黔东南州2010年手足口病病原学监测结果

目的:了解黔东南州2010年手足口病流行的主要病原体。方法:采集临床诊断为手足口病病例的咽拭子、粪便或肛拭子、疱疹液采用RT-PCR方法扩增病毒的特异性片段,检测EV71、CA16核酸和非EV71、CA16的其他肠道病毒核酸。结果:2010年4月-2010年11月共检测标本101份,病毒核酸检测阳性50份(49.50%),其中EV71为17.82%;CA16为19.80%;其他肠道病毒阳性为11.88%。101例标本中,从发病至采样0 d~2 d病毒核酸检出率最高(59.68%),其次是3 d~5 d(39.29%)。咽拭子、肛拭子或大便、疱疹液阳性率分别为48.42%、50.00%和100%。结论:黔东南州2010年手足口病流行毒株以肠道病毒CA16和EV71为主。     

哈尔滨市2008年手足口病病原学检测结果分析

目的研究2008年哈尔滨市手足口病的病原学情况。方法应用RT-PCR和病毒分离两种方法对疑似手足口病患者标本进行检测。结果 RT-PCR快速检测EV71阳性率为25.64%,CA16阳性率0.64%;病毒分离培养EV71阳性率为37.82%,CA16阳性率为2.56%。156份标本分离出阳性病毒株63份,其中EV71阳性59份(占总阳性数的93.65%),CA16阳性4份(占总阳性数的6.35%)。结论哈尔滨市2008年手足口病的流行株为肠道病毒EV71型。手足口病病毒分离培养法阳性率高于RT-PCR法。粪便(包括肛拭子)和咽拭子标本手足口病病毒分离阳性率较高。     

2009年广西253例疑似肠道病毒感染病例病原学监测结果分析

目的 了解广西肠道病毒的感染情况,为制定预防和控制肠道病毒感染策略提供依据.方法 采用实时荧光定量PCR方法,对广西253例疑似肠道病毒感染者咽拭子、疱疹液和粪便标本共505份进行肠道病毒、肠道病毒71型(EV71)和柯萨奇病毒A16型(CoxA16)核酸检测.结果 共检出290份肠道病毒核酸阳性,阳性率为57.43%,其中EV71核酸阳性105份,阳性率为20.79%,CoxA16核酸阳性143份,阳性率为28.32%.结论 505份标本中CoxA16核酸的阳性率高于EV71;疱疹液标本的阳性检出率高于肛拭子、咽拭子、粪便标本的阳性检出率;CoxA16和EV71是引起儿童手足口病的主要病原体,要加强对CoxA16和EV71的的鉴别诊断.开展手足口病流行病学和病原学研究,将有助于提出更好的预防和控制措施.     

2013年许昌市手足口病病原学监测分析

目的了解许昌市2013年手足口病(HFMD)病原体型别与分布特征。方法收集许昌市5县3区手足口病例患者的粪便、肛拭子或咽拭子标本。实验室检测采用Real-Time RT-PCR法对标本进行肠道病毒71型(EV 71)、柯萨奇病毒A组16型(CA 16)和其他肠道病毒核酸检测。结果共检测496份病例标本,阳性318份,阳性率为64.11%。其中EV71阳性99份,阳性率19.96%;CA16阳性100份,阳性率20.16%;其他肠病毒阳性119份,阳性率为23.99%。其中重症病例56份,实验室诊断43份,以EV71感染为主(48.84%,21/43)。结论 2013年许昌市手足口病的病原体呈现EV71、CA16和其他肠道病毒共存,引起重症的病原体以EV71型肠道病毒感染为主。     

2009年山东省手足口病病例的病原学检测分析

目的了解2009年引起山东省手足口病（HFMD）的病原体型别及分布特征。方法采集HFMD临床诊断病例的粪便、咽拭子、疱疹液等标本,应用肠道通用引物和EV71、CoxA16特异性引物对其进行RT-PCR鉴定;使用RD、Hep-2细胞对部分肠道通用引物阳性的粪便标本进行病毒分离。结果共收集1604份HFMD临床诊断病例标本,实验室检测阳性标本990份,其中EV71阳性标本589份,CoxA16阳性标本29份,EV71和CoxA16同为阳性标本2份,EV71和CoxA16的检出率分别为36.72%和1.81%。从80份肠道通用引物阳性的粪便标本中分离出肠道病毒32株,其中EV71型病毒23株,CoxA16型病毒4株。结论引起山东省HFMD的病原体主要为EV71型肠道病毒,EV71感染占EV阳性标本数的59.50%。全省17个地市均有EV71感染的HFMD病例检出。     

一步RT-PCR方法在黑龙江省手足口病病原检测中的应用

目的了解核酸检测方法在黑龙江省手足口病病原谱调查中的应用价值,为疾病防控提供依据。方法在全省范围内收集2009年和2010年疑似手足口病病人疱疹液、咽拭子或肛拭子标本,使用人肠道病毒通用引物、肠道病毒71型(EV71)引物和萨奇病毒A组16型(CVA16)引物,采用一步RT-PCR方法进行病原核酸检测,进而分析病原构成,并对部分核酸检测阳性标本进行病毒分离。结果 2009年检测标本985份,其中EV71阳性226份、CVA16阳性191份、EV71和CVA16合并阳性3份,其他肠道病毒阳性100份。2010年检测标本1696份,其中EV71阳性354份、CVA16阳性356份、其他肠道病毒阳性188份。两年标本肠道病毒阳性率平均为52.87%,其中EV71和CVA16占阳性标本中病原总数的79.69%。选取353份核酸检测阳性标本进行病毒分离,共获得毒株265株。结论一步RT-PCR方法用于手足口病病原检测稳定、特异、快捷、易于分型,EV71和CVA16是黑龙江省近两年手足口病的主要病原体。     

2008—2009年广东省手足口病病毒分离和鉴定

目的了解广东省手足口病病原特征,为科学防治手足口病提供依据。方法采集2008—2009年广东省疑似手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液、脑脊液等标本,对其中肠道病毒通用引物阳性的标本进行病毒分离;分离株用肠道病毒通用引物、EV71引物、CoxA16引物进行RT-PCR鉴定。结果对892份肠道病毒通用引物阳性的标本进行病毒分离,共分离出毒株484株,分离率为54.26%;其中EV71型302株,占62.40%;CoxA16型143株,占29.55%。2008年和2009年不同类型标本的病毒分离率差异均有统计学意义(均P0.01),2年均以粪便标本的分离率最高,分别为70.79%(126/178)和73.89%(232/314);不同类型病例的病毒分离率之间差异无统计学意义(P0.05),2年死亡和重症病例均以EV71型为主。结论 2008—2009年广东省手足口病疫情主要由EV71和CoxA16引起,今后应加强对多种病原及其变异情况的监测。     

2011年平顶山市手足口病实验室检测结果分析

目的：对平顶山市2011年手足口病实验室检查结果进行分析,了解2011年平顶山市手足口病病原学特征,为实验室诊断手足口病提供参考。方法采集2011年平顶山市各地送检的499例手足口病患者的粪便、肛拭子、咽拭子、疱疹液和脑脊液等标本507份,应用RT-PCR技术检测样本中的肠道病毒、肠道病毒71型（ EV71）、柯萨奇病毒A组16型（ CA16）。结果499例手足口病患者的507份各类样本中,检测到肠道病毒（PE）阳性84份,EV71病毒特异性基因片段阳性167份, CA16特异性基因片段阳性125份。499例手足口病病例中,阳性376例,阳性率75.35%;其中EV71阳性167例,占阳性人数44.41%,CA16阳性共125例,占阳性人数33.24%, EV71的检出率较CA16高。已检验499例中,重症患者133例,阳性109例,阳性率81.95%;其中EV71共91例,占阳性人数83.49%,CA16共9例,占阳性人数8.26%。结论 EV71是2011年平顶山市手足口病的优势病原体;同时EV71是引起手足口病重症病例的主要毒株类型。     

重庆渝东北地区2010年手足口病病原分析

目的了解重庆渝东北地区儿童手足口病的病原学特征,为手足口病防治工作提供科学依据。方法收集2010年4～12月268例临床手足口病患儿的肛拭子、咽拭子、疱疹液标本共336份,采用Real-timeRT-PCR检测肠道病毒核酸及进行型别鉴定。结果 336份标本中检出193份肠道病毒阳性,总阳性率为57.44%,其中疱疹液、肛拭子、咽拭子标本阳性率分别为79.24%、67.44%、47.21%,泡疹液阳性检出率最高。268例患儿中检出146例肠道病毒阳性,阳性率为54.48%,其中CoxA16感染最高,占53.42%,其次为EV71型,占41.10%。重症患儿肠道病毒阳性检出率为68.75%,均为EV71型。男性发病多于女性,男女之比为1.47︰1,其差异无统计学意义(χ2=0.530,P=0.466)。肠道病毒阳性病例主要集中在5岁及以下儿童,占92.47%。结论 2010年渝东北地区手足口病流行的病原体主要为Cox-A16、EV71,重症病例系由EV71病毒感染所致。疱疹液标本中核酸阳性检出率最高。     

镇江市手足口病病原检测结果分析

目的了解镇江市手足口病病原体分布,为采取控制措施提供依据。方法采集临床诊断为手足口病病例的咽拭子、肛拭子、粪便、疱疹液等标本,用实时荧光定量PCR先筛选出总肠道病毒阳性的标本,再分别进行EV71型和CA16型特异性核酸的检测。结果共采集473例手足口病临床诊断病例标本,检测出肠道病毒209例,阳性率为44.19%,其中EV71型病毒135例,阳性率为28.54%,CA16型病毒60例,阳性率为12.68%。感染者多发生在4~8月份、人口密集区,发病年龄集中在2~5岁、性别分布男性大于女性。结论镇江地区手足口病主要流行毒株为EV71型和CA16型病毒,5岁以下儿童为高危人群。     

2010年合肥儿童手足口病病例肠道病毒血清基因型分析

目的:对合肥地区2010年5~7月儿童手足口病流行期间的手足口病患儿进行病原学调查。方法:采集手足口病患儿的疱疹液、粪便、咽拭子进行病毒分离;分离的病毒接种非洲绿猴肾细胞(Vero)后待细胞病变(CPE)达到++++以上后提取RNA。分别用EV71和CA16的VP1基因的特异性引物进行RT-PCR鉴定,并根据血清型不同比较其临床特征。结果:77例患儿采集的标本中65例分离到病毒;经RT-PCR检测发现其中47例CA16阳性,18例为EV71,比例为2.6∶1。CA16感染和EV71感染在患者的年龄大小、症状轻重等方面无显著统计学差异。结论:手足口病患儿检测到的主要病原是CA16和EV71,两者感染对临床的影响无显著差异。     

手足口病患者不同标本中肠道病毒检测结果比较

目的 对手足口病患者不同类型标本进行病原学检测和分析,了解手足口病患者肠道病毒的感染状况,探讨不同类型标本对检测结果的影响.方法 对临床诊断为手足口病的病例同时取粪便及咽拭子标本,用实时荧光定量逆转录多聚酶链反应检测总肠道病毒(enterovirus,EV)、肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)和柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A group 16 strain,CA16).比较两种标本的肠道病毒检测阳性率并进行一致性检验.结果 粪便标本的肠道病毒的总体阳性率为90.9％,EV71的阳性率为41.9％,CA16的阳性率为29.5％;咽拭子标本的肠道病毒的总体阳性率为87.5％,EV71的阳性率为37.4％,CA16的阳性率为26.9％,粪便标本的EV,EV71,CA16检出率均高于咽拭子标本,但差异均无统计学意义(x2分别为3.18,3.75,3.37,P值分别为0.073,0.052.0.064).结论 手足口病患者粪便标本和咽拭子标本的肠道病毒检出阳性率差异无统计学意义,考虑到粪便标本采集具有一定的局限性,临床上可选择咽拭子标本用于手足口病的检测.     

2009—2011年上海市宝山区手足口病病原学研究

[目的]探讨2009—2011年上海市宝山区手足口病病原学特征及诊断意义。[方法]2009年3月—2011年12月连续采集手足口病临床诊断病例的咽拭子、大便样本或肛拭子和疱疹液进行肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)、柯萨奇病毒A组16型(coxsackievirus A16,CoxA16)和其他肠道病毒核酸检测。[结果]2009—2011年肠道病毒的总检出率分别为59.00%、72.44%和79.00%,重症(死亡)病例中EV71型肠道病毒的阳性检出率为90.91%,明显高于普通病例(χ2=45.97,P<0.001)和聚集性病例的检出率(χ2=56.85,P<0.001);咽拭子、肛拭子或大便样本、疱疹液、咽漱液标本肠道病毒阳性检出率分别为68.02%、86.67%、71.43%、25.00%;咽拭子标本与肛拭子或大便标本和疱疹液标本检测结果符合率为83.53%和100.00%;发病0~4d肠道病毒核酸检出率为79.73%,5~10d肠道病毒核酸检出率为45.61%,差异有统计学意义(χ2=30.91,P<0.001)。[结论]2009—2011年宝山区手足口病感染的主要病原是EV71型和CoxA16型肠道病毒,肠道病毒的检出率逐年提升,且每年的优势型别有所不同;手足口病重症(死亡)病例的主要病原为EV71型肠道病毒;咽拭子、肛拭子或大便样本、疱疹液都有较高的诊断价值;病后4d内采集标本对手足口病诊断效果较好。     

19份手足口病临床标本的病原学分离与鉴定

目的：为探索手足口病的病原并为该病的防治提供科学依据,对本省徐州地区采集的19份手足口病临床标本进行病原学分离与鉴定。方法：采集的患者咽拭子（6份）和肛拭子（13份）标本,接种Hep-2细胞进行病毒分离,经培养3代,对有明显致细胞病变效应并能连续传代的毒株,用肠道病毒通用引物real-time-RT-PCR方法鉴定确认为肠道病毒后,用肠道病毒分子分型引物（E187/E222）对肠道病毒VP1区进行扩增,将扩增产物测序获得的序列与GeneBank中肠道病毒核苷酸序列进行比对,确定毒株血清型别。结果：19份标本中分离到9株病毒,均为肠道病毒。对其VP1区部分核苷酸序列测定和比较分析后,鉴定出其中有6株为CoxB5,1株为CoxB3,2株为Echo6。结论：虽然肠道病毒71型（EV71）和柯萨奇病毒A16（CoxA16）是引起手足口病暴发流行的主要病原,但引起手足口病的肠道病毒存在多种血清型,CoxB5、CoxB3和Echo6等均能引起手足口病。因此,对手足口病的病原学检测,除EV71和CoxA16外,不能忽视对其他肠道病毒的病原学检测和鉴定。     

实时荧光PCR技术在手足口病病毒核酸检测中的应用

目的通过对2010年4～8月北京市怀柔区手足口病病原学监测数据的分析,了解北京市怀柔区手足口病流行趋势,为该地区手足口病防治提供科学依据,同时探讨实时荧光RT-PCR在检测手足口病毒核酸中的应用价值。方法采集2010年4～8月怀柔区疑似肠道病毒感染者咽拭子和疱疹液标本,用实时荧光RT-PCR方法对人肠道病毒(包括EV71、CoXA16)进行核酸检测。结果 2010年4～8月共采集121例标本,检出肠道病毒EV71型87例,CoXA16型19例,肠道病毒通用型6例,阴性9例。结论 2010年4～8月怀柔区手足口病毒以肠道病毒EV71型为主。实时荧光RT-PCR技术具有特异性强、灵敏度高的特点,且能在采样后数小时内检测到病毒的RNA,从而达到快速诊断的目的,该方法对手足口病的治疗及疫情的有效控制提供有力的病原学支持。     

2010-2012年聊城市手足口病患儿肠道病毒的检测结果分析

目的了解流行高峰时聊城市手足口病的病原学特征,为手足口病的防治提供科学依据。方法收集2010～2012年临床诊断或疑似为手足口病病例的咽拭子、大便和疱疹液标本,应用实时RT-PCR法进行肠道病毒71型（EV71）、柯萨奇病毒16型（Cox16）和其他肠道病毒核酸检测。结果2010～2012年合计检测406份标本,肠道病毒阳性率为67．98％,其中EV71和Coxl6阳性率分别为29．31％和21．92％,EV71和Cox16均为阳性的1例,其他肠道病毒阳性率为16．75％;其中男性阳性率为46．31％（188／406）;女性为21．68％（88／406）,男性阳性率高于女性,性别比为2．14：1,差异有统计学意义（P〈0．05）;发病年龄为5个月至7岁,0～5岁为高风险年龄组;4～8月为手足口病高发期。结论聊城地区手足口病患儿以EV71和Cox16感染为主,2010年以EV71为主要病原,2011年以Cox16为主要病原,2012年又以EV71为主出现,高发病毒株交替出现。     

贵州省从江县81例手足口病病例病原学检测结果

目的了解贵州省从江县2011—2012年手足口病流行的主要病原体,为手足口病防控提供科学依据。方法采集临床诊断为手足口病病例的咽拭子采用RT-PCR方法扩增病毒的特异性片段,检测EV71、CoxA16核酸和其他肠道病毒核酸。结果共采集标本81份,病毒核酸检测阳性33份,阳性率为40.74%;其中EV71阳性9份（27.27%）,CoxA16阳性4份（12.12%）,其他肠道病毒阳性20份（60.61%）。结论从江县2011—2012年手足口病流行毒株以其他肠道病毒为主。但也不能忽视EV71引起的有中枢神经系统并发症的重症病例的监测。     

北京市儿童手足口病与肠道病毒71型和柯萨奇病毒A组16型感染有关

目的了解2007年5-6月北京市儿童中流行的手足口病的病原。方法于2007年5、6月间采集来首都儿科研究所附属儿童医院门诊就诊的手足口病患儿咽拭子标本6份和1份病情危重的手足口病并发神经系统症状而急诊收住院患儿（编号F4243，年龄9岁8个月，女性）的经气管插管呼吸道抽吸液、脑脊液及血清标本。将咽拭子和气管插管抽吸液标本接种Hep-2、MDCK和Vero细胞进行病毒分离。同时设计位于肠道病毒5^＋非编码区（UTR）的通用引物2对（巢式PCR）、肠道病毒71型（EV71）VPl基因不同位置的特异性引物2对半（PCR和半巢式PCR）和柯萨奇病毒A组16型（CAl6）的特异性引物1对检测标本中的病毒核酸。首先用随机引物将标本中的RNA逆转录成cDNA，然后分别用上述引物进行PCR扩增肠道病毒5^＋UTR和EV71／CAl6的VPl基因片段；对EV71阳性的标本还扩增了VPl全基因，扩增产物直接进行序列测定和分析。结果6例门诊就诊的普通手足口病患儿和F4243的呼吸道标本中均扩增到肠道病毒5^＋UTR基因片段，有2例门诊患儿和F4243的标本中还扩增到EV71的VPl基因片段，提示该组手足口病患儿均为肠道病毒感染，其中3例为EV71感染。序列测定和分析表明有1例普通手足口病患儿（F4211）和F4243标本确定为EV71。所有标本接种Hep-2和MDCK细胞均未出现病变，说明常见的呼吸道病毒为阴性。除1份咽拭子标本（F4283）外，其余6份接种Vero细胞的标本均出现细胞病变。用肠道病毒通用引物和EV71特异性引物对分离到的病毒株核酸的扩增结果显示这6株病毒均为肠道病毒，其中F4211和F4243为EV71，与直接从呼吸道标本中扩增的结果相符；其余4株为CAl6。结论北京市儿童中流行的手足口病与肠道病毒EV71和CAl6感染有关；EV71可以在5岁以上儿童中引起严重的神经系统并发症，应引起注意。