MMP-2和PEDF在氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达

目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)在氧诱导小鼠视网膜新生血管中的表达和意义。方法随机选取80只健康C57BL/6J小鼠进行分组,取对照组(40只)和高氧组(40只)小鼠眼球作ADP酶视网膜铺片、病理切片及免疫组织化学法检测,观察视网膜血管的改变,计算视网膜新生血管突破内界膜的内皮细胞核数及检测MMP-2、PEDF蛋白的表达。结果高氧组视网膜大量新生血管形成;新生血管突破内界膜的内皮细胞核数为(32.45±1.34)个,与对照组(1.27±0.20)个相比差异有统计学意义(t=10.345,P<0.05)。高氧组与对照组相比,MMP-2蛋白在神经节细胞层、内丛状层、内核层和突破视网膜内界膜的新生血管中高表达(P<0.05);PEDF蛋白在神经纤维层、神经节细胞层、内丛状层、感光细胞层及视网膜色素上皮细胞层低表达(P<0.05)。两者表达呈显著负相关(r=-0.785,P<0.05)。结论 MMP-2和PEDF共同维持视网膜新生血管的形成。     

视网膜和脉络膜新生血管的基因治疗

抑制视网膜或脉络膜新生血管是治疗视网膜或脉络膜血管性疾病的关键。基因治疗是目前研究的热点，我们从动物模型、载体、治疗性靶基因的选择等方面对视网膜和脉络膜新生血管治疗的进展进行综述。     

Ad-PEDF对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜新生血管的抑制作用

目的 研究色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)腺病毒载体注射后,对糖尿病视网膜病变大鼠视网膜新生血管的抑制作用.方法 构建、扩增及纯化PEDF病毒载体,注射入2型糖尿病模型大鼠玻璃体中,运用免疫组织化学、PAS染色及HE染色检测PEDF的表达,与对照组比较观察PEDF的表达水平,以及其对视网膜新生血管的抑制作用.结果 注射PEDF病毒载体后,PEDF表达量与对照组比较在各个时期均明显增多,同时PAS染色及HE染色均可发现注射组其视网膜新生血管较对照组明显减少.结论 注射PEDF腺病毒载体后,稳定表达的PEDF具有抑制新生血管生成,促进异常新生血管消退的作用.     

Captopril抑制鼠视网膜新生血管的形成(英文)

目的:探讨Captopril对鼠视网膜新生血管形成的抑制作用。方法:将60只7d龄小鼠随机分为对照组(30只)和治疗组(30只),置于体积分数750±50mL/L高氧环境下饲养5d后回到正常空气环境中饲养,出氧箱后治疗组每天1次玻璃体腔内注射2.7mL/kg Captopril,对照组注射9g/L的氯化钠注射液2.7mL/kg,连续5d。两组小鼠均于17d处死并摘除眼球,采用ADP酶视网膜铺片、HE染色及免疫组织化学法分别观察视网膜血管的改变、计数视网膜新生血管内皮细胞核数及检测MMP-2、PEDF蛋白的表达。结果:治疗组与对照组相比视网膜血管分布规则、分支良好、新生血管密度减少,且突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目明显减少(P<0.05);治疗组MMP-2染色较对照组减弱,PEDF染色较对照组增强。结论:玻璃体腔内注射2.7mL/kg Captopril能够有效抑制高氧诱导下的小鼠视网膜新生血管形成, Captopril有望成为防治血管增生性视网膜病变的一种有效的方法。     

AE-941抑制鼠视网膜新生血管的实验研究

目的探讨AE-941（CARTCELL卡特消）对视网膜新生血管形成的抑制作用。方法将鼠龄为7天的Wistar幼鼠置于75％浓度的氧环境中连续生活5天，建立高氧诱导的血管增生性视网膜病变幼鼠模型。随机分为正常对照、给氧对照组及治疗组（幼鼠玻璃体腔内注射AE-9410．25mg，0．5μl，1mg／ml，对侧眼注射相同体积的生理盐水作为对照）。采用ADP酶组织化学法行视网膜铺片，了解视网膜血管改变；用组织切片观察并计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数目，观察卡特消对视网膜新生血管形成的抑制情况。结果给氧对照组（鼠龄17天）可见视网膜血管分布紊乱、密度增高，大量的视网膜新生血管，组织切片上可见较多突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核。治疗组视网膜血管分布规则、密度减少，突破内界膜的内皮细胞细胞核数目明显减少，两组差异有显著统计学意义（P〈0．001）。结论AE-941可以抑制视网膜新生血管形成，有望成为防治血管增生性视网膜病变的一种有效的方法。     

视网膜新生血管抑制因子的研究进展

血管的正常生长是血管组织中促生长因子和抑制因子相互协调达到动态平衡的结果,但是当这种平衡被打破后,就会诱发新生血管的生长.内源性的新生血管抑制因子,是一组机体自身产生的抑制血管生成的负反馈分子,其产生血管抑制的作用主要是通过影响促新生因子与其受体或其下游促增生信号结合,或者自身促进内皮凋亡而实现的.血管新生抑制因子的研究对于防治眼底视网膜新生血管生长具有潜在的临床意义.本文就视网膜新生血管抑制因子的最新研究进展进行系统综述.     

PEDF和VEGF mRNA在实验性脉络膜新生血管组织中的表达

目的 研究血管内皮生长因子(vessel endothelial growth factor，VEGF)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor，PEDF)在实验性小鼠脉络膜新生血管(choroidal neowascularization,CNV)组织中的表达情况。探讨二者在CNV形成过程中所起的作用。方法 用半导体激光诱导小鼠CNV模型。分别于激光后1、3、7d、2和3周时取出眼球，采用原位杂交方法检测CNV组织中VEGF和PEDF mRNA的表达情况。结果 VEGF和PEDF mRNA在激光诱导的小鼠CNV组织形成过程中均有显著表达。激光光凝早期二者的表达均增高，但VEGF mRNA的表达升高更显著。激光照射后3和7d时．VEGF mRNA的表达即达到高峰，阳性率分别为26．05％和27．92％，而PEDF mRNA的阳性表达率分别为21．13％和23．55％．2周时，VEGF mRNA表达开始下降，约为23．95％，而PEDF mRNA的表达则达到高峰,为29．19％,光凝后3周时，二者的表达均下降，但PEDF mRNA的表达仍高于VEGF mRNA的表达，分别为24．87％和21．93％．结论 VEGF和PEDF mRNA明显表达于实验性小鼠CNV组织中。2者表达失衡可能在CNV的形成过程中起到调控作用。     

血管内皮生长因子和色素上皮衍生因子在实验性视网膜新生血管中表达

目的 研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factot,VEGF)和色素上皮衍生因子(pigment epithelium derived factor,PEDF)在实验性小鼠视网膜新生血管(retinal neowcularization,RNV)中的表达情况.探讨VEGF/PEDF比值变化与RNV形成过程的相关性.二者在RNV形成过程中所起的作用.方法 以高浓度氧诱导C57BL/6J小鼠建立RNV模型.分别于出氧箱后,即鼠龄P12、P14、P17、P21时取出眼球,采用免疫组织化学法检测RNV中VEGF和PEDF蛋白的表达情况.结果 VEGF和PEDF在OIR的RNV形成过程中均有显著表达.VEGF阳性表达于P14 ～ P17最明显,P17表达最强烈,P17后表达下降;PEDF于P12表达最强烈,P12后明显下降,P17下降最明显.2种因子动态表达与RNV发展存在一定时间相关性.结论 VEGF和PEDF明显表达于实验性小鼠RNV中,二者表达失衡可能参与RNV形成及发展过程的调控.     

PEDF和KBP对新生血管抑制作用的研究进展

血管增生是指由已存在的微血管床产生新的毛细血管芽的过程,主要是在毛细血管和细静脉的基础上发生发展.这种新生血管对机体的创伤和组织缺血有积极的作用,但对于肿瘤、糖尿病合并症、血管增生性眼病等疾病则是其共同病理特征,因此抑制新生血管增生成为治疗这些疾病的共同点.目前丝氨酸蛋白酶抑制剂已成为内源性血管生成抑制因子研究的热点,...     

Inhibition of retinal angiogenesis by PEDF

AIM: To investigate the effect of PEDF on retinal neovascularization in mice. METHODS: 40 7-day-old C57BL/6J mice was exposed to 750mL/L oxygen for 5 days and then to normal situation to produce the murine model of oxygen-induced retinopathy(OIR). One eye of the mouse was regarded as experimental one and the other served as control. Eyes in experimental group received intravitreal injection of PEDF and eyes in control group received intravitreal injection of PBS at postnatal day 12. All mice were executed at postnatal day 17. The changes of retinal vessels of mice were observed by ADPase histochemical technique. The inhibitory effect of PEDF on retinal neovascularization was evaluated by counting the endotheliocyte nuclei of new vessels which extended from retina to vitreous in the tissue slice of HE staining. RESULTS: Neovascularization was reduced, retinal blood vessels distributed regularly and non-perfusion areas were not found in eyes of experimental group compared with control group. The number of endotheliocyte nuclei of new vessels extending from retina to vitreous was significantly less in the eyes of experimental group (10.18±1.74) than that in control group (38.89±2.98) (P <0.01). Retinal toxicity and inflammatory reactions were not found in tissue slice. CONCLUSION: PEDF inhibits retinal angiogenesis in OIR and the feasibility should be determined for use of PEDF in ocular angiogenesis treatment.     

PEDF的研究进展

色素上皮衍生因子(PEDF),是丝氨酸蛋白酶超家族成员,它具有高度保守的序列和独特的分子结构,因具有神经营养,抑制新生血管,抗肿瘤等多种功能而成为研究的热点,其抗新生血管的功能尤为重要.在糖尿病视网膜病变、老年性黄斑变性、CNV、缺血缺氧引起的眼部新生血管疾病中扮演着重要的角色.现就其分子结构,功能,抗新生血管的机制方面的研究进展进行综述.     

PEDF与视网膜新生血管

近年来糖尿病性视网膜病变、视网膜静脉阻塞、Eales病、早产儿视网膜病变、年龄相关性黄斑变性的发病率越来越高,已经成为致盲的主要眼病。新生血管形成是这些眼病共有的病理性改变,并且是其致盲的主要原因。研究发现新生血管形成因子与抑制因子之间的平衡失调是新生血管形成的重要机制,抑制血管增生已经成为治疗这类疾病的新靶点。色素上皮细胞衍生因子(pigmentepitheli-umderivedfactor,PEDF)是目前最有效的血管增生抑制剂之一。本文将对PEDF的概况,PEDF与视网膜新生血管的关系,PEDF在视网膜新生血管性疾病中的用途等方面进行综述。     

抗代谢药物8-氯腺苷抑制兔实验性视网膜新生血管的研究

目的探讨抗代谢药物8-氯腺苷(8-Cl-A)眼局部应用对兔实验性视网膜新生血管的抑制作用。设计实验研究。研究对象纯种青紫兰家兔40只。方法采用视网膜静脉直接光凝法建立兔视网膜静脉阻塞(RVO)模型。分别设立对照组及8-Cl-A给药组,每组各20只(20眼)。于造模后次日治疗组每日球后注射8-Cl-A 9mg(计10日),对照组注射等体积生理盐水,采用荧光素眼底血管造影观察注射后2周内2组兔视网膜新生血管的发生率,并进行统计学分析。主要指标视网膜新生血管发生率及程度。结果RVO对照组20眼中,17跟发生视网膜新生血管:8-Cl-A治疗组20眼中3眼发生光凝点远端的视网膜新生血管(P= 0.000),且发生的程度及范围小于对照组,同时未见视网膜静脉侧支循环的建立。结论8-Cl-A可有效抑制兔实验性视网膜新生血管的发生。在视网膜血管增生性病变治疗中可能具有潜在的临床应用价值。     

PEDF和Avastin对大鼠角膜碱烧伤新生血管作用的比较

目的:比较局部应用PEDF与Avastin对大鼠碱烧伤角膜新生血管(CNV)的作用。方法:建立碱烧伤诱导大鼠CNV模型,将30只SD大鼠随机分为5组:A组于烧伤当日开始给予10μg/mL PEDF点眼;B组于烧伤后第3d开始给予10μg/mL PEDF点眼;C组于烧伤当日开始给予5mg/mL Avastin点眼;D组于烧伤后第3d开始给予5mg/mL Avastin点眼;E组于烧伤当日开始使用生理盐水点眼,均每日4次,每次10μL。裂隙灯显微镜观察CNV情况并计算各组CNV的面积,采用免疫组织化学染色观察VEGF和CD31的表达。结果:第12d时,A组CNV面积小于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.01);B,C组与D组相比,差异无统计学意义(P=0.215,0.058)。免疫组织化学检测VEGF及CD31示A组VEGF及CD31表达较弱,B,C,D组表达增多,E组表达显著增强。结论:局部应用Avastin及PEDF均能抑制大鼠角膜化学伤后的CNV。烧伤后早期使用PEDF效果优于Avastin。     

Inhibition of retinal angiogenesis by gold nanoparticles via inducing autophagy

AIM: To investigate the effect of gold nanoparticles on retinal angiogenesis in vitro and in vivo, and to reveal the possible mechanism. METHODS: Seed growth method was used to synthesize gold nanoparticles (GNPs). The size, zeta potential, absorption spectrum and morphology of GNPs were identified using Malvern Nano-ZS, multimode reader (BioTek synergy2) and transmission electron microscope. Cell viability was analyzed using cell counting kit-8 method and cell growth was assessed with EdU kit. Transwell chamber was used to investigate cell migration. Tube formation method was used to assess the angiogenic property in vitro. Oxygen induced retinopathy (OIR) model was used to investigate the effect of GNPs on retinal angiogenesis. Confocal microscope and Western blot were used to study the possible mechanism of GNPs inhibited angiogenesis. RESULTS: The GNPs synthesized were uniform and well dispersed. GNPs of 10 μg/mL and 20 μg/mL were able to inhibit human umbilical vein endothelial cells proliferation (50% and 72% separately, P<0.001), migration (54% and 83% separately, P<0.001) and tube formation (52% and 90% separately, P<0.001). Further data showed that GNPs were able to improve the retinopathy in an OIR model. The possible mechanism might be that GNPs were able to induce autophagy significantly (P<0.05). CONCLUSION: The present study suggests that GNPs are able to inhibit retinal neovascularization in vitro and in vivo. GNPs might be a potential nanomedicine for the treatment of retinal angiogenesis.     

小胶质细胞在视网膜血管生成中的作用机制研究进展

视网膜小胶质细胞作为视网膜的常驻免疫细胞,不断监测其周围环境的变化,并通过与其他视网膜细胞的信号传导维持稳态。视网膜小胶质细胞不仅在视网膜血管系统的发育和生理过程中发挥重要作用,而且在病理性新生血管形成中也起着至关重要的作用。在某些视网膜病变中,活化的小胶质细胞通过神经血管耦联,促进异常血管生成,从而造成不可逆的损伤,但具体的作用机制尚不明确。本文简要综述小胶质细胞与视网膜新生血管生成的相关性,并讨论了参与该过程的细胞和分子信号机制,旨在为视网膜新生血管性疾病的预防和治疗提供新的有效的策略。     

大鼠PEDF基因的克隆及腺病毒表达载体的构建

目的构建PEDF基因腺病毒表达载体，为基因治疗年龄相关性黄斑变性（AMD）奠定基础。方法从大鼠视网膜组织中提取总RNA，RT—PCR扩增PEDF基因cDNA，并将回收的PEDF基因克隆人质粒pGEM—Teasy载体中，亚克隆人腺病毒表达载体质粒pDC316中，DNA序列分析加以证实。利用腺病毒Admax系统，通过含有目的基因片段PEDF的穿梭载体pDC316／PEDF和病毒骨架质粒共转染293细胞的方法包装出重组腺病毒AdPEDF。Western Blot对重组腺病毒进行鉴定。结果基因测序表明PEDF基因包含了大鼠PEDF基因阅读框内的全部序列，与NCBI Sequence Viewer中公布的大鼠PEDF mRNA序列（NM-177927）完全一致。获得了表达PEDF蛋白的重组腺病毒。结论成功构建了PEDF基因腺病毒表达载体，为进一步研究基因治疗脉络膜新生血管奠定了基础。     

Bevacizumab联合视网膜光凝治疗虹膜和视网膜新生血管

目的:观察Bevacizumab玻璃体腔注射联合视网膜光凝治疗虹膜和视网膜新生血管的疗效和安全性。方法:回顾分析虹膜和视网膜新生血管患者13例13眼玻璃体腔注射Bevacizumab联合视网膜光凝治疗的临床随访资料。13眼中视网膜新生血管9眼(其中继发于视网膜分支静脉阻塞的2眼,增生型糖尿病视网膜病变的6眼,Eales病的1眼),虹膜新生血管4眼(均继发于视网膜中央静脉阻塞)。13眼全部行玻璃体腔注射1.25mg/0.05mL的Bevacizumab,术前或术后分次补充完成视网膜光凝。随诊3～18mo,随访期间发现新生血管复发者,再行同样方法的注射和光凝治疗。观察治疗前后最佳矫正视力、眼压、眼底荧光血管造影。结果:经治疗后,13眼中8眼(61.5%)视力提高,4眼(30.8%)视力保持不变,1眼(7.7%)视力下降;6例合并玻璃体积血,术后均明显吸收;13眼视网膜及虹膜新生血管均消退,随诊期间复发2眼,行第二次注射和光凝治疗后新生血管无复发。虹膜新生血管(新生血管性青光眼)4眼中2眼治疗后眼压下降,随访期间均控制正常,另2眼联合青光眼阀植入后眼压控制正常。随诊期中,其余9眼眼压无升高。1例患者注药后结膜下出血,其余患者未出现其他并发症。结论:Bevacizumab玻璃体腔注射联合视网膜光凝治疗虹膜和视网膜新生血管在短期内能促进玻璃体积血吸收和新生血管萎缩,副作用少;但尚需进一步大样本、多中心的临床随机对照研究。