浅谈细菌实验室菌种的保存和使用方法

菌种保存对于临床微生物有这十分重要的意义.细菌实验室除了长期留存日常监测用的标准菌株外,通常也会保存一些有意义的菌种,对于保存和使用生物学性状的稳定性不发生改变的菌种,质量是关键.那么,菌种应如何保存和使用,本人将工作中的一些经验和体会总结如下     

甘油保存菌种方法的改良

目的 将甘油原液保存菌种方法进行改良，寻找一种简便易行的保存实验室各种菌种的方法。方法 将一般细菌的菌种纯化后接种于普通肉汤管，4～6h增菌后，加入适量甘油一生理盐水保存液，-20℃冰箱保存；链球菌属和奈瑟氏菌属的菌株纯化后接种于血清肉汤管，在5％～10％CO2中经8～10h增菌后，加入适量保存液，80℃低温冰箱保存；真菌菌种纯化后直接取菌洗入肉汤，不做培养，加入保存液后，-20℃冰箱保存。结果 在连续3年实验期内，各菌种保存效果良好，且其形态结构、染色特性、生化反应等与标准株相符。结论 使用甘油生理盐水保存法来保存菌种，各菌种保存时间长，方法简便，特别是使链球菌、奈瑟氏菌和弧菌等需特殊保存方法保存的菌株在一般实验室得以保存。     

滤纸片法低温冷冻保存菌种的实验室应用

在微生物检验工作中，成功进行细菌菌种保存，对于菌株的分子生物学特征和耐药性变迁监测，以及医院感染病原学调查、新药研究等至关重要。实验室保存菌种的方法很多、有些方法简单易行，不需要特殊设备，但经常移植菌种易发生变异或污染杂菌，又增加工作强度；有些需要冷冻干燥机、真空泵，全自动化生物分析仪等特殊设备。本采用干燥滤纸片低温冷冻保存菌种C63的方法，保存2年后将菌种复苏进行鉴定，取得理想效果。结果报告如下。     

菌种的质量控制

生产用菌种，经长期使用和保藏后，会发现发酵单位低、产生泡沫多、菌丝变形等异常现象，这标示着菌种的退化，导致菌种质量低劣，应用该菌种会直接影响发酵生产，菌种质量是影响发酵成败的关键因素之一。针对菌种质量这一问题，结合菌种本身的特征及菌种制备的方法和条件，对已退化的菌种进行处理，恢复该菌种原有优良性状，是保证生产稳定性的基础。现以细菌为例进行探讨。     

五种定期移植法保存非苛养菌的效果比较

菌种保存是从事微生物研究、检验及教学工作中所不可缺少的重要环节 ,定期移植保存法 (又称传代培养保存法 )为最常用的菌种保存方法 ,由于其操作简便 ,无需特殊设备和技术 ,因而被各级微生物实验室和检验室所普遍采用。该法包括斜面培养、半固体穿刺培养、液体培养等多种方法 ,我们就常用的 5种定期移植方法对非苛养细菌的保藏效果进行了长达 6年的对比观察 ,现报告如下 :1　材料与方法1 1　菌种　共 14种 (见附表 ) ,均由中国医学细菌保藏中心(ＣＭＣＣ -Ｂ)提供。1 2　培养基　营养肉汤培养基、半固体琼脂培养基、营养琼脂培养基 ,均购自…     

低温对常见致病弧菌菌种保存的影响

致病弧菌是人和水产动物的常见病原菌。其中 ,比较常见的有霍乱弧菌、副溶血弧菌等。由于对人的健康和水产动物危害严重 ,有关研究也越来越多。病原学研究必然用到菌种 ,菌种的保藏是这些工作不可分割的一部分。菌种保藏有多种方法 ,但对于基层实验室来说 ,比较普遍的方法是接种半固体或营养琼脂斜面后 ,放 4～ 6℃冰箱保存。但用这种方法保存弧菌 ,在较短时间 ,用常规方法即检测不到[1,2 ] ,通常认为已经死亡。近年来研究发现 ,霍乱弧菌、副溶血弧菌和创伤弧菌等细菌 ,在低温水中能变成另 1种存活形式即活的非可培养状态 ,处于这种状态的细…     

一种沙门菌和志贺菌保存用培养基

在日常微生物学检验中和检验方法研究中需要保存一些菌种.有些菌种比较容易保存,有些菌种保存较难,原因是保存时间短,容易死亡,尤其是沙门菌和志贺菌.有比较好的菌种保存培养基"[1],但能够较长时间地保存志贺菌的培养基还没有报道.为此研究出了一种在斜面上能够较长时间保存沙门菌和志贺菌等肠杆菌科细菌的培养基.     

空肠弯曲菌菌种的保存方法

空肠弯曲菌（Ｃａｍｐｙｌｏｂａｔｅｒ　ｊｅｊｕｎｉ）作为急性腹泻的重要病原菌,越来越受到重视,已成为教学实践的重要内容。为便于观察该菌的形态、动力等特性,常需保存足够的菌株。空肠弯曲菌在实验室中存活时间短,不易保存,过去我们常用黄氏保存培养基（ＷＴＭ）和双相保存培养基（ＰＢＭ）。但只能使该菌种存活３０ｄ左右。为能长期稳定地保存该菌,避免因反复传代所致的变异,有必要研制新的保存培养基。笔者以改良Ｓｋｉｉｒｏｗ培养基为基础,试制成一种新的保存培养基－改良Ｓｋｉｉｒｏｗ斜面加半固体覆盖,该方法制作简单…     

菌种保存的最佳方法

菌种在科学实验、教育、传染病的致病机理及遗传变异的研究中起着重要的作用。本文报导采用高层半固体琼脂与冷冻干燥二种保存菌种方法,与原来菌种保存常用半固体琼脂加液体石蜡(3个月移种一次)比较,既节约原材料与时间,又可避免因多次移种而引起菌株污染及变异,是目前保存菌种的二种最佳方法。     

霍乱菌种长期保存存活率分析

霍乱是由霍乱弧菌引起的急性肠道传染病 ,该古老的疾病 ,在中外历史上曾对人类健康造成极大的危害。该病病原霍乱弧菌长期动态的深入研究对该病防治有重要意义。菌种的长期保存是进行研究的基本条件之一。本省自 1961年发现El Tor霍乱弧菌至今 ,坚持了霍乱菌种的冷冻干燥 (冻干 )保存 ,但是从未对冻干菌种的存活率进行检查。分析长期保存霍乱菌种的存活率 ,探讨如何改善菌种的保存 ,这是一件十分有意义的工作。1　材料与方法1.1　材料来源　用本省不同时期采集的流行菌株计 2 4 8株。其中 60年代的 2 6株 ,70年代的 118株 ,80代的 10 4株。…