广西体外受精-胚胎移植不孕妇女子宫内膜和息肉组织整合素αvβ3表达初探

目的:通过收集在广西壮族自治区人口和计划生育研究中心生殖科(广西生殖健康中心)行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)不孕症妇女子宫内膜和息肉组织做病理切片苏木素-伊红(HE)染色和子宫内膜容受性分子整合素αvβ3免疫组织化学(免疫组化)染色,观察αvβ3表达分布情况,为研究提高子宫内膜息肉(EP)不孕症患者妊娠率提供参考依据.方法:在广西生殖健康中心收集30例确诊为EP不孕症并做IVF-ET患者的子宫内膜和息肉组织作为研究组,另取30例同期在该中心以丈夫不育为主因做IVF-ET的非EP患者(接近正常)子宫内膜组织作为正常对照组,同期在广西医科大学第一附属医院计划生育门诊收集30例非EP非不孕症的取环诊断性刮宫(诊刮)患者子宫内膜组织作为宫内节育器(IUD)避孕对照组(IUD避孕组),内膜和息肉由宫腔镜或诊刮获得,分别进行病理切片HE染色及整合素αvβ3免疫组化染色,以大肠癌组织作为阳性对照组(15例),以同种无关血清替代一抗作为阴性对照组(30例).结果:整合素αvβ3免疫组化染色结果显示,阳性对照组腺上皮和间质细胞胞核、胞质均普遍强阳性表达;阴性对照组则基本无表达;正常对照组可见腺上皮胞质、胞核普遍阳性表达,间质细胞胞质普遍阳性表达而胞核基本不表达;IUD避孕组局部腺上皮阳性表达(胞质为主),间质细胞局部散在点状阳性表达;研究组内膜腺上皮胞质、胞核均强阳性表达,间质细胞胞质一般阳性表达而胞核不表达;研究组息肉组织腺上皮胞核、胞质基本不表达,间质局部散在小片状强阳性表达.与正常对照组比较,免疫组化染色半定量结果显示,IUD避孕组子宫内膜和研究组息肉αvβ3阳性染色区域(Area)和累积光密度(IOD)均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).结论:广西IVF-ET的EP不孕患者子宫内膜及息肉组织整合素αvβ3免疫组化染色以间质局部散在小片状强阳性表达为主,腺上皮基本不表达,Area和IOD均显著降低.     

胃癌组织中幽门螺杆菌感染与PCNA、COX-2蛋白表达的相关性

目的：探讨胃癌组织中增殖细胞核抗原（PCNA）、环氧合酶-2（COX-2）蛋白的表达及其与幽门螺杆菌感染的关系。方法：应用Warthin—Starry银染色观察胃癌组织中幽门螺杆菌（HP）感染情况、免疫组化染色检测胃癌中PCNA、COX-2蛋白的表达情况,并与慢性胃炎、胃黏膜上皮内瘤变标本检测结果相比较。结果：胃癌、慢性胃炎和胃黏膜上皮内瘤变组织中HP感染率分别为：84．5％、42．9％、66．7％;PCNA阳性表达率分别86．2％、47．6％、72．2％;COX一2阳性表达率为84．5％、28．6％、72．2％。在同一病变中HP阳性组PCNA、COX-2阳性表达率高于HP阴性组,胃癌组有显著差异（Fisher’s ExaCt Test：前者P=0．000,后者P=-0．025）。胃癌中HP感染与PCNA与COX-2蛋白表达呈正相关（r=0．521。P=0．000及r=0．342,P＝0．009）。结论：胃癌组织中PCNA与COX-2蛋白表达及HP感染共同参与胃癌的发生、发展。     

肝细胞癌及癌旁组织中骨形态发生蛋白的免疫组织化学研究

目的：研究HCC及其癌旁组织是否存在BMPs，方法：利用S－P免疫组织化学技术检测15例肝细胞癌及其癌旁组织中BMPs的表达，结果：BMPs不均一的存在于HCC及其癌旁组织中，肝癌细胞胞浆和／或胞核呈阳性，而癌旁组织胞浆阳性，仅一例胞浆胞核阳性。结论：首次报道肝细胞癌及其癌组织存在骨形态发生蛋白BMPs，并提示BMPs可能与HCC分化和生长有关。     

Snail基因甲基化与TGFβ1诱导前列腺癌细胞发生EMT的相关性研究

目的探讨Snail基因甲基化与转化生长因子β1(TGFβ1)诱导前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的相关性。方法 TGFβ1诱导前列腺癌PC3、DU145细胞,通过细胞形态、划痕及侵袭实验筛选EMT明显的细胞系;利用Western blot、RT-PCR技术检测该细胞系EMT时相关Marker表达的变化,确定EMT过程中的决定性转录因子;沉默组蛋白去甲基化酶KDM4A的表达,观察前列腺癌细胞形态学及转录因子Snail表达的变化;收集前列腺良性增生组织(对照组)及Gleason分级四级以上的前列腺癌组织(实验组)各60例,检测Snail、E-cadherin和Vimentin的表达。结果细胞形态学变化、划痕及侵袭实验证明TGFβ1诱导后前列腺癌细胞PC3具有明显的迁移及侵袭能力;Western blot、RT-PCR实验表明PC3细胞EMT时E-cadherin表达下调,Snail1和Vimentin表达上调,其中Snail1变化最为明显。免疫组化结果显示对照组E-cadherin细胞膜表达强阳性,Vimentin、Snail细胞质表达弱阳性;实验组E-cadherin细胞膜表达弱阳性,Vimentin、Snail细胞质表达强阳性。沉默KDM4A表达,PC3细胞由间质转变为上皮形态,Snail1表达上调。结论 Snail1甲基化富集程度改变与TGFβ1诱导前列腺癌细胞上皮间质转化相关。     

前列腺癌中HSF1蛋白的表达及与临床病理特征的相关性

目的探讨HSF1在前列腺癌组织中的表达及与前列腺癌各项临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法和图像分析系统研究82例前列腺癌标本中HSF1的表达情况。结果HSF1蛋白在前列腺癌癌细胞胞浆部位染色阳性,阳性表达率为89.2%。HSF1在前列腺癌组织中的表达与Gleason评分呈正相关(r=0.66,P0.001)。HSF1表达与PSA水平随PSA升高而升高,呈正相关(r=0.76,P0.001)。结论HSF1蛋白在前列腺癌中表达增加,可能与调控热休克蛋白家族成员作用机制有关。     

非小细胞肺癌中VEGF、PCNA及P53的表达

目的：探讨VEGF、PCNA和P53在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其生物学行为的关系。方法：采用免疫组织化学方法，对病理确诊的62例非小细胞肺癌组织进行VEGF、PCNA和P53表达的检测。结果：62例非小细胞肺癌VEGF阳性表达率58．1％（36／62），其表达与NSCLC的组织分化程度、生存期有相关性（P〈0．05），与组织学类型、有无淋巴结转移、临床病理分期无关。P53阳性表达率46．8％（29／62），表达与肿瘤组织类型、TNM分期、有无淋巴结转移无关（P〈0．05）。PCNA阳性表达率61．0％（36／59），表达与肿瘤组织类型、TNM分期、有无淋巴结转移无关，与组织分化程度及生存期有关（P〈0．05）。结论：VEGF、PCNA和P53可作为评价非小细胞肺癌预后的重要指标。     

p27^kip1和cyclinE及PCNA在宫颈磷癌中的表达

目的：探讨p27^kip1、cyclinE蛋白及PCNA在宫颈鳞癌中的表达及临床意义。方法：采用免疫组化法检测140例宫颈鳞癌病例p27^kip1、cyclinE蛋白及PCNA的表达。结果：p27^kip1在宫颈鳞癌中的阳性表达率为47．14％（66／140），显著低于正常宫颈上皮的92．0％（46／50）；cyclinE蛋白在宫颈鳞癌中阳性表达率为37．14％（52／140），显著高于正常宫颈上皮的12．0％（6／50）：PCNAⅢ～Ⅳ级在宫颈鳞癌中阳性表达率37．14％（58／140），显著高于正常宫颈鳞状上皮；P27^kip1阳性，cyclinE和PCNA低表达者生存期分别较p27^kip1阴性，cyclinE和PCNA高表达者长，且与淋巴结转移呈负相关；p27^kip1与cyclinE和PCNA的表达呈负相关，cyclinE与PCNA的表达呈正相关。结论：p27^kip1低表达，cyclinE和PCNA高表达与宫颈癌的发生、发展密切相关，可作为综合判断预后的指标。     

鼻咽非角化性癌Fas表达与癌细胞增生和凋亡的关系

目的检测正常鼻咽组织以及鼻咽非角化性癌癌细胞Fas的表达，探讨其表达与癌细胞增生和凋亡的关系。方法收集中山大学附属第一医院病理科37450未治疗的非角化性鼻咽癌活检组织标本。应用免疫组化法检测鼻咽癌组织中Fas和癌细胞PCNA的表达；应用原位细胞凋亡检测法（TUNEL）计数癌细胞的凋亡（ApoptosisCount，AC）。结果正常鼻咽粘膜表面及隐窝的假复层纤毛柱状上皮细胞、鳞状化生上皮、部分小涎腺的导管上皮细胞的胞膜和胞浆Fas阳性表达。45．9％（17／37）的鼻咽非角化性癌的少数癌细胞Fas弱阳性。癌细胞表达Fas与癌细胞凋亡计数AC无关（P〉0．05）。Fas阴性病例癌细胞增生指标显著高于Fas阳性病450（P〈0．01）。结论Fas对鼻咽非角化性癌癌细胞的自发性凋亡不起主导作用，鼻咽非角化性癌细胞大多处于细胞增生周期是导致癌细胞自发性凋亡非Fas途径的主要原因之一。     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子及基质金属蛋白酶9在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子（EMMPRIN）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）在卵巢癌组织中的表达意义。方法应用免疫组化sP法对55例上皮性卵巢癌组织、21例良性上皮性卵巢肿瘤组织中EMMPRIN、MMP-9的表达情况,分析卵巢癌组织及良性上皮性卵巢肿瘤组织中EMMPRIN、MMP-9阳性表达率,其与临床病理指征的关系。结果卵巢上皮性癌组织中EMMPRIN及MMP-9阳性表达率[89．1％（49／55）,96．4％（53／55）]高于卵巢良性肿瘤[14．3％（3／21）,23．8％（5／21）,）（2=40．64,45．84,P〈0．01]。上皮性卵巢癌组织中EMMPRIN与MMP9阳性表达呈正相关（rs=0．5535,P〈0．01）。结论EMMPRIN、MMP-9在肿瘤细胞及基质细胞中阳性表达率高,二者参与了卵巢癌的发生、发展,并有促进卵巢癌的浸润和转移作用。     

鼻息肉组织中核因子κB亚单位P50的活性及其意义

目的探讨鼻息肉组织中核因子κB亚单位P50(NF-κB-P50)的活性及其临床意义。方法根据是否伴有变应性鼻炎(AR)将鼻息肉病人分为AR组与NAR组,每组20例,采用SP免疫组织化学染色方法检测40例鼻息肉与20例正常钩突黏膜中P50的表达,以胞核阳性细胞数/(胞核阳性细胞数 胞浆阳性细胞数)×100%计算P50活性。结果鼻息肉组织中P50胞浆胞核均有阳性表达,主要位于上皮细胞、炎症细胞及腺上皮细胞胞浆,AR组与NAR组P50活性均显著高于正常组(P<0.01);AR组较NAR组更高(P<0.01)。结论鼻息肉组织中NF-κB-P50的活性显著增强,AR的并存可进一步提高P50的活性。     

HPLC法同时检测食品中黄曲霉毒素B1、B2、G1和G2的研究

[目的]建立一种快速、灵敏、简便的高效液相色谱(HPLC)同时测定食品中黄曲霉毒素(AFT)B1、B2、G1和G2的方法。[方法]样品经提取、净化、衍生后直接进入具有荧光检测器的高效液相色谱仪检测。[结果]15min内可完成AFT4种组分的分离。检测大米和花生的方法检测限分别为B1(7.52×103、7.48×103ng/g)、B2(3.96×103、0.013ng/g)、G1(0.032、0.046ng/g)、G2(0.024、7.36×103ng/g);标准曲线良好,相关系数大于0.99994;大米和花生的回收率分别为85.3%～96.0%和85.3%～97.0%,相对标准偏差分别小于2.2%和4.8%。[结论]HPLC法测定AFT,快速、简便和灵敏度高。     

高效液相色谱法同时测定食品中四种黄曲霉毒素的方法探讨

目的：建立一种快速、灵敏、简便的高效液相色谱（HPLC）同时测定食品中黄曲霉毒素（AFT）B1、B2、G1和G2的方法。方法：样品经振荡提取，多功能净化柱净化，三氟乙酸衍生后，选用ZORBAX XDB-C18分离柱，用乙腈-水（23＋77）作流动相，于20℃以下等度洗脱，经荧光检测器测定后，以保留时间定性，用峰面积或峰高定量。结果：20分钟内可完成AFr4种组分的分离。检出限分别是，B1为0．042ng，B2、G1和G2为0．08ng。回收率为83．4％～103．1％，r〉0．9995。结论：经振荡提取、多功能净化柱净化后，用荧光检测器同时测定食品中黄曲霉毒素（AFT）B1、B2、G1和G2的高效液相色谱方法快速、灵敏、简便。     

高温与CO不同方式的联合作用对大鼠脑、心、肝、脾、肾Hsp60基因表达的影响

主要研究了高温与ＣＯ的３种联合作用方式对大鼠肛温及脑、心、肝、脾和肾表达Ｈｓｐ６０基因的影响，对大鼠肛温的影响为：单纯高温与单纯ＣＯ分别使肛温升高和降低；联合作用中，先ＣＯ后高温的相继联合作用具有协同效应，而先高温后ＣＯ的相继联合作用和高温＋ＣＯ的同时联合作用则表现为拮抗效应，对Ｈｓｐ６０基因表达的影响为：（１）３种联合作用方式对５种脏器的效应都表现为拮抗效应；（２）３种联合作用方式对肝、肾乃至脾中表达Ｈｓｐ６０基因的拮抗效应小于对其它脏器中表达Ｈｓｐ６０蛋白的拮抗效应     

补充维生素B_1、B_2及C对大鼠脑功能的影响

用普通奶粉和强化维生素Ｂ１、Ｂ２及Ｃ的奶粉进行对比实验，观察补充维生素对大鼠脑功能的影响。补充维生素后大鼠行为功能测试表明：错误反应率和逃避时间均明显下降，海马乙酰胆碱神经递质明显增加，脑脂质过氧化物水平降低（Ｐ＜０．０５），而大鼠身体发育无明显改变。提示，在满足机体发育下适当补充维生素Ｂ１、Ｂ２和Ｃ可改善脑功能。     

微波消解法测定胎儿大脑组织中生物必需元素

目的　建立胎儿大脑组织中生物必需元素K、Na、Mg、P、Cu、Fe、Mn、Zn的分析方法。方法　样品经HNO3 H2 O2 微波消解体系消解后 ,用电感耦合等离子体发射光谱法 (ICP -AES)同时测定K、Na、Mg、P、Cu、Fe、Mn、Zn含量。结果　元素的检出限分别在 0 0 0 7mg/L～ 0 1mg/L之间 ;线性良好 ,线性相关系统均≥ 0 999;重现性好 ,变异系统RSD <2 % ;准确度高 ,回收率在 93 7%～ 16 1%之间 ,用猪肝 (GBW 0 8551)及人发 (GBW 0 760 1)标样质控 ,分析结果与标准值吻合。结论　本法快速灵敏 ,精密度及准确度均符合要求 ,结果令人满意     

硒对大鼠组织中硒、镉、锌、铜、锰含量的影响

本文观察了Ｗｉｓｔａｒ雄性大鼠经口摄入不同浓度的亚硒酸钠液，３周后用原子吸收分光光度法测定肝、肾、脾和睾丸中硒、镉、锌、铜和锰的含量。结果表明：给硒后肝、肾组织中硒的含量随着硒剂量的增加而升高；肝、肾、脾中锌的含量升高，而至１０ｍｇ／Ｌ组锌的含量又下降；肾、脾和睾丸中铜、锰的含量升高，肾、脾中锰含量随硒剂量的增加而降低。     

母血与脐血中VitA VitC VitD VitE含量及其相关性

目的:探讨母血与脐血血清维生素正常水平值及相互关系。方法:对2002年1月～2003年6月在天坛医院妇产科进行检查的北京市崇文区540例孕产妇配对测定母血、脐血中维生素A、C、D、E浓度,比较其水平并进行相关性分析。结果:脐血与母血比较,维生素A、C、D、E差异有显著性意义,脐血维生素值普遍低于母血。母血与脐血维生素A、C、D、E具有相关性。其中尤以母血维生素A与脐血的相关性大。结论:本次研究测得母血、脐血维生素值均低于正常值。提示孕期应合理补充维生素,定期检测体内维生素的含量,母血与脐血维生素A、C、D、E含量具有相关性,妊娠期补充维生素对提高新生儿体内维生素含量有作用,以提高维生素A最容易见效。     

HLD ATP 7B基因8、12、14、16、18号外显子突变的DNA分析(Ⅱ)

目的 对肝豆状核变性(又称Wilson病,WD)基因的突变位点外显子8、12、14、16、18进行DNA测序分析并建立直接基因诊断方法.方法 对102例WD病人和82例对照正常人提取基因组DNA,PCR扩增ATP7B第8、12、14、16、18号外显子,8号外显子及12号外显子扩增产物分别行Msp Ⅰ及Tail内切酶酶切分析;后对所有病人及对照组DNA外显子扩增产物行直接测序,进而与临床表型做相关分析.结果 102例WD病人,8号外显子35例存在Msp Ⅰ酶切反应异常,测序示Arg778Leu纯合或杂合突变,占34.31%,其中12例伴Leu770Leu多态性;12号外显子13例存在Tail酶切反应异常,测序示Thr935Met杂合错义突变,占12.75%,1例存在Arg919Gly杂合错义突变,Arg952Lys在患者及对照组中均检出;余外显子14、16、18对照组与患者均未发现突变.结论 ATP7B基因外显子8、12为WD突变热点,其中8号外显子以Arg778Leu、12号外显子以Thr935Met为主要突变形式,PCR-Msp Ⅰ酶切、PCR-Tail酶切反应可作为WD病人初步筛选方法.     

糖尿病患者血中相关指标及微量元素改变的研究

目的测定糖尿病患者外周血中CD62p、CD63、CD42a、CD4、CD8、CD3、CDl6＋56和微量元素锌（Zn）、铬（Cr）含量。方法应用流式细胞术测定CD62p、CD63、CIM2a、CD4、CD8、CD3、CD16＋56；用原子吸收光谱法测定Zn、Cr。结果糖尿病患者CD4、CD3、CD16＋56、Zn、Cr水平显著低于正常对照组（P〈0．01），而CD62p、CD63、CD42a、CD8水平则显著高于正常对照组（P〈0．01）。结论糖尿病患者血小板膜糖蛋白（CD62p、CD63、CD42a）和免疫功能指标（CD4、CD8、CD3、CD16＋56）及微量元素、锌（Zn）、铬（Cr）的含量在糖尿病病情观察、临床诊断治疗中可能起着一定的作用。     

1996年武穴市蚊、蝇、蟑螂的抗药性监测

１９９６年武穴市蚊、蝇、蟑螂的抗药性监测马建良为掌握本市卫生害虫的抗药性水平，指导合理使用卫生杀虫剂，开展了监测工作。１材料杀虫剂：ＤＤＴ、马拉硫磷、溴氰菊酯、速灭菊酯、胺菊酯、ＤＤＶＰ、敌百虫、奋斗呐，为中国科学院动物研究所产品；溶剂（丙酮）：为襄...