人β防御素2在子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达及其意义

子宫内膜异位症(内异症)是一种育龄妇女常见的妇科良性疾病[1],其发病机制仍未完全明确,目前研究表明,内异症与免疫炎性反应有着密切的关系[2].     

HOXA10基因在子宫内膜异位症患者在位及异位子宫内膜组织中的表达及其意义

目的 探讨HOXA10基因在子宫内膜异位症(内异症)患者在位及异位内膜组织中的表达水平及其临床意义.方法 选取2009年1月至2010年8月于佛山市妇幼保健院因内异症行腹腔镜手术治疗的患者30例,留取宫腔内膜组织(内异症在位内膜组)和异位内膜组织(内异症异位内膜组);同期因卵巢囊肿及输卵管因素不孕行腹腔镜手术治疗患者30例为对照组,留取宫腔内正常内膜组织.分别采用实时荧光定量PCR技术、免疫组化法和蛋白印迹法检测各组内膜组织中HOXA10 mRNA及蛋白表达水平.结果 内异症在位内膜组HOXA10 mRNA及蛋白表达水平分别为0.61±0.07和0.47±0.05,内异症异位内膜组分别为0.64±0.06和0.50±0.05,对照组分别为1.22±0.14和1.42 ±0.14;内异症在位和异位内膜HOXA10 mRNA及蛋白表达水平明显低于正常内膜中的表达水平,差异均有统计学意义(P均＜0.01);内异症在位和异位内膜组的HOXA10 mRNA及蛋白表达水平比较,差异则无统计学意义(P＞0.05).免疫组化法检测内异症在位和异位内膜组织的间质和腺细胞中HOXA10表达均降低.结论 HOXA10基因在内异症在位及异位内膜组织中均呈低表达状态,可能与内异症的发病和不孕有关.     

Polo-样激酶1在子宫内膜异位症患者在位和异位子宫内膜中的表达

目的探讨Polo－样激酶1（PLK1）在子宫内膜异位症发生发展中的作用。方法采用逆转录（RT—PCR）、蛋白免疫印迹法（Western blotting）及免疫组织化学的方法检测子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜组织29例和在位子宫内膜组织20例及正常子宫内膜组织30例中PLK1的表达。结果PLK1蛋白在内异症组增殖期异位（2．19±0．63）和在位子宫内膜组织（1．78±0．59）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（1．21±0．30）上的表达量（P〈0．05）。PLK1蛋白在内异症组分泌期异位（1．15±0．332）和在位子宫内膜组织（1．00±0．33）上的表达量明显高于对照组子宫内膜组织（0．82±0．24）上的表达量（P〈0．05）。内异症组增殖期和分泌期异位和在位子宫内膜组织上PLK1的表达量比较,差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论PLK1蛋白的高表达可能与子宫内膜异位症的发生发展有关。     

骨桥蛋白在子宫内膜异位症患者异位和在位内膜中的表达

骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是近年来发现的一种磷酸化糖蛋白,在胃癌、肝癌、卵巢上皮性癌及子宫内膜癌等多种恶性肿瘤组织中呈明显高表达,并与肿瘤的侵袭、转移等恶性行为密切相关.子宫内膜异位症（内异症）是一种具有恶性生物学行为的良性妇科疾病,近几年来发病率有上升趋势.为探讨OPN在内异症的发生、发展中的作用,我们采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法,检测OPN在内异症患者异位及在位内膜组织中的表达情况,现将结果报道如下.     

中期因子在重度子宫内膜异位症患者异位和在位内膜组织中的表达及其临床意义

目的探讨中期因子（MK）蛋白在重度子宫内膜异位症（内异症）患者异位和在位内膜组织中的表达变化及其临床意义.方法应用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法,检测41例重度内异症患者（研究组）的异位内膜和在位内膜组织及32例子宫肌瘤患者（对照组）的内膜组织中MK蛋白表达和微血管密度（MVD）.结果研究组异位内膜组织中MK蛋白的阳性表达率为29%（12/41）,在位内膜组织中MK蛋白的阳性表达率为63%（26/41）,对照组内膜组织中MK蛋白的阳性表达率为22%（7/32）,研究组在位内膜组织中MK蛋白阳性表达率与异位内膜组织及对照组内膜组织比较,差异均有统计学意义（P均＜0.05）,而且两组MK蛋白的阳性表达率与MVD呈正相关关系（r=0.637,P＜0.05）.结论MK蛋白在重度内异症患者的在位内膜过度表达,且与内膜血管生成密切相关.在位内膜中MK蛋白的表达变化可能与重度内异症的发生、发展有关.     

白细胞介素1受体Ⅱ在正常子宫内膜及子宫内膜异位症患者在位和异位内膜组织中的表达

子宫内膜异位症(内异症)可能是一种自身免疫性炎症疾病。内异症患者腹腔液、在位内膜和异位内膜中都可观察到细胞因子的失衡和表达异常。白细胞介素1(interleukin-1，IL-1)可通过多个通路导致内异症的发生。本研究采用RT—PCR技术和免疫印迹法，检测了IL-1受体Ⅱ(IL-1RⅡ)基因及蛋白在正常子宫内膜以及内异症患者在位和异位内膜中的表达，现将结果报道如下。     

MMP-2、TIMP-2在子宫内膜异位症组织中的表达及其意义

目的研究基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及其抑制因子-2(TIMP-2)mRNA在子宫内膜异位症异位和在位内膜组织中的表达及临床意义。方法分别选取子宫内膜异位症异位内膜组织50例、在位内膜组织26例和对照组正常子宫内膜组织22例为研究对象,应用半定量逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测MMP-2、TIMP-2mRNA的表达。结果(1)MMP-2mRNA在异位症异位内膜组织中相对表达量明显高于正常子宫内膜组织和在位内膜,差异均有显著性(P<0.01,P<0.01);TIMP-2mRNA在子宫内膜异位症异位内膜和在位内膜组织中均低表达,其相对表达量分别明显低于正常子宫内膜,差异均有显著性(P<0.01;P<0.01);(2)异位症异位内膜组织中MMP-2mRNA、TIMP-2的表达与r-AFS临床分期无关,差异无显著性(P>0.05)。结论异位和在位内膜组织中MMP-2高表达,TIMP-2低表达,使MMP-2与TIMP-2平衡失调,异位内膜组织侵袭降解ECM的能力增强,从而在子宫内膜异位症中的发生发展中起了重要作用。     

整合素β3和细胞内粘附分子在子宫内膜异位症在位与异位内膜组织中的表达

目的探讨整合素β３和细胞内粘附分子（ＩＣＡＭ）与子宫内膜异位症的关系。方法收集子宫内膜异位症患者的子宫内膜（１５例）、异位病灶组织（１５例）及非子宫内膜异位症患者（３０例,对照组）的子宫内膜,分３批对这些组织进行整合素β３和ＩＣＡＭ的蛋白免疫印记法测定,并用ＶＤＳ扫描对实验结果进行半定量。每批结果均用方差分析和ｔ检验进行统计处理。结果３批结果趋势相同,子宫内膜异位症患者子宫内膜的整合素β３和ＩＣＡＭ蛋白表达量均明显低于对照组同期子宫内膜的表达量。而异位病灶组织整合素β３的表达较对照组明显降低,ＩＣＡＭ表达却明显高于对照组。结论子宫内膜异位症患者从子宫内膜到异位病灶,整合素β３和ＩＣＡＭ均有明显的变化,这可能与子宫内膜异位症发生、发展和不孕有关。     

膜联蛋白Ⅰ在子宫内膜异位症患者在位内膜组织中的表达变化及其意义

子宫内膜异位症（内异症）是育龄妇女的常见病，发病率达10％。虽然，内异症是良性病变，但其病理过程表现出浸润、转移等恶性疾病的特征。目前，有关内异症发生的分子机制尚不清楚。我们利用蛋白质组学研究发现，膜联蛋白家族成员——膜联蛋白Ⅰ（annexinⅠ）可能为内异症疾病相关蛋白。本研究采用免疫组化、实时定量PCR及蛋白印迹的方法，检测annexinⅠ在非内异症患者子宫内膜和内异症患者在位内膜中的表达情况，旨在探讨annexinⅠ在内异症发病中的作用。[第一段]     

乙酰肝素酶基因在子宫内膜异位症患者在位与异位子宫内膜组织中的表达

目的　研究乙酰肝素酶基因在子宫内膜异位症发病中的作用。方法　应用原位杂交技术 ,检测腹腔镜手术中证实为子宫内膜异位症患者 (EM组 ,2 3例 )的在位和异位子宫内膜组织乙酰肝素酶mRNA的表达 ,并与正常妇女 (对照组 ,2 5例 )子宫内膜组织比较。结果　 ( 1)EM组在位与异位子宫内膜乙酰肝素酶mRNA阳性表达率一致 ,但异位子宫内膜组织中 ,阳性细胞着色较深。在位子宫内膜腺上皮细胞较间质细胞胞浆染色深 ,异位子宫内膜腺上皮细胞与间质细胞胞浆着色基本一致 ;EM组增生期与分泌期子宫内膜均有乙酰肝素酶mRNA的表达 ,增生期阳性表达率为 83 3%( 10 / 12 ) ;分泌期为 72 7% ( 8/ 11) ,两者比较 ,差异也无显著性 (P >0 0 5 ) ;( 2 )对照组增生期子宫内膜乙酰肝素酶mRNA的阳性表达率为 4 1 7% ( 5 / 12 ) ,分泌期子宫内膜阳性表达率为 7 7% ( 1/ 13) ,两者比较 ,差异有显著性 (P <0 0 5 )。 ( 3)EM组子宫内膜乙酰肝素酶mRNA阳性表达率为 78 3% ( 18/2 3) ;对照组为 2 4 0 % ( 6 / 2 5 ) ,两者比较 ,差异也有显著性 (P <0 0 5 )。结论　乙酰肝素酶基因的表达与子宫内膜异位症的发病相关 ,其可能成为子宫内膜异位症治疗的一个有价值的靶点。     

RANTES在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及其意义

目的:探讨调节活化正常T细胞表达与分泌的趋化因子(RANTES)在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜的表达及在子宫内膜异位症发病中的作用.方法:以2010年1～10月因子宫内膜异位症在我院行手术治疗的30例患者的在位内膜及异位内膜为研究组,以同期在我院就诊取IUD的30例患者的正常子宫内膜作为对照组,检测3组标本中RANTES mRNA表达及蛋白水平.并检测3组培养上清液对单核细胞趋化活性的影响.结果:①IL-1β刺激48小时,异位内膜组细胞RANTES mRNA表达及蛋白水平均增加,与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).IL-1β刺激72小时,异位内膜组、在位内膜组细胞RAN-TES mRNA表达及蛋白水平均增加,异位内膜组细胞与在位内膜组和正常内膜组细胞比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);在位内膜组细胞与正常内膜组细胞比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).②异位内膜组及在位内膜组单核细胞趋化指数明显高于正常内膜组(P＜0.05).结论:子宫内膜异位症患者的在位内膜及异位内膜RANTES mRNA表达及蛋白水平均增加.RANTES通过促进单核细胞的趋化活性,可能在子宫内膜异位症的发病中发挥作用.     

β-catenin在子宫内膜异位症患者在位内膜中的表达

目的:探讨β-catenin在子宫内膜异位症(EMs)患者在位内膜的增殖与凋亡活性的关联,及其在EMs发病中的作用。方法:共收集68例EMs患者在位内膜组织(EMs组)和70例非EMs患者子宫内膜(对照组),采用免疫组织化学技术分析子宫内膜组织β-catenin的表达情况。TUNEL检测分析子宫内膜组织的凋亡活性,Ki67免疫组织化学染色分析子宫内膜组织的增殖活性。结果:与对照组比,EMs患者在位内膜Ki67表达明显增强,TUNEL阳性细胞明显减少(P<0.05)。在位内膜腺上皮及间质β-catenin表达明显高于对照组(P<0.05)。β-catenin在胞质及胞核的表达明显高于对照组(P<0.05)。直线相关分析结果显示无论是正常内膜还是EMs患者在位内膜,β-catenin的表达与Ki67表达均呈正相关,与TUNEL结果均呈负相关。结论:EMs患者在位内膜β-catenin的异常高表达可能通过上调内膜组织的增殖活性,下调其凋亡性而参与EMs的发病。     

Cofilin在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜中的表达及意义

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)在位内膜及异位内膜中候选基因cofilin的表达在EMT发生和发展中的作用.方法:选取我院35例经病理证实为EMT的在位内膜及异位内膜[增殖期17例,分泌期18例;轻度组(Ⅰ、Ⅱ期)18例,重度组(Ⅲ、Ⅳ期)17例]为研究组,以同期16例非EMT患者的子宫内膜标本为正常对照组(增殖期7例,分泌期9例).应用原住杂交方法检测cofilin的表达,并对各组内膜中cofilin表达水平进行统计学分析.结果:研究组的在位内膜cofilin表达水平(2.2569±1.0005)明显高于对照组(1.2525±0.7549)(P<0.01);研究组中EMT异位内膜cofilin表达水平(4.2274±1.2091)明显高于EMT在位内膜(2.2569±1.0005)(P<0.01);研究组中EMT重度组在位内膜及异位内膜cofilin表达水平(分别为2.6941±0.9517及4.5965±1.0353)高于轻度组(分别为1.8439±0.8809及3.8789±1.2846)(P<0.01).对照组内膜组织和研究组中在位内膜及异位内膜的分泌期与增殖期cofilin表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论:EMT患者在位内膜中cofilin表达水平异常升高在该病的发生、发展中可能起一定作用.     

plastin在子宫内膜异位症在位内膜及异位内膜中的表达及意义

目的探讨子宫内膜异位症(内异症)患者在位内膜及异位内膜中plastin(T亚型及L亚型)的表达在内异症发生和发展中的作用。方法采用原位杂交方法检测2007年5月至12月中国医科大学附属盛京医院妇产科收治的内异症患者(36例,研究组)在位内膜及异位内膜和非内异症、证实盆腔结构正常的妇女(22例,对照组)在位内膜中T-plastin及L-plastin的mRNA表达,并对其表达水平与月经周期进行相关性分析。结果(1)在内异症患者在位内膜中T-plastin的表达水平(0.1519±0.0267)与正常在位内膜(0.1535±0.0299)比较差异无统计学意义(P>0.05),但其两者中T-plastin的表达水平均显著高于在内异症患者异位内膜中(0.1153±0.0151)的表达(P<0.01);研究组在位内膜及异位内膜中L-plastin的表达水平(分别为0.1610±0.0126和0.1869±0.0268)显著高于对照组(0.1396±0.0088)(P<0.01),且异位内膜中显著高于在位内膜中(P<0.01)。(2)在研究组及对照组中,增殖期与分泌期T-plastin的表达水平差异均无统计学意义(P>0...     

紧密连接蛋白claudin-4在子宫内膜异位症患者在位与异位内膜组织中的表达

目的 检测紧密连接蛋白claudin-4在正常子宫内膜、子宫内膜异位症(内异症)患者的在位和异位内膜组织中的表达,评价elaudin-4在内异症发病中的作用.方法 选择35例内异症患者的卵巢异位内膜组织(异位内膜组),其中27例内异症患者的在位子宫内膜(在位内膜组)和35例非内异症良性卵巢、子宫疾病患者(对照组)的子宫内膜组织.透射电镜观察各组内膜组织中紧密连接的形态学变化;免疫组化和免疫印迹法检测elaudin-4蛋白的表达量,RT-PCR技术检测claudin-4 mRNA的表达量.结果 (1)透射电镜下,异位内膜组内膜组织中紧密连接结构消失,胶原组织丰富;在位内膜组内膜组织中紧密连接的结构与对照组内膜组织相似,未见明显变化.(2)免疫组化检测结果显示,clandin-4蛋白的阳性染色主要定位于子宫内膜腺上皮细胞膜,异位内膜组织中claudin-4的阳性染色很弱甚至缺失;在对照组、在位内膜组和异位内膜组内膜组织中,claudin-4蛋白表达量分别为89±24、84±22、27±14;claudin-4 mRNA表达量分别为14.5±6.8、13.8±9.5、2.6±2.5.异位内膜组内膜组织中claudin-4 mRNA和蛋白的表达量均低于在位内膜组和对照组内膜,差异有统计学意义(P<0.05).在位内膜组和对照组内膜组织中claudin-4 mRNA和蛋白的表达量分别比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 异位子宫内膜组织中clandin-4的低表达可能参与了内异症的发病.     

子宫内膜异位症患者在位与异位内膜中骨桥蛋白的表达及意义

子宫内膜异位症（endometriosis,EMs）发病率为10％～15％,呈逐年上升趋势,恶变率为0．7％～1．0％,具有广泛种植和治疗后易复发的特点。骨桥蛋白（osteopontin,OPN）是近年来发现的一种分泌型磷酸化糖蛋白,在多种恶性肿瘤组织中高表达,与肿瘤的侵袭转移密切相关。     

EGFR和Annexin-Ⅰ在子宫内膜异位症异位内膜的表达及意义

目的:检测表皮生长因子受体(EGFR)和膜联蛋白-I(Annexin-Ⅰ)在子宫内膜异位症(EMT)异位内膜的表达,探讨二者表达的变化与EMT的关系。方法:选取32例EMT患者(研究组)异位内膜及在位内膜,其中轻度组(Ⅰ、Ⅱ期)16例(增殖期8例,分泌期8例),重度组(Ⅲ、Ⅳ期)16例(增殖期8例,分泌期8例)。同时获取16例非EMT患者的子宫内膜标本作为对照组(增殖期8例,分泌期8例)。采用实时荧光定量PCR方法检测EGFR和Annexin-Ⅰ在各内膜组织中的表达,并比较其表达水平。结果:研究组异位内膜中EGFR的表达水平明显高于研究组在位内膜,研究组异位内膜Annexin-I的表达水平明显低于研究组在位内膜,二者差异均有高度统计学意义(P<0.01)。EMT重度组在位内膜及异位内膜中EGFR和Annexin-Ⅰ的表达水平与EMT轻度组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。对照组在位内膜组织及研究组在位内膜和异位内膜组织EGFR和Annexin-Ⅰ在分泌期和增殖期的表达水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:EGFR和Annexin-Ⅰ在EMT异位内膜表达水平的变化与EMT的发生、发展有关,而与子宫内膜的周期性变化无关。     

HOXA10基因在子宫内膜异位症不孕患者内膜组织中的表达及意义

目的:探讨HOXA10基因在子宫内膜异位症(EMs)不孕中的作用及作用机制。方法:以行腹腔镜手术并经病理确诊为EMs合并不孕症的患者为研究对象(18例,A组),以同期行腹腔镜手术的输卵管性不孕患者(18例,B组)、正常生育组(15例,C组)为对照。分别应用荧光定量PCR、免疫组织化学和Western blotting等方法从mRNA及蛋白质水平检测HOXA10基因在EMs不孕症患者在位、异位子宫内膜以及对照组在位子宫内膜的表达。结果:HOXA10 mRNA及蛋白表达水平在C组的内膜较高;B组稍低于C组,但两者相比差异无统计学意义(P>0.05);A组的在位及异位内膜表达水平较C组明显降低(P<0.01);但A组的在位内膜与异位内膜基因和蛋白的表达水平均无统计学差异(P>0.05)。结论:HOXA10基因在EMs不孕患者在位子宫内膜中的表达显著降低,可能是EMs不孕患者子宫内膜容受性降低,进而引起不孕的重要因素之一。     

巨噬细胞移动抑制因子在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜中的表达及其意义

子宫内膜异位症（内异症）是妇科的一种常见病，据报道存在于60％的痛经妇女及40％-50％有慢性盆腔痛和性交痛的妇女中，在行经腹妇科手术的患者中，5％-15％被发现有此病。近年来，内异症发病率逐年上升，一般认为，内异症的发病细胞在病理上呈良性形态学表现，而临床上呈“恶性”的生物学行为，患者呈持续加重的盆腔粘连、疼痛、不孕。目前，尽管对内异症进行了大量基础和临床研究，但其发病机制仍未完全阐明。大量证据表明，免疫学因素在内异症的发病机制中起了重要的作用，其中巨噬细胞与内异症的关系备受关注，巨噬细胞及其分泌的细胞因子参与内异症的发生和发展。     

ER与TrkB在子宫内膜异位症患者不同子宫内膜组织中的表达

目的:检测雌激素受体(ER)和酪氨酸激酶受体B(Trk B)在子宫内膜异位症(EMs)患者在位和异位内膜组织中的表达,评价ER和Trk B在EMs发病中的作用。方法:选择18例卵巢EMs病例,其中在位内膜增殖期9例、分泌期9例。采用实时聚合酶链反应(real time PCR)、蛋白质印迹法(Western blotting)和免疫组织化学法检测ERα、ERβ、Trk B和脑源性神经营养因子(BDNF)m RNA和蛋白质的表达。结果:EMs患者在位内膜ERαm RNA和蛋白表达高于异位内膜组织,而ERβ、Trk B m RNA和蛋白的表达均低于异位内膜组织,差异有统计学意义(均P0.05)。异位内膜组织中ERβ/ERαm RNA的比值高于在位内膜组。在EMs在位内膜中,ERα、ERβ、Trk B蛋白的表达在增殖期均高于分泌期(均P0.05)。ERα主要表达于在位内膜细胞核内;ERβ主要表达于异位内膜细胞质中;ERα与ERβ在EMs在位内膜的增殖期着色比分泌期更加明显。EMs的在位内膜和异位内膜组织中Trk B与BDNF都有表达,且主要集中于细胞质。EMs在位内膜中Trk B蛋白质在增殖期表达更明显。结论:ERβ和Trk B可能在EMs的发病机制中发挥作用。