双酚A对小鼠早期胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 揭示双酚A的发育毒性及其毒作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将8．5日龄BalB/C小鼠胚胎与含双酚A的大鼠即刻离心血清共培养48h(双酚A终浓度为0，40．0，60．0，80.0,100.0mg/L），观察双酚A对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果 随着双酚A剂量的增加，胚胎在体外的生长发育受影响越严重，呈现出明显的剂量－反应关系。≥60mg/L的双酚A可诱发卵黄囊（VYS）生长和究化不良，生长迟缓及形态分化异常，严重者出现体位异常及各种畸形，如心脏发育迟缓，心包积液等。结论 在较高剂量下，双酚A对体外培养的小鼠胚胎具有一定的毒性作用，其中对卵黄囊胎盘的结构和功能的影响可能是其发育毒作用的重要基础之一。     

烹调油烟冷凝物对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的 观察烹调油烟冷凝物(Cooking Oil Fume Condensates，COFC)的体外发育毒性并探讨其可能的毒性作用机制。方法采用体外全胚胎培养模型，将植入后8．5d龄昆明种小鼠胚胎在大鼠即刻离心血清培养基中培养48h(COFC染毒浓度分别为0、20、40、80、160、320mg／L)，观察COFC对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果COFC在≥80ms／L以上剂量时能抑制胚胎生长发育和形态分化，诱发卵黄囊生长和血管分化不良，发育异常率增高；高浓度组能诱发多种畸形，主要为神经系统，心脏、肢芽等器官系统畸形。结论体外实验条件下，COFC对小鼠胚胎具有一定的胚胎毒性和致畸性。     

壬基酚对体外培养大鼠胚胎发育的毒性研究

目的 研究4-壬基酚(4-NP)在体外条件下对大鼠胚胎生长发育的影响，探讨其胚胎毒性作用机制。方法 采用植入后全胚胎培养模型，将9.5d Wistar大鼠胚胎与含4-NP的大鼠即刻离心血清共培养48h(4-NP终浓度为0，6.25，12.5，25，50，100mg/L)，观察4-NP对大鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响，并用光镜、电镜检测胚胎和卵黄囊的组织结构。结果 4-NP在25mg/L以上可诱发卵黄囊生长和血管分化不良、胚胎生长迟缓及器官形态分化异常，严重者出现神经系统、心脏、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形；100mg/L的4-NP对体外培养胚胎主要呈致死效应。光镜可见实验组胚胎多个器官组织出现病理改变，光镜和电镜下可见卵黄囊3层结构受损，以上结果均呈明显的剂量-反应关系。结论 4-NP对体外培养的大鼠胚胎具有-定的胚胎毒性。其胚胎毒性机制可能与4-NP对卵黄囊胎盘的结构和功能的破坏及其直接的细胞毒性有关。     

双酚A致体外培养大鼠胚胎发育毒性的时间-效应关系研究

目的探讨双酚A（BisphenolA）对大鼠胚胎毒性的时间-效应关系。方法采用全胚胎培养模型,对9.5d龄大鼠胚胎分别染毒BisphenolA（100mg/L）6、16、26、48h,观察体外培养胚胎生长发育的影响。结果早期暴露6h对体外培养的大鼠胚胎的生长发育无不良影响,染毒16h即可影响大鼠胚胎的生长发育,染毒26h和48h对胚胎生长发育和形态分化均有明显的抑制作用。光镜下发现只有染毒26h以上才出现卵黄囊及大鼠胚胎脑组织结构的改变。结论体外实验条件下,BPA对器官形成期的早期大鼠胚胎的毒性作用具有明显的时间-效应关系,其毒性表现为慢性毒性作用。     

邻苯二甲酸二-(2-乙基己基)酯对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

为探讨邻苯二甲酸 二 2 乙基己基酯 (Di 2 ethylhexylphthalate ,DEHP)对体外培养小鼠胚胎的发育毒性 ,采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8.5天龄Balb c小鼠胚胎移入含DEHP即刻离心血清培养 48h ,DEHP终浓度为 0、12 .5、2 5、5 0、10 0和 2 0 0mg L ,观察DEHP对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果显示DEHP对体外培养小鼠胚胎生长发育毒性的最大无作用剂量为 12 .5mg L ,≥ 2 5mg L的DEHP可诱发胚胎生长迟缓及组织器官形态分化异常 ,出现心脏、神经系统、腮弓发育异常及小肢芽、体位异常等畸形 ;10 0mg L的DEHP对体外培养胚胎偶尔呈致死效应 ;2 0 0mg L时各组织器官形态分化均出现了异常 ,但未发现死胎。上述改变具有明显的剂量 -效应及剂量 -反应关系。提示DEHP对体外培养的小鼠胚胎具有胚胎毒性 ,并以致畸效应为主     

氯化三丁基锡对体外培养小鼠胚胎毒性研究

目的观察氯化三丁基锡的体外培养小鼠胚胎毒性。方法采用全胚胎培养技术,将8.5 d龄昆明种小鼠胚胎置入含有不同浓度氯化三丁基锡的大鼠离心血清中旋转培养48 h,观察体外培养小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的变化。结果氯化三丁基锡在0.05 mg/L以上时能诱发卵黄囊生长和血管分化不良,胚胎发育异常率增高;高浓度组能诱发脑小、心脏畸形(心小和心包积液)、前肢芽小或无、无后肢芽。结论体外实验条件下,氯化三丁基锡对小鼠胚胎具有胚胎毒性和致畸性。     

人参皂甙Rb1对小鼠胚胎发育毒性的体外实验研究

目的　探讨人参皂甙Rb1对体外培养小鼠胚胎的发育毒性及其毒作用机制。方法　采用植入后全胚胎培养模型 ,将 8 .5日龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参皂甙Rb1的大鼠即刻离心血清中旋转培养 4 8小时 (Rb1终浓度分别为 0、5、15、30、4 0、5 0 μg ml) ,观察人参皂甙Rb1对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果　随着人参皂甙Rb1浓度的增加 ,反映胚胎生长发育的指标得分和总形态学得分均降低 ;浓度≥ 15 μg ml时 ,卵黄囊生长受抑制 ,血管分化不良 ;浓度较高时 ,可诱发胚胎畸形 ,包括脑部发育异常、体位未翻转、心包腔扩大等 ,严重者可见腹凸。结论　在较高浓度时 ,人参皂甙Rb1对体外培养的小鼠胚胎有一定的毒性作用 ,其中对卵黄囊胎盘结构和功能的影响可能是其发育毒作用的机制之一。     

应用全胚胎培养方法研究CrCl3对大、小鼠胚胎的发育毒性研究

目的 研究三价铬化合物的发育毒性及其种属差异。方法 采用植入后大、小鼠全胚胎培养技术,观察胚胎生长发育及组织分化的改变。结果 三氯化铬（CrCl3）影响大、小鼠胚胎的生长发育,CrCl3对大鼠或小鼠胚胎作用浓度在112．5μmol／L或150．0μmol／L以上时可导致大、小鼠胚胎体长、头长、卵黄囊直径及胚胎干重等指标明显低于对照组,形态学评分结果可见,CrCl3主要影响大、小鼠胚胎神经管、体屈、前肢芽及鳃弓等形态分化,高浓度组还可导致胚胎畸形发生率的明显升高。结论 表明CrCl3对体外培养的大、小鼠胚胎具有明显的发育毒性,且大鼠较小鼠敏感。     

应用全胚胎培养方法研究CrCl_3对大、小鼠胚胎的发育毒性研究

目的　研究三价铬化合物的发育毒性及其种属差异。方法　采用植入后大、小鼠全胚胎培养技术 ,观察胚胎生长发育及组织分化的改变。结果　三氯化铬 (CrCl3 )影响大、小鼠胚胎的生长发育 ,CrCl3 对大鼠或小鼠胚胎作用浓度在 112 5 μmol/L或 15 0 0 μmol/L以上时可导致大、小鼠胚胎体长、头长、卵黄囊直径及胚胎干重等指标明显低于对照组 ,形态学评分结果可见 ,CrCl3 主要影响大、小鼠胚胎神经管、体屈、前肢芽及鳃弓等形态分化 ,高浓度组还可导致胚胎畸形发生率的明显升高。结论　表明CrCl3 对体外培养的大、小鼠胚胎具有明显的发育毒性 ,且大鼠较小鼠敏感     

同型半胱氨酸对体外培养大鼠胚胎生长发育的影响

采用着床后体外全胚胎培养方法 ,观察同型半胱氨酸 (homocysteine,HCY)对大鼠胚胎生长发育的影响。将孕 9.5日龄大鼠胚胎移植于 HCY终浓度为 0、0 .15、1.5、2 .0、4.0、6 .0、8.0、10 .0 mm ol/L的全胚胎培养基中 ,于体外培养 48小时 ,观察 HCY对胚胎发育和器官形态分化的影响。结果显示 :HCY可影响大鼠胚胎在体外的生长发育 ,并呈现剂量 -效应关系 ;随着 HCY浓度的增加 ,卵黄囊体积减小、表面皱缩、血管减少及分化程度降低 ;胚胎生长发育迟缓并逐渐加重 ;同时伴有形态分化异常 ,出现多种畸形 ,主要畸形部位为神经系统和心脏等。上述结果提示 :HCY可能对胚胎有直接致畸作用 ,亦可能通过引起卵黄囊功能障碍而导致发育毒性。     

应用中脑细胞微团培养技术探讨双酚A的发育毒性

目的 为揭示双酚A(BPA)是否具有神经系统发育毒性及其毒作用机制提供实验依据。方法 采用微团培养技术观察不同浓度的BPA(0—60mg／L)对体外培养的13d龄Wistar大鼠胚胎中脑细胞分化的影响及其细胞毒性作用。结果 BPA对体外培养的大鼠胚胎中脑细胞的存活和分化均有抑制作用并呈现出明显的剂量反应关系。BPA对中脑细胞的50％细胞存活抑制浓度(ICV50)和50％分化抑制浓度(ICD50)分别为57．2mg/L和24．6mg／L。两者比值为2.33。结论 BPA对大岚胚胎中脑细胞分化的抑制作用大于对细胞存活的抑制作用。按照Flint等人推荐的体外致畸分类标准，BPA属于阳性致畸物。     

人参总皂甙对小鼠胚胎发育的影响

目的探讨人参总皂甙对体外培养的小鼠胚胎发育的影响。方法采用植入后全胚胎培养模型,将8.5d龄的ICR小鼠胚胎在含有不同浓度人参总皂甙的大鼠即刻离心血清中旋转培养48h(人参总皂甙终浓度分别为0,5,15,30,40,50mg/L),观察人参总皂甙对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化的影响。结果随着人参总皂甙浓度的增加,反映胚胎生长发育的指标得分和胚胎总形态学得分无明显变化,各剂量组与对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论人参总皂甙浓度达到50mg/L时,未见对体外培养的小鼠胚胎有毒性作用。     

酒精的发育毒性靶器官探讨

目的 探讨酒精发育毒性和致畸机制。方法 于体外施与孕９．５ｄ大鼠胚胎不同剂量酒精,应用植入后全胚胎培养和荧光偏振技术研究酒精对胚胎发育影响及酒精对卵黄囊（ＶＹＳ）细胞膜脂质流动性影响。结果 ４００ｍｇ／Ｌ酒精对胚胎发育、器官形态分化各指标及ＶＹＳ细胞膜脂质荧光偏振度（Ｐｒ）和流动度（ＬＦＵ）与对照组比较,差异无显性,１０００ｍｇ／Ｌ组脑、ＶＹＳ直径、ＶＹＳ循环、神经管、头长、心脏、ＤＮＡ含量和Ｐ     

外源性核苷酸拮抗乙醇发育毒性的体外研究

目的探讨外源性核苷酸对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用啮齿类动物植入后全胚胎培养技术,将胎龄8.5 d的ICR小鼠胚胎以4.0g/L乙醇染毒,然后用不同剂量(0.16mg/L,4mg/L,100mg/L)的外源性核苷酸干预。培养48 h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果剂量为0.16mg/L及100mg/L的核苷酸干预可使胚胎颅臀长增大,体位、后神经管评分明显升高,卵黄囊直径增大,且与阴性对照组相比差异无统计学意义。中剂量(4mg/L)核苷酸干预还可使头长增大,对体位、心脏、后神经管、后脑、中脑、前脑、听觉、视觉、嗅觉、前肢芽及后肢芽均有改善,且与阴性对照组相比差异无统计学意义。结论外源性核苷酸可能有拮抗乙醇发育毒性的作用。     

不同途径接触镉的大鼠全胚胎培养

应用大鼠全胚胎培养方法,检测了氯化镉的发育毒性,并对培养的大鼠胚胎染毒途径进行了探讨。培养的大鼠胚胎以三种方式接触镉:(1)直接将镉加到培养基中,培养9.5天大鼠胚胎。(2)孕鼠于妊娠第8.5天经皮下分别注入2mg/kg及8mg/kg氯化镉(按(?)计算),于妊娠9.5天取染毒鼠胚胎于培养基中培养48小时。(3)取染毒大鼠血清,培养9.5天大鼠胚胎。结果表明。这三种途径染毒,均观察到异常胚胎增多,表明氯化镉有致畸作用,与致畸实验结果一致。应用全胚胎培养方法筛查致畸原,经母体宫内染毒,取胚胎体外培养,是较好的方法。     

维生素B_(12)对体外乙醇诱发小鼠胚胎畸变的影响

目的探讨维生素B12(VB12)对乙醇发育毒性的干预作用。方法采用植入后全胚胎培养技术(WEC),将GD8.5的ICR小鼠胚胎用4.0g/L乙醇处理,同时用不同浓度VB12(10-6、10-5和10-4mol/L)干预。在大鼠即刻离心血清中旋转培养48h后对小鼠胚胎生长发育和组织器官形态分化进行评分。结果应用不同浓度VB12干预后,反映胚胎生长发育和组织器官形态分化的指标得分与阳性对照组相比,均有不同程度的提高。其中,10-5mol/LVB12干预组对胚胎生长发育干预得分总和最高,颅臀长、头长、体节数与阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。10-4mol/LVB12干预组对胚胎组织器官形态分化干预得分总和最高,除尿囊、心脏、上颌突、下颌突指标外,其他与阳性对照组相比差异均有显著性(P<0.05)。结论VB12有拮抗乙醇发育毒性的作用。     

TERE1基因在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达

[目的]观察移行上皮反应基因（TERE1）在小鼠胚胎双前肢正常发育和异常发生中的表达,探讨TERE1在短肢发生中的作用。[方法]ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,各64只。于孕第10天（GD10）,经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg/kg的全反式视黄酸（atRA）、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD11～GD18取两组胎鼠的双前肢。于GD12取下小鼠胚胎双前肢,以atRA诱导,培养72 h后收获肢。利用实时荧光定量聚合酶链反应方法检测TERE1在各样本中的表达情况。[结果]在整体动物试验中,atRA可诱致小鼠胚胎明显的短肢畸形;在体外试验中,atRA可诱致小鼠胚胎前肢多种骨骼发育异常。TERE1在正常、异常肢及培养肢芽中均有表达。在正常和异常肢中,TERE1的表达模式一致;除GD15外,实验肢中TERE1的表达均低于相同时点正常肢的表达水平。在体外培养肢,各组的表达量随培养时间的延长而增加。实验组在培养24 h,atRA各剂量组的表达量均低于对照组（P〈0.05）;培养48 h和72 h,在2.5×10-6 mol/L～1.0×10-5 mol/L剂量范围有随剂量增加表达量增加的趋势,但在高剂量组（2.0×10-5 mol/L）表达又下降。[结论]TERE1与小鼠胚胎前肢的发育过程有关,atRA在诱致小鼠前肢异常发生中可引起TERE1 mRNA的表达改变。     

采用微团培养技术探讨双酚A的体外发育毒性

采用微团培养观察了不同浓度的双酚A(0～ 5 0mg L)对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞增殖和分化的影响 ,旨在了解双酚A的体外发育毒性特点及其可能的作用机制。结果显示 :双酚A对体外培养的Wistar大鼠胚胎肢芽细胞的增殖和分化均有抑制作用 ,表现为染毒组肢芽细胞集落形成数量减少 ,细胞毒性试验吸光度值下降 ,并呈现出明显的剂量 反应关系。双酚A对肢芽细胞的 5 0 %增殖抑制浓度 (IP50 )和5 0 %分化抑制浓度 (ID50 )分别为 38 74mg L和 2 7 93mg L ,IP50 ID50 =1 39。按照Renault等人推荐的体外致畸分类标准 ,双酚A属于阳性致畸物 ,对肢芽细胞的分化和增殖有特异性抑制作用     

应用植入后大鼠体外全胚胎培养研究酒精对胚胎发育的影响

为探讨孕期饮酒对胚胎生长发育的影响,应用植入后全胚胎培养（ｗｈｏｌｅｅｂｒｙｏｃｕｌｔｕｒｅ,ＷＥＣ）进行研究,将孕９．５天龄鼠胚胎移植于酒精终浓度分别为０、０．４０、１．００、２．００、４．００ｇ／Ｌ的全胚胎培养基中,于体外培养４８小时,观察酒精对胚胎发育和器官形态分化影响。