溶血试验及其在粉尘毒性研究中的应用

溶血试验(Hemolytic Test)是利用粉尘对细胞膜损害效应来预测粉尘致肺脏纤维化能力的体外测试方法。近十年来,许多学者应用此快速简便的方法,测定粉尘细胞膜毒性及预测粉尘致纤维化能力,研究粉尘毒作用机理,筛选矽肺治疗药物,探索粉尘与其他毒物的联合作用。 一、溶血试验的基本原理和方法 溶血试验是把待测粉尘和动物或人红细胞一起温育,在此过程粉尘对红细胞膜产生毒性作用,红细胞膜损坏对出现溶血效应,其溶血程度反映出粉尘的膜毒性作用强弱。Allisoh,认为石英粉尘引起纤维化与其对肺巨噬细胞溶酶体膜毒性有关,粉尘对红细胞膜的作用类似粉尘同巨噬细胞溶酶体膜反应,故可应用溶血试验来推测粉尘致纤维化能     

几种粉尘对大鼠肺泡巨噬细胞两种酶的影响

肺泡巨噬细胞吞噬粉尘是尘肺发病中的主要环节,在矿物粉尘引起的疾病中,肺泡巨噬细胞被认为是最主要的研究细胞,一些研究表明,用体外培养法可观察粉尘的致纤维化性质与细胞毒性问所存在的关系,Allison(1966)的研究表明不论毒性或非毒性粉尘均会被吞噬细胞吞噬,吞噬后形成吞噬体,继而形成次级溶酶体并损害细胞而释放内容物,不同的粉尘引起的结果不同,     

维生素E对染尘大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响

在SiO_2刺激下,肺的防御和免疫功能获得加强,这是对机体有积极意义的一面。但据文献报告,肺泡巨噬细胞吞噬SiO_2后能导致其溶酶体膜和细胞膜损害以及肺泡巨噬细胞自身的崩解,随之加速纤维化的形成,故肺泡巨噬细胞数目和吞噬SiO_2量的增加,又成为对机体有害的一面。为了探索维生素E对染尘后大鼠肺泡巨噬细胞吞噬功能的影响,借以了解维生素E对抗实验性矽肺形成的机制的某些环节,我们做了以下实验:     

肺巨噬细胞在矽肺肺纤维化发生发展中的作用

矽肺是由于长期吸入大量含游离二氧化硅粉尘引起的以肺间质纤维化为主要病变的全身性疾病.肺巨噬细胞作为与矽尘作用的第一道防线,在矽肺的早期炎症和肺组织纤维化中发挥着重要的作用.肺巨噬细胞具有活跃的吞噬能力.吸入体内的矽尘,绝大部分经纤毛-黏液系统排出体外,一部分由肺巨噬细胞吞噬排出,极少数滞留于肺泡巨噬细胞(alveolar macrophage,AM)内,诱导AM的活化,释放大量的自由基、细胞因子、生长因子、趋化因子、溶酶体酶,最终导致细胞的凋亡或坏死,释放矽尘颗粒.游离的矽尘又可被其他的AM再吞噬.矽尘摄取和再摄取伴随着AM、中性粒细胞、淋巴细胞的补充,导致持续的细胞聚集和慢性炎症.     

飘尘对肺泡巨噬细胞的毒性作用

在研究飘尘的细胞毒性中，肺泡巨噬细胞被认为是最主要的研究细胞，各种尘均会被吞噬细胞吞噬，使肺泡巨噬细胞溶酶体膜受损，并使之崩解，细胞内容物全部释放出来。不同的尘引起的结果不同。对细胞内酶系统的影响亦不同，酶的释放直接表明对细胞的损害程度。沈阳是我国重工业基地之一，被WHO列为重点监测城市，流行病学调查表明铁西区(32业区)居民肺癌发病率较高，小儿易患感冒等。     

不同矿区煤尘细胞毒性与金属元素关系的研究

本文对不同矿区的煤尘分别进行了SiO_2和金属元素的测定,并研究了它们对大鼠肺巨噬细胞存活率、吞噬率、坏变率和溶酶体膜的影响。综合分析结果表明,各煤尘对细胞有一定的毒性。煤尘细胞毒性大小与SiO_2的含量不完全一致。煤尘中金属元素对细胞毒性有一定影响,含镍元素高的细胞毒性大。含锌和钛元素高的细胞毒性小。     

戈谢病治疗进展

戈谢病（Gaucher disease, GD）是基因突变导致患者巨噬细胞内溶酶体缺乏β-葡萄糖脑苷脂酶,致使葡糖脑苷脂在巨噬细胞内大量聚积,从而引起肝脾肿大和骨骼表现,进而出现血液学异常、肝纤维化和门静脉高压的一种溶酶体贮积症。治疗上采用酶替代方法,价格昂贵并且不能纠正中枢神经系统病变。异基因造血干细胞移植是治疗GD的另一种有效方法,生存率约达90%,有很好的前景。此外,基因治疗和底物减少治疗等方法也正在研究中。本文就GD的治疗进展作一综述。     

药物对实验性矽肺大鼠肺泡巨噬细胞影响的初步观察

许多从事矽肺研究工作者都认为石英破坏巨噬细胞是矽肺发病的一个重要环节。当肺泡巨噬细胞吞噬了石英粉尘,细胞被石英破坏,石英从细胞中溢出,然后再被吞噬。同时由于肺泡巨噬细胞不断地破坏,导致肺部发生纤维化作用,最后形成了矽结节。我们为了进一步了解矽肺发病过程和药物作用的原理,首先对石英引起的肺泡巨噬细胞结构与功能的改变做了初步探讨,同时也观察了一些治疗矽肺有效的药物在阻止石英破坏肺泡巨噬细胞这一作用上的表现,企图从中能找到一些规律,以便为寻找新的有     

钙离子与SiO2引起的巨噬细胞损伤

本文研究了钙离子与SiO_2引起的巨噬细胞损伤之间的关系。研究结果表明:在siO_2致肺泡巨噬细胞损伤过程中,细胞外液钙浓度对其损伤程度的发展起重要调节作用。细胞质膜损伤与细胞内游离钙水平增加所形成的钙稳态紊乱可能是SiO_2对巨噬细胞损伤的主要机制。     

石英粉尘和肺泡巨噬细胞对体外肺纤维母细胞生长的影响

肺中有石英粉尘存在时,常常围绕着石英蓄积的部位形成纤维化区,推测这种纤维化区的形成是石英对结缔组织细胞刺激的结果。肺部对石英的首要反应之一是肺泡巨噬细胞的聚积,关于石英在体外对巨噬细胞的影响已有相当多的资料;而有关石英直接作用于纤维母细胞的研究很少。本文作者研究在有肺泡巨噬细胞或无肺泡巨噬细胞参与时石英对肺纤维母细胞     

温石棉对肺泡巨噬细胞膜Fc变体的影响

肺泡巨噬细胞可以一种或多种机制参与石棉相关疾病的发生过程。研究表明,巨噬细胞膜Fc受体与细胞的许多生物学功能有关,如花生四烯酸代谢及前列腺素的合成,触发细胞产生活性氧自由基及释放溶酶体酶。最近有人报道Fc受体还具有离子通道作用。因此,本研究拟就国产茫崖及涞源温石棉(简称茫棉及涞棉)对肺泡巨噬细胞膜Fc受体的影响进行了初步探讨。 1 材料与方法 1.1 温石棉的制备将来自茫崖及涞源石棉矿的长纤维石棉剪成1cm,置于冰冻切片机上切断,将切下的纤维置于60℃烤箱内烘干。用前以生理盐水稀释成一定浓度。     

三氧化二锑包装工肺活检组织光镜和电镜分析

目的了解三氧化二锑(Sb2O3)粉尘包装工肺活检组织光镜和电镜改变情况。方法光镜观察采用常规石蜡包埋,HE染色;电镜观察采用618环氧树脂包埋,经醋酸铀和柠檬酸铅双重染色。结果肺泡壁和肺间质有慢性增生性炎症改变,以纤维母细胞和纤维细胞弥漫增生为主;在增生性细胞病灶和微小纤维结节中可见折光性金属粉尘样颗粒沉着,其肺间质伴有慢性纤维细胞增生性炎症,并有轻度纤维化和增生性细胞病灶形成;支气管黏膜可见慢性炎症改变,黏膜下纤维组织增生。电镜下可见肺泡Ⅰ型上皮细胞减少;肺泡Ⅱ型上皮细胞增生;肺泡巨噬细胞增生,其胞浆内含有许多溶酶体和大小不一、形状不规则、电子密度高的异噬体颗粒;肺间质内可见明显的纤维细胞及胶原纤维增生。结论Sb2O3粉尘可导致肺泡Ⅰ型上皮细胞减少,肺泡Ⅱ型上皮细胞、肺泡巨噬细胞增生,肺间质为主的慢性纤维细胞增生性炎症及轻度纤维化和增生性细胞病灶形成。     

工业锑尘细胞毒性研究——豚鼠腹腔巨噬细胞体外培养法

Fairhal、Gross等认为,吸入锑尘后,由于肺巨噬细胞吞噬大量锑尘,致使细胞代谢功能失调,脂类物质聚集,从而导致细胞死亡崩解。我们实验结果表明,小白鼠腹腔注入锑尘后,可引起巨噬细胞脂肪样变;大鼠气管注入锑尘后,血清溶菌酶含量早期明显升高。为进一步探讨锑尘细胞毒性,提供制定锑尘卫生标准的科学依据,本文通过豚鼠腹腔巨噬细胞组织培养,对锑尘细胞毒性进行了体外研究,现将结果报道如下。     

溶酶体铁代谢异常与肾脏损伤

溶酶体的完整性对维持细胞正常的代谢非常重要。溶酶体降解含铁的物质会使其内存在大量低质量铁。这些铁主要以还原型Fe（Ⅱ）形式存在并能诱导芬顿反应的发生,导致溶酶体膜完整性破坏。溶酶体膜透性增加会使一系列水解酶和还原铁进入胞浆进而诱导细胞损伤或死亡。此外,自噬在溶酶体铁代谢中也起着至关重要的作用。溶酶体铁处理的异常在一系列肾脏疾病中发挥着重要作用。     

低剂量石英对大鼠肺泡灌洗液的早期影响

用支气管肺泡灌洗法研究低剂量石英对大鼠肺脏的影响。大鼠分别注尘2、10mg观察1、7、21天。结果表明低剂量石英可使灌洗液中细胞总数、有核细胞/红细胞比值、肺泡巨噬细胞显著增高,特别是泡沫型肺泡巨噬细胞随时间延长而明显增高。染尘动物灌洗液中蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶呈一过性升高,酸性磷酸酶在2mg石英组呈一过性升高,但在10mg石英组却持续上升。实验结果表明,肺泡巨噬细胞及其溶酶体膜的破坏在矽肺发生早期可能起一定的作用。     

豚鼠巨噬细胞经P_(204)处理后的抗石英细胞毒作用

本文报导了用酸性磷酸酶经溶酶体膜漏出作为体外石英对细胞毒性的指标,研究P_(204)(聚乙烯吡啶氮氧化合物)和聚乙烯吡咯烷酮的抗石英细胞毒的作用。实验用豚鼠腹腔巨噬细胞进行。先给豚鼠腹腔注入含0.4%P_(204)的盐水溶液,然后采集腹腔巨噬细胞;或采集未经该品处理的豚鼠腹腔巨噬细胞,在培养时加入含0.04%P_(204)的Tyrode溶液。并以未经任何处理的正常巨噬细胞为对照。尔后,在这些巨噬细胞培养基中加入裸露的石英颗粒或外裹P_(204)的石英颗粒。结果发现,未经P_(204)预处理的     

脂质过氧化与矽肺及螺施藻的抗氧化作用

脂质过氧化(Ｌｉｐｉｄｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ,ＬＰＯ)是指发生在不饱和脂肪酸(ＰＦＵＡ)的自由基链锁反应。1976年Ａрхипова[1]提出:在矽肺发病机制中ＳｉＯ2可启动肺泡巨噬细胞膜表面的脂质过氧化自由基反应,从而使巨噬细胞受损,释放许多活性因子引起肺部进行性纤维化是矽肺发病的重要环节之一。1　脂质过氧化与矽肺肺泡巨噬细胞在矽肺发展过程中起着主要作用,一方面在吞噬石英过程中发生脂质过氧化,损坏细胞;另一方面引起巨噬细胞活化,释放多种生物活性因子ＴＧＦ[2,3]、ＴＮＦ、ＩＬ6[4],从而间接或直接引起肺纤维细胞的增生,…     

Compartmentalization——自然分隔作用

由具有选择性渗透膜在细胞内形成的自然分隔,使细胞分为许多小室(如线粒体、溶酶体、高尔     

矽肺纤维化细胞分子机制研究的进展

矽肺是由于长期吸入大量游离SiO2 引起的肺进行性纤维化疾病。目前 ,对矽肺纤维化的研究已进入到细胞、细胞因子和信号转导等领域。通过调控参与肺纤维化的效应细胞、细胞因子 ,特别是干预介导肺纤维化的重要信号转导分子将给肺纤维化治疗带来新的希望。一、矽肺纤维化发生中的细胞机制肺泡巨噬细胞是矽尘作用的主要靶细胞。矽尘进入肺泡后 ,肺泡巨噬细胞吞噬矽尘颗粒 ,细胞活化并产生大量炎性因子和致纤维化因子 ,如活性氧 (ROS)、活性氮 (RNS)、脂多糖(LPS)、细胞因子 [如白细胞介素 (IL) 1、IL 2、肿瘤坏死因子α(TNF α) ]、趋…     

石英引起的巨噬细胞微管分布改变及柠檬酸铝的拮抗效应

应用间接免疫荧光技术观察了石英、乳胶微球及柠檬酸铝处理的石英对巨噬细胞形状及细胞内微管分布的影响。结果表明,石英引起的细胞形状和膜表面形态的改变与石英引起的巨噬细胞微管解聚有关,而柠檬酸铝可拮抗石英的这一效应。