白色念珠菌芽管的诱导培养及定量检测

目的:比较和优化白色念珠菌芽管诱导培养的条件,定量检测白色念珠菌芽管形成的情况。方法:采用结晶紫芽管染色法,对不同血清浓度,菌体浓度,孵育时长及孵育温度下的芽管形成进行定量检测,通过计算出芽率判断芽管诱导效率。结果:在浓度为50%(v/v)的血清中,白色念珠菌菌体浓度为5×106cfu/m l时,于37℃孵育2 h,出芽率及芽管纯度较好。结论:结晶紫法可精确定量检测芽管形成,诱导条件优化后可使白色念珠菌形成较多较纯的芽管。     

消炎痛抑制白色念珠菌菌丝生长的小鼠模型试验

目的:探讨消炎痛对白色念珠菌性阴道炎的治疗作用。方法:建立小鼠白色念珠菌阴道炎动物模型后,连续7天小鼠阴道内注入2 mmol/L的消炎痛100μl后,进行灌洗液涂片镜检,阴道灌洗液真菌荷载量菌落计数及阴道组织病理学检查。结果:消炎痛组仅见少量炎性细胞浸润(HE染色),阴道粘膜未见菌丝,仅见少量孢子(PAS染色);阴道灌洗液真菌载量计数有较低水平的CFU计数;灌洗液涂片镜检仅见少量孢子,未见菌丝。结论:消炎痛能抑制体内白色念珠菌菌丝生长和孢子增殖生长,对模型小鼠白色念珠菌性阴道炎具有显著的治疗作用。     

载银二氧化钛抗白色念珠菌生物被膜作用及机制研究

目的研究载银二氧化钛(Ag-Ti O_2)对白色念珠菌生物被膜的抑制作用,并初步探讨其作用机制及靶点。方法通过XTT法检测Ag-Ti O_2对白色念珠菌生物被膜的影响并测定其黏附最低抑菌浓度(SMIC);在倒置显微镜下观察不同浓度Ag-Ti O_2作用后白色念珠菌菌丝生长状况,考察Ag-Ti O_2对白色念珠菌酵母态向菌丝态转变的影响;使用水-烃两项测定实验检测不同浓度Ag-Ti O_2作用后白色念珠菌细胞表面疏水性(CSH)的变化,考察Ag-Ti O_2对其黏附能力的影响。结果 Ag-Ti O_2对白色念珠菌生物被膜具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖性,SMIC为400 mg/L;Ag-Ti O_2可以干扰白色念珠菌从酵母态向菌丝态的转变,进而抑制三维网状结构的形成,在Ag-Ti O_2浓度为300 mg/L时,即可观察到菌丝成分明显减少,被膜结构疏松,极易从附着物上脱落;随着Ag-Ti O_2浓度的提高,CSH也随之减低。结论 Ag-Ti O_2对白色念珠菌生物被膜的形成具有明显的抑制作用,可能是通过干扰菌体菌丝态的形成、降低CSH等方面抑制白色念珠菌的聚集黏附能力。     

培养环境对两性霉素B抑制白色念珠菌作用的影响

目的综合考察各种因素（不同的培养基、培养基的pH值、真菌接种浓度等）对两性霉素B（AmB）抑制白色念珠菌作用的影响,为临床合理用药提供理论依据。方法液体稀释法。结果在不同的培养基中,AmB对白色念珠菌的MIC值不同,随着pH值的增高及真菌接种菌液浓度增加,其MIC值增加。结论 AmB对白色念珠菌的MIC值会受到多种因素的影响,所以,进行药物的抗菌活性研究时应制定并严格执行统一的标准。     

念珠菌显色培养基临床应用效果评价

[目的]CHRO Magar念珠菌显色培养基对临床标本中念珠菌的快速检测作用进行评价。[方法]临床标本中分离出的念珠菌,接种显色培养基后,作芽管、厚膜孢子形成试验和VITEK—YBC卡并进行鉴定比较。[结果]显色培养基24h内即可快速准确鉴别87．4％临床中常见的念珠菌,对白色念珠菌、热带念珠菌鉴定的正确率为100％,光滑念珠菌鉴定的正确率为85．7％0。[结论]显色培养基是一种方便、快捷、有效的念珠菌分离鉴定培养基,值得临床实验室的推广应用。     

氧化剂抑制白色假丝酵母菌菌丝形成的研究

目的研究3种氧化剂对白色假丝酵母菌(CAL)菌丝形成的影响,探讨氧化应激对真菌病原体的抑制作用,为研发新的抗真菌药物提供理论依据。方法 2014年2月将3株CAL标准株和临床分离菌株悬液接种于含不同浓度过氧化氢、二酰胺和甲萘醌的RPMI-1640培养基中,分别于不同时间(0、2、4、6h)计数菌丝生成率,数据采用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果 3种氧化剂对CAL菌丝形成均有抑制作用,H2O2、二酰胺和甲萘醌均呈剂量依赖性抑制菌丝生成,H2O2、二酰胺和甲萘醌浓度为30mmol/L时,CAL菌丝生成率开始下降,菌丝生成率分别为67.0%、58.0%、49.0%;在H2O2、二酰胺和甲萘醌处理2h时,CAL菌丝生成率开始下降,生成率分别为73.0%、59.0%、51.0%。结论 3种氧化剂呈浓度和时间依赖性抑制CAL菌丝形成,其中甲萘醌抑制CAL菌丝形成的作用最强,并且标准株菌丝生成率低于临床分离株。     

外阴阴道念珠菌病小鼠模型阴道组织PGE_2的测定及消炎痛对其治疗的研究

目的:探讨雌激素诱发白念珠菌性阴道炎的发病机制,观察阴道内应用消炎痛对白念珠菌性阴道炎的影响并分析其作用机制。方法:采用雌激素化小鼠白念珠菌性阴道炎模型(A)、另设单一白念珠菌感染组(B)、单一雌激素化组(C)、模型用药(消炎痛)组(D)和空白对照组(E)。在接种后4、7、14天取小鼠阴道灌洗液并摘取阴道组织,动态观察灌洗液中白念珠菌菌丝生长情况。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测小鼠阴道组织前列腺素E2(PGE2)水平。结果:与E组比较,A组和C组小鼠阴道组织PGE2水平均增高;与B组及D组比较,A组阴道灌洗液中见更多菌丝生长,且阴道组织PGE2水平增高。结论:雌激素可诱导小鼠阴道组织产生PGE2,与白念珠菌菌丝生成和阴道炎形成及持续感染有关;消炎痛能抑制小鼠阴道内白念珠菌菌丝形成和PGE2合成,阴道内给予消炎痛有助于治疗白念珠菌性阴道炎。     

亮氨酸对原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞肌管形成和MyHC表达的作用研究

目的 探讨新生个体骨骼肌生长重要营养因子亮氨酸对新生大鼠骨骼肌卫星细胞肌管形成和肌球蛋白重链(myosin heavy chain,MyHC)表达影响的机制。方法 分离纯化原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞,在细胞的分化阶段用不同浓度亮氨酸和雷帕霉素(0 mM亮氨酸,0.1 mM亮氨酸,0.5 mM亮氨酸,2.0 mM亮氨酸,2.0 mM亮氨酸+50 nM雷帕霉素)处理细胞,观察肌管形成情况并检测MyHC、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)、p-mTOR和Myod的表达。结果 亮氨酸促进肌管的形成,随着原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞分化MyHC表达逐渐增加(P<0.05、<0.01或<0.001)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞p-mTOR表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P<0.05或<0.01),添加雷帕霉素后,p-mTOR表达水平下降(P<0.05)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞Myod的表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P值均<0.05),雷帕霉素则抑制Myod的表达(P<0.05)。亮氨酸浓度为0.5 mM和2.0 mM时原代新生大鼠骨骼肌卫星细胞MyHC的表达水平高于亮氨酸浓度为0 mM组(P<0.05或<0.01),雷帕霉素则抑制MyHC的表达(P<0.05)。结论 亮氨酸通过mTORC1/Myod信号通路上调新生大鼠骨骼肌卫星细胞MyHC表达,促进肌管的形成。     

黄连对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列基因表达影响

目的研究不同浓度黄连浸液对生物膜状态下耐氟康唑白色念珠菌凝集素样序列（ALS）基因mRNA表达量的影响。 方法采用阴道白色念珠菌耐药株为研究对象,经甲基四氮盐（XTT）减低法筛选形成生物膜的白色念珠菌。在不同浓度黄连浸液干预下,通过RT-PCR检测生物膜黏附阶段ALS3/ALS4基因表达,观察黄连对白色念珠菌生物膜形成相关基因表达的抑制作用。 结果当黄连浸液浓度为125 mg/L时,对白色念珠菌生物膜的形成阶段和成熟阶段的抑制率分别为88.6%和82.9%;黄连浸液干预下生物膜状态白色念珠菌黏附相关基因ALS3/ALS4的mRNA表达与药物浓度成负相关;当黄连浸液浓度大于4.023 mg/L时,黄连浸液干预下ALS3/ALS4的mRNA表达相对量与阴性对照比较差异有统计学意义（P＜0.05）。 结论黄连可以抑制白色念珠菌黏附相关基因ALS3 /ALS4的mRNA水平表达且呈剂量依赖关系。     

二氧化氯消毒剂的剂型对杀菌效果的影响

目的:比较不同剂型二氧化氯消毒剂对微生物的杀灭效果。方法:采用悬液定量杀菌试验进行实验室观察。结果:固体消毒剂(A)500 mg/L浓度作用1 min,250 mg/L浓度作用5 min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、枯草杆菌黑色变种的杀灭对数值均≥5;液体消毒剂(B)500 mg/L浓度作用5 min对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌的杀灭对数值均≥5。结论:两种剂型的二氧化氯杀灭微生物效果随浓度增加、作用时间延长而增强,其中固体消毒剂(A)杀灭效果优于液体消毒剂(B)。     

Micronuclei formation induced by X-ray irradiation does not always result from DNA double-strand breaks

X-ray induced formation of micronuclei is generally thought to result from DNA double-strand breaks (DSBs). However, DNA DSBs inhibit the cell cycle progression that is required for micronucleus formation. In order to reconcile this apparent discrepancy, we investigated whether DNA DSBs induced during the G1 phase could lead to micronucleus formation. We irradiated human embryonic (HE17) cells that had been treated with a radical scavenger, either DMSO or ascorbic acid (AsA), and determined the level of suppression of DNA DSBs or micronuclei. When DNA DSBs were evaluated using 53BP1 foci, treatment with 5 mM AsA did not inhibit the numbers of foci at various intervals after X-ray irradiation; however, treatment with 5 mM or 256 mM DMSO did have a significant inhibitory effect. By contrast, an assay of micronucleus numbers showed that treatment with 5 mM or 256 mM DMSO before X-ray irradiation resulted in almost no inhibition of micronucleus formation, but treatment with 5 mM AsA did have a significant inhibitory effect. These results clearly showed that AsA could suppress micronucleus formation, although it was not effective for suppression of DNA DSBs. Therefore, we conclude that DNA DSBs induced in the G1 phase do not directly lead to micronucleus formation.     

中药成方复方香艾液抑菌作用的实验研究

目的观察中药成方复方香艾液的抑菌作用及最低抑菌浓度。方法采用平皿法和试管法。以不同质量浓度药物作用于培养的大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和白色念珠菌,观察抑菌效果。结果复方香艾液能有效抑制实验细菌生长,复方香艾液对大肠杆菌MIC为31.25 mg/ml(原液稀释8倍),对金黄色葡萄球菌MIC为7.8 mg/ml(原液稀释32倍),对白色念珠菌MIC为62.5 mg/ml(原液稀释4倍)。结论实验研究证实复方香艾液具有明显的抑菌作用,能有效抑制空气中常见致病菌的生长。     

The comparison of two agar media for germ tube and chlamydospore production by Candida albicans.

A simple (2% oxgall) agar medium is described for the production of both germ tubes and chlamydospores by over 500 clinical isolates of Candida albicans. In comparison studies between the 2% oxgall agar and the more complex "cream of rice" infusion-oxgall-Tween 80 agar (RIOT), germ tubes were formed by 478 isolates in both media, by 9 isolates in only the oxgall medium and by 11 isolates in only the RIOT medium. Chlamydospores were formed by 481 isolates in both media, by 2 isolates in only the oxgall medium and by 9 isolates in only the RIOT medium. The data also show that both the germ tubes and chlamydospores were needed for the presumptive clinical identification of C. albicans.     

DNA损伤应答基因MMS22调控白念珠菌形态发生和致病性的作用

目的 探索白念珠菌DNA损伤应答基因MMS22调控形态发生和致病性的作用。方法 通过细胞形态检测、菌丝生成实验结合半定量PCR分析MMS22基因缺失对细胞形态和菌丝生成的影响;利用大蜡螟构建感染模型,研究MMS22基因缺失对致病性的影响。结果 MMS22基因缺失导致菌体出现极性生长,菌丝细胞壁编码基因HWP1表达上调;在血清等菌丝诱导条件下,MMS22缺失明显影响菌丝生成;MMS22缺失还导致大蜡螟感染模型中缺失株致病能力显著降低,而在MMS22缺失株中高表达菌丝生成促进因子BRG1可明显提高MMS22缺失株的致病能力。结论 白念珠菌MMS22参与调控菌丝生成,并影响其致病能力,可成为潜在抗真菌治疗靶点。     

扩散管法配制十种挥发性有机化合物标准染毒混合气体的研究

以液态苯、甲苯、对－二甲苯、乙基苯、氯代苯、苯乙烯、异丙苯、四氯乙烯、甲基环己烷和壬烷等常见VOCs为原料,在一定的温度下,通过控制载气流速来配制10年标准染毒气体。详细介绍了配制10种VOCs标准染毒气体的方法,探讨了所配标准气体的准确性和稳定性,提出了用动态配气装置配制10种VOCs标准气体的方法。同时,分别用热解吸－气相色谱法和固相微萃取－气相色变法对所配的VOCs 的标准染毒气体的浓度进行了测定。实验证明,所配标准气体的称量结果与二种方法的测定值相比较,差异无显著性。用扩散管法配制低浓度挥发性有机化合物（ VOCs） 标准染毒混合气体,其VOCs的浓度可以较方便调整。其扩散率的相对标准偏差小于2％ 。该动态配气方法适用于环境中低浓度VOCs 在毒理学 染毒上的应用。且扩散管可重复使用。     

尿路清制剂对几种常见泌尿生殖道病原体的抑制试验

目的:探讨中药尿路清对几种常见泌尿生殖道病原体的抑制作用,为中医药治疗此类疾病提供中药药理学依据。方法:采用液体试管法和微量稀释法测定尿路清对某些病原体的体外抑制效应。结果:尿路清对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌、丙型链球菌、卡他球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念珠菌和表皮葡萄球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为0.10,0.05,0.20,0.20,0.20,0.20,0.20,0.10(g/ml);尿路清对解脲支原体和人型支原体的MIC分别为3.91g/L和7.81g/L。结论:中医药在泌尿生殖道感染的治疗上具有重要作用。     

Protective effects of D-glucaro 1,4-lactone against oxidative/nitrative modifications of plasma proteins

OBJECTIVE: The protective effects of D-glucaro 1,4-lactone (1,4-GL) against oxidative/nitrative protein damage (determined by parameters such as levels of protein carbonyl groups and nitrotyrosine residues) to human plasma treated with peroxynitrite (ONOO-) or hydroperoxide (H2O2) were studied in vitro. We also investigated the effects of 1,4-GL on the level of total free thiol groups and low-molecular-weight thiols (glutathione and homocysteine) in plasma treated with ONOO- (0.1 mM). METHODS: Levels of carbonyl groups and nitrotyrosine residues in human plasma proteins were measured by ELISA and a competition ELISA, respectively. High-performance liquid chromatography (HPLC) was used to analyze free thiols from plasma. RESULTS: Exposure of plasma to ONOO- (0.1 mM) resulted in an increase of the level of carbonyl groups and nitrotyrosine residues in plasma proteins and in a distinct decrease in total thiols and low-molecular-weight thiols (glutathione and homocysteine) measured by high-performance liquid chromatography. In the presence of 1,4-GL (0.4-6.4 mM), a distinct decrease in carbonyl group formation and tyrosine nitration in plasma proteins and changes in plasma thiols caused by 0.1 mM of peroxynitrite were observed. Moreover, 1,4-GL inhibited plasma protein oxidation induced by H2O2 (2 mM). CONCLUSION: The obtained results indicate that in vitro 1,4-GL has inhibitory effects on ONOO-- or hydroperoxide-mediated oxidative stress in human plasma and changes plasma redox thiol status. The mechanism of the antioxidative action of 1,4-GL present in plasma is not known yet.