艰难梭菌感染实验室检测方法进展

<正>艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)是一种专性厌氧的革兰阳性芽孢杆菌,1935年首次在新生儿肠道正常菌群中被分离出来。1978年起人们发现该细菌是引起抗生素相关性腹泻、医院性腹泻及假膜性肠炎的主要病原体。有资料显示,25%~30%的抗生素相关性腹泻以及90%以上的假膜性肠炎均是由CD引起的,美国由艰难梭菌感染(Clostridium-difficile infection,CDI)所致的病死     

艰难梭菌污染现状

艰难梭菌是引起人类腹泻的致病菌,艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)的发生率在世界各地呈上升趋势.与此同时艰难梭菌在动物粪便及食物中检出率的报道也不断上升,通过食物传播艰难梭菌被认为是引起CDAD的可能途径,但目前尚不清楚艰难梭菌是否为食源性病原体.本文综述了艰难梭菌在水、动物和食物中的检出污染现状及致病菌株的分布.     

艰难梭菌感染诊断团体标准解读

艰难梭菌是引起抗生素相关性腹泻和医疗机构相关性腹泻的重要病原,在欧美引起暴发流行,造成沉重疾病负担。然而我国艰难梭菌感染调查缺乏统一的诊断原则和检测技术规范,我国艰难梭菌感染率和疾病负担尚不明确。因此中国CDC传染病预防控制所联合全国其他11家单位撰写《艰难梭菌感染诊断(T/CPMA 008-2020)》中华预防医学会团体标准,以"合法性、科学性、先进性、可行性"为原则,给出了艰难梭菌感染的危险因素、诊断原则、诊断和鉴别诊断。旨在提高临床感染性腹泻中艰难梭菌感染诊断的准确性,指导监测工作开展,明确我国艰难梭菌感染的风险和疾病负担。     

FDA批准新药非达霉素治疗艰难梭菌相关性腹泻

2011年5月27日,美国食品与药物管理局(FDA)发布公告,批准非达霉素(Fidaxomicin,商品名Dificid)口服片剂用于治疗艰难梭菌相关性腹泻(CDAD)。艰难梭菌(Clostridium difficile)是一种专性厌氧革兰阳性杆菌,可引起腹泻并导致肠炎和其他一系列肠道疾病,严重时造成死亡。艰难梭菌可在受感染者粪便中找到,如果其他人接触这种细菌或芽孢污染的物品,然后触摸口唇就会感染。发生艰难梭菌相关性腹泻的高危人群包括老人、在医院或疗养院住院患者以及因其他感染接受抗生素治疗者。预防CDAD最有效的方法是以肥皂和温水彻底洗手。     

108例艰难梭菌相关性腹泻患者的临床诊治分析

目的回顾性研究三甲综合性医院艰难梭菌感染的流行及治疗。方法收集2015年1月-2016年6月医院收治的852例腹泻患者的粪便标本,进行厌氧培养和药敏试验,对艰难梭菌培养阳性的108株菌株进行毒素基因(tcdA、tcd B)的PCR检测和多位点序列分型。收集所有患者的临床资料,归纳ICU腹泻患者感染艰难梭菌的影响因素。结果艰难梭菌阳性率为12.68%(108/852),毒素基因tcd A和tcd B均阳性占89.81%(97/108)。多位点序列分型分离出33种ST型,主要为ST54型(17.59%)、ST3型(15.74%)、ST8型(8.33%)、ST2型(7.41%)和ST35型(6.48%),eBURST分析33个ST型无明显的同源性。性别(男性)、年龄和APACHE II评分是ICU腹泻患者艰难梭菌感染的影响因素(P<0.05)。消化内科、ICU、康复科和血液科为检出艰难梭菌感染最多的科室。甲硝唑和万古霉素保持高度敏感,无耐药菌株检出。108例CDI中41例采用非药物治疗,其中好转33例,无效6例,死亡2例。病情较重行药物治疗67例,选择甲硝唑加/不加万古霉素抗CDI治疗,其中好转56例,无效7例,死亡4例。结论腹泻患者中艰难梭菌感染发生率较高,但无高产毒株检出,无证据表明存在艰难梭菌感染的传播和暴发流行,多个科室应列为艰难梭菌感染的感控哨点科室,应规范标本送检,提高送检率。     

艰难梭菌分子分型方法研究进展

正艰难梭菌(Clostridium difficile,CD)是一种革兰阳性厌氧芽孢杆菌,20世纪80年代发现它是引起抗生素相关性假膜性肠炎的原因之一,由其引起的艰难梭菌感染(Clostridium difficile infection,CDI)现已成为抗生素相关性腹泻的主要原因[1-2]。CDI可表现为从轻度的自限性腹泻到严重     

艰难梭菌毒素蛋白表达与艰难梭菌感染分级关系的研究

目的分析医院艰难梭菌感染(clostridiumdifficile infection,CDI)患者的临床表现与实验室检查结果,初步研究艰难梭菌毒素蛋白表达与CDI严重程度分级的关系。方法收集2016年3月-2017年5月医院连续采集的860例腹泻便样本,采用Techlab Cdiff Quik Check Complete试剂盒和艰难梭菌毒素基因试剂盒分别检测艰难梭菌谷氨酸脱氢酶抗原(Clostridium difficile glutamate dehydrogenase antigen,GDH)、艰难梭菌毒素蛋白和艰难梭菌毒素基因,并对CDI患者临床资料和实验室结果进行统计分析。结果 860份腹泻样本中,GDH阳性99例占11.51%,其中艰难梭菌毒素蛋白阳性16例占16.16%,毒素基因阳性94例占94.95%;艰难梭菌毒素蛋白阳性患者的外周血白细胞数量、血清肌酐水平、腹泻次数、CDI分级指数及院内CDI患者概率均高于毒素蛋白阴性患者(P0.05)。结论艰难梭菌毒素蛋白阳性患者常伴随严重的艰难梭菌感染临床表现,推测艰难梭菌毒素蛋白可作为一项重度艰难梭菌感染的预测指标,为临床判断CDI分级及合理选择治疗方案提供及时客观的依据。     

郴州市住院腹泻患者艰难梭菌感染状况及其基因特征

目的 通过对住院腹泻患者粪便中艰难梭菌的分离培养和毒力基因检测及分型,了解郴州市住院腹泻患者艰难梭菌感染状况。方法 收集2020年10-12月湘南学院附属医院、郴州市第一人民医院和郴州市第三人民医院住院腹泻患者粪便标本306例,厌氧培养法分离艰难梭菌菌株,采用荧光聚合酶链反应(RT-PCR)检测A、B毒素基因tcdA、tcdB及二元毒素基因cdtA、cdtB,并对分离的艰难梭菌菌株进行多位点序列分型(MLST)。结果 郴州市住院腹泻患者产毒艰难梭菌核酸阳性率为8.17%(25/306),>60岁患者感染风险更高(χ²=5.499,P=0.019); 306份标本中分离出17株艰难梭菌,粪便标本荧光PCR检测有25份阳性,二者比较有统计学差异(P=0.008),毒力基因检测均为tcdA2=5.499,P=0.019); 306份标本中分离出17株艰难梭菌,粪便标本荧光PCR检测有25份阳性,二者比较有统计学差异(P=0.008),毒力基因检测均为tcdA⁺tcdB+tcdB⁺,未检出二元毒素;选取7株艰难梭菌进行MLST分型,分出5个ST型,ST54型(3株)、ST129型(1株)、ST98型(1株)、ST53(1株)和ST631(1株)。结论 郴州市住院腹泻患者艰难梭菌感染率较低,感染毒素类型为tcdA+,未检出二元毒素;选取7株艰难梭菌进行MLST分型,分出5个ST型,ST54型(3株)、ST129型(1株)、ST98型(1株)、ST53(1株)和ST631(1株)。结论 郴州市住院腹泻患者艰难梭菌感染率较低,感染毒素类型为tcdA⁺tcdB+tcdB⁺,呈多种ST流行。     

腹泻患儿艰难梭菌感染的调查研究

目的调查苏州市腹泻患儿艰难梭菌感染(CDI)的状况并分析其相关因素,为降低其感染率提供参考依据。方法以2013年6-10月在苏州大学附属儿童医院消化科住院的腹泻患儿共176例作为研究对象,采用实时荧光PCR方法检测艰难梭菌看家基因tpi及A/B毒素基因tcdA/tcdB进行艰难梭菌初筛及致病性诊断,探讨其危险因素。结果在176例腹泻患儿中初筛艰难梭菌阳性34例,阳性率为19.32%,确诊CDI 22例,感染率12.50%,其中男性占59.09%、女性占40.91%;统计分析表明年龄、性别、城乡分布及有无抗菌药物应用史差异均无统计学意义。结论腹泻患儿中艰难梭菌感染率较高,艰难梭菌感染率与患儿年龄、性别、城乡分布及抗菌药物应用史无显著相关。     

艰难梭菌毒素A＆B测定在医院腹泻患者中的应用

目的探讨艰难梭菌毒素AB测定在医院腹泻患者中的应用价值。方法采用VIDAS艰难梭菌AB毒素检测试剂对某院47例住院的腹泻患者粪便标本进行毒素检测,并结合细菌常规培养、临床资料及治疗进行综合分析。结果 47例腹泻患者中,7例(14.89%)艰难梭菌毒素检测阳性,此7例阳性结果均与临床诊断和/或治疗相符。结论该院艰难梭菌感染形势较为严峻,VIDAS艰难梭菌AB毒素检测可提供简单、准确、快速的检测结果,值得推广应用。