经口镉染毒大鼠前列腺中金属硫蛋白基因表达水平的变化

目的 观察经口镉染毒对大鼠前列腺组织中锌、镉含量以及金属硫蛋白（MT）基因表达水平的影响。方法 48只大鼠随机分成8组，每组6只，其中设对照组和50、100、200mg/kg镉染毒组各2组。大鼠通过饮水给予氯化镉，并分别在染毒1个和6个月后分批（每批4组）处死大鼠。大鼠前列腺组织中锌、镉含量的测定采用原子吸收光谱法，而金属硫蛋白基因（MT－I和MT-Ⅱ）表达水平的测定采用RT－PCR的方法。结果 在镉染毒的每1个月和第6个月，随着镉染毒剂量的增加，锌在大鼠前列腺腹叶中的含量呈逐渐降低的趋势。其中在镉染毒1个月和6个月后，200mg/kg镉染毒组大鼠前列腺腹叶中锌的含量分别为9．5、8．5μg/g湿重，明显低于对照组的17．0、18．9μg/g湿重，差异有显著性（P＜0．05）。与锌相反，各染毒组大鼠前列腺腹叶和背侧叶中镉的含量均明显高于对照组，尤以背侧叶增高的幅度更明显。MT－I和MT－Ⅱ在前列腺腹叶的表达水平随着镉染毒剂量的增大而呈逐渐降低趋势；在染毒第1个月和第6个月，200mg/kg镉染毒组的MT－I基因相对表达丰度为0．410和0．339，MT－Ⅱ基因相对表达丰度为0．100和0．112，均明显低于对照组MT－I（0．760，0．830）和MT－Ⅱ（0．429，0．439）相对表达丰度，差异有显著性（P＜0．01）。显著 经口镉染毒能影响大鼠前列腺组织中锌、镉的含量和MT基因表达的水平。     

大鼠肝脏镉金属硫蛋白的制备

用氯化镉注射Ｗｉｓｔａｒ大鼠，每天１次连续５次后取肝脏制备金属硫蛋白（Ｃｄ－ＭＴ－Ｉ和Ｃｄ－ＭＴ－ＩＩ）。主要步骤经加热，葡聚糖凝胶Ｇ－７５和Ａ－２５层析分析，超微薄膜过滤，有火焰和无火焰原子吸收分光光度计及紫外分光光度计分析等。所得样品较纯且该法可在常规实验室应用。     

镉染毒去卵巢大鼠模型的骨量丢失

目的 研究镉对去卵巢大鼠骨丢失的影响。方法 将6月龄SD雄性大鼠行人工去卵巢技术，分5组，每组9只；假手术组；对照组（去卵巢，0mg/L Cd）；低剂量组（去卵巢 50mg/L Cd）；中剂量组（去卵巢 100mg/L Cd）；高剂量组（去卵巢 200mg/L Cd）。均经饮用水镉染毒。24周后处死动物，测定股骨颈骨密度，雌二醇、血、尿镉、尿β2-微球蛋白、骨镉、骨钙、粪钙、尿钙。结果 大鼠去卵巢后，体内雌二醇及骨密度明显下降，镉染毒可使去卵巢大鼠股骨颈的骨密度降低更明显，且呈剂量-反应关系。镉染毒大鼠发生肾损伤，表现为尿β2-微球蛋白含量升高，镉染毒后，去卵巢大鼠粪钙及尿钙排泄明显增加，且呈剂量-反应关系，高剂量组去除卵巢大鼠的骨钙含量也显著性下降。结论 镉可加剧去卵巢大鼠的骨量丢失，肠钙及尿钙的排泄量增加，骨钙含量降低，骨密度下降。     

铈对镉染毒泥鳅肝脏中丙二醛含量和脱氧核糖核酸损伤的影响

目的研究稀土元素铈对镉暴露泥鳅肝脏中丙二醛(MDA)含量和脱氧核糖核酸损伤的影响。方法将泥鳅随机分为空白对照组、低(0.025 mg/L)、中(0.25 mg/L)、高(2.5 mg/L)剂量 Cd~(2 )染毒组、低(0.025 mg/L Cd~(2 ) 0.025 mg/L Ce~(3 ))、中(0 25 mg/L Cd~(2 ) 0.25 mg/L Ce~(3 ))、高(2.5 mg/L Cd~(2 ) 2.5 mg/L Ce~(3 ))剂量联合染毒组,每组60条。分别于第1、2、3、5、7、10天采用硫代巴比妥酸法测定泥鳅肝脏中的 MDA 含量,于染毒后第7天采用琼脂糖凝胶电泳对泥鳅肝脏中 DNA 的完整性进行分析。结果第1、2天低剂量 Cd~(2 )染毒组 MDA 含量高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);中、高剂量 Cd~(2 )染毒组短时间内(前3天)MDA 含量低于对照组,从第5天开始,MDA 含量开始升高。低剂量联合染毒组的 MDA 含量短时间内(前3天)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);随着时间的延长(第5、7、10天),差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,第1、2天中剂量联合染毒组 MDA 含量较低,第5、7、10天 MDA 含量较高,差异均有统计学意义(P<0.05或 P<0.01);而高剂量联合染毒组 MDA 含量均高于对照组。DNA 在 Cd~(2 )单一胁迫下遭到不同程度地损伤,加 Ce~(3 )处理后,低、中剂量组 DNA 损伤得到恢复,高剂量组则损伤加重。结论 Cd~(2 )可增加肝脏中 MDA 含量,对脱氧核糖核酸有损伤作用。低浓度的 Ce~(3 )对 Cd~(2 )造成的损伤有缓解作用,高浓度的 Ce~(3 )对 Cd~(2 )造成的损伤有加重作用。     

硫酸镉诱导大鼠肝组织及L02细胞热应激蛋白70基因表达的研究

目的 研究重金属镉诱导热应激蛋白70( HSP70)基因表达的变化,探讨以HSP70基因表达作为环境污染及暴露人群监控的敏感性指标.方法 将Wistar大鼠随机分成25.0、8.0及3.0 mg/kg硫酸镉染毒组及正常对照共4组,每组16只,雌雄各半,连续染毒28 d;运用RT-PCR扩增技术观察肝组织HSP70 mR...     

大鼠体内镉负荷与尿金属硫蛋白关系的实验研究

[目的]分析大鼠尿金属硫蛋白(UMT)与体内镉负荷的关系,探讨UMT作为镉接触性生物标志物的可行性。[方法]24只SD大鼠分为4组,分别皮下注射给予0、0.5、1.0、2.0mgCd/kg体重CdCl27d。原子吸收分光光度法(AAS)测定肝脏、肾脏、胰脏、尿液、血液中镉的含量;比色法测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(UNAG)水平;酶联免疫吸附法(ELISA)检测UMT的含量。[结果]镉染毒大鼠血镉、尿镉、肝镉、肾镉、胰镉含量随染镉剂量的增加而明显增加,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);各染镉组大鼠UNAG水平未见明显改变(P>0.05);UMT含量随着染镉剂量的增加而明显增加(P<0.05),并且与肝镉、肾镉、胰镉、血镉、尿镉含量呈明显正相关,相关系数分别为0.703、0.815、0.691、0.654、0.641(P<0.01)。[结论]UMT与体内镉负荷指标间存在较好的一致性,能反映机体镉负荷水平,可作为镉接触生物标志物。     

镉毒性肾损害与镉、锌结合蛋白——Ⅰ.尿金属硫蛋白对镉毒性肾损害的检测价值

采用Sephadex G-75凝胶柱色谱技术对亚急性镉毒性肾损害大鼠肝、肾、血、尿中金属硫蛋白(MT)进行了分离测定。结果表明,镉暴露后,肝、肾、血、尿中MT增多。MT是体内镉的主要存在形式,其在体内镉的运转、蓄积及排泄过程起最重要的作用。尿中MT增高是镉毒性肾损害最早出现的变化之一,它作为低分子蛋白质是肾小管功能障碍的灵敏指标。同时,作为一种镉金属结合蛋白,在反映镉性肾损害有其特异性。     

大鼠组织中金属硫蛋白测定方法的建立及应用

本文用纯化的金属硫蛋白（ＭＴ）作为标准品，用镉饱和法测定大鼠组织中ＭＴ的含量，并进行了回收率测定和精密度检验。结果表明，此方法测定组织中ＭＴ可得到准确的结果。（１）以标准ＭＴ加入量对实际测定镉计算的ＭＴ含量作图，可见有良好的直线关系（ｒ＝０．９９３１，Ｐ〈０．０１）。（２）标准回收率范围为９７．６％￣１０８．０％。（３）对同一样品进行１０次测定，其变异系数为３．８％。（４）实际测定中创伤应激大鼠肝     

大黄酚固体分散体对镉染毒大鼠氧化应激影响

目的 观察大黄酚固体分散体对镉染毒大鼠氧化损伤的影响.方法 以聚乙二醇6 000为载体制备大黄酚固体分散体,差示扫描量热法(DSC)和X射线衍射法对固体分散体进行分析.SD大鼠40只,雌雄各半,随机分为5组,分别为正常对照组、镉染毒组、镉加大黄酚组、镉加大黄酚固体分散体低剂量组和镉加大黄酚固体分散体高剂量组.正常对照组灌胃纯净水,其余4组给予20 mg/kg氯化镉隔日灌胃染毒,共染毒4次,染毒6h后给予大黄酚或大黄酚固体分散体干预.末次给药后,测定大鼠血清、脑和肾中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)水平,测定大鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活力.结果 DSC和X射线衍射分析表明,大黄酚以无定形形式存在于固体分散体中.大黄酚固体分散体可降低镉染毒大鼠血清、脑组织和肾中MDA水平(P＜0.05),增加血清、脑组织和肾中SOD和GSH-Px活力(P＜0.05),降低血清中ALT、AST活力(P＜0.05).结论 大黄酚固体分散体可降低镉对大鼠造成的肝损伤、脑损伤和氧化损伤.     

破壁灵芝孢子粉对长期镉暴露大鼠金属硫蛋白表达的影响

目的研究破壁灵芝孢子粉(GLS)对长期镉暴露大鼠金属硫蛋白(MT)基因表达的影响。方法雄性SD大鼠80只,随机分为4组,每组20只,即正常对照组(C)、单独染镉(Cd)和2个给药组(灵芝孢子粉0.5 g/kg和1.0 g/kg+Cd Cl2,即GCd_L和GCd_H组)。除C组外,所有大鼠隔天腹腔注射Cd Cl2(2 mg/kg),GCd_L和GCd_H组每天灌胃灵芝孢子粉混悬液,C组和Cd组大鼠灌胃等体积生理盐水。实验过程观察动物一般表现并定期称重,分别于30、60和90 d处死取肝组织,原子吸收光谱法(AAS)检测90 d肝组织中各亚细胞细胞核、线粒体、微粒体、细胞质Cd含量;采用real time RTPCR法检测MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达。结果与单独染镉组比较,对照组与给药组(GCd)体重差异有统计学意义(P0.05);灵芝孢子粉使镉在肝组织中各亚细胞的分布发生显著变化(P0.05);与对照组比较,灵芝孢子粉可诱导镉中毒大鼠MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达上调(P0.05),且呈时间、剂量效应。结论灵芝孢子粉对长期镉暴露大鼠肝组织有保护作用,其机制可能与调节MT-1mRNA、MT-2mRNA基因表达水平有关。     

电磁辐射对PC12细胞GluR2蛋白质表达及磷酸化的影响

目的 探讨电磁辐射对PC12细胞GluR2蛋白质表达及蛋白质磷酸化水平的影响。方法 对离体培养的PC12细胞给予平均功率密度为90mW/cm²的电磁波持续辐照20min,采用western blot方法检测辐照后0h、3h、12h、24h四个时相点GluR2蛋白质表达及蛋白质磷酸化水平的变化。结果 电磁波辐照后0h和3hGluR2的蛋白质表达水平降低(P<0.05),其余各时相点无显著变化;辐照后0hGluR2的蛋白质磷酸化水平显著降低(P<0.01),3h后逐渐恢复至正常水平。结论 平均功率密度为90mW/cm²的电磁波持续辐照20min能够降低PC12细胞GluR2的蛋白质表达和蛋白质磷酸化水平。     

乙醇对金黄地鼠胚胎神经上皮细胞Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

目的探讨乙醇染毒对金黄地鼠胚胎神经上皮细胞内B细胞淋巴瘤/白血病-2(B-celllymphoma/leukemia-2,Bcl-2)基因和Bcl相关蛋白(Bcl-associatexprotein,Bax)表达的影响。方法成年未经产金黄地鼠48只,实验组分6组,每组5只;对照组分6组,每组3只。实验组于孕7.5d腹腔注射乙醇,剂量为5.8g/kg,分别于4、8、16、24、48和72h后剖腹取胎,用免疫组织化学和图象分析技术对各期鼠胚神经上皮的Bcl-2和Bax的表达进行检测。对照组腹腔注射生理盐水。结果对照组Bcl-2和Bax正常分布于金黄地鼠胚胎神经上皮和周围间充质的核膜和胞浆,随时间推移,二者的表达量逐渐增高,于处理后16h达到高峰,与对照组相比,升高有统计学意义(P<0.01),之后逐渐下降。各实验组胚胎神经上皮细胞的Bcl-2免疫组化染色强度均不同程度地低于对照组,Bax的表达在8h低于对照组,其他各组均不同程度地高于对照组。结论乙醇能抑制Bcl-2的表达,促进Bax的表达,从而参与了乙醇致神经管畸形中细胞凋亡的调节。     

四氯化碳诱发大鼠肝脏蛋白质表达变化的分析

目的分析四氯化碳(CCl4)诱发肝纤维化大鼠肝脏细胞蛋白表达的变化,为寻找CCl4致肝纤维化早期生物效应的相关蛋白提供实验基础。方法采用皮下注射CCl4诱发实验性大鼠肝损伤模型,测定大鼠血清生化指标和观察肝组织病理学的变化,提取大鼠肝细胞总蛋白并采用二维凝胶电泳(2-DE)进行分离,Image Master 2D Platinum软件分析电泳图谱,选择表达有显著差异的蛋白点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定。结果大鼠血清生化指标和病理学结果提示肝纤维化造模成功,CCl4损伤组肝细胞蛋白质2-DE图谱表达发生改变,差异点经MALDI-TOF-MS分析和数据库搜索,鉴定出4个已知序列蛋白。结论应用蛋白质组学技术筛选和鉴定出的蛋白可能与肝纤维化的发生发展有关,为进一步研究CCl4诱发肝纤维化机制提供依据。     

雌鼠围产期染铅对仔鼠脑组织Brn-3a基因转录及蛋白表达的影响

[目的]探讨雌鼠围产期染铅对仔鼠中枢神经系统神经细胞内Brn-3a基因转录及蛋白的影响。[方法]雌性大鼠在围产期经饮水染铅，分为低（0．5g/L）、中（1．0g/L）、高（2．0g/L）3个染铅组，对照组饮用蒸馏水。取21日龄仔鼠脑组织进行观察，采用组织原位杂交半定量方法检测Brn-3a基因mRNA转录水平，采用免疫组织化学方法检测Brn-3a蛋白表达水平。[结果]原位杂交检测Brn-3a基因mRNA图像分析结果表明，高铅组与对照组相比，大脑皮质和海马部位平均灰度值升高（P〈0．05），表明mRNA的表达量减弱，海马部位阳性面积比明显下降（P〈0．01）。免疫组织化学图像分析表明，与对照组相比，各染铅组大脑皮质、海马及小脑的Brn-3a蛋白表达的阳性面积比[Aa（％）]、平均灰度的差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01），并呈剂量依赖性关系。染铅组Brn-3a蛋白表达低于对照组。[结论]大鼠脑组织基因转录水平和蛋白表达水平有所下降，提示在本实验染毒剂量下，铅干扰了Brn-3a蛋白的正常表达模式。     

子宫内膜腺癌组织中Bcl—2蛋白表达的研究

为探讨Ｂｃｌ－２蛋白在子宫内膜腺癌组织中的表达状况，其病理学与临床意义，本组应用抗Ｂｃｌ－２单克隆抗体对３４例子宫内膜腺癌细胞石蜡标本行Ｂｃｌ－２蛋白免疫组织化学测定（ＳＡＢＣ法）。结果发现Ｂｃｌ－２蛋白在子宫内膜腺癌组织中表达的阳性率为４７％，其阳性表达与肿瘤组织学分期、肌层浸润深度及患者预后有关（Ｐ〈０．０５）。说明Ｂｃｌ－２蛋白表达与子宫内膜腺癌的某些病理学特征及生物学行为之间存在的关系。应     

铅对幼鼠脑海马区Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的：通过大鼠孕期及哺乳期不同剂量染铅所致幼鼠染铅模型，测定出生后7天、21天幼鼠血铅，脑铅含量，同时测定脑组织海马区细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达情况。方法：血铅、脑铅测定采用原子吸收石墨炉法；Bcl-2、Fas蛋白表达采用免疫组化法测定。结果：对于出生后7天幼鼠，染铅组与对照组相比，其脑组织Bcl-2蛋白表达降低，而Fas蛋白表达升高，但对于出生后21天幼鼠，则没有这种改变。结论：染铅可能通过改变发育期脑组织细胞凋亡相关基因Bcl-2、Fas蛋白表达使细胞凋亡数量改变，从而导致铅的发育神经毒性。     

慢性铝接触大鼠不同脑区bcl-2基因的表达

[目的 ]通过对慢性铝接触大鼠不同脑区bcl 2基因表达水平的检测 ,研究神经细胞凋亡在铝中毒引起的学习记忆障碍中的作用。 [方法 ]给SD大鼠腹腔注射不同剂量的AlCl3 溶液 60d ,用跳台法测试其学习记忆能力的改变 ,用免疫组化法测定分析其脑组织不同脑区bcl 2基因表达水平。 [结果 ]与对照组相比 ,染铝组大鼠学习记忆能力明显下降 (P <0 0 5 ) ,大鼠跳台实验结果 ,潜伏期和 5min内错误次数明显增加 (P <0 0 5 )。大脑皮层和小脑各个剂量组bcl 2的表达都升高 (P <0 0 1) ,海马CA3区仅在中剂量组表达升高 (P <0 0 1)。 [结论 ]慢性铝接触可导致大鼠学习记忆障碍 ,出现类AD病人的早老性痴呆样症状 ,bcl 2基因作为重要的神经细胞凋亡抑制基因参与了这一毒性损害过程 ,并在其中起一定的保护作用 ;大脑皮质、海马及小脑部位的大量神经细胞凋亡很可能是铝毒性作用的重要机制之一。     

丙肝患者mIL—2R表达和血清sIL—2R水平的临床观察

本研究观察５６例丙肝患者（急性２７例,慢性２９例）ＰＢＭＣ经ＰＨＡ刺激后的ｍＩＬ－２Ｒ表达和血清ｓＩＬ－２Ｒ水平,设健康对照组３０例。结果：⑴丙肝患者ｍＩＬ－２Ｒ表达较低,急、慢性之间差异无显著性;⑵丙肝患者血清ｓＩＬ－２Ｒ水平较高,急性组高于慢性组;⑶丙肝患者ｍＩＬ－２Ｒ表达和血清ｓＩＬ－２Ｒ水平之间无明显关系。表明ｍＩＬ－２Ｒ表达不足和ｓＩＬ－２Ｒ水平升高在丙肝患者机体免疫抑制机制中起重要作用;提示ｓＩＬ－２Ｒ可作为丙肝患者临床观察指标     

肺癌和癌旁正常组织中Gab2蛋白及其mRNA的表达

目的检测肺癌和癌旁正常组织中Gab2蛋白及其mRNA的表达情况,探讨Gab2与肺癌发生发展的关系。方法采用PV-9003免疫组织化学法检测75例肺癌组织和25例癌旁正常组织中Gab2蛋白表达水平,实时荧光定量RT-PCR方法检测15对肺癌组织和相对应的癌旁正常肺组织中Gab2基因mRNA表达状况。结果 Gab2蛋白在30例鳞癌、30例腺癌和15例其他类型癌中的阳性表达率分别为66.67%,46.67%和80%,高于癌旁正常肺组织(P0.01);15例肺癌组织中Gab2 mRNA表达高于相对应的癌旁正常肺组织(P0.05)。结论 Gab2在肺癌的发生发展中可能起重要作用,其表达增强可能诱导了肺癌的发生。