镍铬钴混合物对小鼠肝脏毒作用机制的研究

目的：探讨镍铬钴混合物致小鼠肝脏损伤的机制，为早期防治镍铬钴混合物联合毒性所致的肝脏损伤提供理论依据。方法：模拟金川矿区矿石中Ni、Cr、Co平均含量百分比（0．26：0．30：0．02），连续10d小鼠腹腔注射硫酸镍2．5mg/kg、重铬酸钾0．14mg/kg、氯化钴0．41mg/kg及混合物0．09，0．17mg/kg染毒。制备肝细胞膜，采用定磷比色法检测肝细胞膜Ca^2 -ATPase活性；PDE法检测钙调素（CaM）含量；TBA法检测MDA含量和邻苯三酚自氧化改进法测定SOD活性。结果：各单体和混合物明显抑制肝细胞膜Ca^2 -ATPase活性，使肝组织中钙调素（CaM）含量降低，MDA含量升高的同时抑制SOD活性，尤以混合物组显著，并且混合物毒性大于各单体毒作用。结论：混合物在体内可能产生联合毒性，抑制肝细胞膜Ca^2 -ATPase活性，使钙调素（CaM）含量降低，导致钙稳态失衡；同时引起肝细胞脂质过氧化作用增强而致肝脏损伤。     

硫酸镍、重铬酸钾和氯化钴混合物对小鼠心肌钠钾泵、钙泵活性的影响

模拟金川矿区矿石镍、铬、钴平均含量百分比(0.260.300.02),连续10日小鼠腹腔注射硫酸镍、重铬酸钾、氯化钴及其混合物染毒.制备心肌细胞膜,定磷比色法检测各单体和混合物对钠钾泵、钙泵活性的影响.结果发现备单体和混合物明显抑制心肌细胞膜钠钾泵、钙泵活性.提示混合物在体内可能产生联合毒性,引起心肌细胞膜电位变化、离子运动异常,从而导致心肌损伤.     

中医药防治硫酸镍对大鼠肾脏Na＋-K＋-ATP酶、Ca2＋-ATP酶活性影响的实验研究

目的　检测肾小管细胞膜Na K ATP酶、Ca2 ATP酶活性 ,探讨扶正解毒汤 (FJD)对NiSO4 致肾脏损伤的防治作用及其机理。方法　NiSO4 腹腔注射染毒 ,FJD灌胃防治 ,测定肾小管细胞膜Na K ATP酶及Ca2 ATP酶活性进行评价。结果　NiSO4 组与NS组比较 ,两种酶活性均明显抑制 (P <0 0 1)。用FJD防治后 ,两种酶活性明显改善 (P<0 0 1)。结论　FJD对NiSO4 致大鼠肾小管细胞膜Na K ATP酶、Ca2 ATP酶活性的抑制有恢复作用 ,可有效防治NiSO4 对肾脏的损害。     

硫酸镍对大鼠心肝肾ATPase毒性的实验研究

目的 探讨硫酸镍对心、肝、肾的毒作用及其机理。方法 对大鼠腹腔注射硫酸镍2.5、5.0、10.0dmg/kg连续10d染毒,制备心肌、肝及肾小管细胞膜,定磷比色法检测细胞Na^ .K^ -ATPase、Ca^2 -ATPase活性。结果 硫酸镍明显抑制心肌、肝、肾小管细胞膜Na^ .K^ -dATPasc、Ca^2 -ATPase活性,其抑制作用肾脏最强,心脏次之,肝脏最轻。结论 硫酸外长致心肝肾损伤与其抑制细胞膜ATPase活性有关。     

氯丙嗪和异搏定对镉致大鼠肝肾毒性的影响

目的　研究氯丙嗪和异搏定对镉致大鼠肝肾毒性的影响 ,重点观察Na+ - K+ -ATPase和Ca2 + -ATPase活性的改变。方法　大鼠按体重随机分成 4组 ,第 1组为对照组 ,皮下注射 0 . 9%氯化钠 ;第 2组为单纯染镉组 ,皮下注射7μmol/kg的氯化镉溶液 ;第 3、 4组分别腹腔注射氯丙嗪 5mg/kg (CPZ干预组 )或异搏定 4mg/kg (Ver干预组 ) ,1h后皮下注射 7μmol/kg的氯化镉。各组处理 6周后 ,测定尿乳酸脱氢酶 (LDH)、尿蛋白、尿镉以及肝肾组织中镉、Na+ - K+ - ATPase和Ca2 + ATPase的活性。结果　单纯染镉组与对照组比较 ,尿LDH、尿蛋白和尿镉含量明显升高 ;肝肾组织中Na+ - K+ - ATPase和Ca2 +- ATPase活性和镉含量也明显升高 ,统计学差异非常显著 (P <0 . 0 1) ;CPZ干预组与单纯染镉组比较 ,尿LDH、尿蛋白和尿镉含量及肝肾组织中Ca2 + ATPase活性明显下降 (P <0. 0 5 ,P <0 .0 1) ;Ver干预组尿蛋白、尿镉和肝肾组织中的Na+ - K+ -ATPase和Ca2 + ATPase活性明显低于单纯染镉组 ,统计学差异显著 (P <0. 0 5 ,P <0. 0 1) ,肝、肾、尿中镉含量均明显降低 ,说明Ver可抑制镉的吸收。结论　氯丙嗪和异搏定均对镉毒性有不同程度的拮抗作用。     

硫酸镍对小鼠脑组织钙调素、ATP酶活性的影响

为探讨镍化合物对中枢神经系统毒作用及其机理,用小鼠腹腔注射(ip)硫酸镍染毒,检测小鼠自发活动和协调运动;并于0～4℃条件下制备脑匀浆,梯度分离酶蛋白,用比色法检测脑组织中Na+·K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性及钙调素(CaM)含量.结果表明ip染毒后小鼠脑匀浆中Na+·K+-ATPase、Ca2+-ATPase活性及钙调素含量明显降低.提示镍可通过血脑屏障,抑制能量供给、信息传递,导致外周运动神经瘫软,小鼠活动次数降低,伏着力下降,运动失调.     

地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响

目的研究地卓西平对甲基汞致大鼠脑皮质细胞内钙稳态失调的影响。方法 Wistar大鼠32只,按体重随机分成4组,每组8只。第1组为对照组,腹腔注射0.9%氯化钠;第2组为低剂量甲基汞染毒组,腹腔注射4μmol/kg的甲基汞溶液;第3组为高剂量甲基汞染毒组,腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;第4组为地卓西平预处理组,隔日皮下注射0.3μmol/kg地卓西平,2 h后腹腔注射12μmol/kg的甲基汞溶液;注射容量均为5 ml/kg,染毒4周,每周5次。观察神经细胞内Ca2＋浓度及其凋亡情况,同时测定脑皮质Hg含量和与维持钙稳态相关的酶Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性。结果染毒4周后,随着染毒剂量的增加,脑皮质Hg含量和细胞内Ca2＋浓度均明显升高（P〈0.01）;细胞凋亡率明显高于对照组（P〈0.01）;脑皮质Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性均不同程度的受到抑制。地卓西平预处理可以明显缓解神经细胞凋亡和细胞内Ca2＋超载,对Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性也有一定程度的恢复作用。结论甲基汞通过抑制与维持钙稳态相关的酶Na＋-K＋-ATPase和Ca2＋-ATPase活性,干扰神经细胞内钙稳态,进而造成神经细胞凋亡。地卓西平可以阻断Ca2＋通道对钙稳态失调引起的细胞损伤有拮抗作用。     

硫酸镍、重铬酸钾和氯化钴混合物联合毒性的评价

金川地区矿石镍、铬、钴平均含量百分比为０２６∶０３０∶００２，矿石中矿物构成以镍、铬、钴含量较高。对它们独自的毒作用研究较多，本文进行混合物联合毒性的评价。现报告如下。材料与方法（１）材料：昆明种小白鼠，体重１８～２２ｇ，雌雄各半，由兰州医学院...     

硫酸镍,重铬酸钾和氯化钴混合物对小鼠心肌钠钾泵,钙泵活性？…

模拟金川矿区矿石镍、钴平均含量百分比,连续１０日小鼠腹腔注射硫酸镍,重铬酸钾,氯化钴及其混合物染毒。制备心肌细胞膜,定磷比色法检测各单体和混合物对钠钾泵、钙泵活性的影响。结果发现：各单体和混合物明显抑制心肌细胞膜钠钾泵、钙泵活性。     

镍铬钴混合物对心肌线粒体酶毒性的研究

镍、铬、钴广泛应用于工业生产,它们既是重要的工业元素,又是环境污染物之一.据报道接镍人群的心肌损伤与接镍剂量、时间呈正相关[1];六价铬动物急性毒性可出现心肌退行性变、心肌纤维肿胀、横纹消失[1];急性和亚急性钴化合物中毒的动物,可出现心肌营养不良和灶性心肌炎[2].甘肃富产镍矿,金川矿区矿石镍、铬、钴平均含量百分比为0.26∶0.30∶0.02,矿石中矿物构成以镍、铬、钴含量较高.本文通过对心肌线粒体酶活性的检测.拟从亚细胞水平探讨混合物的心脏毒作用机理,为早期防治镍、铬、钴联合毒性所致的心肌损伤提供理论依据.     

2型糖尿病并糖尿病足患者中血栓素A2、前列环素的变化及临床意义

目的探讨2型糖尿病(T2DM)合并糖尿病足(DF)患者血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)的变化情况及其与糖尿病足病情的关系。方法 60例T2DM并DF患者分为DF非坏疽组38例和DF坏疽组22例,30例健康体检者为对照组,应用放免法测定血浆TXA2和PGI2的稳定代谢产物血栓素B2(TXB2)和6-酮-前列环素(6-keto-PGF1α)含量,同时观察DF患者的病程、体质指数、血压、血糖、胰岛素、糖化血红蛋白、血脂、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和踝肱动脉指数(ABI)的变化,并分析其与TXB2和6-keto-PGF1α的关系。结果糖尿病患者存在明显的TXA2和PGI2平衡异常。糖尿病足患者的血浆TXB2明显高于对照组(P<0.01),而血浆6-keto-PGF1α水平明显低于对照组(P<0.01),糖尿病足患者的TXB2/6-keto-PGF1α(T/P)明显高于对照组,DF坏疽组比DF非坏疽组更为严重(P<0.01)。糖尿病足组患者的T/P值与病程、总胆固醇、低密度胆固醇、空腹血糖、餐后2小时血糖和HOMA-IR呈正相关关系(P<0.05,P<0.01),与ABI呈负相关关系(P<0.01)。结论检测血浆TBA2与6-keto-PGF1α水平可提示血管内皮细胞的损伤,早期判断糖尿病足患者血管病变的程度,及早采取治疗措施。     

2型糖尿病合并高同型半胱氨酸血症患者血浆CRP水平的变化及临床意义

[目的]探讨血浆C-反应蛋白(CRP)水平的变化在2型糖尿病合并高同型半胱氨酸血症患者发病中的临床意义. [方法]2型糖尿病患者100例,其中合并高同型半胱氨酸血症组50例,单纯糖尿病组50例,正常对照组100例.比较各组间血浆CRP,血脂及同型半胱氨酸. [结果]2型糖尿病组CRP水平明显高于对照组(P＜0.05),2型糖尿病合并高同型半脱氨酸血症组CRP水平明显高于无高同型半胱氨酸血症组(P＜0.05). [结论]2型糖尿病合并高同型半胱氧病血症患者CRP水平明显升高,炎症可能是2型糖尿病和高同型半胱氨酸血症的共同危险因子.     

雌激素对子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞合成NGF及COX-2的影响及传导通路研究

目的 观察雌激素(E2)对子宫内膜异位症(EMs)患者在位子宫内膜间质细胞(ESC)合成神经生长因子(NGF)及环氧化酶-2(COX-2)的影响,以及阻断核因子-κB(NF-κB)信号通路后ESC合成NGF及COX-2的变化,探讨雌激素导致EMs患者疼痛的可能信号传导通路.方法 体外分离培养42例EMs患者在位ESC,用10-8 mol/L E2(E2组)、25 μmol/L NF-κB抑制剂(PDTC)+ 10-8mol/L E2(E2+PDTC组)处理细胞24h后,采用Western blot及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术分别检测ESC合成NGF、COX-2蛋白及mRNA水平的变化.结果 E2组NGF、COX-2的蛋白及mRNA均高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为4.745、6.317、3.465、5.443,均P＜0.05).E2+ PDTC组NGF、COX-2的蛋白及mRNA均低于E2组,差异均有统计学意义(t值分别为3.675、5.319、7.132、8.514,均P＜0.05),但仍高于对照组,差异均有统计学意义(t值分别为3.526、4.733、4.261、5.513,均P＜0.05).结论 在体外,雌激素可促进EMs患者在位ESC中NGF、COX-2表达,PDTC可部分抑制这种作用,说明NF-κB通路参与了雌激素调节EMs在位ESC中NGF、COX-2表达调控,阻断和调控NF-κB信号通路的活性可能为治疗EMs提供新策略.     

饮酒对尿2 -硫代噻唑烷-4-羧酸排泄的影响

目的观察饮酒对二硫化碳(CS2)接触者及非接触者尿2-硫代噻唑烷4羧酸(TTCA)排泄的影响。方法(1)男性非接触CS2志愿者10人,一次饮用38。白酒150ml或250ml,高效液相色谱法观察其尿TTCA排泄动态;(2)CS2作业男工152人,非接触者60人,分别收集班末尿和晨尿进行TTCA测定并进行问卷调查;同时进行个体空气采样和CS2浓度气相色谱法测定。结果非接触者一次饮白酒150ml后3h尿TTCA水平达峰值,12h后降至饮前水平(餐前0．5h,饮酒后1、3、12h中位数分别为0．045、0．068、0．099、0．046mg/gCr,n=10);TTCA水平随饮白酒剂量的增加而增高,饮0、150、250ml白酒者TTCA水平(中位数)分别为0．036、0．064、0．609mg/gCr(n=5,饮后3h)。CS2浓度为≤10．0、10．1～50．0、>50．0mg/m3时,CS2接触者TTCA有随CS2浓度增高而上升的趋势;对照组中饮白酒和啤酒者TTCA水平似高于不饮者,而接触组TTCA水平则随饮酒指数的增加而呈降低趋势。结论大量饮酒可影响尿TTCA水平,在进行CS2生物监测时,应避免在大量饮酒后12h内采集尿样,以避免饮酒对监测结果的干扰作用。     

DEHP对小鼠淋巴细胞分泌IL-2影响

目的 通过邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)影响小鼠淋巴瘤细胞(EL4)分泌白细胞介素-2(IL-2)蛋白影响机制研究,探讨DEHP对辅助性T细胞1(Th1)型细胞因子影响.方法 不同浓度DEHP染毒以25 ng/mL佛波酯(PMA)+1μg/mL离子霉素(Ion)激活的EL4细胞,并用钙调神经磷酸酶抑制剂FK506进行干预;实验6 h用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测活化T细胞核因子(NFAT)的mRNA表达;实验48 h用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清液中IL-2蛋白表达.结果 与激活剂组的(72.59±9.05)pg/mL比较,10,50 μmol/L DEHP染毒组的IL-2蛋白分泌量为(36.00±5.10),(32.00±1.86)pg/mL,明显降低EL4细胞分泌IL-2蛋白(P<0.01);50μmol/L DEHP明显升高了EL4细胞中NFAT2 mRNA相对含量,且降低了NFAT1 mRNA相对含量(P<0.05);0.05,0.5 μmol/L FK506未明显影响IL-2蛋白表达;Spearman相关分析表明,DEHP影响IL-2蛋白与NFAT mRNA表达元相关.结论 DEHP可能是通过NFAT非依赖途径影响EL4细胞分泌IL-2蛋白.     

Ang-2和茶多酚对缺氧内皮细胞分泌ET影响

目的观察缺氧条件下血管紧张素（Ang-2）对血管内皮细胞（VEC）分泌内皮素（ET）的影响及茶多酚的保护作用。方法将VEC分为空白对照组、单纯缺氧组、Ang-2组、缺氧＋Ang-2组、缺氧＋Ang-2＋高浓度茶多酚组、缺氧＋Ang-2＋低浓度茶多酚组。除空白对照组和Ang-2组外，其他各组置丁低压舱内进行缺氧暴露。用放免法测定各组ET含量。结果（1）缺氧和ET可促进VEC分泌ET增加（P〈0．01）。（2）茶多酚能显著降低缺氧加Ang．2促VEC分泌ET的作用，在6和24h时，低浓度茶多酚组的ET含量低于高浓度组（P〈0．01）。结论缺氧条件下Ang-2可显著增加VEC分泌ET的功能，茶多酚能显著抑制缺氧和Ang-2促VEC分泌ET的作用，且低浓度茶多酚的保护作用要优于高浓度组。     

新生大鼠坏死性小肠结肠炎肠组织分泌型磷脂酶A2含量变化及意义

目的 通过观察罹患坏死性小肠结肠炎(necrotizing enterocolitis,NEC)的新生SD大鼠肠组织中分泌型磷脂酶A2(secretory phospholipase A2,sPLA2)含量变化,探讨分泌型磷脂酶A2在坏死性小肠结肠炎发病中的作用.方法 将20只新生SD大鼠随机分成NEC模型组(n=10)和对照组(n=10).对NEC模型组新生SD大鼠自出生48 h后给予鼠乳代用品人工喂养,并对其进行100%氮气缺氧90 s和4℃冷刺激10 min处理,每天2次,连续处理3 d,建立新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎模型.在最后一次缺氧、冷刺激处理后24 h,将其空腹断头处死,同时处死对照组SD大鼠.对两组新生SD大鼠均留取回盲部近端肠管组织标本,分别进行肠组织损伤评分和肠组织分泌型磷脂酶A2含量检测.当标本组织学评分≥2分时,诊断为坏死性小肠结肠炎.采用酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测肠组织中分泌型磷脂酶A2含量(单位为:pg/mg prot).应用Kruskal-Wallis H检验等方法对两组大鼠肠组织中分泌型磷脂酶A2含量进行统计学分析(α=0.05).结果 NEC模型组新生SD大鼠相继出现腹泻、腹胀、萎靡、活动减少,生长减慢等症状;对照组新生SD大鼠进食及排便正常,无腹泻及腹胀症状,活动度良好,皮下脂肪丰满.NEC模型组和对照组肠组织损伤病理学评分(±s)分别为:3.300±0.850和0.450±0.400;肠组织分泌型磷脂酶A2含量(pg/mg prot)分别为1.752±0.483和0.669 ±0.180.两组间肠组织损伤评分和肠组织中分泌型磷脂酶A2含量比较,差异均有显著意义(P＜0.05);肠组织分泌型磷脂酶A2含量与相应平均损伤程度,均呈显著正相关关系(rsPLA2=0.834,P=0.000).NEC模型组新生SD大鼠坏死性小肠结肠炎发生率为100%(10/10),对照组无一例发生坏死性小肠结肠炎.结论 肠组织分泌型磷脂酶A2是导致坏死性小肠结肠炎发生的关键介质,持续过度表达分泌型磷脂酶A2介导,可致黏膜损伤和肠屏障功能障碍,从而引发坏死性小肠结肠炎.     

沥青烟对小鼠血清及脑组织氧化损伤指标的影响

目的 探讨沥青烟对小鼠血清及脑组织中谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及过氧化氢(H2O2)、丙二醛(MDA)含量的影响.方法 将40只成年雄性小鼠按体重随机分为4组,分别为对照组(0 mg/m3)和低剂量(41 mg/m3,1/4 LD0)、中剂量(82 mg/m3,1/2 LD0)及高剂量(165 mg/m3,LD0)染毒组,每组10只.采用1 m3静式染毒柜行呼吸道吸入染毒,2 h/d,连续8周.测定各组小鼠血清和脑组织中GSH、H2O2、MDA含量及GSH-Px活力.结果 与对照组比较,染毒组小鼠血清和脑组织匀浆中GSH含量和GSH-Px活力显著下降,H2O2 、MDA含量显著升高.结论 沥青烟可致小鼠脑组织细胞发生氧化性损伤,使机体的抗氧化能力降低.     

PCOS患者IRS-2及酪氨酸磷酸化的表达

目的 研究多囊卵巢综合征患者脂肪组织胰岛素受体底物-2蛋白的表达及其酪氨酸磷酸化,探讨其在多囊卵巢综合征产生胰岛素抵抗中的作用.方法 采用放射免疫法检测多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组(24例)、多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组(15例)及对照组(20例)血清空腹胰岛素的浓度;葡萄糖氧化酶法测定血浆空腹血糖;稳态模型计算胰岛素抵抗指数;Western blot方法检测胰岛素受体底物-2蛋白的表达,应用免疫沉淀及增强化学发光法检测酪氨酸磷酸化程度.结果 ①多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组患者血清空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数均显著高于多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组与对照组(F=66.25,P＜0.01;F=97.31,P＜0.01);多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组患者血清空腹胰岛素及胰岛素抵抗指数亦显著高于对照组(均P＜0.05);②多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组、多囊卵巢综合征非胰岛素抵抗组及对照组3组相比较,胰岛素受体底物-2蛋白表达无显著性差别;③多囊卵巢综合征胰岛素抵抗组胰岛素受体底物-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度显著降低(F=48.12,P＜0.05).结论 多囊卵巢综合征患者脂肪组织胰岛素受体底物-2蛋白质酪氨酸磷酸化程度降低,可能是其产生胰岛素抵抗的机制之一.     

脐血多种细胞因子表达水平及其临床意义

目的 :探讨新生儿脐血中白细胞介素 - 2 (IL - 2 )、可溶性白细胞介素 - 2受体 (s IL - 2 R)、膜白细胞介素 - 2受体 (m IL - 2 R)、白细胞介素 - 6 (IL - 6 )和可溶性细胞间粘附分子 - 1(s ICAM- 1)的表达水平及其临床意义。方法 :以 EL ISA法检测新生儿脐血中 IL - 2、s IL - 2 R、m IL - 2 R、IL - 6和 s ICAM- 1含量 ,以 Ficoll- Hypaque常规分离产妇外周血单个核细胞 (PBMC)和脐血单个核细胞 (CBMC) ,用生物素 -链霉亲和素 (BSA)系统检测 m IL - 2 R表达水平。结果 :产妇外周血血清中 IL - 2、s IL - 2 R、m IL - 2 R、IL - 6和 s ICAM - 1含量分别为 (9.6 7± 4 .2 6 ) pg/ m l、(2 4 6 .5 0± 97.30 ) pg/ ml、 (3.73±1.0 3) %、(6 .6 7± 1.4 2 ) pg/ ml和 (5 6 0 .70± 136 .5 0 ) ng/ m l。新生儿脐血中 IL - 2、s IL - 2 R、m IL - 2 R、IL - 6和 s ICAM- 1含量分别为 (13.4 7± 3.4 0 ) pg/ ml、(15 5 .0 0± 83.5 0 ) pg/ m l、(1.30± 0 .4 5 ) %、(12 .87± 3.15 ) pg/ m l和 (32 1.2 0± 10 2 .2 0 ) ng/ ml。脐血 IL - 2、s IL - 2 R、m IL - 2 R、IL - 6、s ICAM- 1含量与产妇外周血相比 ,差异均有显著性 (P<0 .0 1)。结论 :脐血虽含有较丰富的天然造血细胞因子 ,但总体细胞因子水平