视神经挫伤轴浆运输和超微结构变化的实验研究

目的 研究实验性视神经挫伤轴浆运输与超微结构的变化。方法采用自行设计的弹簧冲击器对家兔视神经进行定量损伤，术后1、3、7、14d应用辣根过氧化物酶(HRP)顺行标记和透射电镜观察视神经轴浆运输以及超微结构的变化。结果 不同时间实验组HRP反应产物较正常对照组明显降低，差异有显著性，HRP反应产物随观察时间延长逐渐增加，但至术后14d仍明显低于正常。电镜观察见损伤后1d大部分轴突颗粒状变性，线粒体肿胀，髓鞘松解，3d时损伤最重，14d部分轴突恢复正常。结论 视神经挫伤后局部轴浆运输发生障碍，同时轴突变性，14d部分轴突功能恢复。     

灯盏细辛对兔高眼压视网膜神经节细胞活性的作用

目的观察灯盏细辛对慢性高眼压兔视网膜神经节细胞活性的保护作用。方法对20只健康新西兰白兔右眼前房内注射40g·L-1甲基纤维素,制成慢性高眼压模型,左眼眼压均正常,随机分成灯盏细辛治疗组(n=10,高眼压+灯盏细辛治疗亚组和正常眼压+灯盏细辛治疗亚组)和未治疗组(n=10,单纯高眼压亚组和单纯正常眼压亚组)。治疗组于高眼压模型制作后第7d开始行灯盏细辛悬浊液灌胃,60d后制作眼球标本。常规石蜡切片,AgNOR染色观察RGCs细胞核内的银染颗粒。采用计算机图像分析系统对RGCs细胞核内的银染颗粒进行定量分析。结果高眼压2亚组较正常眼压2亚组的RGCs细胞核内银染颗粒明显减少,其差异有显著性意义(P<0.05);其中高眼压+灯盏细辛治疗亚组较单纯高眼压亚组银染颗粒多(P<0.05)。结论40g·L-1甲基纤维素前房注射建立慢性高眼压模型可导致RGCs细胞核内银染颗粒减少,灯盏细辛对高眼压后RGCs活性有一定的保护作用。     

灯盏细辛对大鼠慢性高眼压模型视神经损伤保护的实验研究

目的:建立大鼠慢性高眼压模型,观察灯盏细辛(Erigeronbrevicapas hand mass,EBHM)对眼压升高诱导视神经损伤的保护作用。方法:选用健康成年Wistar大鼠90只,分为3组。用波长为532nm的氪离子黄绿激光光凝第1和第2组大鼠双眼小梁网,建立大鼠高眼压模型。在眼压升高后1wk开始用EBHM对第2组大鼠15mg/100g肌肉注射,行视神经保护性治疗。第1组作为光凝对照组,第3组大鼠作为正常对照组。在第9wk同时处死3组大鼠做全视网膜铺片,1%甲苯氨蓝染色,记数平均视网膜神经节细胞(retinalganglion cells,RGCs)密度。结果:所有光凝眼眼压均中等程度升高,光凝前眼压为14.70±3.2mmHg;光凝后第3,6,9wk眼压分别为27.25±4.75,28.75±6.24,25.47±5.60mmHg,与光凝前比较,差别有显著性(P<0.05)。经视网膜铺片甲苯胺蓝染色,视网膜RGCs密度值(个/mm2)为:第1组1654±136,第2组2135±125,第3组2516±196。第2组大鼠视网膜RGCs密度值与第1和第3组大鼠RGCs密度值比较,差别有显著性(P<0.05)。结论:光凝大鼠小梁网成功建立大鼠慢性高眼压模型,光凝眼眼压中等程度升高,RGC密度降低;EBHM能够部分保护大鼠慢性高眼压诱导的视神经损害。     

藏红花素与灯盏细辛对慢性高眼压模型大鼠视神经保护作用的比较

背景 青光眼视神经损害的主要机制是视觉神经元的凋亡和视网膜血液供应的减少,灯盏细辛已证实对高眼压大鼠视网膜神经节细胞(RGCs)和视神经有保护作用.研究发现,藏红花提取物具有抗炎、抑制神经元凋亡和调节血流等作用,但其能否保护青光眼患者的RGCs尚不清楚. 目的 探讨藏红花素对慢性高眼压模型大鼠视神经的保护作用.方法 采用随机数字表法将32只SD大鼠随机分为假手术组、模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组,每组8只,均以右眼为实验眼.模型对照组、灯盏细辛组、藏红花素组大鼠采用巩膜静脉烧灼法建立慢性高眼压模型;假手术组大鼠仅剪开结膜,灯盏细辛组和藏红花素组大鼠于术前30 rmin和术后每日分别腹腔内注射灯盏细辛注射液150 mg/kg(0.5 ml)和藏红花素20 mg/kg(0.5 ml),共给药4周,假手术组和模型对照组大鼠以同样的方式注射0.5 ml生理盐水.各组大鼠均于术前和术后1d、3d、1周、2周、3周、4周测量眼压.术后4周制备大鼠眼球及视神经标本,采用苏木精-伊红染色法测定视网膜厚度;采用TUNEL染色法计数RGCs凋亡数量;采用透射电子显微镜观察各组大鼠视神经轴突超微结构的变化;采用Western blot法检测视网膜中bcl-2和bax蛋白的表达.结果 模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠造模和干预后不同时间点眼压均明显高于假手术组,造模后不同时间点大鼠的眼压值均明显高于造模前,各组大鼠在造模前后不同时间点眼压值的变化差异均有统计学意义(F分组=169.079,P=0.000;F时间=50.505,P=0.000).假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠视网膜厚度分别为(192.72±4.28)、(165.15±3.89)、(177.75±3.35)和(182.48±4.12) μm,藏红花素组大鼠视网膜厚度值明显低于假手术组而高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).假手术组、模型对照组、灯盏细辛组和藏红花素组大鼠RGCs凋亡率分别为(2.58±1.33)％、(42.10±4.71)％、(28.34±2.96)％和(19.95±2.93)％,藏红花素组大鼠RGCs凋亡率明显低于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).藏红花素组大鼠视神经有髓纤维数量和bcl-2/bax值均明显高于模型对照组和灯盏细辛组,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 藏红花素可抑制RGCs凋亡和视神经纤维的变性,对慢性高眼压大鼠视网膜神经细胞发挥保护作用,其对视神经的保护作用强于灯盏细辛.     

慢性高眼压对兔眼视神经的影响

本实验对２２只（４４只眼）健康成年青紫蓝兔的视神经乳头，在持续不同时间的高眼压状态下，分别进行了光镜和电镜的观察。     

灯盏细辛对青光眼视神经保护作用的临床试验

目的　评价灯盏细辛 (美尔瑞 )对眼压已控制的青光眼视神经的保护作用。方法　采用随机数字表法 ,将眼压已控制的 3 6例青光眼病人 (慢性闭角型青光眼 19例 ,原发性开角型青光眼17例 )分为两个组 ,双盲法让病人口服美尔瑞或安慰剂 ,服用三个疗程 ,每个疗程两个月 ,共六个月 ,观察眼压、视力、平均视网膜敏感度 (MS)、视网膜血流和视乳头地形图变化。结果　试验组和对照组服药前后眼压、视力无明显变化 ;试验组服药 6月MS为 17 44± 7 40dB ,与基线比较 ,P =0 0 49,差异有统计学意义。试验组在 2、 4、 6月视野改善率为 10 %、 2 5 %、 3 5 % ;而对照组分别为5 %、 5 %、 5 % (P <0 0 5 ) ;视网膜血流灌注检查 ,服药后 4月、 6月试验组Vol、Vel、Flw与基线比较 ,视乳头微循环改善 (P <0 0 5 )。而对照组以上三个指标差异均无显著性 ;HRT视乳头地形图检查 ,服药后 2、 4、 6月 ,试验组和对照组视杯面积、杯盘面积比、盘沿面积、视网膜神经纤维层厚度分别与各自基线比较未见明显变化 (P >0 0 5 )。     

灯盏细辛对大鼠视神经压榨伤后视网膜神经节细胞的保护作用

目的　探讨中草药灯盏细辛对大鼠标定性视神经压榨伤所致的视网膜神经节细胞(RGC)损伤的防护和修复作用。方法　 4 2只健康SD大鼠随机均分为A组和B组。两组均用特制微型视神经夹直接夹持视神经 ,制作成单眼视神经部分压榨伤模型后 ,A组不予任何治疗 ,B组予以灯盏细辛治疗 ,直至处死动物。以上两组按致伤日至处死日动物的存活时间又分为 :A1组和B1组 (损伤后 4d) ,A2 组和B2 组 (损伤后 14d) ,A3 组和B3 组 (损伤后 2 1d) ,每组各 7只大鼠。于处死前 3d双上丘直接注射 3%快蓝标记双眼RGC。处死日行眼球摘除术后 ,将双眼全视网膜组织铺片置于荧光显微镜下 ,在距视乳头 1mm处的颞上、颞下、鼻下及鼻上 4处作荧光摄影 ,并输入计算机经图像分析仪计数RGC。计算RGC标识率 ,即 (损伤眼RGC数 /未损伤眼RGC数 )× 10 0 % ,并进行统计学分析。结果　A组大鼠中 ,A1、A2 及A3 组的RGC标识率分别为 (77 79± 7 11) %、(6 3 76± 3 79) %、(5 4 6 6±4 75 ) % ;B组大鼠中 ,B1、B2 及B3 组的RGC标识率分别为 (80 13± 12 0 3) %、(78 17± 9 19) %及(83 5 9± 12 6 1) %。A2 和A3 组分别与B2 和B3 组比较 ,差异均有非常显著意义 (t=14 10 8,36 2 0 3;P<0 0 1)。结论　大鼠标定性视神经压榨伤后用灯盏细辛治疗 ,     

灯盏细辛对青光眼神经保护作用的临床研究

目的　评价灯盏细辛对眼压已控制的青光眼神经保护作用。方法　采用前瞻性、随机、双盲、安慰剂对照的研究方法 ,将眼压已控制的中晚期青光眼患者共 45例 ( 4 5眼 ) ,分层随机分为年龄匹配的灯盏细辛治疗组 ( 2 3例 )和安慰剂对照组 ( 2 2例 )。治疗组口服灯盏细辛 (EBHM) 2片 ,3次 /d ,对照组口服安慰剂 ,连续 6个月 ,每月复诊 1次。治疗前及每月复诊均检查矫正视力、眼压、视乳头杯盘比 (C/D)、自动静态阈值视野、血压和脉搏。结果　EBHM组与对照组在 6个月中平均眼压分别为 14 17mmHg± 2 5 0mmHg( 8～ 2 1mmHg)和 14 5 2mmHg± 1 94mmHg( 8～ 19mmHg) (P =0 5 98)。治疗 6个月后EBHM组平均敏感度 (MS)增加 1 42dB ,对照组MS下降 0 95dB(P =0 0 0 0 )。EBHM组和对照组视野进步率分别为 5 6 5 2 %和 4 5 5 % (P =0 0 0 1)。结论　灯盏细辛为一安全、无毒副作用的中草药 ,具有提高青光眼患者MS和部分改善原有视野缺损的作用 ,可作为视神经保护剂应用于治疗眼压已控制的青光眼。     

急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变

目的 观察急性高眼压模型兔眼不同眼压状态下视神经轴浆运输的改变。方法 成年新西兰大白兔24只,分为眼压20、30、40 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)组和眼压为10～15 mm Hg的对照组,每组均为6只兔。采用前房穿刺灌注法联合压力持续监测法建立急性高眼压模型。实验开始时,兔眼玻璃体腔中注射罗丹明异硫氰酸(RITC)标记轴浆运输。持续3h高眼压后,过量麻醉处死兔后取下视神经。荧光显微镜下观察视神经轴浆运输情况的改变。采用德国Leica公司Q500IW图像分析软件对RITC进行灰度定量分析,并对各眼压组平均灰度值和筛板前、筛板区、筛板后350 μm区域灰度值进行统计学分析处理。结果 RITC在视神经中心呈顺行标记染色。不同眼压组轴浆运输情况不同,随着眼压升高,轴浆运输能力减弱,差异有统计学意义(F=159.3,P＜0.05)。筛板前区,各眼压组间灰度值比较,差异无统计学意义(F=0.2545,P＞0.05)。40 mm Hg组灰度值与对照组灰度值比较,在筛板区（t=5.684）和筛板后350 μm区域（t=5.124）差异均有统计学意义(P＜0.05);20、30 mm Hg组灰度值与对照组灰度值比较,差异无统计学意义(t=1.747,P＞0.05)。结论 眼压40 mm Hg持续3h将导致视神经轴浆运输改变,轴浆运输障碍部位以筛板区及以后的区域为主。     

灯盏细辛对眼压已控制青光眼患者视野的保护作用

-目的:探讨灯盏细辛对眼压已控制青光眼患者视野的保护作用。方法:选择有青光眼视野缺损,眼压控制在18mmHg以内的原发性青光眼患者24例40眼。按随机、双盲法予药物口服,药物分别为灯盏细辛片和安慰剂。患者每日口服3次,每次2片。2mo为一疗程,连续3个疗程,每2mo随访1次。试验结束由药物提供方拆盲并反馈信息。结果:①用药前后各疗程对照组和治疗组收缩压、舒张压、脉搏、眼压、C/D、视力均无显著性统计学差异(P>0.05),且所有患者用药过程中无明显不良反应。②治疗组用药6mo后的平均缺损(MD)、平均敏感度(MS)与用药前的MD、MS相比,差异有显著性意义(P<0.05)。③中晚期治疗组用药2,4,6mo后的MD、MS分别与用药前MD、MS相比差异均有显著性意义(P<0.05)。结论:降低眼压对部分青光眼患者的视功能有保护作用。灯盏细辛对原发性青光眼患者的视功能有一定的保护作用,且应用疗程越长,视野缺损改善越明显;而对于原发性中晚期青光眼患者,灯盏细辛改善视野更显著。灯盏细辛对血压、脉搏、眼压、视力、C/D比均没有影响。     

灯盏细辛对青光眼血流的影响

目的 观察灯盏细辛片对眼压已控制的青光眼血流的影响。方法 采用前瞻性、随机、双盲、安慰剂对照的方法,将眼压已控制的中晚期青光眼患者42例(眼),随机分为年龄匹配的治疗组(22例)和对照组(20例)。治疗组口服灯盏细辛,对照组口服安慰剂,连续6个月,每月复诊1次。采用彩色多谱勒成像系统测量眼动脉、睫状后短动脉及视网膜中央动脉的血流动力学参数变化。结果 治疗组与对照组6个月中眼压分别为(14.30±2.48)mmHg和(14.44±2.02)mmHg(P=0.841)。治疗组治疗6个月后眼动脉阻力指数较治疗前降低0.059(P=0.009)。灯盏细辛对血压、眼灌注压和脉搏无影响。结论 灯盏细辛可降低眼动脉阻力指数,但不能证明其具有直接改善青光眼视乳头血流的作用,对青光眼血流的影响有待进一步证实。     

大鼠视神经损伤后视网膜小胶质细胞表达的初步观察

目的 研究大鼠视神经损伤后视网膜中小胶质细胞的表达情况.方法 实验研究.选取30只成年雌性健康SD大鼠,按照随机数字表法分为实验组和对照组各15只,分别用于细胞计数、免疫组织化学及免疫印迹实验.实验组在眼球后约1.5 ～2.0 mm处行右眼视神经鞘内切断术,术后5d于视神经断端处用荧光金逆行标记视网膜节细胞,手术后7d处死取材.对照组小鼠右眼行视神经切断术并标记,2d后处死取材.视网膜做铺片用于计数.用免疫组织化学法于视网膜切片上行小胶质细胞的表面标记物Iba-1染色,观察小胶质细胞的形态及数量,同时应用免疫印迹法检测视网膜内Iba-1蛋白含量的变化.两组间比较采用非配对student t-检验进行统计学分析.结果 对照组视网膜中有少量小胶质(Iba-1阳性)细胞表达,并呈非活化状态.视神经切断7d后小胶质细胞明显增多且呈半活化状态,免疫印迹结果显示损伤后Iba-1蛋白表达量明显增加到对照组的2.3倍(t=7.669,P=0.001).视视神经切断7d后节细胞数量为(1182±64)个/mm2,明显减少至对照组的51％(t=23.850,P＜0.01).结论 大鼠视神经损伤后小胶质细胞表达增多且呈部分激活状态,可能是视网膜受损后自我保护的表现之一.     

灯盏花提取物对青光眼视神经保护作用的临床观察

目的 评价灯盏花提取物对眼压已控制的青光眼视神经保护作用.方法 采用随机、双盲与安慰剂对照临床试验方法.对2009年10月至2009年在解放军第五医院眼科就诊符合纳入标准的青光眼患者共34例(42只眼),分为治疗组和对照组,分别给予口服益脉康胶囊和安慰剂,每两月观察安全(血压、肝功、肾功)及疗效指标(视力、视野、HRT),疗程6月,评价疗效.结果 治疗组与对照组两组治疗前及治疗后2月平均光敏感度组间比较P＞0.05,差异无统计学意义,而治疗4、6月后两组组间比较的P＜0.05,差异有统计学意义;两组治疗后2月视网膜平均光敏感度改善率组间比较P＞0.05,差异无统计学意义,而治疗4月后两组组间比较P＜0.05,差异有统计学意义.治疗6月后两组组间比较的P＜0.01,差异显著有统计学意义.结论 益脉康胶囊能提高视网膜平均光敏感度,随治疗时间延长,其改善率明显提高,表明灯盏花提取物对眼压已控制的青光眼有一定的视神经保护作用.

Abstract：

Objective To evaluate the action for optic nerve protection of engeron extracts in treating glaucoma with control of intraocular pressure. Methods Thiny-four patients (42 eyes) with glaucoma who met the inclusion criteria, in randomized, double-blind and placebo-controlled clinical trial were divided into treatment group and control group were given oral Yi Mai Kang capsules and placebo, observed every two months to test security (blood pressure, liver function, renal function) and outcome measures (visual acuity, visual field, HRT), and were evaluated after 6 months. Results The mean sensitivity of treatment group and control group, the difference was not statistically significant both before treatment and 2 months after treatment, (P＞0.05), but the difference of the two groups,4, 6 months after treatment were statistically significant (P ＜0.05). The average rate of retinal light sensitivity of the 2 months, the difFerence between two groups was not statistically significant (P ＞0.05), but the difference of the two groups, 4 months at/er treatment was statistically significant (P ＜0.05). There was statistically sipiificant difference 6 months after treatment between the two groups (P ＜0.01). Conclusions Yi Mai Kang Capsule can improve retinal mean sensitivity, with longer treatment time, the improvement rate is significantly increased. It indicates that the extract of Erigeron has certain protective effect of optic nerve on glaucoma with control of intraocular pressure.     

Dominant optic atrophy: Culprit mitochondria in the optic nerve

Dominant optic atrophy (DOA) is an inherited mitochondrial disease leading to specific degeneration of retinal ganglion cells (RGCs), thus compromising transmission of visual information from the retina to the brain. Usually, DOA starts during childhood and evolves to poor vision or legal blindness, affecting the central vision, whilst sparing the peripheral visual field. In 20% of cases, DOA presents as syndromic disorder, with secondary symptoms affecting neuronal and muscular functions. Twenty years ago, we demonstrated that heterozygous mutations in OPA1 are the most frequent molecular cause of DOA. Since then, variants in additional genes, whose functions in many instances converge with those of OPA1, have been identified by next generation sequencing. OPA1 encodes a dynamin-related GTPase imported into mitochondria and located to the inner membrane and intermembrane space. The many OPA1 isoforms, resulting from alternative splicing of three exons, form complex homopolymers that structure mitochondrial cristae, and contribute to fusion of the outer membrane, thus shaping the whole mitochondrial network. Moreover, OPA1 is required for oxidative phosphorylation, maintenance of mitochondrial genome, calcium homeostasis and regulation of apoptosis, thus making OPA1 the Swiss army-knife of mitochondria. Understanding DOA pathophysiology requires the understanding of RGC peculiarities with respect to OPA1 functions. Besides the tremendous energy requirements of RGCs to relay visual information from the eye to the brain, these neurons present unique features related to their differential environments in the retina, and to the anatomical transition occurring at the lamina cribrosa, which parallel major adaptations of mitochondrial physiology and shape, in the pre- and post-laminar segments of the optic nerve. Three DOA mouse models, with different Opa1 mutations, have been generated to study intrinsic mechanisms responsible for RGC degeneration, and these have further revealed secondary symptoms related to mitochondrial dysfunctions, mirroring the more severe syndromic phenotypes seen in a subgroup of patients. Metabolomics analyses of cells, mouse organs and patient plasma mutated for OPA1 revealed new unexpected pathophysiological mechanisms related to mitochondrial dysfunction, and biomarkers correlated quantitatively to the severity of the disease. Here, we review and synthesize these data, and propose different approaches for embracing possible therapies to fulfil the unmet clinical needs of this disease, and provide hope to affected DOA patients.     

手术降低眼压对视盘参数及视网膜神经纤维层厚度的影响

背景 降眼压治疗是青光眼最确切的治疗手段.明确降眼压治疗对视盘和视网膜神经纤维层厚度(RNFLT)的影响及其随时间而变化的规律将为青光眼患者降眼压治疗效果的评估提供视神经评价的客观依据. 目的 动态评价原发性开角型青光眼(POAG)患者小梁切除手术前后视盘结构参数和RNFLT的改变,分析青光眼患者手术前后的影像结构改变与眼压下降幅度及视野平均缺损(MD)的关系. 方法 采用前瞻性病例系列观察研究设计.纳入在中山大学中山眼科中心接受小梁切除手术治疗的POAG患者39例40眼,术前高眼压状态下及术后2周,1、3、6个月及1年均行眼压测量,并采用海德堡视网膜扫描仪进行视盘形态学检查,采用光学相干断层扫描仪(OCT)进行RNFLT测量,术前及术后3个月、6个月、1年行双眼视野检查.比较手术前后视盘结构参数和RNFLT随时间的变化情况,并分析眼压下降幅度以及疾病严重程度对视盘结构参数改变的影响. 结果 POAG患者39例40眼术前平均眼压为(32.77±8.64) mmHg(1 mmHg=0.133 kPa);术后2周,1、3、6个月,1年的眼压分别为(12.45±3.65)、(13.05±3.90)、(13.42±3.33)、(14.22±2.60)、(14.74±2.46) mmHg,均较术前明显下降,各时间的总体差异有统计学意义(F=13.73,P=0.00),POAG患者术眼手术前后视野MD值的变化差异无统计学意义(F=1.02,P=0.41).小梁切除手术后视盘参数视杯面积(CA)、杯/盘面积比(C/DAR)、视杯容积(CV)、平均视杯深度(MCD)、视杯形态测量(CSM)、水平C/D、垂直C/D比手术前变小,盘沿面积(RA)、沿/盘面积比(R/DAR)、视盘轮廓线高度变化(HVC)、盘沿容积(RV)、平均视网膜神经纤维层厚度(mRNFLT)、视网膜神经纤维层截面面积(RNFLA)比手术前增加,但随着术后时间的延长,改善参数逐渐减少,至术后1年,RV、CSM、mRNFLT、RNFLA仍较术前增加,而垂直C/D较术前减少,差异均有统计学意义(P＜0.05).手术前后各时间点OCT测量的全周mRNFLT和上方、下方、鼻侧、颞侧4个象限mRNFLT比较差异均无统计学意义(F=1.63,P=0.16;F=0.51,P=0.77;F=1.44,P=0.20;F=1.02,P=0.32;F=1.31,P=0.30).术后1年较术前眼压下降的幅度与RV,CSM及垂直C/D的改善幅度均呈正相关(r=0.45,P=0.02;r=0.41,P=0.04;r=0.58,P=0.00).术眼手术前MD绝对值与术后1年RV及CSM的改善幅度均呈负相关(r=-0.43,P=0.03;r=-0.62,P=0.00).结论 小梁手术有效降低眼压后1年,POAG患者的视盘结构参数可部分得到改善,疾病程度越轻,眼压下降的幅度越大,视盘结构参数的改善越明显.     

两种常用大鼠视神经钳夹伤模型造模效果的比较

背景 视神经钳夹伤(ONC)动物模型是外伤性视神经损伤致病机制及治疗方法相关基础研究的主要工具,目前常用的造模方法有经眼眶上缘开神经鞘膜视神经钳夹法和经球结膜外眦部夹伤视神经法,但关于2种模型优劣评价的研究很少. 目的 比较2种常用大鼠ONC模型的造模效果,为相关的实验研究中造模方法的选择提供依据.方法 采用随机分配方法将8～10周龄健康成年雄性SD大鼠24只分为经眶上缘开神经鞘膜ONC组和经眶上缘开神经鞘膜ONC 20 s、40 s、60 s组,分别采用经眶上缘开神经鞘膜视神经夹伤法(20 s)及经球结膜外眦部夹伤视神经法在大鼠的一侧眼建立ONC动物模型,各组大鼠的正常对侧眼作为对照.于造模后14 d记录各组大鼠闪光视觉诱发电位(F-VEP)P1波;制备大鼠视神经组织切片,采用苏木精-伊红染色法观察大鼠视神经的组织病理学改变;采用免疫荧光法观察并计数大鼠视网膜组织中Brn-3α阳性视网膜神经节细胞(RGCs).对2种造模方法的造模过程和检测结果进行比较.结果 造模后14d,经眶上缘开神经鞘ONC组和经球结膜ONC 20 s组、40 s组、60 s组大鼠的F-VEP P1波潜伏期较各自的正常对侧眼均明显延长,差异均有统计学意义(t=-11.64、-8.04、-6.50、-10.84,均P＜0.01);经眶上缘开神经鞘ONC组大鼠P1波潜伏期与经球结膜ONC 20 s、40 s、60 s组大鼠比较均明显延长,差异均有统计学意义(P=0.01、0.02、0.05);各组大鼠术眼P1波振幅与其正常对侧眼比较差异均无统计学意义(均P＞0.05).造模后14 d,免疫荧光检测显示各组大鼠模型眼视网膜上Brn-3α表达阳性RGCs数均较正常对侧眼明显减少,经眶上缘开神经鞘ONC组大鼠视网膜上Brn-3α表达阳性RGCs数为(13.60±2.14)个/视野,为其正常对侧眼的47.49％,经球结膜ONC 20 s、40 s和60 s组中Brn-3α阳性RGCs数分别为(18.74±3.61)、(15.84±2.31)和(14.58±3.23)个/视野,分别为其正常对侧眼的67.70％、56.69％和50.17％,经眶上缘开神经鞘ONC组大鼠视网膜中Brn-3α阳性RGCs数与经球结膜ONC 40 s和60 s组比较,差异均无统计学意义(均P＞0.05).组织病理学检查显示,各组大鼠造模眼神经胶质细胞核排列紊乱,细胞基质空泡化,可见大量炎性细胞浸润,以眶上缘开神经鞘ONC组更为严重.结论 与经球结膜ONC模型鼠比较,经眶上缘开视神经鞘ONC模型大鼠视神经形态结构损害更为严重,视神经的传导功能更为迟缓,RGCs的存活率更低.     

视神经损伤对视网膜结构的形态学研究

研究正常视网膜神经节细胞（RGC）核的形态。分类和视神经不完全损伤对其影响；建立视神经不全损伤豚鼠模型，术后3月，测量RGC核的平均体积和体密度，视网膜各层的厚度；正常豚鼠RGC核按其体积大小分成大、中、小3群，其平均体积分别为36．35μm3、185、3μm3、80.0μm3，所占比例分别为20．9％，28．6％，49．5％，外伤3月后每群节细胞核的平均体积不大，但所占比例分别为1．74％，14．2％，84．1％；细胞核体密度从7．2％下降到3．7％；视网膜各层厚度均有下降，以内视网膜层的变化最敏感；进行RGC核体积分型能更好地体现节细胞对损伤的反应；大型节细胞对外伤最敏感。