HLA—DR基因及乙肝病毒基因型与肝细胞癌相关性的初步研究

[目的]探讨乙型肝炎病毒（HBV）感染人群HLA—DR基因、HBV基因型与肝细胞癌的相关性。[方法]2007～2008年,应用序列特异性引物-聚合酶链反应（SSP—PCR）方法与荧光PCR（探针）法,分别对40例慢性乙肝患者（试验1组）、38例肝硬化患者（JR验2组）和34例肝细胞癌患者（试验3组）的HLA—DR等位基因、HBV基因型进行检测,并以中华骨髓库山东分库无血缘关系的自愿骨髓捐献者1383例为对照,分析其表达与肝细胞癌的相关性。[结果]HLA—DR1基因的检出率,试验3组为14．71％,对照组为4．85％（P〈0．05）;HLA—DR13基因的检出率,试验3组为14．71％,试验1组为0．00％（P〈O．05）;试验2组与试验3组各等位基因表型的检出率差异均无统计学意义（P〉0．05）。HBV基因型B型、C型、非B非C型所占比例,试验1、2、3组的差异无统计学意义（P〉0．05）。试验3组中,HLA—DR1、DR13阳性的5例均为HBV基因C型;其他29例HBV基因C型23例、非B非C型6例（P〉0．05）。[结论]HLA—DR1可能是肝细胞癌的易感基因．携带HLA—DR13基因位点的HBV感染者更易发展为肝细胞癌。     

HLA-DR抗原与HBV宫内感染关系研究

目的 了解人类白细胞抗原-DR(HLA-DR)抗原与HBV宫内感染的关系，探索HBV宫内感染的遗传易感性。方法以1997年2月～1998年8月在太原市传染病医院分娩的HBsAg阳性孕妇新生儿为研究对象．随机选择发生及未发生HBV宫内感染的新生儿各20例，采用序列特异引物PCR(PCR-sequencelspecificprimer，PCR-SSP)技术扩增HLA-DR基因区18对等位基因。判定HLA-DR抗原的型别。计算HLA-DR抗原各型别出现频率并分析其在2组间的差别。结果 DR3、DR51在宫内感染组的频率较高，分别为45％，40％，在非宫内感染组分别为20％。15％，OR值分别为3．27(0．67～17．08)、3．78(0．69～23．02)．P分别为0．18，0．16。DR53在非宫内感染组的频率较高．为60％，在宫内感染组为35％，OR值为0．36(0、08～1．54)P为0．20，均未达显性差异。结论 DR3、DR51有可能是HBV宫内感染的易感型．DR53有可能具有保护作用．但需要扩大样本量进一步研究。     

孕期注射乙肝免疫球蛋白与新生儿HBV宫内感染关系的研究

目的探讨孕期注射乙肝免疫球蛋白对新生儿HBV宫内感染的保护作用。方法以本院2007年10月～2009年10月360例乙型肝炎表面抗原阳性且孕期注射过乙肝免疫球蛋白的孕妇及其新生儿为观察组，以380例乙型肝炎表面抗原阳性且孕期未注射过乙肝免疫球蛋白的孕妇及其新生儿为对照组，比较两组HBV宫内感染发生率的差异，并分析乙肝免疫球蛋白对观察组HBsAg滴度以及I-IBVDNA拷贝数的影响。结果观察组与对照组的宫内感染发生率比较差异无统计学意义（P〉0，05）；孕期乙肝免疫球蛋白注射剂量与HBsAg滴度以及HBVDNA拷贝数无关（P〉0．05）。结论孕期注射乙肝免疫球蛋白对HBV官内传播可能不具有保护作用，孕期注射乙肝免疫球蛋白可、能对孕妇体内的病毒载量无影响。     

乙型肝炎病毒基因型与HBV宫内传播关系的研究

目的：探讨乙型肝炎病毒基因型与HBV宫内传播之间的关系。方法：采集170例HBsAg阳性孕妇及其172例新生儿外周血，巢式PCR检测血清HBV DNA。PCR-RFLP技术结合PCR产物直接测序鉴定HBV基因型。结果：太原地区HBsAg阳性孕妇及其新生儿携带乙型肝炎病毒有B、C、133种基因型，以C型为优势基因型。HBV C型与B型孕妇HBV宫内感染率分别为56．45％、50．00％（x^2=0．092，P=0，761），两组孕妇的HBV宫内感染率差异无统计学意义。所有发生宫内感染的新生儿HBV基因型均与其母亲一致。结论：孕妇感染HBVC型与B型其新生儿发生HBV宫内感染的几率相当。乙型肝炎病毒宫内传播过程中，HBV基因型可能不发生改变。     

免疫预防后HBeAg与HBV宫内感染分析

目的 探讨免疫预防后母亲及其新生儿HBeAg阳性对乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染及婴儿产生抗．HBs的影响。方法 以194例HBsAg阳性孕妇及其所生的196例婴儿为研究对象。通过随访分析母亲或新生儿HBeAg阳性对HBV宫内感染的发生、新生儿HBV持续感染及其与婴儿抗．HBs产生的关系。结果 196例新生儿有10例发生宫内感染，母亲或新生儿HBeAg阳性是宫内感染的危险因素（P〈0．05），RR值分别为4．76（1．28～17．67）、5．53（1．49～20．48），共有1例HBV宫内感染慢性化的婴儿，其出生时HBeAg也阳性。在出生于HBeAg阳性母亲的婴儿、HBeAg阴性母亲的婴儿之间，在出生时HBeAg阳性的婴儿、出生时HBeAg阴性的婴儿之间，在1，4，7月龄随访时各组间抗-HBs的A值差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论 HBeAg可自由通过胎盘，因此该指标不能作为宫内感染与否的判断指标。免疫预防后母亲及新生儿HBeAg阳性与否在宫内感染和慢性化中仍起重要作用。但对婴儿抗-HBs的产生无影响。     

乙型肝炎病毒宫内感染对新生儿发育影响

目的评价乙型肝炎病毒携带孕妇新生儿体格发育状况，研究发生乙型肝炎病毒宫内感染对新生儿发育的影响。方法按标准方法测量新生儿的体重、身高、头围和胸围。214名新生儿中，将新生儿是否发生乙型肝炎病毒（HBV）宫内感染分为宫内感染组和未感染组，采用Z值法评价新生儿的发育状况。结果214名新生儿中有3例（1．40％）新生儿的胎龄别身长Z得分〈-2，为发育迟缓。宫内感染组和未感染组新生儿的体重Z得分（t=0．21，P：0．832）、身长Z得分（t=1．60，P=0．122）、头围Z得分（t=1．03，P=0．311）和胸围Z得分（t=-0．89．P=0．372）的比较差异无统计学意义。男婴的头围Z得分（t=2．15，P=0．034）、胸围Z得分（t=2．37，P=0．019）明显高于女婴，差异有统计学意义。结论214名乙型肝炎病毒携带孕妇分娩的新生儿发育状况较好。未发现乙型肝炎病毒宫内感染对新生儿发育有影响。     

不同方法注射乙肝免疫球蛋白阻断HBV宫内传播的研究

目的：研究不同方法注射乙型肝炎免疫球蛋白（HBIG）对HBsAg和HBeAg双阳性孕妇的乙肝病毒（HBV）宫内阻断作用。方法：A组32例，孕16周起肌注HBIG，每4周1次至分娩；B组32例。孕28周起肌注HBIG，每4周1次至分娩；C组31例未予用药。结果：A组和B组孕妇HBVDNA水平C组显著下降（P〈0．05），其新生儿宫内感染率明显低于C组（分别为5.88％和15.62％），P〈0．05。3组孕妇及其新生儿未发现有不良反应。结论：HBkAg和HBeAg双阳性孕妇孕中期多次注射HBIG可有效减少HBV宫内感染发生率。     

弓形体IgG抗体亲和力指数在胎儿宫内感染中的临床意义

【目的】探讨弓形体（toxoplasma，TOX）IgG抗体亲和力指数，判断弓形体感染孕妇宫内感染的概率。【方法】ELISA法检测中晚期孕妇弓形体特异性抗体IgM和IgG，并对150例TOX—IgM或TOX—IgG阳性孕妇的胎儿或新生儿脐血进行TOX—IgM检测；采用尿素变性试验检测弓形体感染孕妇TOX-IgG抗体亲和力指数（avidityindex，AI）。【结果】孕妇弓形体IgM抗体阳性和IgG抗体阴性58例；弓形体IgM和IgG抗体阳性22例；弓形体IgM抗体阴性和IgG抗体阳性70例。胎儿或新生儿IgM阳性44例。原发性感染宫内感染率高于继发性感染（P〈0．05），活动性感染宫内感染率高于非活动性（P〈0．01），AI≤30％宫内感染率高于AI〉30％（P〈0．01）。【结论]IgG抗体亲和力指数AI≤30％结合IgM阳性有助于提高判断弓形体宫内感染的发生率。     

乙型肝炎病毒基因在宫内传播中的选择性

目的探讨乙型肝炎病毒（HBV）基因突变与宫内传播的关系。方法采用聚合酶链反应（PCR）方法从HBsAg阳性孕妇及其新生儿血清中扩增得到包括HBV前C／C区和前S／S区基因的2．5kb基因片断或前S／S区1．2kb基因片断,克隆、测序,分析测序结果,比较母婴HBV基因序列的差异。结果4对发生宫内感染的母婴HBV序列共得到43株,都属于HBVC基因亚型、adr血清亚型。HBV前S／S区序列中,新生儿序列的差异性低于母体（P〈0．05）。4对母婴问序列的平均相似率分别为99．47％、99．39％、99．37％和99．46％;母婴序列具有高度一致性;每对母婴序列间的进化距离都比较小,核苷酸差异率分别为0．4、0．8、1．2和0．3。母婴序列间均存在1个或数个核苷酸位点的差异,母体内的优势株和新生儿体内的优势株不完全相同。结论母体内的优势株或弱势株都可以通过宫内传播感染新生儿,可能与其基因突变有密切关系。提示HBV的宫内传播存在基因选择性。     

人群HBV易感性与HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因相关性研究

[目的]探讨人类白细胞抗原Ⅰ、Ⅱ类基因与乙型肝炎病毒（HBV）感染的相关性。[方法]2003～2004年，采用PCR-SSP方法对青岛市178例HBV感染者（实验组）和1383名无血缘关系的自愿骨髓捐献者（对照组）分别进行HLA-Ⅰ、Ⅱ类基因分型检测。[结果]HLA-DR9、DR12的分布频率在实验组为30．9％（55／178）和28．0％（50／178），在对照组为20．7％（286／1383）和19．5％（270／1383）（P〈0．01）。[结论]HLA—DR9、DR12有助于HBV对宿主的感染，可能是HBV的易感基因。     

乙型肝炎病毒宫内感染危险因素研究

目的 研究乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的危险因素.方法 采用巢式病例对照研究的方法,进行HBV宫内感染危险因素的logistic回归分析.结果 HBV宫内感染危险因素的单因素分析显示在α=0.05水平上,孕妇DR3、婴儿DR3、母婴DR3同阳性、孕妇血清HBV DNA阳性、孕妇血清HBeAg阳性和胎盘感染在病例组和对照组差异均有统计学意义;是HBV官内感染的危险因素,OR值(95%CI)分别为4.71(1.62～13.66)、3.91(1.18～12.94)、5.96(1.14～31.15)、6.59(2.72～15.97)、4.53(1.93～10.64)和2.51(1.12～5.60);在α入=0.05,α出=0.10水平上,进行HBV宫内感染的多因素logistic回归分析,孕妇DR3(OR=4.65,1.44～15.05)、孕妇血清HBV DNA(OR=6.56,2.65～16.23)被引入回归方程,为HBV宫内感染的危险因素,且两因素间未显示交互作用;其他因素的暴露率在病例组和对照组未见明显差别.随着孕妇血清HBV DNA含量的增加,其发生宫内感染的危险性呈现增高趋势(χ2=16.74,P＜0.os).结论 HBV宫内感染的危险因素为孕妇HLA-DR3阳性和孕妇血清HBV DNA阳性,且两因素间未显示交互作用,HBV宫内感染率随孕妇血中HBVDNA含量增高呈增高趋势.     

HBsAg阳性孕妇血清乙肝病毒含量与HBV宫内感染关系的研究

目的探讨孕妇外周血中HBV含量与HBV宫内感染的关系。方法ELISA法检测孕妇及新生儿外周血HBsAg、HBeAg;FQ-PCR对血清HBVDNA定量检测。结果166例新生儿中有28例发生HBV宫内感染(16.87%);在HBV宫内感染组和非感染组孕妇HBVDNA暴露、各级病毒载量与HBV宫内感染趋势χ2检验差异为有统计学意义;HBVDNA?156copies/ml为HBV宫内感染最佳临界预测值,它的敏感度为81.80%,特异度为72.10%,阳性预测值为37.10%,阴性预测值为95.19%。结论孕妇外周血HBVDNA阳性不仅是HBV宫内感染的危险因素,且随着孕妇血中乙肝病毒含量的增高,其发生HBV宫内感染的危险性呈现增高趋势;孕妇血HBVDNA156copies/ml为HBV宫内感染最佳临界预测值,孕妇血清中HBVDNA水平对于预测新生儿HBV宫内感染较为重要。     

孕妇血清中HBV DNA含量与胎儿宫内感染的关系

[目的]探讨孕妇血清中乙型肝炎病毒DNA(HBV DNA)含量与胎儿宫内感染发生率的关系。[方法]用PCR法检测1 280例乙型肝炎表面抗原(HBsAg)阳性孕妇血清中HBV DNA含量及新生儿血清中HBsAg阳性情况。[结果]1 280例血清中HBV DNA阳性孕妇所分娩的新生儿中,有425例HBsAg呈阳性,宫内感染率为33.20%。按母亲HBV DNA含量滴度的高低分为5×103~4,5×105~6,5×107~8拷贝/mL三组,分别为436例、398例、446例,其胎儿宫内感染分别为8例、82例、335例,感染率为1.83%、20.60%、75.10%,经统计学处理三组差异均有显著性(P<0.01)。[结论]孕妇血清中HBV DNA含量升高是胎儿发生乙型肝炎病毒感染的重要因素之一。     

母胎细胞转运与乙型肝炎病毒宫内感染关系的研究

目的探讨母胎细胞转运与乙型肝炎病毒(HBV)宫内感染的关系。方法用STRPCR、As-PCR及hemi-nPCR技术扩增HBsAg阳性孕妇及其新生儿外周血中胎儿DNA及母亲DNA，通过检测TH01、GSTM1、ACE等位基因确定母．胎细胞转运与胎．母细胞转运。采用巢式病例对照研究方法分析母-胎细胞转运与HBV宫内感染的关系。结果以GSTM1、ACE基因多态性判定母亲源性或胎儿源性等位基因，42对信息病例中有26例新生儿发生了母．胎细胞转运(61．90％，26／42)；40对信息病例中有32例发生了胎-母细胞转运(80．00％，32／40)；10对母胎发生了双向转运。统计分析显示母-胎细胞转运与HBV宫内感染有关联，胎．母细胞转运与HBV宫内感染无关联，母-胎细胞转运与胎-母细胞转运无关。母-胎细胞转运、孕妇PBMC HBV DNA阳性是HBV宫内感染的危险因素，二者未显示交互作用；母-胎细胞转运、孕妇PBMC HBV DNA阳性与新生儿PBMC HBV感染有关，两因素间亦未显示交互作用。结论母胎之间存在细胞转运，母-胎细胞转运是HBV宫内感染的危险因素，这可能是对HBV宫内感染途径的补充。     

HBsAg阳性孕妇新生儿HBV宫内感染的影响因素研究

目的探讨HBsAg阳性孕妇新生儿发生HBV宫内感染的相关影响因素。方法以太原市第三人民医院产前检查并分娩的HBsAg阳性孕妇及其新生儿为研究对象,收集HBsAg阳性孕妇一般情况(年龄、文化程度)、分娩前HBIG注射史、家人HBV感染史、乙肝病毒标志物以及新生儿出生24小时内的乙肝病毒标志物的资料。以新生儿是否发生HBV宫内感染将379例HBsAg阳性孕妇分为两组,HBV宫内感染组36例,非HBV宫内感染组343例,进而分析HBsAg阳性孕妇的一般情况、家人感染HBV史、HBV复制状态、HBV血清标志物阳性模式及HBIG注射史与新生儿HBV宫内感染的关系。结果 (1)单因素分析显示:HBV宫内感染组与非HBV宫内感染组的HBsAg阳性孕妇年龄、HBV复制状态、HBV血清标志物阳性模式的差异均有统计学意义(P<0.05),而两组间HBsAg阳性孕妇文化程度、家人HBV感染史和HBIG注射史的差异均无统计学意义(P>0.05)。(2)多因素Logistic回归分析显示:HBsAg阳性孕妇的年龄(OR=0.398,95%CI0.159～0.996)与HBeAg和HBV DNA双阳性(OR=2.539,95%CI 1.233～5.227)被引入回归方程。同时分析HBsAg阳性孕妇HBV DNA含量分级与HBV宫内感染关系的结果显示其差异有统计学意义(χ2=10.983,P=0.004),且进行趋势卡方分析后,显示HBV DNA拷贝数在>106时,HBV宫内感染率明显上升。结论 HBsAg阳性孕妇年龄(>30岁)是HBsAg阳性孕妇HBV宫内感染的保护因素,而血清HBeAg和HBV DNA均为阳性和HBVDNA拷贝数>106时,其发生HBV宫内感染的可能性较大。     

荧光定量PCR技术用于乙型肝炎病毒宫内感染监测的临床观察

目的:探讨应用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)在宫内感染监测中的意义。方法:应用FQ-PCR检测142例HBsAg阳性孕妇血清及其新生儿脐带血的HBV-DNA,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测孕妇血清及其新生儿脐带血的乙肝血清学标志物,并对其结果进行分析。结果:新生儿脐带血HBV-DNA阳性率(16.2)高于HBsAg的阳性率(9.85),P<0.01;血清HBeAg阳性孕妇,其新生儿脐带血HBV-DNA阳性率为41.0(16/39),高于HBeAg阴性孕妇组的阳性率6.80(7/103),P<0.01;新生儿脐带血的HBV-DNA阳性率随孕妇HBV-DNA含量增加而增加(P<0.01)。结论:孕妇血清HBV-DNA高含量是乙型肝炎宫内感染的高危因素,应用FQ-PCR检测新生儿脐带血HBV-DNA是监测乙型肝炎发生宫内感染的较敏感指标。     

母亲外周血单个核细胞HBV感染对围生儿的影响

目的探讨母亲HBV感染的外周血单个核细胞在HBV宫内感染中的作用。方法用套式多聚酶链反应(nPCR)法分别检测41例HBsAg阳性、12例HBsAg阴性而其他标志物阳性和16例乙肝血清标志物全部阴性的孕产妇及其新生儿血清和外周血单个核细胞中的HBVDNA。结果HBsAg阳性产妇外周血单个核细胞中的HBVDNA阳性率为31.7%(13/41);外周血单个核细胞感染率与血清HBeAg和HBVDNA的状态及水平无关(P>0.05);新生儿外周血单个核细胞HBVDNA阳性率在母亲血清和外周血单个核细胞HBVDNA均阳性组显著高于仅血清阳性组;母亲外周血单个核细胞HBVDNA阳性组显著高于阴性组(P<0.05);1例母亲血清HBVDNA阴性而外周血单个核细胞HBVDNA阳性,其新生儿血清中检出HBVDNA。结论母亲HBV感染的外周血单个核细胞有可能作为载体导致HBV宫内感染。     

HBsAg阳性孕妇新生儿T细胞亚群测定

目的:通过检测HBsAg阳性孕妇分娩的新生儿T细胞亚群,探讨HBV宫内感染与T细胞亚群之间的关系。方法:以太原市第三人民医院妇产科68例HBsAg阳性孕妇分娩的新生儿作为研究对象,应用酶联免疫吸附法检测孕妇和新生儿出生24 h内外周血乙肝病毒标志物,利用实时荧光定量PCR检测母亲和新生儿外周血HBV-DNA含量,使用流式细胞术检测新生儿股静脉血中的CD3+、CD4+、CD8+T细胞亚群,并分析HBV宫内感染与T细胞亚群表达的关系。结果:宫内感染组新生儿股静脉血T细胞亚群CD3+、CD4+、CD8+与未宫内感染组相比升高,CD4+/CD8+与未宫内感染组新生儿相比降低,宫内感染和非宫内感染组新生儿股静脉血T细胞亚群含量比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:尚未观察到HBV宫内感染新生儿T细胞亚群比例失调。     

HBV宫内感染胎盘组织TLR-4、HBD-2及孕妇外周血IFN-γ的相关性

目的:研究乙型肝炎病毒宫内感染TLR-4、HBD-2及IFN-γ水平及相关性。方法:选择乙肝标志物HB-sAg、HBeAg为阳性且肝功能正常的孕妇57例为试验组,根据脐血清乙肝两对半结果,分为宫内感染组26例,宫内未感染组31例,外周血血清HBV标志物均为阴性的正常分娩孕妇20例为对照组,采用ELISA法检测孕妇外周血血清IFN-γ水平;SYBRGreenⅠ实时荧光定量RT-PCR的方法检测TLR-4,HBD-2在孕妇胎盘组织中的表达,选择GAPDH为内参。结果:①宫内感染组TLR-4,HBD-2,IFN-γ的表达均显著低于HBV宫内未感染组及对照组(P<0.01)。宫内未感染组和对照组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。②胎盘TLR-4、HBD-2与孕妇外周血IFN-γ水平均成显著正相关关系(r=0.815,P<0.01;r=0.685,P<0.05)。结论:TLR-4、HBD-2下调与IFN-γ水平下降相关,导致HBV宫内感染。