鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞毒性作用

目的观察鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞毒性作用的特点。方法体外培养大鼠中脑星型胶质细胞,采用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光法鉴定。观察染毒星型胶质细胞形态,检测细胞活力,通过生长曲线分析鱼藤酮对星型胶质细胞增殖的影响以及RT-PCR检测缝隙连接蛋白（connexin43,CX43）mRNA表达。结果0.5μmol/L鱼藤酮染毒24 h即可引起明显的细胞形态改变;0.75,1.0,2.0μmol/L鱼藤酮染毒时星型胶质细胞活力明显降低,乳酸脱氢酶释放量显著增加;0.5μmol/L以上鱼藤酮可明显抑制胶质细胞增殖,CX43 mRNA表达降低。结论鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞可以产生明显的毒性损伤作用,但与神经元比较,星型胶质细胞对相同剂量的鱼藤酮染毒具有更强的耐受能力。     

鱼藤酮对PC12细胞的毒性作用

目的 研究鱼藤酮对PC12细胞的毒性作用及其机制.方法 分别用0.1、0.5、1.0μmol/L的鱼藤酮染毒PC12细胞72 h,对照组加入相同剂量的DMS0,采用四甲基偶氮唑盐（MT T）比色法检测细胞活力,借助流式细胞仪检测各浓度下细胞的凋亡率和线粒体膜电位的变化.结果 0.1、0.5、1.0μmol/L鱼藤酮作用于PC12细胞72 h时,细胞活力随染毒浓度的增加而降低.细胞虽未发生明显的凋亡,但处于G1期细胞随染毒浓度增加而增多,G2/S期细胞相对减少,说明鱼藤酮抑制细胞增殖明显,线粒体膜电位降低显著.结论 鱼藤酮在小剂量长时间的持续作用时,启动了细胞凋亡,表现为对PC12细胞的线粒体膜电位的降低.     

百草枯诱导小鼠脑小胶质细胞的炎症反应

目的观察百草枯(PQ)诱导小鼠脑小胶质(BV2)细胞株的炎症反应。方法取处于对数生长期的BV_2细胞,分别暴露于终浓度为0(阴性对照)、20、40、80μmol/L的PQ溶液继续培养6、12、24、48 h。检测细胞活性和炎症因子[肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin 6,IL-6)、IL-1β及活性氧(ROS)]水平。结果与阴性对照组比较,各剂量PQ染毒组BV_2细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS的水平及细胞抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);与染毒6 h比较,染毒12、24、48 h时BV_2细胞TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS的水平及细胞抑制率均较高,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着PQ染毒剂量的升高和染毒时间的延长,BV_2细胞的抑制率及TNF-α、IL-1β、IL-6和ROS水平均呈上升趋势。结论PQ能活化小鼠小胶质细胞,使其分泌炎症因子,同时诱导氧化损伤,加重细胞毒性作用。     

氧化应激对鱼藤酮PC12细胞中的毒性作用

目的探讨氧化应激在鱼藤酮多巴胺能神经元PC12细胞中的毒性作用。方法用高分化的PC12细胞作为多巴胺能神经元的细胞模型,经不同浓度的鱼藤酮处理,观察细胞形态及其超微结构,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性和增殖抑制及细胞代谢状态,生化分析法检测SOD活力、MDA含量,特异性DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS水平。结果经鱼藤酮处理24 h后PC12细胞突起样结构消失,细胞体积变小、形态变圆,部分细胞呈悬浮状态;细胞线粒体代谢和超微结构发生改变;PC12细胞增殖抑制,细胞活性降低;细胞内的SOD活力下降,MDA含量增高;荧光探针标记显示PC12细胞荧光强度增加,细胞内ROS含量增加。结论鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,可抑制细胞增殖,影响线粒体代谢,氧化应激可能在鱼藤酮的多巴胺神经元毒性机制中起作用。     

鱼藤酮对星形胶质细胞缝隙连接耦联功能的影响

目的观察鱼藤酮对星形胶质细胞缝隙连接耦联功能的影响。方法建立星形胶质细胞与常用的神经细胞株PC12细胞共培养鱼藤酮染毒模型,应用划痕染料标记示踪技术观察染毒星形胶质细胞缝隙连接耦联功能的变化,采用RT-PCR法检测CX43 mRNA的表达,Western Blot技术观察CX43蛋白活性变化。结果随着染毒剂量的增加,鱼藤酮对星形胶质细胞缝隙连接耦联功能的抑制作用愈发明显;与正常对照组比较,0.5、1.0μmol/L鱼藤酮染毒组CX43 mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论鱼藤酮可引起星形胶质细胞CX43表达水平降低,显著抑制细胞缝隙连接耦联功能,这可能是其诱导神经细胞损伤的原因之一。     

慢性鱼藤酮中毒诱导的细胞凋亡机制初步探讨

目的观察小剂量鱼藤酮长期暴露对大鼠纹状体一氧化氮（nitricoxide,NO）、细胞色素C（cytochromeC,Cyt-C）含量及Caspase-3蛋白表达的影响,探讨鱼藤酮诱导的中脑多巴胺神经元凋亡机制。方法采用Wistar大鼠72只,随机分为对照组、鱼藤酮中毒0.335mg/kg、0.670mg/kg、1.005mg/kg组,连续皮下注射鱼藤酮30d、60d和90d,以生化法和Western-blotting法检测大鼠纹状体Cyt-C含量及Caspase-3蛋白的表达。结果小剂量鱼藤酮长期中毒可导致大鼠纹状体内NO和Cyt-C含量增加（P〈0.05）,且呈时间—剂量效应关系。Westernblotting结果证实小剂量鱼藤酮重复注射可导致纹状体Caspase-3蛋白表达增强。结论低剂量鱼藤酮重复注射可使动物脑组织NO、Cyt-C含量增高及Caspase-3蛋白表达增强,NO介导的细胞凋亡机制可能参与了鱼藤酮中毒所致的多巴胺神经元死亡。     

特发性肾病综合征血清IL-2、IL-4、IL-6的临床意义

目的探讨特发性肾病综合征患儿治疗前后血清IL-2、IL-4、IL-6变化的临床意义。方法采用双抗体夹心ELISA法检测57例特发性肾病综合征患儿(INS组)治疗前后的血清IL-2、IL-4、IL-6的水平,同时取同期健康儿童44例作为对照。结果 INS组患儿治疗前血清IL-2、IL-6水平明显高于治疗后和健康对照组(p<0.05),血清IL-4水平治疗前明显低于治疗后和健康对照组(p<0.05)。结论血清IL-2、IL-4、IL-6变化水平可作为INS疾病病情程度和预后的参考指标。     

鱼藤酮对星形胶质细胞内游离钙浓度的影响及其机制

[目的]研究鱼藤酮引起的星形胶质细胞内游离钙浓度变化及其离子流动机制. [方法]以体外培养的大鼠中脑星形胶质细胞为研究对象,激光共聚焦结合Fluo-4荧光法动态测定细胞内游离钙浓度.[结果]鱼藤酮可浓度依赖性地引起星形胶质细胞内游离钙浓度升高.细胞内钙库释放抑制剂TMB-8、无钙缓冲液和钙通道阻滞剂MK-801、尼莫地平均可抑制鱼藤酮引起的细胞内钙浓度变化,但其抑制作用发挥的时间和程度均有显著不同. [结论]细胞内钙释放与细胞外钙内流共同参与了鱼藤酮引起的星形胶质细胞内游离钙浓度的升高,但细胞内钙释放发挥作用的时问稍迟,而鱼藤酮引起的细胞外钙内流主要由电压依赖武钙通道内流引起.     

C5aR拮抗剂在油酸诱导的小胶质细胞炎性改变中的作用

目的观察油酸(oleic acid,OA)及C5a受体(C5aR)拮抗剂(PMX53)干预后小胶质细胞的炎性改变,探讨C5a-C5aR在油酸诱导的小胶质细胞炎症中的作用。方法取新生1 d龄小鼠,分离脑组织,原代培养小胶质细胞并进行分离纯化及鉴定。纯化小胶质细胞随机分成5组,分别为正常对照组、OA 100μmol/L处理组、OA 100μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组、OA 200μmol/L处理组、OA 200μmol/L+PMX53 100 nmol/L处理组。应用Western印迹、ELISA法检测不同浓度OA及OA+PMX53干预后小胶质细胞Iba-1、C5aR蛋白及TNF-α表达变化。结果成功培养小胶质细胞,且纯度≥99%。不同浓度OA干预后,Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度较对照组明显升高(P<0.01);OA+PMX53干预组较OA组Iba-1及TNF-α浓度有所下降(P<0.01);OA+PMx53干预组较OA组C5aR蛋白表达有所下降(OA100 vs.OA100+PMX53,P<0.05,OA200 vs.OA200+PMX53,P<0.01)。200μmol/L OA干预组较100μmol/L OA干预组Iba-1、C5aR蛋白表达及TNF-α浓度高(P<0.01)。结论应用C5aR拮抗剂可以抑制油酸诱导的小胶质细胞的炎症反应,提示C5a-C5aR参与了油酸诱发的炎症反应,推测C5aR拮抗剂在神经系统炎性损伤中具有神经保护作用。     

急性白血病患者化疗前后IL-2及IL-6水平测定的临床意义

目的:探讨急性白血病患者化疗前后白介素-2(IL-2)及白介素-6(IL-6)水平变化对免疫功能影响的临床意义.方法:应用放射免疫分析法对57例急性白血病患者进行化疗后血清IL-2及IL-6含量检测,并与30例正常健康人作对照.结果:急性白血病初治组及短期完全缓解(CR)组IL-2水平分别为(18.69±9.41)ng/L,(29.36 ±6.30)ng/L,明显低于长期CR组(46.71 ±8.23)ng/L及正常对照组(53.62 ±8.86)ng/L;初治组及短期CR组IL-6水平分别为(125.86 ±15.78)ng/L,(82.27 ±10.21)ng/L,明显高于长期CR组(30.29±7.63)ng/L及正常对照组(23.46±6.32)ng/L.初治组IL-2和IL-6水平与长期CR组及正常对照组比较差异有显著性,P<0.05.结论:初治及短期CB急性白血病患者IL-2水平低、IL-6水平高,造成免疫抑制状态,白血病易复发.随着CR时间的延长,免疫状态逐渐恢复.     

孟鲁司特对呼吸递合胞病毒毛细支气管炎患儿血清白介素-5及嗜酸粒细胞趋化蛋白表达的影响

【目的】 通过检测炎症因子白介素-5(IL-5)和嗜酸粒细胞趋化蛋白(eotaxin)的变化及临床表现,探讨孟鲁司特对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)毛细支气管炎(毛支)后气道炎症的干预作用。 【方法】 选择88例初次喘息发作的具有特应性体质的患儿作为研究对象,随机选择40例毛支患儿作为对照组予常规治疗;48例观察组在常规治疗的同时口服孟鲁司特钠。分别在急性期及恢复期检测血清IL-5及eotaxin水平的变化,门诊随访3月,观察有无喘息再次发作。 【结果】 毛支患儿急性期血清IL-5及eotaxin水平明显增高,经孟鲁司特干预后,恢复期IL-5及eotaxin水平明显下降。3个月内喘息再次发作人数情况比较,观察组与对照组相比,差异具有统计学意义。 【结论】 孟鲁司特对RSV毛支患儿炎性因子IL-5和eotaxin有下调作用,可控制毛细支气管炎后的气道炎症,对毛支后喘息的反复发作具有预防作用。     

被动吸烟孕母血浆白细胞介素-6和白细胞介素-10与早产关系的临床研究

目的研究被动吸烟孕妇血浆白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)在孕期的变化,探讨其与早产之间的关系。方法选取155例早产孕妇(28~36+6周)为研究组,并根据有无存在被动吸烟分成两组,研究组1为被动吸烟组,研究组2在妊娠期间无被动吸烟或吸烟;同时选取82例对照组孕妇(妊娠期无被动吸烟或吸烟且最后足月分娩的产妇)。采用酶联免疫吸附法,测定研究组1、2孕妇及对照组孕妇在相应孕周时的血浆IL-6和IL-10浓度。结果研究组1孕妇血浆IL-6浓度较研究组2和对照组明显升高(P0.05);而研究组1孕妇IL-10浓度较在研究组2降低,但其变化无显著意义(P0.05);研究组孕妇IL-10较对照组明显下降(P0.05)。结论孕期被动吸烟可致IL-6明显升高,及IL-10呈下降趋势,可能参与了被动吸烟引发早产高风险的机制,增加早产的发生风险。     

抵抗素与IL-6在妊娠期高血患者胎盘组织中的表达及临床意义

目的 研究抵抗素与白细胞介素-6(IL-6)在妊娠期高血患者胎盘组织中的表达并探讨其临床意义.方法 选取2013年6月至2014年10月在江汉大学附属医院妇产科分娩合并妊娠期高血压疾病的孕妇90例作为观察组,根据病情将其分为子痫前期轻度组和子痫前期重度组,每组45例,选取同期在江汉大学附属医院妇产科进行分娩的正常孕妇45例作为对照组,检测抵抗素和IL-6在所有研究对象胎盘组织中的表达.结果 与对照组相比,抵抗素在子痫前期轻度组、重度组患者胎盘中表达阳性率明显升高,差异具有统计学意义(x2轻=4.11,P＜0.05;x2重=13.52,P＜0.05),IL-6在子痫前期轻度组、重度组患者胎盘中表达阳性率明显升高,差异具有统计学意义(x2轻=13.26,P＜0.05;x2重=23.46,P＜0.05);与子痫前期轻度组相比,抵抗素在子痫前期重度组患者胎盘中表达阳性率明显升高,差异具有统计学意义(x2=3.87,P＜0.05),1L-6在子痫前期重度组患者胎盘中表达阳性率明显升高,差异具有统计学意义(x2 =4.41,P＜0.05).根据评分标准,与对照组相比,抵抗素在子痫前期轻度组、重度组患者胎盘组织中的表达明显升高,差异具有统计学意义(Uc蛏=3.28,P＜0.05;Uc重 =5.47,P＜0.05),IL-6在子痫前期轻度组、重度组患者胎盘组织中的表达明显升高,差异具有统计学意义(Uc轻=4.34,P＜0.05;Uc重=6.17,P＜0.05);与子痫前期轻度组相比,抵抗素在子痫前期重度组患者胎盘中表达程度明显升高,差异具有统计学意义(Uc=2.61,P＜0.05),IL-6在子痫前期重度组患者胎盘中表达程度明显升高,差异具有统计学意义(Uc=1.99,P＜0.05).结论 抵抗素与IL-6在妊娠期妇女胎盘组织中均有不同程度的表达,但在妊娠期高血压疾病患者胎盘组织中的表达较高,而且随着病情的加重,其表达水平逐渐增高,说明其水平的变化与疾病的严重程度有关,值得临床上进一步研究.     

早产儿脑白质损伤与宫内感染及白细胞介素-6相关性研究

目的 早产儿脑白质损伤与宫内感染及白细胞介素-6相关性研究,为临床诊治提供参考依据。 方法 2010年1月-2012年5月出生的168例早产儿纳入研究,分为WMD组和对照组。通过胎膜、胎盘病理检查判断宫内感染,颅脑超声检查判断WMD,酶联免疫吸附法检测脐带血IL-6水平。 结果 168例中宫内感染患病率为32.1%(54/168);脑白质损伤29例,宫内感染患者WMD检出率35.2%(19/54),高于无宫内感染者的8.8%(10/114)(χ²=17.899,P<0.001)。与对照组比较,WMD组胎龄、性别、出生体重及Apgar评分均差异无统计学意义(P>0.05)。脐带血IL-6水平比较,WMD组高于对照组(P<0.001);宫内感染者高于无宫内感染者(P<0.001)。 结论 宫内感染显著增加早产儿脑白质损伤的风险,细胞因子可能介导了宫内感染早产儿脑损伤的过程。     

煤工尘肺患者血清白细胞介素6及其可溶性受体含量的变化

目的探讨煤工尘肺患者血清白细胞介素6(IL -6)和可溶性IL-6受体(sIL-6R)水平的变化.方法用酶联免疫吸附试验法(ELISA法)检测148例不同期别煤工尘肺患者[无尘肺(0 )→Ⅰ→Ⅱ]及40例健康对照者血清的IL-6及sIL-6R水平.结果对照组、无尘肺(0 )组、Ⅰ期尘肺组及Ⅱ期尘肺组人群血清IL-6平均水平分别为:(7.1±6.8)、(7.9±6.8)、(12.6±11.7 )、(24.6±21.5)ng/L,统计学处理差异有显著性(P<0.05).但煤工尘肺患者血清sIL-6R水平与对照组的差异无显著性意义(P>0.05).结论 IL-6 介入了煤工尘肺的发生和发展过程,血清IL-6检测可能对煤工尘肺的早期诊断、疗效判断及病情监测有一定参考价值.     

白细胞介素6与血小板活化因子对中性粒细胞凋亡的抑制作用

应用血浆 Percoll梯度分离技术分离健康供血者的中性粒细胞 (PMN)并以 2× 10 7PMN/ml培养2 4h,实验分白细胞介素 6 (IL- 6 )、血小板活化因子 (PAF)单独处理组。 PAF受体拮抗剂 BN5 2 0 2 1预处理后再以 PAF、IL - 6分别处理组。吖啶橙和溴乙啶染色 ,荧光显微镜下观察细胞形态并记数进行细胞凋亡的定性定量分析。结果表明 ,IL- 6和 PAF均有抑制 PMN凋亡的作用。PAF受体拮抗剂 BN5 2 0 2 1能消除 IL- 6和PAF抑制 PMN凋亡的作用。提示 IL - 6抑制 PMN凋亡的机制可能是通过 PAF而实现的。从而从一个侧面说明了 IL- 6和 PAF介导的损伤后炎症反应及继发性器官功能衰竭可能与抑制中性粒细胞凋亡加剧炎症反应有关。     

孟鲁司特治疗COPD急性加重期的临床观察

目的观察孟鲁司特治疗慢性阻塞性肺病的疗效。方法将40例慢性阻塞性肺病患者随机分为2组各20例,对照组给予支气管扩张剂,抗生素和氧疗常规治疗,治疗组常规治疗基础上加用孟鲁司特片口服。结果经过2周的治疗,患者的临床症状、肺功能、血气指标均有明显改善,治疗组和对照组有显著差异。结论孟鲁司特治疗慢性阻塞性肺病的疗效较好,具有良好的依从性和安全性,值得临床推广应用。     

Dracocephalum moldavica Ethanol Extract Suppresses LPS-Induced Inflammatory Responses through Inhibition of the JNK/ERK/NF-κB Signaling Pathway and IL-6 Production in RAW 264.7 Macrophages and in Endotoxic-Treated Mice

The excessive synthesis of interleukin-6 (IL-6) is related to cytokine storm in COVID-19 patients. Moreover, blocking IL-6 has been suggested as a treatment strategy for inflammatory diseases such as sepsis. Sepsis is a severe systemic inflammatory response syndrome with high mortality. In the present study, we investigated the anti-inflammatory and anti-septic effects and the underlying mechanisms of Dracocephalum moldavica ethanol extract (DMEE) on lipopolysaccharide (LPS)-induced inflammatory stimulation in RAW 264.7 macrophages along with septic mouse models. We found that DMEE suppressed the release of inflammatory mediators NO and PGE₂ and inhibited both the mRNA and protein expression levels of iNOS and COX-2, respectively. In addition, DMEE reduced the release of proinflammatory cytokines, mainly IL-6 and IL-1β, in RAW 264.7 cells by inhibiting the phosphorylation of JNK, ERK and p65. Furthermore, treatment with DMEE increased the survival rate and decreased the level of IL-6 in plasma in LPS-induced septic shock mice. Our findings suggest that DMEE elicits an anti-inflammatory effect in LPS-stimulated RAW 264.7 macrophages and an anti-septic effect on septic mouse model through the inhibition of the ERK/JNK/NF-κB signaling cascades and production of IL-6.     

Baseline Repeated Measures from Controlled Human Exposure Studies: Associations between Ambient Air Pollution Exposure and the Systemic Inflammatory Biomarkers IL-6 and Fibrinogen

Introduction

Systemic inflammation may be one of the mechanisms mediating the association between ambient air pollution and cardiovascular morbidity and mortality. Interleukin-6 (IL-6) and fibrinogen are biomarkers of systemic inflammation that are independent risk factors for cardiovascular disease.

Objective

We investigated the association between ambient air pollution and systemic inflammation using baseline measurements of IL-6 and fibrinogen from controlled human exposure studies.

Methods

In this retrospective analysis we used repeated-measures data in 45 nonsmoking subjects. Hourly and daily moving averages were calculated for ozone, nitrogen dioxide, sulfur dioxide, and particulate matter ≤ 2.5 μm in aerodynamic diameter (PM_2.5). Linear mixed-model regression determined the effects of the pollutants on systemic IL-6 and fibrinogen. Effect modification by season was considered.

Results

We observed a positive association between IL-6 and O₃ [0.31 SD per O₃ interquartile range (IQR); 95% confidence interval (CI), 0.08–0.54] and between IL-6 and SO₂ (0.25 SD per SO₂ IQR; 95% CI, 0.06–0.43). We observed the strongest effects using 4-day moving averages. Responses to pollutants varied by season and tended to be higher in the summer, particularly for O₃ and PM_2.5. Fibrinogen was not associated with pollution.

Conclusions

This study demonstrates a significant association between ambient pollutant levels and baseline levels of systemic IL-6. These findings have potential implications for controlled human exposure studies. Future research should consider whether ambient pollution exposure before chamber exposure modifies IL-6 response.     

孟鲁司特联合舒利迭对支气管哮喘患儿细胞免疫及微量元素的影响

目的探讨孟鲁司特联合舒利迭治疗支气管哮喘患儿的临床疗效及其对患儿细胞免疫及微量元素的影响。方法选择2015年6月至2017年2月凉州医院儿科收治的支气管哮喘患儿60例,随机分为两组,每组30例,对照组患儿接受舒利迭治疗,联合组患者在对照组基础上接受孟鲁司特治疗。评价两组患儿治疗的临床疗效,比较两组患儿治疗前后肺功能、免疫功能及微量元素的变化情况。结果两组患者经治疗1s用力呼出量(FEV1)、用力肺活量(FVC)以及呼吸峰流速(PEF)较治疗前均显著升高(P0.05),且联合组显著高于对照组(P0.05);联合组治疗的总有效率显著高于对照组(P0.05);两组患者较治疗前IFN-γ均显著升高,且联合组显著高于对照组(P0.05),两组患者IL-13较治疗前均显著降低,且联合组显著低于对照组(P0.05);除Cu之外,两组患者经治疗,Ca、Fe、Mg、Cu、Zn等微量元素较治疗前均显著升高(P0.05),且联合组微量元素显著高于对照组(P0.05)。结论孟鲁司特联合舒利迭治疗支气管哮喘患儿疗效显著,可有效改善患儿肺功能及免疫功能,可能有利于促进患儿机体微量元素的平衡。