养.将未冻存的细胞和冻存复苏后的细胞采用免疫细胞荧光染色、流式细胞仪检测,鉴定培养细胞的生物学特性,通过倒置显微镜、MTT比色法比较传代培养的角膜缘干细胞低温保存前后的形态结构和特性.主要指标角膜缘干细胞活性及生物学特性.结果 显微镜下观察冻存复苏后的细胞,与未冻存细胞相比,细胞状态差,贴壁时间晚,核浆比变小,形态不规则;免疫荧光细胞染色检测ABCG2单克隆抗体阳性率未冻存细胞为81.7%,低温冻存细胞降至46.9%,差异有统计学意义（P〈0.05）;流式细胞仪检测低温冻存细胞与未冻存细胞角膜缘干细胞占总细胞的比例分别为0.90%和2.43%,差异有统计学意义（P〈0.05）;MTT法检测低温冻存的细胞比未冻存细胞增殖活性降低,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 低温冻存后角膜缘干细胞的活性和生物学特性均受到严重影响,其冻存方法和复苏技术有待进一步改进.     

体外培养的晶状体上皮细胞株的确定及生长、分化规律

目的建立牛、兔、人晶状体上皮细胞的体外培养，进一步认识晶状体上皮细胞生长、分化规律。方法应用组织块培养方法进行３种晶状体上皮细胞的体外培养，经Ｇｉｍｓａ染色，在倒置显微镜下对培养的晶状体上皮细胞的生长、分化规律进行观察。结果培养至６ｗｋ的人胎儿晶状体上皮细胞中有特征性的“晶状体小体”形成；牛、兔晶状体上皮细胞去分化是发生在第３代，而人晶状体上皮细胞在第４代开始出现去分化；它们传代至第８代时生长都趋于停止，出现老化表现；来自人的晶状体上皮细胞生长增殖率与年龄呈负相关关系（ｒ＝－０．９９６）。结论“晶状体小体”的形成可作为确定晶状体上皮细胞株的一项特征性依据，而体外培养的人、牛、兔晶状体上皮细胞具有相同的有限生长潜能，在相同的条件下，牛、兔晶状体上皮细胞的生长增殖速度比人晶状体上皮细胞快，但易于发生去分化；此外，人晶状体上皮细胞的生长增殖率与年龄密切相关，年龄越小，晶状体上皮细胞的生长增殖速度越快。     

Magnetic attraction of iron-endocytosed corneal endothelial cells to Descemet's membrane

PURPOSE: To evaluate the feasibility of a novel method of magnetic attraction of iron-endocytosed corneal endothelial cells to Descemet's membrane. METHODS: Cultured rabbit corneal endothelial cells (RCEC) were exposed to spherical iron powder at various concentration ranging 0-100 micro moll(-1). After 24hr, the cell density and morphology were evaluated. RCEC that had been exposed to spherical iron powder (RCEC-iron), were trypsinized and poured onto a culture dish where a neodium magnet was fixated paracentrally. After 24hr, the cell density was measured at the areas with and without a magnet. Rabbits' corneas were cryo-injuried to detach corneal endothelial cells and 1x10(5)/200 micro l RCEC-iron were injected into the anterior chamber. Neogium magnet was fixed on the lid for 24hr to attract RCEC to Descemet's membrane. Each operated eye was observed up to 2 months after the injury. RCEC group (rabbits with cryo-injury and injection of normal cultured RCEC) and cryo group (rabbits with cryo-injury but without injection of RCEC) served as controls. RESULTS: The RCEC-iron density on the dish decreased in the medium containing iron powder of 10 micro moll(-1) or more. When RCEC had been exposed to iron powder of between 5 and 10 micro moll(-1), the ratio of RCEC in the field with a magnet to RCEC in the field without a magnet increased. In the RCEC-iron group, the mean corneal thickness gradually decreased and was significantly less than in the other two groups at 2, 4, and 8 weeks after the cell injection. Fluorescein microscopic examination showed a monolayer of DiI-labelled cells on the Descemet's membrane. CONCLUSION: Magnetic attachment of iron-endocytosed corneal endothelial cells to Descemet's nembrane can be a method of choice for corneal endothelial decompensation.     

Cytotoxic effects of antiproliferative agents on human retinal glial cells in vitro

Purpose: Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is characterizedby the formation of cellular membranes on the detached retina and also in the vitreous. Glial cellscan be found in epiretinal and subretinal membranes from eyes with PVR, proliferative diabeticretinopathy (PDR), idiopathic macular pucker, uveitis and other diseases affecting theretina. Proliferation and contraction of glial cells appears to play a role in the pathogenesisof PVR. This study is designed to inspect the effectiveness of harringtonine, as well as colchicine,daunomycin and fluorouracil, against cellular proliferation of cultured human retinal glial cellsthat might be involved in the retinal and/or vitreous proliferation. Methods: Cultures of human retinal glial cells were preparedusing the enzyme digesting method. Cells that had been in culture for 2–5 passages were usedin this study. Harringtonine (0.063 g/ml 2.0 g/ml), colchicines(0.5 g/ml 16.0 g/ml), daunomycin (0.1 g/ml 3.2 g/ml) and 5-fluorouracil(0.5 g/ml 16.0 g/ml) were added to cultures of human retinal glial cellsand the proliferation rates of the cells were measured by the MTT method. Results: Harringtonine at the dosage of 0.063 g/mlinduced suppression of cellular growth, but the changes were not statistically significant (p > 0.05).At a dosage ranging from 0.125 g/ml to 2.0 g/ml, harringtonine significantly suppressedcellular growth according to the test (p < 0.01). Likewise, other antiproliferativeagents inhibited cellular growth significantly at a dosage from 1.0 g/ml to 16.0 g/ml(colchicine), 0.2 g/ml to 3.2 g/ml (daunomycin) and 1.0 g/ml to 16.0 g/ml(5-fluorouracil), but not at 0.5 g/ml (colchicine), 0.1 g/ml (daunomycin) and0.5 g/ml (5-fluorouracil). The ID₅₀ were 0.33 g/ml (harringtonine), 3.11 g/ml (colchicine), 0.79 g/ml (daunomycin) and 5.23 g/ml (5-fluorouracil), respectively.Conclusions: Harringtonine was extremely effective ininhibiting human retinal glial cell proliferation, like other antiproliferative drugs such as colchicine,daunomycin and 5-fluorouracil. Harringtonine, therefore, may be a candidate for further studies regardingthe treatment of experimental PVR.     

曲尼司特对培养兔晶状体上皮细胞的作用

目的 观察曲尼司特(Tranilast)对培养兔晶状体上皮细胞增殖的作用及其对细胞周期的影响。方法 将传代的兔晶状体上皮细胞用含不同曲尼司特浓度的培养液培养，每天计数，绘制细胞生长曲线，收集细胞做流式细胞仪检查。空白培养液培养的细胞做阴性对照，含0．004％丝裂霉素C(MMC)培养液培养的细胞为阳性对照。结果 用180μmol／L的培养液培养细胞时细胞增殖明显受到抑制，随药物浓度增加，细胞增殖受抑制越明显，细胞生长曲线越低平，细胞形态变化不大。经流式细胞术进行细胞周期分析，随药物浓度增加G0／G1期细胞数增多(67．47％～79％)，而S期细胞数减少(21．19％～4．32％)。阳性对照组细胞于48h全部死亡。结论 曲尼司特具有抑制晶状体上皮细胞增殖的效果，且呈浓度依赖性。曲尼司特将细胞抑制在G1期的限制点内。     

尾静脉注射碘酸钠对小鼠视网膜形态结构变化的影响

目的　探讨尾静脉注射碘酸钠（NaIO₃）对小鼠视网膜形态结构的影响。方法　36只昆明小鼠分为4组:对照组、损伤3 d组、损伤7 d组、损伤14 d组。对照组不作任何处理，各损伤组小鼠经尾静脉单剂量注射NaIO₃（35 mg?kg^-1）。在NaIO₃损伤3 d、7 d、14 d后取材，进行视网膜组织铺片和组织切片。利用HE染色、NeuN免疫组织化学染色及 Opn1mw、GFAP、Iba1免疫荧光染色，检测NaIO₃注射后不同时间小鼠视网膜形态结构的改变。结果　HE染色结果显示，损伤3 d后外核层每10 μm长度细胞数由正常水平（31.97±2.27）个下降至（26.21±0.83）个，差异有统计学意义（P<0.05）；损伤7 d后内核层每10 μm长度细胞数由正常水平（12.33±0.16）个下降至（11.39±0.43）个，差异有统计学意义（P<0.05）。NeuN染色结果显示，损伤14 d后视网膜神经节细胞层每100 μm长度视网膜神经节细胞数由正常水平（14.92±1.74）个下降至（11.25±0.09）个，差异有统计学意义（P<0.05）。GFAP染色结果显示，损伤3 d组每200 μm × 200 μm 范围内活化的Müller细胞数由对照组的（16.96±0.85）个增加至（20.42±1.64）个，差异也有统计学意义（P<0.05）。Opn1mw、Iba1染色结果显示，损伤后视网膜视锥细胞外节段变薄、小胶质细胞数增加。结论　尾静脉注射NaIO₃会引起小鼠视网膜形态结构不可逆的损伤，且该损伤具有时间依赖性。     

兔角膜内皮、上皮及基质细胞体外培养扩增的研究

目的 建立角膜上皮、基质及内皮细胞体外培养扩增的简单稳定的方法，为组织工程化角膜的构建提供种子细胞。方法 内皮细胞与后弹力层在培养基中孵育后消化法获原代细胞，胰酶消化去除表层上皮后取角膜缘，组织块法培养角膜缘上皮细胞，基质细胞应用胶原酶消化法获原代培养，各细胞融合后胰酶消化依次传代培养。结果 原代内皮细胞4—5d融合成单层细胞，可连续传6—7代。上皮细胞1周左右生长融合，连续传3—4代后细胞形态改变。基质细胞接种6—7d后近融合，传代后增殖明显，可连续传10代。结论依据角膜组织特征选择合适的方法体外分离、培养角膜3种细胞成分，可获连续传代扩增的角膜细胞。     

Socioeconomic and Ethnic Disparities in Periocular Cutaneous Malignancies

ABSTRACT

Cutaneous malignancies make up the majority of periocular tumors diagnosed and treated by ophthalmologists. In this review, we examine literature regarding ethnic and socioeconomic disparities in incidence and clinical outcomes of the three most common cutaneous periocular tumors: basal cell carcinoma, squamous cell carcinoma, and melanoma. In all three tumor types, the literature shows an increased incidence among two groups: those with lightly pigmented skin and those of higher socioeconomic status. While incidence is high in these groups, clinical outcomes for these patients tend to be good. Those with lower socioeconomic status and ethnic minorities, on the other hand, have a low incidence but are more likely to have poor clinical outcomes. These disparities are likely the result of both biologic and behavioral differences between patients and could provide opportunities for intervention to change risk perception and improve outcomes.     

干细胞移植在视网膜神经节细胞损伤修复中的应用

进行性视网膜神经节细胞损伤在一些致盲性眼病中屡见不鲜。目前临床上缺乏有效的损伤修复方法,然而最近研究显示干细胞移植为受损视网膜神经节细胞的保护和替代治疗提供了新思路。本文将就干细胞移植为基础的研究进展进行综述。     

重楼皂苷Ⅰ对人视网膜色素上皮细胞系ARPE-19增殖的影响

目的 探讨重楼皂苷Ⅰ对人视网膜色素上皮细胞系(ARPE-19)的增殖和凋亡的影响.方法 不同浓度(1.5 mg·L-1、3.0 mg·L-1、6.0 mg·L-1)重楼皂苷Ⅰ作用下的ARPE细胞,CCK-8法检测重楼皂苷Ⅰ对ARPE-19细胞增殖的影响;流式细胞仪检测ARPE-19细胞周期变化及细胞凋亡水平;Western blot检测ARPE-19细胞内Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Cyclin D1、ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达.结果 1.5 mg· L-1、3.0 mg·L-1、6.0 mg·L-1重楼皂苷Ⅰ处理后细胞存活率分别为(68.945±5.647)％、(58.637±5.266)％、(47.338±6.493)％,均低于空白对照组的(98.600±7.803)％;凋亡率分别为(9.622±0.315)％、(26.123±0.331)％、(34.345±0.621)％,均高于空白对照组的(4.512±0.213)％;G0/G1期比例分别为(68.520±2.630)％、(75.222±2.627)％、(81.792±3.931)％,均高于空白对照组的(54.632±2.506)％.重楼皂苷Ⅰ处理对ARPE-19细胞ERK1/2蛋白表达无明显影响,但下调Cyclin D1、Bcl-2和p-ERK1/2蛋白的表达,上调Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达.结论 重楼皂苷Ⅰ通过下调Cyclin D1的表达将ARPE-19细胞阻滞于G1期,抑制细胞增殖.通过抑制ERK信号通路,活化线粒体凋亡通路,诱导细胞凋亡.本研究为中药重楼治疗增生性玻璃体视网膜病变提供了依据.