用PCR/RFLP技术对福建省宁化林区鼠蜱类中斑点热群立克次体的检测

目的 了解福建省宁化林区斑点热自然疫源地存在情况.方法 用聚合酶链反应(PCR)对该林区鼠、蜱类中感染斑点热群立克次体(SFGR)进行扩增.用限制性酶切片段长度多态分析(RFLP)法对分离株NH-97进行鉴定,并同已知的西伯利亚立克次体等国际标准株进行比较.结果 从越原血蜱、金泽革蜱、微小牛蜱中扩增出SFGR特异的DNA片段,NH-97分离株的PCR产物经PstI和RsaI酶切后发现它们的酶切图谱与西伯利亚立克次体246国际标准株相同.从社鼠,黄胸鼠脏器中扩增出康氏立克次体DNA片段.由不同来源批次的越原血蜱中扩增出近缘于日本立克体DNA片段和相关序列提示:可能是斑点热群立克次体新成员.结论 福建宁化林区除存在西伯利亚立克次体外,还可能存在康氏立克次体,日本立克次体等多种斑点热群立克次体的疫源地.     

黑龙江立克次体蜱传斑点热的病原学研究

目的 对我国东北地区蜱传斑点热进行病原学和流行病学研究。方法 建立并应用分子立克次体学方法,包括单克隆抗体、SDS－PAGE、免疫印迹、DNA酶切图谱、PCR／RFLP、PCR／SSCP及DNA序列分析等。结果 （1）在种的水平上研究了黑龙江分离株（代表株HLJ－54、36）,从分类学上确定其属立克次体属、斑点热群的一个新种,命名黑龙江立克次体（R.heilongiangii);（2）发现其现症患,并从病人血液分离到一株与黑龙江立克次体相同性质的立克次体株,证实了其对人的致病性。结论 流行病学调查和病原学研究证实华北地区存在黑龙江立克次体蜱传斑点热疫源地。     

对福建省宁化林区鼠蜱类中斑点热群立克次体的检测

目的 了解福建省宁化林区斑点热自然疫源地存在情况。方法 用聚合酶链反应对该林区鼠、蜱类中感染斑点热群立克次体(SFGR)进行扩增。用限制性酶切片段长度多态分析(RFIP)法对分离株NH-97进行鉴定,并同已知的西伯利亚立克次体等国际标准株进行比较。结果 从越原血蜱、金泽革蜱、微小牛蜱中扩增出SFGR特异的DNA片段,NH-97分离株的聚合酶链反应产物经PstI和RsaI酶切后发现它们的酶切图谱与西伯利亚立克次体246国际标准株相同。从社鼠、黄胸鼠脏器中扩增出康氏立克次体DNA片段。由不同来源批次的越原血蜱中扩增出近缘于日本立克体DNA片段和相关序列提示：可能是斑点热群立克次体新成员。结论 福建宁化林区除存在西伯利亚立克次体外,还可能存在康氏立克次体、日本立克次体等多种斑点热群立克次体的疫源地。     

新疆西北部地区蜱类自然感染斑点热组立克次体的调查

北亚蜱媒立克次体病广泛分布于苏联亚洲部分,与我国新疆接壤的阿尔泰边区和哈萨克共和国早已报道有本病的自然疫源地。本文作者在新疆西北部地区采集各种蜱类,用血淋巴试验检查蜱媒斑点热组立克次体,证实新疆的察布查尔、昭苏、精河、阿勒泰、哈巴河和克拉玛依市存在斑点热组立克次体病的自然疫源地。由于所用抗原的精河株立克次体,其抗原性虽与北亚立克次体相近,但可能存在某些差异,因此,尚不能肯定属何种立克次体。本次调查发现边缘革蜱和草原革蜱携带斑点热组立克次体。边缘革蜱分布地区较广、携带率较高,是本组立克次体的重要媒介。     

广东省首次分离斑点热群立克次体

目的 从宿主动物及蜱中分离斑点热群立克次体，以了解广东省是否存在斑点热自然疫源地。方法 从广东省封开县七星自然保护区采用笼日法捕活鼠，采集鼠脾及鼠表的蜱，用PCR进行初筛，鸡胚卵黄囊培养法直接分离立克次体，血清学试验对分离株进行鉴定。结果 采集鼠脾103份，鼠表的蜱38匹；从2只针毛鼠体表捉获的蜱中分离到2株斑点热群立克次体，命名为GDFK58—2000株、GDFK59—2000株立克次体，经血清学鉴定为西伯利亚种。结论 首次从病原学上证实了广东省存在斑点热自然疫源地。     

二连浩特口岸鼠体寄生蜱感染病原体调查

目的 调查二连浩特口岸鼠体寄生蜱种群组成及自然感染病原体情况.方法 从捕获的鼠体上收集寄生蜱,提取单只蜱DNA基因组及总RNA,采用PCR或RT-PCR方法检测莱姆病螺旋体、Q热立克次体、巴贝西原虫、斑点热立克次体、无形体、森林脑炎病毒、布尼亚病毒、克里米亚-刚果出血热病毒.结果 共采集鼠体寄生蜱152只,分别为草原血蜱、银盾革蜱和亚东璃眼蜱,其中草原血蜱为优势种,占捕获总数的98.03％.从草原血蜱、银盾革蜱和亚东璃眼蜱中检测到斑点热立克次体19份,检出率为12.50％,其他病原体检测均为阴性.结论 二连浩特口岸地区存在斑点热立克次体自然疫源地.     

东北部分地区蜱携带几种病原立克次体的分子检测

目的为了解东北地区蜱中携带立克次体的情况。方法应用人工小时布旗法采集东北部分地区不同生境的游离蜱,采用PCR作斑点热立克次体、查菲埃立克体、人粒细胞无形体DNA检测。结果从东北地区全沟硬蜱和森林革蜱检出查菲埃立克体DNA,全沟硬蜱平均阳性率为3.29%,森林革蜱为1.88%;从全沟硬蜱检出人粒细胞无形体DNA,平均阳性率为2.98%;从嗜群血蜱检出斑点热立克次体DNA,其平均阳性率(6.67%)明显高于全沟硬蜱(1.69%)和森林革蜱(2.36%)。结论东北地区全沟硬蜱和森林革蜱可能是查菲埃立克体、人粒细胞无形体的主要携带媒介,嗜群血蜱主要携带斑点热立克次体,提示东北地区存在三种蜱媒立克次体病的自然疫源地。     

某部驻区蜱传斑点热自然疫源地调查

目的了解某部驻区蜱传斑点热的自然疫源地情况。方法进行蜱类与啮齿动物调查，利用立氏立克次体190kD外膜蛋白A(R．rOmpA)基因序列设计引物，对683只蜱类标本和146个鼠类脏器标本进行PCR检测，随机抽取一株森林革蜱阳性扩增产物进行序列测定。结果调查地区存在3种蜱、5种啮齿动物；从森林革蜱、嗜群血蜱和啮齿动物脏器标本中检测斑点热立克次体DNA片段，阳性率分别为53．81％、7．41％和6．16％；所测序列与前苏联的DaS 14株的同源性为100％，与我国检测的BJ-90、HLJ-054的同源性分别为88％和86％。结论调查地区存在与DaS14株型别一致的斑点热立克次体株。     

逊克县边疆俄罗斯民族村蜱携带斑点热群立克次体的调查

目的 调查黑龙江逊克县边疆俄罗斯民族村蜱携带斑点热群立克次体的调查.方法 采集2017年4-6月418只活蜱样本,利用PCR方法分别扩增斑点热群立克次体(SFGR)3种不同目的 基因的特异性片段,通过基因测序进一步鉴定.结果 在所有蜱中共检出斑点热群立克次体核酸阳性样本93例,经SFGR 3种不同目的 基因测序对比确定所有样本均属于同一种斑点热群立克次体,且为日本立克次体(Rickettsia japonica),感染率为22.25％(93/418).其中在全沟硬蜱中检测阳性样本62例,感染率为21.68％ (62/286);在嗜群血蜱中检测到阳性样本31例,感染率为23.48％(31/132).结论 Rickettsia japonica是该地区主要蜱携带病原体,并存在潜在威胁人类健康的风险,应加强对黑龙江逊克县边疆俄罗斯民族村地区媒介蜱的防治防控.     

黑龙江口岸蜱携带斑点热群立克次体及嗜吞噬细胞无形体复合感染调查

目的为了研究黑龙江地区密山、绥芬河、嘉荫、东宁、虎林、同江、逊克、萝北、牡丹江、黑河、饶河11口岸蜱类分布、携带及复合感染新发蜱传病原体的情况。方法 2014年4月到2015年10月,利用布旗法采集蜱类样本,通过建立斑点热群立克次体(spotted fever group Rickettsia,SFGR)及嗜吞噬细胞无形体(Anaplasma phagocytophilum,A.P.)特异性引物,利用PCR方法对所有样本进行特异性片段扩增,通过基因测序对五种新发蜱传疾病作进一步鉴定并分型。结果共采集1306只蜱标本,经分类鉴定分属于革蜱属的森林革蜱、硬蜱属的全沟硬蜱和血蜱属的嗜群血蜱和日本血蜱。共检测出528例(40.43%)斑点热群立克次体阳性样本和31例(2.37%)嗜吞噬细胞无形体阳性样本。并证实存在三种斑点热群立克次体,分别为劳氏立克次体Rickettsia raoultii、新塔拉塞维奇立克次体Candidatus Rickettsia tarasevichiae、黑龙江立克次体Rickettsia heilongjiangensis。共检测到复合感染12例,复合感染率为0.92%(12/1306)。结论黑龙江口岸媒介蜱类存在斑点热群立克次体及嗜吞噬细胞无形体的复合感染现象,提示黑龙江地区蜱媒疾病的危险程度很高,急需加强黑龙江口岸地区蜱媒传染病及其复合感染的监测与防控技术研究,进而建立科学合理的新发蜱媒疾病预警监测和防控技术体系。     

Ricettsioses studies. 2. Natural foci of rickettsioses in east Slovakia.

Natural foci of Q fever and of spotted fever group rickettsiae in the Košice district of east Slovakia are described and discussed. It was established that the natural focus of Q fever was a secondary one. Cattle were observed to be the main source of human infection and a high proportion of synanthropic rodents was found to be infested with Coxiella burnetii. The natural focus of spotted fever group rickettsiae was shown to be of a primary character, such rickettsiae circulating among ticks and small mammals. It is suggested that natural foci of spotted fever group rickettsiae in east Slovakia may be connected with the natural distribution of Dermacentor ticks.     

北京市昌平区西伯利亚立克次体的分离和鉴定

目的 对北京市昌平区中国疾病预防控制中心园区内刺猬携带的中华革蜱进行斑点热群立克次体（SFGR）的分离和鉴定。方法 采用形态学和分子生物学方法对SFGR进行鉴定,并进行系统进化特征分析。结果 SFGR对DH82细胞产生明显细胞病变;Gimenez染色后,可见较多清晰的立克次体被染成紫红色;细菌16S基因测定后,西伯利亚立克次体246株和西伯利亚立克次体BJ-90株相应核苷酸序列的同源性均为100%;系统进化分析显示,SFGR位于西伯利亚立克次体进化分支内,确认其为西伯利亚立克次体。结论 北京市昌平区存在西伯利亚立克次体,该地区存在北亚热自然疫源地的可能性。     

斑点热群立克次体HN-98株的分离和初步鉴定

目的 从海南省斑点热疫源地不明热病人体内分离斑点热群立克次体。方法 用鸡胚卵黄囊培养法直接从斑点热疫区一不明热病人血标本中分离立克次体,继之用分子生物学及血清学试验对分离株进行鉴定。结果 从海南省琼中县斑点热疫区一不明热男性民工的血标本中分离到了一株立克次体,命名为ＨＮ－９８株立克次体,西伯利亚种。结论 该结果进一步从病原学上证实海南省琼中县存在有斑点热疫源地。     

北京郊区旅游景点北亚蜱传斑点热分子流行病学调查

用ＰＣＲ／ＲＦＬＰ技术对北京郊区１１个旅游景点的媒介蜱及小哺乳动物进行斑点热群立克次体的检测，并进行了病原体分离和鉴定。结果从北京航空博物馆附近地区收集的刺猬和其体表寄生的中华革蜱中分离出２株斑点热群立克次体，分别命名为ＢＪＨ－９５株和ＢＪ－９５株，经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＰＣＲ／ＲＦＬＰ技术进行了鉴定认为是西伯利亚立克次体。结果证明了该立克次体在蜱和动物宿主间呈水平传播，并且表明在被调查的旅游景点中除航空博物馆附近地区外，大多数景点基本上是北亚热的安全区。在刺猬中分离出西伯利亚立克次体为国内、外首次报道     

浙江省蜱标本中斑点热群立克次体rOmpA和gltA基因检测

目的了解浙江省部分山区蜱中感染斑点热群立克次体的状况,探讨以外膜蛋白A（rOmpA）和柠檬酸合成酶基因（gltA）为靶基因的PCR方法可行性。方法利用PCR方法,检测天台县左溪镇和临安县西天目地区共46组蜱类标本中rOmpA和gltA基因特异片段。对所检测到的阳性结果进行克隆与序列测定,并进行聚类分析。结果从46组蜱标本中检测发现2组长角血蜱中斑点热群立克次体的rOmpA和gltA基因片段均为阳性,核酸序列基本一致,但推测斑点热群立克次体种的进化位置存在差异。结论浙江省部分山区存在蜱中感染斑点热群立克次体的状况。利用rOmpA和gltA基因能从标本中检测到斑点热群立克次体,但从2个结果推测立克次体的分类位置存在差异。     

Rickettsioses studies. 1. Natural foci of rickettsioses in the Armenian Soviet Socialist Republic.

Ixodid ticks collected in the Armenian SSR during 1971 and 1974 were positive for rickettsiae of the spotted fever group, as confirmed by haemocyte tests and by isolation experiments. Serum specimens collected from human beings and from domestic and wild animals in the same areas contained antibodies against such rickettsiae and against Coxiella burnetii. These results indicate the existence of mixed natural foci of rickettsioses of the spotted fever group and of Q fever in the Armenian SSR.     

Rickettsioses studies. 3. Natural foci of rickettsioses in south Bohemia.

Antibodies against Coxiella burnetii and against rickettsiae of the spotted fever group were found in human sera and in sera from domestic and wild animals collected in south Bohemia. Spotted fever group rickettsiae were also discovered in the tick Ixodes ricinus. These results indicate the presence of both types of rickettsiae in this part of Czechoslovakia. As no epizootics or epidemics of Q fever have as yet been reported in the area, it can be assumed that C. burnetii occurs in the latent state. The occurrence of spotted fever group rickettsiae is probably endemic among I. ricinus ticks and among small and larger wild mammals.     

Ecology of tick vectors of American spotted fever

The author reviews the natural history of the tick vectors of American spotted fever. The discussion concerns the ecology of the Rocky Mountain wood tick, Dermacentor andersoni, the American dog tick, Dermacentor variabilis, and the lone-star tick, Amblyomma americanum, all of which are proven vectors of Rocky Mountain spotted fever to man. Also included are the rabbit tick, Haemaphysalis leporispalustris and Dermacentor parumapertus, which very rarely bite man but which are considered of importance in maintaining and distributing Rickettsia rickettsi, the etiological agent of Rocky Mountain spotted fever, in nature. Brief reference is also made to recently developed techniques for studying the ecology of tick vectors.     

Fatal spotted fever rickettsiosis, Kenya

We report a fatal case of rickettsiosis in a woman from the United States living in Kenya, who had a history of tick exposure. Immunohistochemical staining of skin, kidney, and liver demonstrated spotted fever group rickettsiae. The clinical findings, severity, and fatal outcome are most consistent with Rickettsia conorii infection.