低氧条件下γ射线对Hep-2细胞p53表达的影响

目的 模拟在体肿瘤细胞微环境,体外建立不同氧供状态下的细胞模型,探讨乏氧再氧合条件下60 Coγ,射线照射对人喉鳞癌Hep-2细胞凋亡的影响.方法 将体外培养的人喉鳞癌细胞分为3组:A组(常氧组)、B组(低氧组)、C组(低氧再氧合组).流式细胞仪检测HIF-1α、p53蛋白表达及细胞凋亡;细胞爬片免疫组化检测各组细胞HIF-1α、p53蛋白表达;RT-PCR检测各组细胞HIF-1amRNA.结果 低氧能明显增加Hep-2细胞HIF-1α蛋白及其mRNA表达,同时p53蛋白表达相应上调.再氧合之后HIF-1α蛋白及其mRNA表达均呈现下调趋势,p53蛋白表达下调.同低氧(B组)相比再氧合之后(C组)Hep-2细胞凋亡率明显升高(P<0.05).结论 低氧降低60Coγ射线照射对Hep-2细胞的诱凋亡作用,再氧合之后其诱凋亡作用明显提高.但在Hep-2细胞凋亡率明显升高的同时却并未出现p53蛋白表达的增强,提示低氧再氧合之后60Coγ射线诱导Hep-2细胞凋亡作用可能是通过p53以外的其它促凋亡途径实现的.     

不同时间持续缺氧对3 T3-L1脂肪细胞炎症因子mRNA的影响

目的探讨不同时间持续缺氧孵育后脂肪细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)表达的变化。明确肥胖缺氧状态下是否存在炎症因子表达增加导致胰岛素抵抗(IR)。方法将3T3-L1脂肪细胞随机分为4组,即常氧和缺氧4 h、12 h、24 h组,实时定量PCR(q RT-PCR)法测定各时间点脂肪细胞缺氧诱导因子1-α(HIF-1α),葡萄糖转运子-1(GLUT-1),TNF-α,IL-6,IL-1β的mRNA。结果与常氧组相比,缺氧12 h、24 h组HIF-1α,GLUT-1 mRNA表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论缺氧使脂肪细胞HIF-1α,GLUT-1升高,确认脂肪细胞缺氧状态形成,在缺氧状态下炎症因子TNF-α,IL-6,IL-1β mRNA水平升高,缺氧处理24 h变化最为明显。     

α-硫辛酸对高糖诱导下乳鼠心肌细胞作用

目的 探讨α-硫辛酸对高糖诱导的乳鼠心肌细胞肥大保护作用及其机制.方法 取出生1～3d乳鼠心尖部心肌细胞原代培养,用低糖培养基培养48 h后分为对照组、高糖组(25.5 mmol/L)、α-硫辛酸组(高糖+50、100、200、300 mg/L)、蛋白激酶C(PKC)抑制剂组(高糖+PKC抑制剂50 nmol/L)、核转录因子-κB(NF-κB)抑制剂组(高糖+ NF-κB抑制剂5 mmol/L);细胞培养48 h,检测细胞表面积以及蛋白含量,Wesrtern blot法检测PKC-α、NF-κB、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、立早基因c-fos蛋白表达.结果 与对照组比较,高糖组乳鼠心肌细胞肥大、细胞表面积增大、蛋白含量增多,心肌细胞内PKC-α(0.89±0.03)、NF-κB(0.88±0.14)、c-fos(0.62±0.14)、TNF-α(0.85±0.05)蛋白表达均升高(P＜0.05);α-硫辛酸能够减轻乳鼠心肌细胞肥大,使心肌细胞表面积减小、蛋白含量减少(P＜0.05),与高糖组比较,α-硫辛酸300 mg/L组细胞内PKC-α(0.44±0.07)、NF-κB(0.24±0.03)、TNF-α(0.39 ±0.05)、c-fos(0.15 ±0.06)蛋白表达均下降(P＜0.05).结论 α-硫辛酸可抑制高糖诱导的乳鼠心肌细胞肥大,其机制可能与抑制PKC/NF-κB/TNF-α/c-fos的信号转导通路有关.     

RAS拮抗剂调节血管平滑肌细胞增殖、凋亡因子表达

目的探讨血管紧张素转化酶抑制剂卡托普利及血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)受体拮抗剂氯沙坦对AngⅡ诱导的肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的干预作用。方法体外原代培养Wistar大鼠主动脉平滑肌细胞,收集不同AngⅡ浓度和作用时间下的细胞和卡托普利组、氯沙坦组和二者联合作用组的细胞,以逆转录(RT)-PCR检测细胞中TNF-α和TGF-β1 mRNA的表达。结果 TNF-αmRNA表达量随AngⅡ浓度和作用时间增加而增加,AngⅡ浓度为10-7、10-6、10-5、10-4 mol/L时表达量分别为(0.43±0.05)、(0.81±0.13)、(0.97±0.17)、(1.09±0.19),与对照组(0.11±0.03)比较,差异有统计学意义(P<0.05或0.01);一定浓度卡托普利(5×10-6mmol/L)、氯沙坦(5×10-6 mmol/L)可明显抑制AngⅡ这一作用;TGF-β1 mRNA表达量随AngⅡ浓度和作用时间增加而明显增加,具有浓度依赖性;在AngⅡ10-7、10-6、10-5和10-4 mol/L时,卡托普利组mRNA表达量分别为(0.19±0.03)、(0.23±0.05)、(0.38±0.14)、(0.34±0.07),较AngⅡ组分别降低了59.57%、73.26%、54.44%和66.67%,差异均有统计学意义(P<0.05或0.01),氯沙坦组分别为(0.17±0.03)、(0.39±0.11)、(0.41±0.12)和(0.39±0.08),较AngⅡ组分别下降了63.82%、54.65%、54.44%和61.76%,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 AngⅡ可促进血管平滑肌细胞TNF-α、TGF-β1 mRNA表达,且有时间和浓度依赖关系;卡托普利、氯沙坦对AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞TNF-α、TGF-β1 mRNA表达均有抑制作用,二者联合作用时抑制作用最明显。     

低氧条件下γ射线对Hep-2细胞周期、凋亡的影响

目的体外建立不同氧供状态下的细胞模型,探讨不同剂量~(60)Coγ射线对喉鳞癌Hep-2细胞周期及凋亡的影响。方法将体外培养的人喉鳞癌Hep-2细胞分为两组:A组(常氧组)、B组(低氧组),两组细胞分别接受1、3、5、10、20、40(Gy)不同剂量~(60)Coγ射线照射,两组分别设0Gy对照组。流式细胞仪检测HIF-1α蛋白表达、细胞凋亡及细胞周期变化;免疫细胞化学检测各组细胞HIF-1α蛋白表达。结果A组Hep-2细胞在接受1～5Gyγ射线照射后,主要发生了G0/G1期阻滞,在接受10～40Gyγ射线照射后,发生了G2/M期阻滞;B组细胞主要发生了G2/M期阻滞。B组0Gy对照组发生了明显的G0/G1期阻滞;A组Hep-2细胞凋亡曲线成抛物线状,凋亡率呈现明显的剂量依赖性,在5Gy处出现最大值41.56±2.25。B组细胞凋亡率同A组相比总体上呈现明显的下调趋势,但不同剂量的γ射线没有对Hep-2细胞的凋亡率产生明显的影响。结论不同剂量~(60)Coγ射线照射会导致常氧条件下Hep-2细胞发生不同周期阻滞,而不同的周期阻滞会对Hep-2细胞的凋亡产生明显的影响。低氧条件下γ射线照射未能导致Hep-2细胞发生明显的凋亡,可能同Hep-2细胞G2/M期阻滞有关,而HIF-1a蛋白的表达上调可能是Hep-2细胞G2/M期阻滞的原因之一。     

高原低氧环境对大鼠肺组织影响

目的观察高原低氧对大鼠肺组织超微结构影响及其低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达变化。方法将SD大鼠分别进行高原低氧干预1、2、3和30 d,并设置对照组;4个高原低氧组由海拔5 m的西安地区途中耗时1d带到海拔2 700 m青海格尔木地区、途中耗时2 d带到海拔5 000 m唐古拉地区,途中耗时3d带到海拔4 500 m的西藏那曲地区,并饲养30 d。结果光镜及电镜观察显示,急性高原低氧2 d组肺组织出现明显高原肺水肿,高原低氧30 d组HIF-1αmRNA条带积分吸光度值(0.874±0.075)明显高于对照组(0.225±0.026)(P<0.01),高原肺水肿现象则明显减轻。结论低氧习服后肺组织低氧诱导因子1αmRNA表达升高,有利于减轻高原肺水肿。     

结肠癌组织中环氧合酶-2和低氧诱导因子-1α的表达及其临床意义

目的探讨环氧合酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)和低氧诱导因子-1α(hypoxiainduced factor-1α,HIF-1α)在结肠癌病变发生、发展中的作用。方法选择2010年4月—2014年12月收治的行结肠癌根治术和结肠腺瘤肿块切除术患者170例作为研究对象,根据病理结果分为A组(结肠癌组织)90例,B组(结肠腺瘤病变组织)40例,C组(癌旁正常结肠组织)40例。采用免疫组织化学法检测COX-2和HIF-1α在各组结肠组织中的表达,并分析两者与结肠癌组织临床病理特征的关系及两者间的相关性。计数资料采用χ2检验,COX-2和HIF-1α表达间的相关性采用Spearman等级相关分析,P0.05为差异有统计学意义。结果 A组COX-2及HIF-1α的表达阳性率分别为81.1%和76.7%,显著高于B组(27.5%、22.5%)及C组(7.5%、5.0%),差异均有统计学意义(均P0.05)。不同病理分级、侵及浆膜层、淋巴结转移及Ducks分期患者结肠癌组织中COX-2和HIF-1α的表达阳性率比较差异均有统计学意义(均P0.05)。结肠癌组织中,COX-2和HIF-1α的阳性表达率存在显著正相关性(r=0.726,P0.05)。结论结肠癌组织中COX-2和HIF-1α高表达且随结肠癌的病理分级、临床分期、远处转移而升高,表明COX-2和HIF-1α阳性率越高,结肠癌的恶性度越高,浸润越深。结肠癌组织中COX-2和HIF-1α的表达具有正相关关系,相互作用共同参与结肠癌的发生、发展。     

IEX-1、HIF-1α和NF-κB蛋白在宫颈癌组织中的表达及临床意义

目的:通过检测IEX-1、HIF-1α和NF-κB蛋白在宫颈癌组织和细胞中的表达情况,初步探讨其与宫颈癌发病的关系。方法:选取2009年1月~2011年10月该院病理科手术存档的蜡块标本116份,根据病变程度分为宫颈癌患者标本50份(A组)、宫颈上皮内瘤变(CIN)患者标本40份(B组)和正常宫颈标本26份(C组)。采用免疫组化法检测3组宫颈组织中IEX-1、HIF-1α和NF-κB蛋白的表达,并分析3者的相关性。结果:IEX-1在A组的阳性表达率明显低于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05),HIF-1α和NF-κB在A组的阳性表达率均明显高于B组和C组,差异有统计学意义(P<0.05);A组IEX-1、HIF-1α和NF-κB的表达均与组织学分级及有无淋巴结转移相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤的组织学类型和FIGO分期无关(P>0.05);A组HIF-1α和NF-κB的表达呈正相关(r=0.398,P<0.05),两者与IEX-1的表达呈负相关(r=-0.322、-0.517,P均<0.05)。结论:IEX-1、HIF-1α和NF-κB蛋白的表达变化与宫颈癌的发生发展有关。     

RNAi沉默HIF-1α对人宫颈癌细胞株辐射敏感性的影响

[目的]探讨在乏氧条件下,应用RNA干扰技术沉默HIF-1α基因表达对人宫颈癌细胞株U14辐射敏感性的影响。[方法]构建针对HIF-1α基因的siRNA,将其结合到pSilencer2.1-U6-neo质粒表达载体上,脂质体转染法转入宫颈癌细胞U14,低氧培养后RT-PCR检测HIF-1αmRNA的表达;成克隆实验检测HIF-1α沉默后对细胞辐射敏感性的影响。[结果]成功构建HIF-1α的siRNA真核表达载体,转染宫颈癌细胞后低氧条件下RT-PCR显示HIF-1αmRNA表达明显下调,同时细胞形成的克隆数明显减少。[结论]HIF-1α的siRNA真核表达载体能够抑制低氧条件下HIF-1α基因的表达并提高宫颈癌细胞对γ射线的辐射敏感性。     

不同剂量左甲状腺素对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织HIF-1α表达的调节

目的 探讨不同剂量左甲状腺素(L-T4)对缺氧缺血性脑损伤(hypoxia-ischemia brain damage, HIBD)新生大鼠脑组织缺氧诱导因子-1α(hypoxia-inducible factor 1α, HIF-1α)的调节作用。方法 7日龄SD大鼠随机分为假手术组、缺氧缺血组(HI)、溶剂组及L-T4低、高剂量组。低、高剂量L-T4干预组及溶剂对照组分别于HIBD后当日起腹腔注射2 μg/100 g L-T4、3.5 μg/100 g L-T4及等体积溶剂, 每日1次, 共5 d。应用免疫组化法检测鼠脑HIF-1α蛋白, RT-PCR法检测HIF-1αmRNA。结果 缺氧缺血组缺血侧大脑皮质HIF-1α蛋白(72.795±6.121)及HIF-1αmRNA(0.448±0.035)表达较假手术组(依次为38.581±2.846, 0.174±0.015)增高, 差异有统计学意义(P＜0.05);L-T4低、高剂量干预组缺血侧大脑皮质HIF-1α蛋白(依次为117.350±9.374, 142.842±8.948)及HIF-1αmRNA(依次为0.618±0.042, 0.711±0.049)表达较缺氧缺血组增高, 差异有统计学意义(P＜0.05), 且L-T4对HIF-1α的影响具有剂量依赖性, 即随剂量增加, HIF-1α蛋白及HIF-1αmRNA表达增加, 两组间差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 在新生大鼠HIBD时, L-T4可上调HIF-1α蛋白及其mRNA表达, 从而对HIBD起保护作用, 且具有剂量依赖性。     

芹黄素对肾癌A498细胞凋亡及HIF-1α/NF-κB信号通路的影响

目的探讨芹黄素对肾癌A498细胞凋亡及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/核因子κB(NF-κB)信号通路的影响。方法体外培养人肾癌A498细胞, 分为不同浓度芹黄素(10、20、40 μmol/L)组、芹黄素(40 μmol/L)+HIF-1α激动剂二甲基二酰氨基乙酸(DMOG)组、HIF-1α抑制剂利非西呱(YC-1)组、对照组。采用CCK-8法和平板克隆形成实验检测细胞增殖, Hoechst 33258染色和流式细胞术检测细胞凋亡, Western blot实验检测凋亡蛋白及HIF-1α/NF-κB通路蛋白表达。结果芹黄素显著抑制A498细胞增殖, 且抑制作用呈浓度依赖性(P<0.001)。与对照组比较, 10、20、40 μmol/L芹黄素组和YC-1组A498细胞凋亡率[(4.35±1.04)% vs (10.06±1.13)%、(18.52±2.58)%、(32.17±2.63)%、(26.94±2.41)%]、B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)和切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达量均显著升高, B淋巴细胞瘤2(Bcl-...     

西宁地区妊娠期肝内胆汁淤积症胎盘组织缺氧诱导因子HIF-1α表达及其意义

目的:探讨西宁高原缺氧环境妊娠期肝内胆汁瘀积症(ICP)患者胎盘组织缺氧诱导因子1α(HIF-1α)表达及其意义。方法:回顾性分析在该院产科分娩的85例ICP患者(ICP组)的临床资料,选取同期正常妊娠分娩对象40例作为对照组,比较两组研究对象的胎盘组织中HIF-1α蛋白及mRNA表达差异。结果:ICP组患者的胎盘组织病理切片显示胎盘绒毛间隙狭窄、合体细胞结节增加、面积增大,与对照组胎盘组织比较,ICP组HE染色的阳性表达率50.59%显著高于对照组的12.50%(P<0.05)。ICP组的HIF-1α蛋白表达水平IOD值(9.146±2.752)、HIF-1αmRNA定量分析(1.621±0.205)均显著高于对照组的(3.982±1.894)、(1.347±0.162),P<0.05。ICP组的新生儿体重(3 268.8±127.5)g、5 min Apgar评分(9.45±0.28)分均显著的低于对照组研究对象,P<0.05。结论:ICP患者的HIF-1α蛋白及mRNA表达水平均显著高于正常妊娠妇女,可能与妊娠不良结局具有一定的相关性。     

乙酰左旋肉碱改善肿瘤坏死因子-α诱导大鼠L6细胞胰岛素抵抗的实验研究

目的研究乙酰左旋肉碱(ALC)对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的大鼠肌细胞胰岛素抵抗的影响。方法分化好的L6肌细胞分为6组,分别为对照组、100nmol/L胰岛素组、100nmol/L胰岛素+10ng/ml TNF-α组、胰岛素+TNF-α+三个不同浓度ALC组(浓度分别为0.1、0.3、0.6mmol/L),继续培养24h。实验结束后分别用葡萄糖消耗实验、葡萄糖转运实验检测胰岛素刺激下L6细胞对葡萄糖的消耗和利用情况,Western blot检测细胞胰岛素受体底物-1(insulin receptor substrate-1,IRS-1)的蛋白表达水平。结果与100nmol/L胰岛素组比较,10ng/ml TNF-α作用24h后胰岛素刺激下细胞上清液中葡萄糖的残存量显著增加和细胞内葡萄糖转运量明显减少(P0.05),而ALC作用后明显改善TNF-α的抑制作用(P0.05),并呈剂量-反应关系。Western blot结果显示,与胰岛素组相比,TNF-α增高IRS-1的Ser307磷酸化表达,而ALC作用后减少IRS-1的Ser307磷酸化表达。结论10ng/ml TNF-α作用24h能诱导L6肌细胞的胰岛素抵抗,而ALC能改善这种胰岛素抵抗,可能是通过减少IRS-1的Ser307磷酸化表达来实现的。     

TNF-α对3T3-L1成熟脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因表达的影响

[目的]观察TNF-α对3T3-L1成熟脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因表达水平以及胰岛素刺激下的葡萄糖摄取率的影响.[方法]体外培养3T3-L1前体脂肪细胞,诱导分化为成熟脂肪细胞后,应用不同浓度(10、25、50 ng/mL)重组TNF-α干预成熟脂肪细胞16 h,或以10 ng/mL重组TNF-α分别干预24、48、72 h,采用实时荧光定量RT-PCR技术检测TNF-α干预后3T3-L1脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因mRNA表达水平;另外,采用[3H]-2-脱氧葡萄糖掺入法检测TNF-α干预24、48、72h后成熟脂肪细胞葡萄糖摄取率.[结果]1)不同浓度TNF-α均能显著上调3T3-L1成熟脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因表达(P均<0.001),在0～25 ng/mL浓度范围内呈现浓度依赖性,随TNF-α干预浓度增高,NYGGF4小鼠同源基因的表达水平逐渐升高;2)TNF-α对3T3-L1成熟脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因的表达调节具时间反应性,呈现随干预时间延长该基因表达逐渐上调的特征,10 ng/mL TNF-α干预人成熟脂肪细胞24 hNYGGF4小鼠同源基因mRNA表达水平即显著上调(P<0.001);3)TNF-α干预48 h,3T3-L1成熟脂肪细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取率与未干预组比较下降50%以上,干预72 h,胰岛素刺激的葡萄糖摄取受到进一步抑制.[结论]TNF-α可以上调3T3-L1成熟脂肪细胞中NYGGF4小鼠同源基因[目的]表达,抑制3T3-L1成熟脂肪细胞胰岛素刺激下的葡萄糖摄取.     

Barret食管组织p53、COX-2基因表达与TNF-α、NF-κB水平的关系

目的 探讨Barrett食管(Barrett’s esophagus,BE)患者病变组织中p53、COX-2基因表达与TNF-α、NF-κB水平的关系。方法 选取2016年3月—2017年3月确诊的BE患者19例,SSBE 13例(SSBE组)、LSBE 6例(LSBE组),另选食管正常者20例作为对照组。应用荧光定量PCR法检测各组食管组织中p53、COX-2 mRNA表达,ELISA法检测组织TNF-α、NF-κB水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,两两比较采用LSD-t检验。采用Pearson相关分析变量间关系。P0.05为差异有统计学意义。结果 对照组、SSBE组、LSBE组p53 mRNA相对表达量分别为1.00±0.33、2.77±0.41、3.54±0.45,COX-2 mRNA相对表达量分别为1.00±0.28、2.33±0.25、3.78±0.32,TNF-α水平分别为(23.15±4.41、65.78±5.32、87.94±4.83)pg/ml,NF-κB水平分别为(18.52±8.41、52.71±10.25、76.45±9.36)pg/ml。SSBE组、LSBE组p53、COX-2 mRNA相对表达量及TNF-α、NF-κB水平均高于对照组(均P0.05),LSBE组COX-2 mRNA相对表达量及TNF-α、NF-κB水平高于SSBE组(均P0.05),但两组p53相对表达量比较差异无统计学意义(P0.05)。Pearson相关分析显示,SSBE组、LSBE组p53 mRNA相对表达量与COX-2 mRNA相对表达量及NF-κB、TNF-α水平均呈正相关(r=0.623、0.601、0.502;0.701、0.589、0.536,均P0.05),COX-2 mRNA相对表达量与NF-κB水平呈正相关(r=0.453、0.583,均P0.05),而与TNF-α水平无相关性(r=0.253、0.329,均P0.05)。结论p53、COX-2、TNF-α、NF-κB共同介导的炎症反应可能在BE的发生发展中起重要作用,联合检测有助于BE的早期诊断、治疗及评估预后。     

西藏红景天对高原肺水肿大鼠肺组织影响

目的观察藏药红景天对高原肺水肿大鼠肺组织的影响及其低氧诱导因子-1a(HIF-1a)表达变化。方法将50只雄性SD大鼠随机分为5组,对照、生理盐水、红景天组(西安,海拔5m)、低氧组、红景天高原组(西藏那曲,海拔4500 m),光、电镜观察肺组织标本,免疫组化法检测肺组织HIF-1a表达,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法检测动物肺组织HIF-1a mRNA表达变化。结果低氧组肺组织显微和超微结构出现明显的高原肺水肿,红景天组高原肺水肿明显减轻;肺组织内未见HIF-1a蛋白表达;红景天高原组HIF-1a mRNA(0.463±0.069)表达明显高于对照组(0.231±0.037)和低氧组(0.219±0.047)(P<0.01)。结论藏药红景天可提高对大鼠肺组织HIF-1a mRNA表达,有利于减轻大鼠低氧性高原肺水肿。     

子痫前期高龄产妇胎盘HIF-1α蛋白与外周血vWF的相关性

目的探究子痫前期高龄产妇胎盘低氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白水平与外周血血管性假血友病性因子(vWF)浓度的相关性,为及时有效预防子痫的发生提供实验室依据。方法对30例正常分娩高龄产妇(A组)、35例子痫前期轻度高龄产妇(B组)、41例子痫前期重度高龄产妇(C组)的HIF-1α蛋白水平与外周血vWF浓度进行测定,并分析HIF-1α蛋白水平与vwF浓度的相关性。结果 B组、C组的HIF-1α蛋白水平、vWF浓度显著高于A组,(B组:t_1=13.194,P_1=0.000;t_2=4.856,P_2=0.000。C组:t_1=17.441,P_1=0.000;t_2=9.156,P_2=0.000);C组的HIF-1α蛋白水平、vWF浓度显著高于B组,差异均有统计学意义(t_1=9.681,P_1=0.000;t_2=4.899,P_2=0.000)。Spearman相关性分析显示,vWF浓度与子痫前期的病情程度(r=0.288,P=0.000)、HIF-1α蛋白水平(r=0.410,P=0.000)均呈显著正相关关系。结论子痫前期高龄产妇的胎盘HIF-1α蛋白水平与外周血vWF浓度明显升高,二者可能共同参与子痫前期的发生和发展。     

HIF-1α及其靶基因VEGF在双胎输血综合征患者胎盘组织中的表达

目的:探讨双胎输血综合征(TTTS)患者胎盘组织中缺氧诱导因子-1(HIF-1)及其靶基因血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达情况。方法:选取2010年1月~2014年7月在该院分娩的单绒毛膜双胎妊娠产妇68例,其中TTTS患者18例作为观察组,未发生TTTS患者50例作为对照组,对胎盘组织HIF-1α及其靶基因VEGF进行定位检测,并检测HIF-1α及其靶基因VEGF蛋白以及mRNA表达情况。结果:HIF-1α主要分布在胎盘的合体滋养细胞以及细胞滋养细胞,而VEGF主要分布在滋养细胞、血管内皮细胞、绒毛间质细胞胞核和胞质中;观察组胎盘组织HIF-1α表达平均面积、平均灰度和IOD值(面积×平均灰度)分别为(0.36±0.11)m2、(147.35±7.54)和(51.74±12.34),VEGF表达平均面积、平均灰度和IOD值分别为(0.47±0.13)m2、(141.27±8.24)和(49.67±11.38),均明显高于对照组(P<0.05);观察组HIF-1、mRNA和VEGF mRNA表达量分别为(0.41±0.04)和(0.38±0.06),明显高于对照组(P<0.05)。结论:HIF-1α和VEGF表达增强可能影响单绒毛膜双胎妊娠胎盘血管生成,从而致双胎输血综合征发生。     

唑来膦酸对乏氧骨肉瘤细胞HIF-1α和VEGF表达的影响

目的研究唑来膦酸在乏氧的环境下对骨肉瘤LM8细胞株缺氧诱导因子1-α（HIF—1α）和血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法建立骨肉瘤细胞体外乏氧培养模型,观察唑来膦酸对骨肉瘤LM8细胞HIF-1α和VEGF表达影响。RT-PCR法检测HIF-1α和VEGF mRNA转录水平;免疫组化和ELISA法分别检测HIF-1α和VEGF蛋白表达情况。结果与常氧组相比,单纯乏氧组和唑来膦酸乏氧组的HIF-1α mRNA转录水平无明显改变（P〉0．05）;但在乏氧条件下,唑来膦酸能明显抑制HIF-1α蛋白的表达。而唑来膦酸能剂量依赖性抑制乏氧条件下VEGF mRNA及其蛋白表达水平（P〈0．05）。结论在乏氧条件下唑来膦酸能够抑制骨肉瘤LM8细胞HIF-1α蛋白的表达,从而使VEGF mRNA及其蛋白表达水平明显下降。     

缺氧诱导因子-1对缺氧诱导肺泡上皮细胞凋亡的调控作用

【目的】探讨细胞凋亡在缺氧肺损伤的作用及缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)对细胞凋亡的调控作用。【方法】体外培养大鼠肺泡上皮细胞加入氯化钴(cobalt chloride,COCl2)制作细胞缺氧模型,将小分子干扰缺氧诱导因子-1(HIF-1αsmall interference RNA,HIF-1αsi RNA)有效的转染至细胞内,检测常氧、缺氧4、24 h、小分子干扰后缺氧4、24 h后HIF-1αmRNA的表达水平变化,同时应用荧光显微镜以及流式细胞术检测非转染以及转染组不同缺氧时间细胞凋亡率的变化。【结果】常氧下HIF-1αmRNA表达水平较低,随缺氧时间增加HIF-1αmRNA的表达水平明显升高(P<0.05);HIF-1αsiRNA可有效沉默HIF-1α,下调率为56%、57%(P<0.01)。细胞凋亡率随着缺氧时间延长而增加(P<0.05),48 h细胞开始出现坏死现象;通过HIF-1αsi RNA预处理细胞后,可降低缺氧诱导的细胞凋亡的发生率(P<0.05)。【结论】缺氧引起肺泡上皮细胞的凋亡,随缺氧时间增加凋亡增加,HIF-1α在缺氧诱导细胞凋亡中起着重要的作用,HIF-1αsiRNA可以减少肺泡上皮细胞凋亡的发生。