低剂量鱼藤酮诱导BV2细胞IL-6产物及montelukast的作用

目的：在体外帕金森病（Parkinson's disease,PD）模型观察低剂量鱼藤酮诱导的BV2小胶质细胞白介素6（IL-6）生成及montelukast的作用。方法以PD诱导因子鱼藤酮处理小鼠小胶质细胞系BV2细胞。 Western blot方法检测BV2细胞前炎症细胞因子 IL-6蛋白表达, ELISA 方法检测 BV2细胞 IL-6释放。观察 CysLT1R 拮抗剂montelukast对鱼藤酮诱导的小胶质细胞IL-6的影响。结果低剂量鱼藤酮（0．3～3 nM）浓度依赖性地增加IL-6蛋白表达;以鱼藤酮（3 nM）处理细胞1～24h,时间依赖性的诱导IL-6释放增加。 CysLT1R拮抗剂montelukast降低鱼藤酮增高的BV2细胞IL-6水平。结论低剂量鱼藤酮诱导小胶质细胞前炎症细胞因子IL-6增加,montelukast抑制鱼藤酮诱导BV2细胞效应。     

基于铁死亡探究牛磺酸对鱼藤酮致神经细胞损伤的保护作用

目的 采用鱼藤酮诱导SH-SY5Y细胞损伤建立帕金森病（Parkinson’s disease,PD）样病变细胞模型，基于铁死亡探讨牛磺酸的保护作用及机制。方法 实验分为对照组、鱼藤酮组、鱼藤酮+牛磺酸组、牛磺酸组；对照组、鱼藤酮组、鱼藤酮+铁死亡抑制剂组、铁死亡抑制剂组。通过Western blot、MTT细胞毒性检测试剂盒、乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒检测SH-SY5Y细胞损伤状况；运用Westernblot和铁含量检测试剂盒检测铁死亡水平；运用总谷胱甘肽检测试剂盒、脂质氧化(MDA)检测试剂盒、活性氧检测试剂盒、总SOD活性检测试剂盒检测氧化应激水平；运用Westernblot检测Nrf2/Keap1/SLC7A11信号通路活化水平。结果 结果显示，与对照组比较，鱼藤酮组酪氨酸羟化酶表达量降低、细胞存活率降低、细胞死亡率升高、铁死亡和氧化应激水平升高以及Nrf2/Keap1/SLC7A11通路活化水平降低，P<0.05，差异具有统计学意义；与鱼藤酮组比较，鱼藤酮+牛磺酸组酪氨酸羟化酶表达量增加、细胞存活率升高、细胞死亡率降低、铁死亡和氧化应激水平降低以及Nrf2/Keap1...     

鱼藤酮对PC12细胞谷氨酸含量及其转运体表达的影响

目的观察鱼藤酮对PC12细胞的毒性与谷氨酸递质水平及谷氨酸转运体表达的关系。方法MTT法检测鱼藤酮染毒PC12细胞活力，高效液相色谱法测定染毒细胞胞外Glu含量，RT-PCR及Western blot技术检测谷氨酸转运体EAAC1 mRNA和蛋白表达。结果0．25μmol／L鱼藤酮染毒24h即可引起PC12细胞活力明显降低，LDH渗出量显著增加；0．5μmol／L以上鱼藤酮诱导PC12细胞释放Glu增加，谷氨酸转运体EAAC1基因及蛋白表达均显著降低。结论鱼藤酮引起神经细胞损伤可能与其增加Glu释放和降低谷氨酸转运体的表达有关。     

鱼藤酮对星形胶质细胞谷氨酸摄取功能的影响

目的研究鱼藤酮对原代培养星形胶质细胞谷氨酸转运功能的影响。方法应用HPLC荧光法检测鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度,同位素标记法检测Glu摄取能力,采用RT-PCR与Western blot技术观察谷氨酸转运体基因及蛋白表达。结果鱼藤酮染毒星形胶质细胞胞外Glu浓度明显升高,Glu摄取能力显著降低,谷氨酸/天冬氨酸转运体(glutamate/aspartate transporter,GLAST)基因和蛋白表达均明显降低,而谷氨酸转运体-1(glutamatetransporter-1,GLT-1)蛋白表达升高。结论鱼藤酮可显著降低星形胶质细胞谷氨酸摄取功能,引起胞外Glu浓度升高;GLAST表达下调可能是鱼藤酮诱导胞外谷氨酸含量增加的主要原因之一,而GLT-1上调可能为神经细胞自我保护机制,以限制谷氨酸的神经毒作用。 更多还原     

谷氨酸转运体在鱼藤酮神经毒性中的作用

目的观察谷氨酸转运体在鱼藤酮神经毒性中的作用。方法建立星形胶质细胞与大鼠嗜铬细胞瘤(PC12)细胞共培养鱼藤酮染毒模型,并用谷氨酸转运体-1(GLT-1)和谷氨酸/天冬氨酸转运体(GLAST)特异性抑制剂二氢卡因酸盐(DHK)、L-反式吡咯烷-2,4-二羧酸(PDC)预处理。高效液相色谱(HPLC)荧光法检测星形胶质细胞胞外谷氨酸(Glu)浓度,同位素标记法检测Glu摄取能力。结果 DHK预处理组星形胶质细胞Glu摄取能力与单纯鱼藤酮中毒组比较差异无统计学意义,而PDC预处理组星形胶质细胞Glu摄取能力明显下降,胞外Glu浓度升高,与单纯鱼藤酮中毒组比较具有显著的统计学意义。结论谷氨酸转运体GLAST可能在鱼藤酮诱导的兴奋性损伤机制中起主要作用。     

鱼藤酮对PC12细胞凋亡及ERK1／2蛋白表达的影响

目的 观察鱼藤酮对PC12细胞凋亡以及细胞外信号调节酶1和2(ERK1/2)蛋白表达的影响,以深入探讨ERK1/2蛋白表达与鱼藤酮诱导PC12细胞凋亡之间的关系.方法 通过建立PC12细胞鱼藤酮染毒模型,光镜下观察鱼藤酮对PC12细胞形态的影响;流式细胞仪检测PC12细胞凋亡率的改变;Western蛋白印迹法和免疫组化法检测PC12细胞ERK1/2蛋白表达及定位情况.结果 鱼藤酮处理24 h后PC12细胞形态明显改变且凋亡率增加,20 μmol/LMEK抑制剂PD98059预处理1 h与单纯鱼藤酮染毒比较凋亡率没有显著性改变;磷酸化ERK1/2蛋白表达量随着鱼藤酮剂量的加大而增高,且活化的ERK1/2蛋白主要集中在胞浆内表达.结论 鱼藤酮体外作用可以诱导PC12细胞凋亡以及ERK1/2蛋白磷酸化表达增强.     

鱼藤酮染毒大鼠纹状体缝隙连接蛋白43的表达及意义

目的 观察鱼藤酮对大鼠中脑纹状体组织的毒性作用及对缝隙连接蛋白43(CX43)表达的影响. 方法 建立大鼠Alzet微泵恒流给药鱼藤酮染毒模型,应用光镜和免疫组织化学染色观察纹状体神经元和星形胶质细胞的形态改变,采用RT-PCR法检测CX43mRNA的表达,Western blot技术观察CX43蛋白活性变化.结果 染毒大鼠出现类帕金森病综合征特征,中脑纹状体组织神经元形态明显改变,星形胶质细胞增生.与正常对照组比较,2.0 mg/kg鱼藤酮染毒组CX43表达明显上调(P＜0.05),而4.0 mg/kg鱼藤酮染毒组CX43表达显著降低(P＜0.05). 结论 鱼藤酮可损伤中脑神经元,诱导大鼠出现类帕金森病症状,星形胶质细胞缝隙连接蛋白43的异常表达,可能参与了鱼藤酮对大鼠纹状体组织的毒性作用.     

松树皮提取物对鱼藤酮诱导帕金森小鼠神经元的保护作用

目的探究松树皮提取物(Pine bark extract)对鱼藤酮诱导帕金森病(Parkinson's Disease,PD)小鼠神经元的保护作用及可能机制。方法成年雄性C57BL/6小鼠40只,随机分为空白对照,鱼藤酮,松树皮提取物,松树皮提取物+鱼藤酮4组。实验处理5周后,化学比色法检测脑组织中MDA、GSH含量及SOD酶活力判定氧化应激损伤水平,免疫组化分析TH、α-SYN和LC3-B阳性表达变化。结果鱼藤酮组与空白对照组及鱼藤酮+松树皮提取物组比较,小鼠中脑黑质-纹状体GSH含量和SOD活性明显减少(P0.05),MDA含量明显增加(P0.05);小鼠中脑黑质-纹状体TH免疫阳性神经元数目明显减少(P0.05);鱼藤酮组与空白对照组及鱼藤酮+松树皮提取物组比较,小鼠中脑黑质-纹状体系统α-SYN和LC3-B免疫阳性表达明显增多(P0.05)。结论松树皮提取物对帕金森模型小鼠多巴胺能神经元具有一定的保护作用,其机制可能与减轻鱼藤酮所致的氧化应激损伤有关。     

鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞毒性作用

目的观察鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞毒性作用的特点。方法体外培养大鼠中脑星型胶质细胞,采用胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光法鉴定。观察染毒星型胶质细胞形态,检测细胞活力,通过生长曲线分析鱼藤酮对星型胶质细胞增殖的影响以及RT-PCR检测缝隙连接蛋白（connexin43,CX43）mRNA表达。结果0.5μmol/L鱼藤酮染毒24 h即可引起明显的细胞形态改变;0.75,1.0,2.0μmol/L鱼藤酮染毒时星型胶质细胞活力明显降低,乳酸脱氢酶释放量显著增加;0.5μmol/L以上鱼藤酮可明显抑制胶质细胞增殖,CX43 mRNA表达降低。结论鱼藤酮对体外培养星型胶质细胞可以产生明显的毒性损伤作用,但与神经元比较,星型胶质细胞对相同剂量的鱼藤酮染毒具有更强的耐受能力。     

098 鱼藤酮的神经毒性研究进展

鱼藤酮是一种低毒的天然杀虫剂，但是近年来发现它对机体的多巴胺能神经系统功能有损伤作用，体外和体内研究的结果都表明鱼藤酮可诱导多巴胺能神经细胞的退变和死亡，鱼藤酮暴露可以使动物出现帕金森病样症状，但因实验室的条件与人类接触的方式有所不同，目前的研究尚不足以肯定鱼藤酮可导致人类的帕金森病。本文综述了近年来的有关研究进展。     

2006年-2010年某市蔬菜中农药残留情况分析

目的:通过某市2006年-2010年蔬菜农药残留情况,探讨造成农药残留的原因和防控措施。方法:用回顾性流行病学方法对某市2006年-2010年蔬菜农药检测资料进行分析。结果:①2006年-2010年用气相色谱法检测95份蔬菜样品,其中不合格蔬菜20份,检出违规使用的农药15种,有机磷酸酯类农药检出率最高为21.1%。②2006年-2010年用速测卡法共检测5790份蔬菜样品,农药检出率在2.8%～7.4%之间,平均检出率为4.5%。结论:5年间该市均检出蔬菜农药残留,且呈现波动性。     

氧化应激对鱼藤酮PC12细胞中的毒性作用

目的探讨氧化应激在鱼藤酮多巴胺能神经元PC12细胞中的毒性作用。方法用高分化的PC12细胞作为多巴胺能神经元的细胞模型,经不同浓度的鱼藤酮处理,观察细胞形态及其超微结构,四甲基偶氮唑盐法检测细胞活性和增殖抑制及细胞代谢状态,生化分析法检测SOD活力、MDA含量,特异性DCF-DA荧光探针检测细胞内ROS水平。结果经鱼藤酮处理24 h后PC12细胞突起样结构消失,细胞体积变小、形态变圆,部分细胞呈悬浮状态;细胞线粒体代谢和超微结构发生改变;PC12细胞增殖抑制,细胞活性降低;细胞内的SOD活力下降,MDA含量增高;荧光探针标记显示PC12细胞荧光强度增加,细胞内ROS含量增加。结论鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,可抑制细胞增殖,影响线粒体代谢,氧化应激可能在鱼藤酮的多巴胺神经元毒性机制中起作用。     

Pesticide/Environmental Exposures and Parkinson's Disease in East Texas

ABSTRACT

Epidemiological evidence suggests that pesticides and other environmental exposures may have a role in the etiology of idiopathic Parkinson's disease (PD). However, there is little human data on risk associated with specific pesticide products, including organic pesticides such as rotenone with PD. Using a case-control design, this study examined self-reports of exposure to pesticide products, organic pesticides such as rotenone, and other occupational and environmental exposures on the risk of PD in an East Texas population. The findings demonstrated significantly increased risk of PD with use of organic pesticides such as rotenone in the past year in gardening (OR = 10.9; 95% CI = 2.5–48.0) and any rotenone use in the past (OR = 10.0; 95% CI = 2.9–34.3). Use of chlorpyrifos products (OR = 2.0; 95% CI = 1.02–3.8), past work in an electronics plant (OR = 5.1; 95% CI = 1.1–23.6), and exposure to fluorides (OR = 3.3; 95% CI = 1.03–10.3) were also associated with significantly increased risk. A trend of increased PD risk was observed with work history in paper/lumber mill (OR = 6.35; 95% CI = 0.7–51.8), exposure to cadmium (OR = 5.3; 95% CI = 0.6–44.9), exposure to paraquat (OR = 3.5; 95% CI = 0.4–31.6), and insecticide applications to farm animals/animal areas and agricultural processes (OR = 4.4; 95% CI = 0.5–38.1). Cigarette smoking, alcohol use, and fish intake were associated with reduced risk. In summary, this study demonstrates an increased risk of PD associated with organic pesticides such as rotenone and certain other pesticides and environmental exposures in this population.     

GC-MS检测蔬菜有机磷农药残留的效果分析

目的:用比较法对气相色谱-质谱法检测蔬菜农药残留的效果进行综合分析。方法:用气相色谱-质谱法对已知的5种农药标准品连续稀释计算出检出限,并随机抽取本地菜农种植的四种蔬菜进行农药残留量检测。同时用气相色谱法同步进行比较试验。结果:两种方法比较,气相色谱-质谱法具有更高的灵敏度和准确度,差异有统计学意义(P<0.05)。对蔬菜残留农药的检测结果表明GC-MS在蔬菜农残检测中具有更广泛的用途。结论:GC-MS在检测蔬菜农药残留方面具有更好的效果。     

鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸及NMDA受体表达的影响

目的观察鱼藤酮对大鼠纹状体兴奋性氨基酸(excitatory amino acid,EAAs)及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达的影响。方法采用Alzet微泵背部埋植法建立大鼠鱼藤酮慢性中毒模型,应用高效液相色谱法(HPLC)检测鱼藤酮染毒大鼠纹状体谷氨酸(glutamate,Glu)和天门冬氨酸(aspartic acid,Asp)浓度,RT-PCR技术观察NMDA受体功能亚基NR1和调节亚基NR2A、NR2B基因表达的变化。结果与正常对照组比较,鱼藤酮染毒大鼠中脑纹状体兴奋性氨基酸浓度明显升高,NMDA受体功能亚基和调节亚基基因表达异常。表现为2.0 mg/kg与4.0mg/kg鱼藤酮染毒组NR1亚基表达明显上调(P<0.05),NR2A亚基mRNA表达亦显著升高(P<0.01),而NR2B基因表达在2.0 mg/kg鱼藤酮染毒组未见明显改变。结论鱼藤酮染毒可致中脑纹状体EAAs水平升高,NMDA受体结构功能发生改变,从而诱导兴奋毒性损伤的产生。     

农产品中有机磷农药的小麦酯酶抑制测定法的评价

目的评价小麦酯酶抑制法检测农产品中有机磷农药残留的应用效果。方法对小麦酯酶抑制法测定韭菜中有机磷农药残留进行了质量评价和主成分分析。检测了5种农产品中有机磷农药残留量,并以气相色谱法进行了确证试验。结果不同有机磷农药检出下限的范围为0.05～0.52 mg/kg,标准差为0.26～3.09 mg/kg,RSD为2.9%～4.1%,平均回收率为74.5%～92.1%。有机磷农药对酶的抑制程度和精密度是影响测定质量的主要因素。结论小麦酯酶抑制法可以满足农产品中有机磷农药残留半定量分析的要求。     

2003～2004年苍山县部分蔬菜农药残留量检测分析

[目的]了解苍山县蔬菜农药残留有关情况,为有效控制蔬菜农药残留,提供科学依据.[方法]2003～2004年对苍山县部分蔬菜批发市场、种植基地及零散摊点进行随机抽样检测,用农药速测卡结合色谱法测定其中的有机磷类农药.[结果]共检测各种蔬菜827份,农药残留阳性的98份,阳性率为11.85%.[结论]我县蔬菜农药残留问题比较严重,应进一步加强监督管理.     

聚合酶链反应检测尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒的结果分析

目的：探讨聚合酶链反应（PCR）在检测尖锐湿疣病人中人乳头瘤病毒的应用。方法：采用PCR的方法。结果：203例被临床医师诊断或怀疑为尖锐湿疣（CA）患者的标本进行了人乳头瘤病毒DNA（HPV－DNA）的检测。其中68例为皮损组织块标本,此部分患者的CA症状典型,被临床医师诊断为CA,68例均被检测出HPV－DNA,检出率100％;135例为生殖器分泌物标本,此部分患者的CA症状还不典型,仅为临床医师怀疑对象,从中检测出HPV－DNA109例,检出率80．7％。结论：用PCR检测标本的HPV－DNA,可对CA患者进行准确地早期诊断,从而有利于患者的早期发现和治疗。