PNP-XTO-POD偶联单一试剂匀相速率法测定血清5′-NT

目的:建立快速、灵敏的血清5′-核苷酸酶(5′-NT)单一试剂匀相速率法检测新技术。方法:通过酶催化反应动力学体系选择、表面活性剂选择、液体酶稳定条件等关键技术研究,建立了嘌呤核苷磷酸化酶-黄嘌呤氧化酶-过氧化物酶(PNP-XTO-POD)偶联单一试剂匀相速率法测定血清5′-核苷酸酶(5′-NT)体系。结果:该方法的线性范围可达0.1~202.7 U/L,平均回收率为100.8%,批内变异系数和批间变异系数(CV)分别为0.013~0.032和0.020~0.045,与美国D iazym e Laboratores提供的5′-NT检测试剂比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0046X-0.051,r=0.9982。结论:用PNP-XTO-POD偶联单一试剂匀相速率法测定血清5′-核苷酸酶(5′-NT),方法简便、快速、灵敏、可靠,适合临床推广应用。     

嘌呤核苷磷酸化酶-黄嘌呤氧化酶-尿酸酶-过氧化物酶偶联双试剂匀相速率法测定血清5'-核苷酸酶

目的:建立快速、灵敏的血清5'-核苷酸酶(5'-NT)匀相速率法检测新技术.方法:通过酶催化反应动力学体系选择、表面活性剂选择、液体酶稳定条件等关键技术研究,建立了嘌呤核苷磷酸化酶-黄嘌呤氧化酶-尿酸酶-过氧化物酶(PNP-XTO-UAO-POD)偶联可见光匀相速率法测定血清5'-NT体系.结果:该法的线性范围为0.0...     

血清ALP、GGT、5’-NT与AFP联合检测在原发性肝癌诊断中的价值

目的探讨血清碱性磷酸酶(ALP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、5核苷酸酶(5’-NT)以及AFP单独检测以及联合检测在原发性肝癌(PHC)诊断中的临床应用价值。方法 ALP、GGT、5’-NT检测采用酶速率法;AFP检测用电化学发光免疫分析法,分别检测原发性肝癌组(94例)、肝硬化组(60例)、慢性肝炎组(60例)、其他消化道肿瘤组(50例)和健康对照组(70例)血清ALP、GGT、5’-NT、AFP水平,应用ROC曲线对结果进行统计学分析。结果 AFP、ALP、GGT、5’-NT的ROC曲线下面积(AUCROC)分别为0.832、0.649、0.786、0.774;AFP、5’-NT血清含量PHC组与其他各组间差异有统计学意义(P<0.05)。系列试验中,AFP+GGT+5’-NT组合的各个特征参数指标较好;平行试验中,AFP/GGT/5’-NT的灵敏度超过了97%。结论原发性肝癌诊断单项指标中以AFP的AUCROC最大,诊断价值最高;系列试验中以AFP+GGT+5’-NT作为确诊PHC,平行试验中以AFP/GGT/5’-NT作为排除PHC较好的组合项目。     

5’-核苷酸酶测定及其在肝胆疾病中的诊断价值

目的采集研究对象血液分别测定5’-核苷酸酶(5’-NT)和碱性磷酸酶(ALP),对5’-NT在临床诊断肝胆系统疾病中的符合度等方面进行探讨研究。方法使用北京万泰德瑞诊断技术有限公司的5’-核苷酸酶测定试剂盒(过氧化物酶法)对所选择的665例健康人,191例肝胆患者,以及25例骨病患者进行测定;并测定全部患者ALP的水平。结果 5’-NT的测定结果不会受到性别因素、年龄因素的影响;各类肝胆疾病组5’-NT水平显著高于健康人对照组与骨病组,具有显著性差异(P0.05)。结论 5’-NT对肝胆系统疾病的诊断具有较高的特异性,与ALP联合检测可以鉴别肝胆疾病与骨病,提高测定的准确性。     

电子废弃物拆解人群血清5’-核苷酸酶的分析

[目的]调查电子废弃物拆解场地人群血清5’-核苷酸酶(serum5-nucleotidase,5’-NT)等水平,分析相关影响因素。[方法]对浙江省台州某镇电子废弃物集中处理历史较长的村庄进行卫生学调查,选择318名拆解地区暴露人群,对职业暴露人群(280名)与非职业暴露人群(38名)进行了血样采集并测定了血清5’-核苷酸酶等多项指标,并与正常对照区的86名人群相比较。[结果]电子废弃物拆解场地的职业拆解人群(3.08±1.13)和非职业暴露人群(3.07±1.13)的5’-NT水平明显低于正常对照区人群(3.34±1.19)的水平;血清其他指标分析结果显示,职业拆解人群血清钾,钠值均比正常对照区人群低,差异有统计学意义(P﹤0.05),职业暴露者碱性磷酸酶高于正常对照区人群。[结论]电子废弃物拆解职业暴露者体内血清5’-核苷酸酶水平降低,同时,血清钾钠值均降低,而另一方面碱性磷酸酶水平升高,二者之间的相关机理研究需要进一步的探索。     

灵敏的单一偶氮胂Ⅲ试剂测定血清总蛋白

[目的]建立一种快速、简便、灵敏的测定血清总蛋白的方法。[方法]在非离子型表面活性剂聚氧乙烯月桂醚(Brij-35)存在下,用水溶性试剂偶氮胂Ⅲ(ArsenazoⅢ)作显色剂直接分光光度法测定血清总蛋白。[结果]该方法测定蛋白质,显色络合物的最大吸收波长为610nm,线性范围在0～56.2mg/L,表观摩尔吸光系数为3.60×10~5L.mol~(-1).cm~(-1)。回收率为96.1%～103.6%,批内相对标准差和批间相对标准差(RSD)分别为0.8%与2.0%,与双缩脲法比较相关性良好,Y=0.9882X 1.1007,r=0.9898,P﹥0.05。59名健康成年人血清总蛋白含量为(62.9～80.8)g/L(±2s)。[结论]该法血清用量少,线性范围宽,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点,适用于血清总蛋白的手工测定和自动分析。     

双试剂自动分析法测定血清不饱和铁结合力:5-Br-PAPS直接光度法

目的:建立简便、灵敏的双试剂自动化分析法测定血清未饱和铁结合力(UIBC)。方法:在表面活性剂存在下,用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(5-Br-PAPS)为显色剂测定血清UIBC。结果:该法线性范围0~97.0μmol/L,平均回收率为101.7%,批内相对标准偏差(RSD)和批间相对标准偏差分别为0.021、0.038,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.03X 1.74,r=0.9834;与日本和光UIBC测定试剂盒比较具有良好的相关性;181例健康人血清UIBC含量为32.55~51.80μmol/L(x±2s)。结论:用5-Br-PAPS双试剂自动化分析法测定血清UIBC,方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。     

以5-Br-PAPS为显色剂计算法测定血清总铁结合力

目的:建立以2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(5-Br-PAPS)为显色剂计算法测定血清总铁结合力(TIBC)。方法:通过测定血清铁和血清未饱和铁(UIBC)含量,以血清铁和血清UIBC含量之和计算血清TIBC含量。结果:该法线性范围0μmol/L～180μmol/L,平均回收率为98.7%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.028、0.035,与临床检验操作规程推荐的方法比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0034-0.87,r=0.9843。90例健康男性血清TIBC含量为46.4μmol/L～75.2μmol/L(x±2s),90例健康女性血清TIBC含量为50.9μmol/L～79.4μmol/L(x±2s)。结论:以5-Br-PAPS为显色剂计算法测定血清总铁结合力TIBC方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。     

氟对体外培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞的毒性作用

目的探讨NaF对体外培养大鼠大脑皮层星形胶质细胞细胞周期和琥珀酸脱氢酶(SDH)、5′-核苷酸酶(5′-NT)、酸性磷酸酶(ACP)活性的影响。方法体外分离纯化培养获得纯度达98%以上的大鼠大脑皮层星形胶质细胞(特异性抗GFAP免疫化学鉴定),分别用浓度为1、2和5mmol/LNaF对星形胶质细胞染毒12、24、48和72h,FCM检测细胞周期构成比,紫外比色法检测SDH、5′-NT、ACP活性。结果FCM分析细胞周期显示:1～5mmol/L剂量范围内,NaF能够以剂量依赖方式诱导星形胶质细胞周期由S期阻滞向G2/M期阻滞转变,随着时间延长变化更明显,超出这一范围则主要为subG1期细胞。紫外比色法检测结果表明,NaF抑制SDH、ACP活性,2mmol/L范围内对5′-NT活性影响无显著性(P0.1),增加剂量5′-NT失活;SDH、ACP活性与subG1DNA期细胞相对含量显著负相关(SDH:r=-0.84148,P0.05;ACP:r=-0.90416,P0.01)。结论NaF可诱导星形胶质细胞细胞周期阻滞及凋亡,并可抑制其SDH、5′-NT、ACP活性。     

应用ROC曲线评价AFP、AFU、5’-NT在原发性肝癌诊断中的意义

目的探讨α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、甲胎蛋白(AFP)、5’-核苷酸酶(5’-NT)检测对原发性肝癌(PHC)患者的诊断价值。方法测定125例肝癌患者及50例体检者作为对照组,应用ROC曲线进行比较与分析。结果 AFU、AFP和5’-NT检测指标在两组资料间比较差异均有统计学意义。AFP、AFU和5’-NT三种指标单独检测时,ROC曲线下面积分别为0.707、0.803、0.817。三项标志物单项检测PHC的敏感性分别为0.68、0.81、0.80,联合检测AFP和AFU或5’-NT可使PHC检出率提高至0.888和0.872,三项标志物联合检测PHC的检出率高达0.92。结论通过ROC曲线评价,联合检测AFP、AFU和5’-NT三种指标可以提高对原发性肝癌(PHC)患者的诊断价值。     

双试剂自动分析法测定血清不饱和铁结合力:Nitro-PAPS直接光度法

目的:建立简便、灵敏的双试剂自动化分析法测定血清不饱和铁结合力(UIBC)。方法:在表面活性剂存在下,用2-(5-硝基-2-吡啶偶氮)-5-[N-正丙基-N-(3-磺酸丙基)氨基]苯酚(Nitro-PAPS)为显色剂测定血清UIBC。结果:该法线性范围0～95μmol/L,平均回收率为100.9%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.019、0.036,与日本和光UIBC测定试剂盒比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0221X+0.2104,r=0.9950。102例健康人血清UIBC含量为32.1～51.1μmol/L(x±2s)。结论:用Nitro-PAPS双试剂自动化分析法测定血清UIBC,方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。     

流动注射化学发光法测定生物样品中维生素C

目的探讨测定生物样品中维生素C(Vit C)的化学发光新方法。方法根据Vit C对Luminol-KIO4-H2O2化学发光体系有明显的抑制作用,建立了测定维生素C的流动注射化学发光分析法。结果方法的检出限为6.0×10-8mol/L,线性范围为1.0×10-7~1.0×10-5mol/L,对8.0×10-7mol/L维生素C11次平行测定的相对标准偏差为1.0%。结论该方法用于生物样品中Vit C的测定,结果令人满意。     

5-Br-PADCAP直接光度法测定血清锌试剂盒的研制与评价

目的 :研制、评价 5 -Br-PADCAP直接光度法测定血清锌试剂盒。方法 :在表面活性剂存在下 ,用 2 - (5-溴 - 2 -吡啶偶氮 ) - 5 - [(N ,N -二羧基甲基 )氨基 ]苯酚 (5 -Br-PADCAP)作显色剂手工分析法和自动分析法测定血清锌。结果 :该法线性范围 0～ 80 μmol/L ,手工分析法和自动分析法平均回收率为 99 8%和 10 0 3% ,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为 0 0 2 1、 0 0 16和 0 0 2 9、 0 0 2 4 ,与原子吸收分光光度法比较具有良好的相关性 ,线性回归方程和相关系数分别为Y =1 0 0 4X - 0 2 84 ,r =0 995 2和Y =0 9917X - 0 175 ,r =0 996 8。 82例健康人血清锌含量分别为9 0 2～ 2 2 34μmol/L和 8 4 9～ 2 2 14 μmol/L ( x± 2s)。 结论 :用 5 -Br-PADCAP直接光度法试剂盒测定血清锌方法简便、灵敏可靠 ,适合临床应用。     

糖类抗原CA19-9光激化学发光免疫分析方法的建立

目的:建立一种检测人血清糖类抗原CA19-9(CA19-9)浓度的光激化学发光免疫分析方法。方法:采用2株针对不同抗原表位的抗CA19-9抗体,其中一株抗体用来包被发光微粒,另一株抗体标记生物素,以双抗体夹心法检测血清中CA19-9浓度,并与Roche公司试剂(电化学发光法)进行比较。结果:发光微粒浓度为25 mg/ml、生物素标记抗体浓度为16.17 mg/ml时,监测范围为0 U/ml～500 U/ml,灵敏度为0.27 U/ml,平均回收率为101.26%,批内变异系数(CV)为1.67%～4.35%,批间CV为1.12%～3.25%,与CEA、CA12-5、CA15-3的交叉反应率低,稳定性好,与电化学发光免疫分析法的符合率高(符合率=98.8%,γ=0.991)。结论:光激化学发光免疫分析方法测定CA19-9具有高灵敏度、精密度和准确性,与电化学发光免疫分析法的符合率高,适用于临床测定。     

3,5-diBr-PADAP直接光度法测定血清铜

目的 :建立一种快速、简便、灵敏测定血清铜的分光光度法。方法 :在表面活性剂 OP及 Tween- 80的存在下 ,用 2 - (3,5 -二溴 - 2 -吡啶偶氮 ) - 5 -二乙氨基酚 (简称 3,5 - di Br- PADAP)作显色剂直接光度法测定血清铜。结果 :该法显色络合物最大吸收波长为 5 72 nm,线性范围达 6 3.0μmol/ L ,表观吸光数为 9.32× 10 4 mol/ (L· cm ) ,回收率为 99.1%～10 2 .6 % ,批内和批间变异系数 (CV )分别为 2 .5 %与 3.2 % ,与原子吸收分光光度法比较相关良好 ,Y=0 .998X +0 .0 4 ,r= 0 .994 7,P>0 .0 5 ,10 5例健康人血清铜含量为 (9.5～ 2 2 .9)μmol/ L (x± 2 s)。结论 :该法血清用量少 ,不必去蛋白 ,具有操作快速、简便、结果灵敏可靠等优点 ,适合临床应用     

镁对内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶的影响

目的 :　研究了 Mg2 + 对氢过氧化物 ( H2 O2 和 t-丁基氢过氧化物 )诱导的人脐静脉内皮细胞脂质过氧化和抗氧化酶超氧化物歧化酶 ( EC- SOD)及含硒和不含硒两类谷胱甘肽过氧化物酶 ( Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px)活性的影响。方法 :　用培养的人脐带内皮细胞以硫代巴比妥酸反应物 ( TBARS)法检测细胞脂质过氧化水平 ,邻苯三酚自氧化法测定 EC- SOD活性 ,DTNB直接法测定内皮细胞 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH- Px活性。结果 :　 1 .与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 +各剂量组 TBARS显著下降 ,P<0 .0 5 ;t-丁基氢过氧化物 + Mg2 + 各剂量组与 t-丁基氢过氧化物组相比 TBARS无显著性差异。 2 .与空白对照组相比 ,0 .6mmol/L、1 .2 mmol/L、2 .4mmol/L补Mg2 + 组 SOD活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 )。 3.与空白对照组相比 ,补 Mg2 + 各剂量组 Se-GSH- Px活性升高 ,P<0 .0 5 ;与 H2 O2 组相比 ,H2 O2 + Mg2 + 各剂量组 Se- GSH- Px和 non- Se- GSH-Px活性升高 ,具有显著性意义 ( P<0 .0 5 ,P<0 .0 1 )。结论 :　Mg2 +能对抗内皮细胞脂质过氧化反应 ,并增强抗氧化酶的活性。     

以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力

目的:建立以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力(TIBC)。方法:通过测定血清铁和血清未饱和铁(UIBC)含量,以血清铁和血清UIBC含量之和计算血清TIBC含量。结果:该法线性范围0～140μmol/L,平均回收率为98.5%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.032、0.043,与临床检验操作规程推荐的方法比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=1.0228X+1.05,r=0.9801。65例健康男性血清TIBC含量为45.7～74.2μmol/L(x±2s),57例健康女性血清TIBC含量为51.4～75.2μmol/L(x±2s)。结论:以5-Br-PADCAP为显色剂计算法测定血清总铁结合力TIBC,方法简便、灵敏可靠,适合临床应用。     

丙酮酸氧化酶偶联法测定血清丙氨酸氨基转移酶的效果评价

应用手工测定血清丙氨酸氨基转移酶的丙酮酸氧化酶偶联比色法,并对其实用价值作了评价。本法具有操作简便快速、准确性、重复性好等优点。该法与紫外酶偶联连续监测法比较,相关系数r=0.987。精密度批内CV％<3.1、批间CV％<5.6。ALT活性在250U/L以内线性良好。     

双试剂自动分析法测定血清不饱和铁结合力:5-Br-PADAP直接光度法

目的:建立简便、灵敏的双试剂自动化分析法测定血清未饱和铁结合力(UIBC)。方法:在表面活性剂存在下,用2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二乙氨基酚(5-B r-PADAP)为显色剂测定血清UIBC。结果:该法线性范围0~95μmol/L,平均回收率为100.28%,批内变异系数(CV)和批间变异系数分别为0.021、0.039,与日本和光UIBC测定试剂盒比较具有良好的相关性,线性回归方程和相关系数分别为Y=0.9985X-0.1604,r=0.9950。85例健康人血清UIBC含量为31.21~50.57μmol/L(x±2s)。结论:用5-B r-PADAP双试剂自动化分析法测定血清UIBC方法简便、灵敏可靠,适合临床、卫生应用。     

流动注射化学发光法测定黑白癣药水中的水杨酸

〔目的〕建立测定黑白癣药水中水杨酸的化学发光新方法。〔方法〕在酸性介质中 ,利用表面活性剂吐温 40作为Ce(Ⅳ ) -水杨酸化学发光反应体系的增敏剂 ,建立了Ce(Ⅳ ) -水杨酸 -吐温 40化学发光新体系 ,结合流动注射技术建立测定水杨酸化学发光分析法。〔结果〕测定水杨酸的线性范围为 3 .0× 10 -7～ 1.0× 10 -5mol/L ,检出限为 1.0×10 -7mol/L ,对 5 .0× 10 -6mol/L水杨酸进行 11次平行测定 ,相对标准偏差为 2 .0 %。〔结论〕该法可用于白癣药水中水杨酸含量的测定。