转化生长因子β及其受体与卵泡发育

转化生长因子β(TGF-β)是一类具有多种生物学活性的细胞因子,而卵巢中的卵泡发育是一动态和复杂的过程.对不同标本进行研究证明,TGF-β及其受体在卵巢不同发育阶段中均可表达,通过自分泌/旁分泌机制参与调控卵巢功能,对维持卵巢内环境稳定发挥重要作用.     

转化生长因子β及其受体与卵泡发育

转化生因子β（TGF－β）是一类具有多种生物学活性的细胞因子,而卵巢中的卵泡发育是一动态和复杂的过程。对不同标本进行研究证明,TGF－β及其受体在卵巢不同发育阶段中均可表达,通过自分泌／旁分泌机制参与调控卵巢功能,对维持卵巢内环境稳定发挥重要作用。     

PRXⅡ蛋白及mRNA在小鼠卵巢不同发育阶段的表达

目的:探讨PRXⅡ在小鼠卵泡发育不同阶段的表达。方法:选择不同发育时期的昆明小鼠卵巢,用免疫组化SP染色法,半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同发育期卵巢组织中PRXⅡ蛋白、mRNA的表达水平。结果:PRXⅡ蛋白在各级卵泡的卵母细胞及颗粒细胞中均有表达,其表达水平随卵泡发育逐渐增强。始基卵泡与初级、次级、窦状卵泡相比,其卵母细胞及颗粒细胞中PRXⅡ蛋白表达水平明显较低,差异有统计学意义(P<0.005)。初级卵泡分别与次级、窦状卵泡相比其颗粒细胞中PRXⅡ蛋白表达水平较低,有显著差异(P<0.005)。闭锁卵泡PRXⅡ蛋白呈强阳性表达,明显高于生长卵泡中的表达水平。黄体及间质中亦见少量PRXⅡ表达。PRXⅡmRNA在卵巢组织中的表达水平随卵巢的生长发育呈先增高后降低的趋势。3、6、11周小鼠卵巢中PRXⅡmR-NA表达水平无统计学差异(P>0.05),但其表达水平是8天及15周小鼠卵巢组织的两倍。结论:卵泡发育不同阶段PRXⅡ均有表达,在卵泡发育后期和闭锁卵泡中强表达,提示PRXⅡ在卵泡的生长发育及闭锁过程中可能起重要的调控作用。     

转化生长因子β1β3及其受体βRⅠβRⅡmRNA在子宫肌瘤组织中的表达

目的　探讨转化生长因子 β1、β3 (TGF β1、β3 )及其受体 βRⅠ、βRⅡmRNA与子宫肌瘤发生发展的关系。方法　 2 0 0 0年 12月至 2 0 0 1年 11月采用免疫组化及原位杂交染色方法 ,对 30例子宫肌瘤及正常子宫肌组织标本检测TGF β1、β3 及其受体 βRⅠ、βRⅡmRNA的表达。 结果　 (1)子宫肌瘤组织中TGF β1、β3 蛋白表达强于邻近正常肌层 (P <0 0 1) ,且黄体期较卵泡期增高 (P <0 0 1)。TGF βRⅠ水平较邻近正常肌层亦增高 (P <0 0 1) ,TGF βRⅡ则下降 (P <0 0 5 )。 (2 )原位杂交TGF β1、β3 mRNA杂交信号的检测结果与免疫组化检测结果一致。结论　TGF β1、β3 与子宫肌瘤的发生发展密切相关 ,TGF βRⅡ降表达或表达异常可能是TGF βs促进子宫肌瘤发生发展的始动环节     

TGFβ_1及其受体在着床期小鼠子宫内膜中转录和表达状况的研究

目的 :为进一步探讨转化生长因子 ( transforming growth factorβ1,TGFβ1)在胚泡着床过程中的生物学作用。方法 :本文通过原位杂交和免疫组化方法 ,检测了 TGFβ1及其受体在着床前后小鼠子宫内膜中的转录和表达状况。结果 :受精后 d4,子宫内膜腔上皮、腺上皮和基质细胞 TGFβ1及其受体转录和表达均较未孕期增强。受精后 d5～ 6 ,TGFβ1及其受体免疫组化和原位杂交阳性着色主要分布于初级蜕膜带 ( primary decidual zone,PDZ)。随着胚泡植入的进行 ,PDZ区蜕膜细胞 TGFβ1及其受体的转录和表达增强。结论 :TGFβ1可能是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子。     

转化生长因子β受体Ⅱ在大鼠实验性隐睾中的表达及与生精细胞凋亡的关系

目的:探讨转化生长因子β受体Ⅱ(TGFβ-RⅡ)与实验性隐睾诱导的生精细胞凋亡的关系。方法:建立大鼠单侧隐睾动物模型,SABC法检测TGFβ-RⅡ在隐睾及对照侧睾丸组织内的分布及表达,TUNEL法检测凋亡生精细胞。结果:术后不同时间组隐睾侧曲细精管TGFβ-RⅡ表达均低于对照侧(P<0.01)。术后隐睾侧细胞凋亡数量较对照侧明显增加(P<0.01)。结论:TGFβ可能通过TGFβ-RⅡ介导的信号转导过程在睾丸生精细胞凋亡过程中发挥重要的调控作用。     

转化生长因子β1及其Ⅱ型受体在卵巢肿瘤中的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1(TGF-β1)及其Ⅱ型受体(TGFβR-Ⅱ)在卵巢肿瘤中的表达及其意义。方法1998年7月至2001年12月哈尔滨医科大学第一临床医学院,采用SP免疫组化染色方法,对30例卵巢癌,30例卵巢良性上皮性肿瘤及30例正常卵巢组织中TGF-β1、TGFβR-Ⅱ的表达进行分析。结果卵巢癌组TGF-β1阳性率明显高于正常卵巢组(P<0·01),且二者的强阳性率比较差异有非常显著性意义(P<0·01);卵巢良性上皮性肿瘤中TGF-β1阳性率与正常卵巢组比较,两者的阳性率、强阳性率之间比较差异均无显著性意义(P>0·05)。卵巢癌组TGFβR-Ⅱ阳性率低于正常卵巢组(P<0·05),且两者的强阳性率之间差异有非常显著性意义(P<0·01);卵巢良性上皮性肿瘤中TGFβR-Ⅱ阳性率与正常卵巢组比较,两者的阳性率、强阳性率之间差异均无显著性意义(P>0·05),与卵巢癌组比较,两者的阳性率之间差异有显著性意义(P<0·05),但强阳性率之间差异无显著性意义(P>0·05)。结论在卵巢癌中TGF-β1呈过度表达,使得其抑制癌细胞生长的作用丧失。在卵巢癌中TGFβR-Ⅱ失表达,使肿瘤细胞有效地逃避了机体的抑制。     

转化生长因子—α和myc癌基因蛋白在卵泡发育与黄体…

目的：探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－α和ｍｙｃ癌基因蛋白（ｍｙｃ蛋白）对人卵巢泡发育的局部调控机理。方法：收集３６例月经规则、因不同妇科情况切除的子宫及卵巢标本，采用免疫组织化学方法，研究ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白在卵巢组织中的表达。结果：卵母细胞在始基卵泡阶段，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白的表达呈强阳性，随着卵泡的发育与表达逐渐减弱。在颗粒细胞中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均出现在窦前卵泡阶段，随卵泡的增大     

β2糖蛋白I(β2GPI)在卵泡液中的表达水平及其与卵泡发育的关系

目的:探讨β2糖蛋白I(β2GPI)与卵泡发育的关系。方法:选取体外受精/卵胞质内单精子注射(IVF/ICSI)助孕治疗的卵巢功能正常者100例(NC组)、多囊卵巢综合征(PCOS)患者85例(PCOS组),卵巢储备功能低下(DOR)患者62例(DOR组),长方案促排卵,收集人绒毛膜促性腺激素(h CG)注射日血清及取卵日优势卵泡的卵泡液,应用酶联免疫吸附试验法(ELISA)测定各组卵泡液中β2GPI的水平;电化学发光法测定h CG注射日血清E2水平,并对IVF/ICSI周期卵泡液中β2GPI水平与h CG注射日血清E2水平、获卵数以及卵成熟率进行相关性分析。结果:各组卵泡液中β2GPI浓度相比均无统计学差异(P0.05);NC组IVF/ICSI周期中卵泡液中β2GPI的水平与h CG注射日血清E2水平、获卵数及卵成熟率均呈负相关(r=-0.279,P0.05;r=-0.243,P0.05;r=-0.711,P0.01)。结论:卵泡液中β2GPI的水平与卵巢功能无显著相关性,卵泡液中β2GPI的表达水平与IVF/ICSI周期中卵泡的发育存在负相关。     

早期自然流产患者TNF-α及TGF-β1的异常表达

目的:探讨自然流产患者外周血单个核细胞和胎盘组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)以及转化生长因子-β(TGF-β1)的异常表达。方法:采用RT-PCR技术,检测30例早期自然流产患者(自1然流产组)、25例正常妊娠妇女(正常妊娠组)、25例正常未妊娠妇女(未孕对照组)外周血单个核细胞内TNF-αmRNA和TGF-β1mRNA表达水平;采用免疫组织化学技术检测绒毛和蜕膜组织内TNF-α及TGF-β1表达强度。结果:三组研究对象外周血单个核细胞表达TNF-αmRNA相对含量分别为21.1±9.4%、68.6±14.1%、97.0±11.6%,组间比较有显著性差异(P<0.05);TGF-β1mRNA相对含量分别为21.5±9.4%、95.7±12.9%、87.0±13.8%,组间比较也均有显著性差异(P<0.05)。自然流产组细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-a均显著强于人工流产组(P<0.01);自然流产组合体滋养层细胞表达TGF-β1显著低于人工流产组(P<0.01)。结论:①早期自然流产患者外周血单个核细胞TNF-αmRNA表达水平显著下降,而细胞滋养层细胞及合体滋养层细胞表达TNF-α均显著强于人工流产组,提示TNF-α可能在母胎界面局部发挥作用并导致流产。②正常早期妊娠妇女外周血单个核细胞TGF-β1mRNA表达水平较正常未妊娠妇女显著升高,提示TGF-β1对妊娠维护起重要作用。早期自然流产患者外周血单个?     

CBS在小鼠卵泡发育过程中的表达模式及其功能初探

目的:研究调节同型半胱氨酸水平的关键酶——胱硫醚β合成酶(cystathionine-β-synthase,CBS)在卵母细胞和卵泡发生过程中的动态表达模式及潜在的生物学作用。方法:以体外培养的卵泡以及去除卵泡中卵母细胞后培养的颗粒细胞为载体系统,利用半定量RT-PCR的方法,研究不同时期卵泡以及颗粒细胞中CBS的动态表达模式。结果:在各级卵泡的颗粒细胞中均有高水平的CBS表达,用完整卵泡进行的表达研究表明,各级卵泡中也都有CBS高水平的表达,同时期的颗粒细胞与完整卵泡相比,前者具有更高水平的CBS表达;而不同发育阶段的卵母细胞中均未见CBS表达。结论:CBS在卵泡和卵母细胞的生长、发育和成熟过程中起着重要的作用,其中CBS在卵泡和卵细胞中不同的表达模式提示CBS对卵母细胞发育的影响可能是通过卵泡细胞与卵母细胞的相互作用而实现的。     

肿瘤坏死因子α及转化生长因子β在子宫腺肌病中的表达

目的:研究肿瘤坏死因子α(TNF-α)和转化生长因子β(TGF-β)在和子宫腺肌病中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化SABC技术检测正常子宫组织11份和子宫腺肌病组织33份蜡封包埋切片中TNFα与TGFβ的组织定位和表达。结果:正常子宫和子宫腺肌病组织中均存在TNFα与TGFβ的表达;正常子宫内膜腺体细胞中TNF-α与TGF-β表达强度分别高于子宫肌层和间质,分泌期高于增生期,并呈周期性变化;在子宫腺肌病组织中,TNFα与TGF-β在原位内膜中的表达强度,分泌期高于增生期,并呈周期性变化;TNF-α与TGF-β在异位子宫内膜中的表达强度分别高于原位内膜和正常子宫内膜,腺体表达强度分别高于子宫肌层和间质。结论:TNF-α和TGF-β的表达受卵巢性激素的调控;其在子宫腺肌病异位内膜中的高表达可能是子宫腺肌病发生的病理机制之一。     

PCNA在早孕小鼠子宫内膜的表达

目的:探讨增殖细胞核抗原(PCNA)mRNA及蛋白在早孕小鼠子宫内膜的作用。方法:实时荧光定量PCR(FQ-PCR)及免疫组化方法分别检测未孕(d0)及早孕d2、d3、d4、d5、d6、d7小鼠子宫内膜PCNA mRNA和蛋白的表达。结果:随着小鼠妊娠天数的增加,PCNAmRNA及蛋白表达量也逐渐增高,在孕d4、d5达到峰值,孕d6、d7逐渐下降。结论:在胚泡植入窗口期子宫内膜PCNA的高表达,可能参与了子宫内膜蜕膜化过程,在胚泡早期植入中发挥作用。     

小鼠卵泡发育不同阶段Egr-1、Gadd45α蛋白表达及相互关系

目的:探讨Egr-1、Gadd45α在小鼠卵泡发育不同阶段的表达及其相互关系。方法:选择不同发育阶段的昆明种小鼠卵巢,用免疫组化法检测不同发育阶段卵泡中Egr-1、Gadd45α蛋白的表达。结果:Egr-1、Gadd45α蛋白在卵泡不同发育阶段的卵母细胞及颗粒细胞中均有表达,而且随卵泡发育表达增强。卵泡不同发育阶段中卵母细胞及颗粒细胞中Egr-1、Gadd45α蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。闭锁卵泡Egr-1、Gadd45α蛋白表达强烈,其表达强度明显高于各级生长卵泡。黄体及间质中亦有Egr-1、Gadd45α表达。同时Egr-1、Gadd45α在各级卵母细胞的表达有较强的相关性(rs=0.993,P<0.05)。结论:卵泡发育不同阶段Egr-1、Gadd45α均有表达,在卵泡发育后期和闭锁卵泡中强表达。提示Egr-1、Gadd45α在卵泡生长发育及闭锁过程中可能起重要的调控作用。     

小鼠子宫内膜着床期碱性成纤维细胞生长因子及其受体免疫组织化学观察

为进一步阐明碱性成纤维细胞生长因子 (basic fibroblast growth factor,b FGF)在胚泡着床中的生物学作用 ,本文采用免疫组织化学的方法检测了 b FGF及其受体在小鼠早期妊娠子宫中的分布状况。结果显示 :b FGF及其受体广泛分布于子宫内膜各种细胞中 ,其分布呈现出明显的阶段性变化。受精后 4～ 5 d,b FGF及其受体在子宫内膜上皮和腺上皮中呈阳性反应。随胚泡植入的进行 ,b FGF及其受体在蜕膜细胞中的表达逐渐增加 ,至受精后 d8达到高峰。结果提示 ,b FGF可能是小鼠胚泡着床过程中的一个重要调节因子     

表皮生长因子受体在子宫内膜、早孕蜕膜及滋养细胞中的表达

目的了解表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）在子宫内膜细胞分化及发育中的作用。方法采用免疫组织化学及逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）技术测定５８例正常子宫内膜（３２例增生期,２６例分泌期）与２６例早孕蜕膜。结果ＥＧＦＲ存在于正常子宫内膜、早孕蜕膜腺体及间质细胞的细胞膜、核膜及胞浆内,分布均匀。ＥＧＦＲ还位于早孕蜕膜腺体及间质细胞核内。正常子宫内膜ＥＧＦＲ的表达,腺体部分高于间质部分（Ｐ＜０．０５）,ＥＧＦＲ在增生期及分泌期子宫内膜腺体的表达差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,但ＥＧＦＲ在早孕蜕膜组织中的表达明显高于增生期及分泌期（Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦＲ在间质细胞的表达,早孕蜕膜高于分泌期内膜,而增生期内膜则表达最低（Ｐ＜０．０５）。ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达从弱到强依次为增生期、分泌期、蜕膜、滋养细胞,增生期与分泌期比较,差异无显著性（Ｐ＞０．０５）,早孕蜕膜较分泌期及增生期明显增加（Ｐ＜０．０５）,滋养细胞ＥＧＦＲｍＲＮＡ的表达明显高于增生期、分泌期及早孕蜕膜（Ｐ＜０．０５）。结论ＥＧＦＲ存在于各期子宫内膜中,其表达在正常月经周期中无明显变化,但在早孕蜕膜、滋养细胞中的表达明显高于增生期及分泌期内膜     

人绒毛膜促性腺激素在卵泡发育中的作用

目的:过去多年,由于人绒毛膜促性腺激素(hCG)与黄体生成素(LH)高度相似,hCG已代替LH被应用于促进卵子的最后成熟。最近,人们发现LH/hCG受体遍布所有的生殖器官,提示hCG的作用不限于此。与LH相比,hCG的半衰期更长、与LH/hCG受体结合更为紧密,效应可能更强。已经有研究报道低剂量hCG可独立于卵泡刺激素(FSH)支持中晚期卵泡的发育与成熟。在控制性超促排卵(COH)之前以及早期添加hCG可能是个有效的减少重组FSH的用量,提高卵子质量,提高妊娠率的方法。本文主要从LH在激素合成以及卵泡发育中的作用,hCG与LH的异同,hCG在中晚期卵泡和早期卵泡发育中的作用等方面进行介绍hCG的最新应用进展。     

小鼠卵巢玻璃化冻融过程中重组人卵泡刺激素干预对血管内皮生长因子(VEGF)及整合素αvβ3表达的影响

目的:观察重组人卵泡刺激素(r FSH)对小鼠卵巢血管内皮生长因子(VEGF)以及整合素αvβ3表达的影响。方法:将4周龄C57BL/6J小鼠卵巢随机分为新鲜对照组(FCG)、玻璃化冻存对照组(VCG)、300 IU/L r FSH干预玻璃化冻存组(r FSH-VG)。通过对冻融卵巢内各级卵泡计数、免疫组织化学观察VEGF和整合素αvβ3在卵巢不同细胞中的定位,Western blotting检测VEGF、整合素αv和整合素β3蛋白表达量。结果:各级卵泡计数、VEGF及整合素β3的蛋白表达均为r FSHVG组优于VCG组(P0.05),整合素αv的表达组间均无统计学差异(P0.05)。结论:玻璃化冻融过程中添加r FSH可以上调VEGF及整合素β3蛋白的表达。     

类赖氨酰氧化酶1、转化生长因子β1在子宫腺肌病中的表达及临床意义

目的:探讨类赖氨酰氧化酶1(LOXL1)、转化生长因子β1(TGFβ1)在子宫腺肌病(AM)中的作用及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测30例AM患者在位内膜和异位内膜组织及20例正常子宫内膜组织中LOXL1、TGF-β1的表达,并对其蛋白表达量进行相关性分析。结果:LOXL1在AM异位内膜组、AM在位内膜组及对照组中表达的平均光密度(MOD)值分别为:0.22±0.10、0.15±0.09、0.15±0.06。AM异位内膜组LOXL1的表达高于AM在位内膜组和对照组(P<0.05),而AM在位内膜组和对照组的LOXL1表达无统计学差异(P>0.05);TGFβ1在AM异位内膜组、AM在位内膜组及对照组的相对表达量分别为:0.26±0.02、0.16±0.03、0.15±0.02,AM异位内膜组TGFβ1的表达高于AM在位内膜组和对照组(P<0.05),AM在位内膜组和对照组间TGF-β1的表达无统计学差异(P>0.05)。AM异位内膜组LOXL1蛋白与TGFβ1蛋白的表达呈正相关(r=0.402,P<0.05)。AM在位内膜组LOXL1蛋白与TGFβ1蛋白的表达无相关关系(r=0.24,P>0.05)。LOXL1在子宫大小>孕12周及腺肌瘤>5 cm的AM异位内膜组表达强于子宫大小≤孕12周和腺肌瘤≤5 cm的AM异位内膜组(P<0.05),LOXL1的表达量与患者痛经与否、月经量差异亦无明显关系(P>0.05)。TGFβ1在AM异位内膜中表达与患者痛经、月经量、AM病灶大小的差异均无明显相关性(P>0.05)。结论:LOXL1、TGFβ1在子宫腺肌病的异常表达可能参与子宫腺肌病的发生和发展。     

转化生长因子-α和myc癌基因蛋白在卵泡发育与黄体形成及退化中的表达

目的：探讨转化生长因子（ＴＧＦ）－α和ｍｙｃ癌基因蛋白（ｍｙｃ蛋白）对人卵巢卵泡发育的局部调控机理。方法：收集３６例月经规则、因不同妇科情况切除的子宫及卵巢标本，采用免疫组织化学方法，研究ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白在卵巢组织中的表达。结果：卵母细胞在始基卵泡阶段，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白的表达呈强阳性，随着卵泡的发育与成熟表达逐渐减弱。在颗粒细胞中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均出现在窦前卵泡阶段，随卵泡的增大与成熟，ＴＧＦ－α表达逐渐增强。闭锁卵泡中ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达仅限于卵泡膜细胞。在晚期退化的黄体中，ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白表达均局限于黄体中央瘢痕周围的黄体膜细胞。结论：ＴＧＦ－α和ｍｙｃ蛋白作为卵巢内局部的调节因子，通过自分泌和旁分泌途径，协同参与人卵母细胞最初的生长、卵泡细胞的增殖分化和黄体细胞凋亡的过程。