金属硫蛋白的基因调控

金属硫蛋白的基因调控ＣｏｕｓｉｎｓＲＪ金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎ，ＭＴ）是一种富含半胱氨酸的金属结合蛋白，已对其未知功能进行了深入研究。ＭＴ以由各种结构基因编码的多种异构体（一般为２～３种）形式存在。３０年前，Ｐｉｓｃａｔｏｒ发现给予Ｃ...     

二甲基苯蒽对金属硫蛋白基因敲除小鼠免疫功能的影响

目的：观察二甲基苯蒽（DMBA）对金属硫蛋白（MT）基因敲除小鼠[MT（－／－）]的免疫毒性。方法：选用MT（－／－）小鼠和MT（＋／＋]野生型小鼠进行对照,DMBA25mg/kg和50mg/kg分别1次腹腔注射染毒后,检测动物对静脉注射绵羊红细胞（SRBC）诱导的体液和细胞免疫反应,体液免疫指标为脾脏抗体形成细胞（PFC）数量变化,细胞免疫功能指标选择迟发型变态反应,即动物足跖肿胀厚度变化。结果：DMBA25mg/kg组,MT（－／－）小鼠脾脏和胸腺重量都减轻,体液免疫功能受到抑制（抑制率为72％）,而MT（＋／＋）小鼠仅脾脏重量减轻,两种小鼠的细胞免疫功能均未见明显变化,DMBA50 mg/kg组,MT（－／－）小鼠的体液免疫和细胞免疫功能受到抑制程度均比DMBA25mg/kg组严重（抑制率分别为91％和72％）。MT（＋／＋）小鼠虽脾脏和胸腺重量减轻,体液免疫受到抑制,但变化程度明显小于MT小鼠（－／－）。MT（＋／＋）小鼠没有出现明显的细胞免疫功能抑制。结论：MT（－／－）小鼠的体液免疫和细胞免疫功能更易被DMBA抑制。提示MT具有保护DMBA所致免疫伤的功能。     

金属硫蛋白的抗氧化和抗辐射实验观察

金属硫蛋白（ｍｅｔａｌｏｔｈｉｏｎｅｉｎｓ，ＭＴ）是一类低分子量、富含半胱氨酸、结合有金属的非酶蛋白，由于ＭＴ特有的氨基酸组成与分子结构，它在体内担负着重要的生理功能［１３］。我们应用电子顺磁共振（ＥＳＲ）波谱技术，直接观察了ＭＴ对ＤＭＰＯ（５，５...     

锌对小鼠肝金属硫蛋白合成的影响

本文研究了小鼠在宽的剂量范用内（１０，２０，４０，８０，１００，１２０，１４０，１６０，１８０，２００ｍｇ／ｋｇｂｗ）口服锌（Ｚｎ）盐时，对肝金属硫蛋白（ＭＴ）合成的影响。结果显示：因服用过量Ｚｎ（２＋），按剂量──效应关系发生肝ＭＴ的诱导合成，而且在肝Ｚｎ浓度和肝ＭＴ浓度之间存在正向关系。表明Ｚｎ是一个ＭＴ的诱导剂。在口服Ｚｎ８０～１００ｍｇ／ｋｇ的剂量范围时，无论是肝ＭＴ水平或肝Ｚｎ水平均有明显的改变。提示：在Ｚｎ诱导ＭＴ合成中，存在一个敏感的剂量范围。     

小鼠肾脏中金属硫蛋白基因诱导表达的时程变化

目的 探讨重复性注射CdMT诱导小鼠肾脏MT基因表达的时程变化。方法 采用RT-PCR方法半定量检测重复性短时间间隔皮下注射镉金属硫蛋白（CdMT)染毒后小鼠肾皮质金属硫蛋白（MT1、MT2）基因表达的时程变化。结果 自CdMT染毒后12h。与对照组相比肾皮质MT1基因表达有增强的趋势，染毒后12h及24h，肾皮质MT2基因表达明显增强，其表达高峰均出现在CdMT染毒后24h，至168hMT1gn MT2基因表达均恢复到基准水平，结论 重复性短时间间隔皮下注射CdMT能够诱导小鼠肾皮质MT1及MT2基因的表达，并且MT1及MT2基因表达的时程变化基本一致。     

微量元素对金属硫蛋白基因表达的调控

研究表明，锌、铜、镉等多种微量元素可能影响机体金属硫蛋白（MT）的表达。作为MT激活剂的金属调节元素（MREs）与金属调节蛋白相互作用，可启动MT基因的转录。但微量元素调控MT基因表达的机制待进一步研究证实。     

真核生物中金属硫蛋白基因的转录调控

本文概述了金属、氧化应激对真核生物金属硫蛋白（ＭＴｓ）基因的转录调中所涉及的顺式作用元件，与之相互作用的反式作用因子及其可能的调控机制。     

金属硫蛋白对镍铬染毒小鼠睾丸损伤保护作用

目的 探讨金属硫蛋白（MT）对镍铬联合染毒小鼠睾丸损伤的保护作用。方法 50只昆明种雄性小鼠随机分为5组：对照组,镍铬染毒组,低、中、高剂量MT组。对照组灌胃生理盐水,镍铬染毒组及MT组灌胃（NiSO₄ 1.0、K₂Cr₂O₇ 0.5 mg/kg混合溶液）,低、中、高剂量MT组分别灌胃5.0、10.0、15.0 mg/kg MT溶液,每日1次,连续20 d;实验结束处死动物检测睾丸、附睾脏器系数,睾丸病理形态学、精子质量观察,试剂盒检测睾丸细胞凋亡、超氧化物岐化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量。结果 与对照组比较,镍铬染毒组小鼠睾丸、附睾脏器系数[分别为（0.73±0.10）%、（0.24±0.07%）减小,睾丸结构受损,精子数[（9.96±0.67）10⁷个/g附睾]及活动度[（39.23±4.87）%]下降,睾丸细胞凋亡率[（20.65±1.68）%]及MDA含量[（112.51±7.21）nmol/g prot]升高,SOD活力[（118.17±12.28）U/g prot]下降（P<0.05）;与镍铬染毒组比较,高剂量MT组小鼠睾丸、附睾脏器系数[分别为（1.25±0.14）%、（0.39±0.11）%]明显升高,精子数[（17.79±0.86）10⁷个/g附睾]及活动度[（70.48±6.24）%]上升,睾丸细胞凋亡率[（9.02±1.14）%]及MDA含量[（25.55±5.81）nmol/g prot]下降,SOD活力[（313.19±15.37）U/g prot]升高（P<0.05）。结论 镍铬联合染毒对小鼠睾丸有损伤作用,一定剂量的MT对其受损的睾丸有修复作用,其作用机制可能与抗氧化作用有关。     

金属硫蛋白对铬染毒小鼠肝脏氧化损伤的修复作用

目的：探讨金属硫蛋白（MT）对六价铬（Cr6^＋）染毒小鼠肝脏氧化损伤的修复作用。方法：60只清洁级昆明（KM）种小鼠雌雄各半,随机分为5组：对照组,铬（Cr6^＋）染毒组（50mg／kg）,低、中、高（5．0、10．0、20．0mg／kg）剂量MT保护组。对照组灌胃生理盐水,铬染毒组按50nag／（kg·bw）灌胃重铬酸钾溶液;MT保护组在给予铬染毒的同时继续分别按5．0、10．0、20．0mg／（kg·bw）剂量灌胃MT。各组灌胃时间均为15d,每日1次;灌胃体积均为0．1ml／（10g·bw）。实验结束麻醉处死动物采血,取肝脏计算其脏器系数;全自动生化分析仪检测肝功能AST、ALT、GGT含量;试剂盒检测肝组织SOD活性和MDA含量。结果：与对照组比较,铬染毒小鼠体重降低、肝脏器系数增高、血清AST、ALT、GGT增高、SOD活力下降、MDA含量增高（P〈0．05）。经MT保护后与铬染毒组比较小鼠体重有所回升、肝脏脏器系数下降、血清AST、ALT、GGT降低、SoD活力升高、MDA含量下降,其恢复程度与MT呈剂量－效应关系（P〈0．05）。结论：铬（Cr6^＋）对小鼠肝脏有损伤作用,MT对肝脏有保护作用,其机制与抗氧化作用有关。     

砷化物对人类金属硫蛋白-3cDNA基因表达的影响

目的 探讨砷化物对人类正常肝细胞金属硫蛋白(Metallothionein,MD-3cDNA基因表达的影响。方法 利用SMART方法克隆cDNA基因,生物信息学分析克隆基因的同源性、染色体定位、基因结构和对该基因编码蛋白质进行分析并对该蛋白质进行跨膜信息分析,基因芯片方法检测染砷L-02细胞MT-3基因的表达。结果 成功克隆MT-3cDNA基因,经生物信息学分析可知,该基因定位在人16号染色体16q13区段,跨膜信息分析发现MT-3基因编码蛋白质可以穿出生物膜,基因芯片结果证实染砷的人正常肝L-02细胞在染砷早期MT-3基因表达增高。结论 该研究发现人类MT-3基因是砷化物作用的一个相关基因,早期参与了砷代谢解毒。     

网纹甜瓜对衰老模型小鼠肝脏抗氧化功能的影响

目的考察网纹甜瓜汁对衰老模型小鼠肝脏抗氧化功能的作用。方法 50只雄性昆明小鼠根据体重随机分为五组,分别为正常对照组,衰老模型组,瓜汁4倍稀释组,瓜汁2倍稀释组和瓜汁原液组。衰老模型组和三个不同浓度的瓜汁组小鼠皮下注射D-半乳糖200 mg/kg d;正常组注射等量的生理盐水;三个瓜汁组分别灌胃4倍稀释的瓜汁溶液、2倍稀释的瓜汁溶液和瓜汁原液0.5ml,每天2次,连续4w,正常组和衰老模型组相应灌胃等量的蒸馏水。实验结束时,处死全部小鼠取肝脏,测定小鼠肝脏总抗氧化力、过氧化物酶(CAT)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)和脂褐质含量。结果与模型组相比,给予网纹甜瓜汁的各组小鼠肝脏总抗氧化力、CAT活性显著升高,GSH-Px活性有所升高,MDA和脂褐质含量显著降低。结论网纹甜瓜可提高衰老模型小鼠清除自由基的能力,提高抗氧化酶活性而发挥抗衰老作用。     

大豆异黄酮对辐射小鼠免疫功能的防护作用

目的 研究大豆异黄酮(SI)对辐射小鼠免疫功能的防护作用,为SI抗辐射功能食品的开发提供参考.方法 96只雄性昆明小鼠,随机分为正常对照组、辐射对照组和实验组(补充0.5％SI),喂养2周后,后2组给与一次性的4Gy137CS辐射.辐射后24h和3d分批进行小鼠吞噬功能、耳廓肿胀率、血清溶血素值和免疫球蛋白水平检测....     

大豆异黄酮对辐射小鼠骨髓细胞的防护作用

目的研究大豆异黄酮(SI)对辐射小鼠骨髓细胞的防护作用,为SI应用于抗电离辐射药物和功能食品的研究提供依据。方法24只雄性昆明小鼠,随机分为正常对照组、辐射对照组和辐射补充0.5%SI组,喂养2周后,后两者给予4.0Gyγ射线照射。照射后7d处死小鼠,分离双侧股骨,观察骨髓细胞(BMC)形成细胞集落的能力。体外实验取正常组小鼠的股骨,制成BMC单细胞悬液,4.0Gyγ射线照射,测定BMC的细胞周期和3H-TdR掺入量。结果辐射使小鼠BMC的粒-巨细胞集落形成单位(CFU-GM)和成纤维细胞集落形成单位(CFU-F)明显减少,辐射补充SI组BMC的CFU-GM〔(26.0±6.9)个/105BMC〕和CFU-F〔(23.4±8.6)个/106BMC〕明显高于辐射对照组〔相应为(17.3±4.4)个/105BMC和(15.6±4.9)个/106BMC)(P0.05)〕。体外实验结果表明,辐射使细胞周期的G0-G1期细胞数量明显增加,S和G2-M期细胞明显减少,细胞的3H-TdR掺入量明显减少;补充SI组与辐射对照组相比,G0-G1期细胞数量明显减少(P0.05),S和G2-M期的细胞数明显增加(P0.05),细胞的3H-TdR掺入量明显增加(P0.05)。结论大豆异黄酮对小鼠骨髓细胞辐射损伤有一定的防护作用。     

硒对辐射所致过氧化脂质含量及谷胱甘肽过氧化物酶活性的影响

以肝、脾组织中过氧化脂质(LPO)含量及谷胱甘肽过氧化物酶(GSHL-Px)活性为指标探讨硒的辐射防护效应。实验结果表明:BALB/C纯系雄性小鼠经3Gy ~(60)Co γ射线照射后3天,肝、脾组织LPO生成量比未照射者均显著增多,而GSH-Px活性却都显著降低;但于照射前连续7天每日经口灌胃亚硒酸钠溶液0.2ml(含硒12.5μg)的实验组动物,肝、脾组织LPO含量均明显少于照射对照组,而GSH-Px活性都显著高于照射对照组,结果提示,通过降低LPO含量和增加GSH-Px活性,硒对小鼠可能有辐射防护作用。     

薏苡仁多糖对小鼠抗氧化作用的研究

目的观察薏苡仁多糖对小鼠的抗氧化作用,并探讨其机制。方法以ICR清洁级小鼠为研究对象,腹腔注射CCl4造模。以VE为阳性对照,给药组[薏苡仁纯多糖低、中、高剂量(250、500、1000mg/kg)]和薏苡仁粗多糖低、中、高剂量(250、500、1000mg/kg)分别先经灌胃28d进行预防。以全血SOD与GSH-Px活性、GSH浓度、血清总抗氧化能力(T-AOC)反映抗氧化功能;观察肝脏GOT、GPT活力单位、丙二醛(MDA)含量和肝脏指数变化。结果与模型组相比,薏苡仁多糖可显著增强小鼠SOD、GSH-Px活性,有效防止CCl4对肝脏组织的伤害,明显抑制肝细胞GOT、GPT活性与MDA含量的异常上升,并呈现明显的量-效关系,且以薏苡仁纯多糖的效果为好。结论薏苡仁多糖能显著增强小鼠的抗氧化功能,有效解除CCl4肝中毒效应,其机制可能与提高机体的抗氧化酶活性和GSH浓度,对抗脂质过氧化反应有关。     

虾青素抗氧化活性研究

目的通过与维生素E的对比实验,进一步研究虾青素的抗氧化能力。方法分别采用硫氰酸铁法(FTC)、邻二氮菲-Fe2+氧化法以及DPPH·自由基测定法,研究虾青素和维生素E在抑制亚油酸的自氧化、清除羟自由基和DPPH·自由基的能力。结果虾青素能有效地抑制亚油酸的自氧化性,抑制能力明显高于维生素E;同时对羟自由基的清除率也高于维生素E,且在浓度为50μg/ml时,清除率可达95.98%;清除DPPH·自由基方面虽然略低于维生素E,但同样表现出较高的清除率,当浓度为80μg/ml时,清除率为97.0%。结论虾青素具有明显的抗氧化活性。     

红景天复方提高小鼠抗疲劳能力的效果

目的观察红景天复方提高小鼠抗疲劳能力的效果,为进一步用于军事作业人员提供实验依据。方法将160只雄性昆明种小鼠随机分为4大组（n=40）,分别用于负重游泳时间观察、血清尿素测定、血乳酸测定、肝糖原测定;每大组又随机分为4小组（n=10）：低、中、高剂量红景天复方组和对照组。低（0．12g／k）、中（0．24g/kg）、高（0．7g/kk）剂量分别相当于人体推荐剂量的5、10、30倍。灌胃给药,每天1次,连续30d;对照组给予等量蒸馏水。比较各组小鼠体质量、力竭性游泳时间、血清尿素、血乳酸浓度及肝糖原水平的变化。结果与对照组相比,高剂量药物组负重游泳时间延长63．6％（P〈0．01）,运动后血清尿素浓度减少17．8％（P〈0．05）,血乳酸曲线下面积减少8．6％（P〈0．01）。各组小鼠的体质量和肝糖原储备量差异无统计学意义（P〉0．05）。结论红景天复方具有缓解小鼠体力疲劳的作用。     

染料木黄酮对γ射线损伤小鼠免疫功能的影响

目的研究染料木黄酮（Genistein，Gen）对^137Cs γ射线照射提高小鼠的免疫功能。方法雄性昆明小鼠补充不同剂量的Gen饲料2周前后经4．0Gy^137Cs γ射线照射，测定其细胞免疫、体液免疫和非特异性免疫功能指标的变化。结果辐射小鼠的免疫功能明显低于正常小鼠，补充0．8％。Gen可以提高辐射小鼠免疫功能，与照射对照组比，耳廓肿胀率提高49．3％；淋巴细胞增殖指数提高86．8％；血清溶血素提高90．9％；脾脏指数提高23．6％；脾结节数提高32．1％，以上差异均有统计学意义（P〈0．05）。补充Gen可以提高辐射小鼠碳粒廓清指数，但差异不显著；对胸腺指数的影响亦不明显。结论染料木黄酮可以提高辐射小鼠免疫功能。     

染料木黄酮的雌激素活性对辐照小鼠免疫功能的影响

目的研究染料木黄酮(genistein,Gen)的雌激素效应对辐射损伤的防护作用,为抗辐射功能食品的开发和对原有辐射防护剂的改进提供实验依据。方法观察应用他莫西芬(ERα阻断剂)和Faslodex(ERβ阻断剂)阻断受照小鼠雌激素受体(ER)活化情况下,Gen对接受4Gy全身照射小鼠血白细胞和淋巴细胞计数、血清溶血素及迟发型变态反应的影响。结果Gen可以降低辐照小鼠的血白细胞和淋巴细胞的减少幅度,增强免疫功能;他莫西芬与Gen合用对小鼠血白细胞和淋巴细胞计数及免疫功能无明显影响,表明他莫西芬不能阻断Gen对辐照的保护作用。Faslodex与Gen合用则仍降低受照小鼠血白细胞和淋巴细胞数量,也抑制免疫功能。表明Faslodex能阻断Gen的保护作用。结论Gen通过激活ERβ途径,增强辐射小鼠的免疫功能。     

琼枝麒麟菜多糖对辐射损伤小鼠细胞因子分泌的影响

目的观察琼枝麒麟菜多糖（EGP）对辐射损伤小鼠细胞因子分泌的影响,为辐射损伤的治疗提供依据。方法将50只小鼠随机分为正常对照组、照射对照组和3个不同剂量EGP[（100、200和400mg／（kg·d）]＋照射组,按每10g体质量0．1mL灌胃,连续10d;正常对照和照射对照组均用等量生理盐水灌胃;7d后除正常对照组外,均进行一次性了射线2Gy照射,20h后检测巨噬细胞产生白细胞介素-1（IL-1）活性,以及血清白细胞介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）水平和脾IFN-γ mRNA和蛋白表达量。结果（1）EGP200、400mg／kg＋照射组小鼠巨噬细胞产生IL-1蛋白量（液闪计数,min^-1）分别为2347±254、3111±628,明显高于照射对照组的1327±729（P〈0．01）;（2）EGP200、400mg／kg照射对照组小鼠血清102、TNF—α、IFN-γ（pg／mL）分别为31．62±1．71、124．27±17．28、110．57±15．71和34．30±2．14、136．19±17．94、123．57±14．47,明显高于照射对照组的23．06±1．79、99．76±9．41、88．28±10．62pg／mL（P〈0．05,P〈0．01）;（3）EGP200、400mg／kg＋照射组小鼠脾细胞IFN-γ耐州A和蛋白表达量（灰度值）分别为0．75±0．13、1．08±0．15、1．21±0．13和93247±5627、130154±7279、171467±8678,明显高于照射对照组的0．35±0．10、50096±4815（P〈0．01）。结论琼枝麒麟菜多糖（EGP）可以通过分泌上述细胞因子拮抗辐射损伤。