八氯二丙醚对BALB/c3T3细胞恶性转化的研究

目的 检测八氯二丙醚(S2)的细胞恶性转化作用。方法 采用传代细胞系BALB／c3T3细胞进行细胞毒性实验确定转化实验的剂量范围，再进行细胞转化实验并对转化细胞进行恶性行为鉴定。结果 S2各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶，并呈剂量-反应关系；软琼脂培养证明转化细胞为恶性转化细胞。结论 是其有致BALB／c3T3细胞恶性转化作用，有必要进行深入研究。     

姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤的保护作用

[目的]研究姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤的保护作用。[方法]采用四甲基偶氮唑蓝比色法（MTT试验）和激光扫描共聚焦显微镜技术研究不同浓度（1、5、10μmol／L）的姜黄素对紫外线致细胞损伤的保护作用。[结果]与紫外线照射组（UVR组）相比较，姜黄素预处理（姜黄素＋UVR）组可以提高紫外线辐照细胞的存活率（P〈0．05），减少细胞内活性氧的堆积（P〈0．05），减少细胞线粒体膜电位的下降（P〈0．05）。[结论]姜黄素对紫外线致NIH3T3细胞损伤有保护作用，其作用机制可能与清除细胞内的活性氧，维持细胞的线粒体膜电位有关。     

利用体外3T3细胞中性红摄取试验检测化学物质光毒性作用

目的建立体外Balb/c3T3细胞中性红摄取法作为检测化学物光毒性的试验方法,初步探讨体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取法作为豚鼠光毒性试验的一种替代方法。方法采用体外培养的BaLb/c3T3细胞建立反应的最佳条件。结果中性红浓度、孵育时间、pH值、性别浓度等是影响试验结果的因素。结论体外BaLb/c3T3细胞中性红摄取试验可作为动物光毒性试验的替代方法。     

硫辛酸和维生素E对氢醌所致V79细胞毒性及线粒体膜电位影响的干预性实验

目的研究氢醌对V79细胞的毒性作用和线粒体膜电位的影响,探讨硫辛酸和维生素E的干预性作用。方法采用MTT和荧光探针JC-1,分别测定一定浓度氢醌与硫辛酸和维生素E单独或联合作用对细胞存活率及线粒体膜电位的影响。结果与对照组比较,50μmol/L和100μmol/L氢醌可导致V79细胞存活率和线粒体膜电位的下降;与单纯氢醌组比较,硫辛酸和维生素E能明显拮抗50μmol/L和100μmol/L氢醌所引起的V79细胞存活率的下降,并且50μmol/L的硫辛酸可以提高50μmol/L氢醌所引起的V79细胞线粒体膜电位的下降,而25μmol/L的维生素E对50μmol/L氢醌引起的V79细胞线粒体膜电位的下降没有影响。结论氢醌对V79细胞具有细胞毒性和线粒体毒性作用;一定浓度的硫辛酸和维生素E都可以拮抗氢醌对V79细胞产生的毒性作用。提示,硫辛酸可能具有线粒体靶向保护作用。     

煤焦油对NIH/3T3细胞的毒性作用

以某炼焦厂煤焦油为受试物,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测NIH/3T3细胞活性。结果不同浓度下的煤焦油作用一定时间后,NIH/3T3细胞存活率下降,随着浓度的增加和作用时间的延长,这种抑制作用也愈加明显,同时细胞在形态学上也出现一系列的改变。接触受试物24 h,细胞生长半数抑制浓度IC50为58.2μg/L,同时镜下观察细胞形态也发生了改变。提示煤焦油可以抑制NIH/3T3细胞生长,降低其线粒体代谢活性。     

三氯乙烯对体外培养皮肤KC细胞线粒体的损伤作用

目的：探讨三氯乙烯（TCE）对体外培养的人皮肤角质形成细胞线粒体的损伤作用：方法：不同浓度的TCE作用于体外培养的人皮肤角质形成细胞不同时间后．利用MTT法检测细胞活力改变,并据此计算线粒体酶活力抑制状况;利用试剂盒检测ATP酶活力抑制状况。结果：随着TCE浓度的升高和作用时间的延长,细胞活力、ATP酶活性下降,线粒体酶抑制率升高．当TCE浓度超过0．5mmol／L,作用时间大于8h时,与空白对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）：结论：TCE可引起体外培养的皮肤KC细胞线粒体发生损伤。     

染料木黄酮对NIH/3T3细胞体外短期转化实验的影响

目的：通过观察染料木黄酮对NIH／3T3细胞体外恶性转化的影响，研究染料木黄酮在癌症起始阶段的预防作用。方法；体外短期转化实验。结果：染料木黄酮在对细胞无明显毒性的浓度下，对MNNG所诱发NIH／3T3细胞恶性转化有明显的抑制作用，其最低抑制浓度为3．7μmol/L。结论：染料木黄酮可能是化学致癌过程的抑制剂。     

纳米二氧化钛对小鼠成纤维细胞的毒性作用

目的探究纳米二氧化钛对小鼠成纤维(Balb/3T3)细胞的毒性作用。方法将处于对数生长期的Balb/3T3细胞暴露于含终浓度分别为0(对照)、1、10、50、100μg/ml纳米二氧化钛颗粒(粒径分别为30、50、100 nm)的DMEM完全培养基中培养24 h。采用CCK-8法测定细胞活性,通过测定细胞培养液上清中LDH的活力来检测细胞膜的完整性,并通过测定细胞内ROS含量来探讨细胞毒性的产生机制。结果与对照组比较,10~100μg/ml不同粒径的纳米二氧化钛染毒组Balb/c3T3细胞的存活率均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着纳米二氧化钛染毒浓度的升高和纳米二氧化钛粒径的下降,Balb/c3T3细胞的存活率呈下降趋势。与对照组比较,10~100μg/ml不同粒径的纳米二氧化钛染毒组Balb/c3T3细胞培养液上清中LDH的活力和ROS的含量均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着纳米二氧化钛染毒浓度的升高,Balb/c3T3细胞培养液上清中LDH的活力和ROS的含量均呈上升趋势。结论纳米二氧化钛对小鼠成纤维细胞的毒性作用呈明显的剂量效应和尺寸效应,纳米二氧化钛诱导Balb/c3T3细胞产生大量活性氧(ROS)可能是导致其产生细胞毒性的主要原因。     

镍化物诱导的BALB/c-3T3转化细胞中端粒酶的表达

为了探讨镍化物诱导BALB/c- 3T3 细胞转化过程中的分子毒作用, 本研究采用TRAP—银染法检测镍对转化细胞端粒酶活性的影响。结果显示, 硫化镍、氯化镍和硫酸镍在中等细胞毒性反应剂量水平诱导的BALB/c- 3T3细胞转化过程中的端粒酶活性均表现为阳性。提示, 镍对细胞端粒酶的阳性表达与细胞转化作用密切相关, 反映了三种镍化物的致癌性或潜在致癌性     

榉木尘对体外培养细胞微核和多核效应观察

目的　探讨榉木尘的诱变性 ,方法　本研究选用BALB/c - 3T3细胞 ,采用榉木尘水提取液与有机提取液进行微核和多核效应测试。结果　榉木尘 2种提取液均存在细胞毒性 ,并可引起BALB/c - 3T3细胞微核和多核细胞率的明显提高 ,剂量反应关系成立。结论　有机提取液体外细胞毒性及诱变性均大于水提取液。     

哈尔滨市水源地江水对NIH3T3细胞的恶性转化作用

用哈尔滨市水源地江水的３种有机提取物（乙醚，丙酮和二氯甲烷）分别做ＮＩＨ３Ｔ３细胞转化试验结果表明：３种有机提取物各剂量组均能诱发该细胞出现典型的细胞转化灶，其细胞转化率呈现剂量反应关系。转化细胞的恶性表现是生长失去接触性抑制并能在软琼脂内生长。提示该江水可能具有潜在的致癌作用。     

Pear pomace water extract inhibits adipogenesis and induces apoptosis in 3T3-L1 adipocytes

Obesity occurs when a person''s calorie intake exceeds the amount of energy burns, which may lead to pathologic growth of adipocytes and the accumulation of fat in the tissues. In this study, the effect and mechanism of pear pomace extracts on 3T3-L1 adipocyte differentiation and apoptosis of mature adipocytes were investigated. The effects of pear pomace extract on cell viability and the anti-adipogenic and proapoptotic effects were investigated via MTT assay, Oil red O staining, western blot analysis and apoptosis assay. 3T3-L1 preadipocytes were stimulated with DMEM containing 10% FBS, 0.5 mM 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX), 5 µg/ml insulin and 1 µM dexamethasone for differentiation to adipocytes. 3T3-L1 cells were cultured with PBS or water extract of pear pomace. Water extract of pear pomace effectively inhibited lipid accumulations and expressions of PPAR-γ and C/EBPα in 3T3-L1 cells. It also increased expression of p-AMPK and decreased the expression of SREBP-1c and FAS in 3T3-L1 cells. The induction of apoptosis was observed in 3T3-L1 cells treated with pear pomace. These results indicate that pear pomace water extract inhibits adipogenesis and induces apoptosis of adipocytes and thus can be used as a potential therapeutic substance as part of prevention or treatment strategy for obesity.     

石榴皮提取物对偏钒酸钠染毒小鼠海马区的影响作用初探

目的 探究石榴皮提取物对偏钒酸钠染毒小鼠海马区的影响。方法 攀枝花硬籽石榴制备石榴皮提取物;C57BL/6J雄性小鼠50只随机分为空白对照组、模型组及低、中、高剂量石榴皮提取物干预组。模型组和干预组每2天腹腔注射偏钒酸钠（3mg/kg·bw）溶液,干预组每日分别用100、200和400mg/kg·bw石榴皮提取物灌胃,对照组做生理盐水同等处理,共计12周。HE染色观察海马组织病理学特征,核磁共振弥散张量实验评价小鼠海马白质完整性,Morris水迷宫评价小鼠空间学习记忆能力。结果 与对照组相比,模型组和石榴皮提取物各剂量干预组小鼠体重降低（F=4.327,P=0.015）,脑组织脏器系数与体重变化趋势相反（F=5.159,P=0.002）;Morris水迷宫中,各组小鼠学习能力相当,模型组逃避潜伏期增加、目标象限停留时间减少、穿越平台次数减少,提示小鼠记忆力受损,PPE干预后,小鼠记忆力能力有所提高,以低剂量PPE干预效果更好;弥散张量成像实验中模型组各向异性分数（fractional anisotropy,FA）降低,石榴皮干预组FA值升高（F=13.550,P<0.001）。海马CA1区HE染色结果显示模型组锥体细胞排列紊乱、细胞间隙增加、出现细胞坏死,而石榴皮提取物干预组细胞形态有所改善。 结论 石榴皮提取物具有拮抗钒神经毒性的潜在作用。     

米氏凯伦藻甲醇氯仿提取物的细胞毒性分析

目的研究米氏凯伦藻提取物对3株肿瘤细胞的增殖抑制作用,分析米氏凯伦藻对人类健康的可能威胁。方法以体外培养的人宫颈癌细胞HeLa、人肝癌细胞HepG2和人肺癌细胞A549为研究对象,采用MTT比色法检测米氏凯伦藻中提取物对3株细胞增殖的影响;观察毒素在不同时间(12、24、36和48h)下对肿瘤细胞增殖的抑制情况;采用免疫荧光染色法分析比较3株细胞膜上GM1的相对含量。结果米氏凯伦藻提取物对3种肿瘤细胞的增殖均具有显著的抑制作用。与肝癌细胞HepG2相比,宫颈癌细胞HeLa和肺癌细胞A549对其更为敏感(P<0.01)。肝癌细胞HepG2、宫颈癌细胞HeLa和肺癌细胞A549细胞膜上GM1的相对含量差异不大(P>0.05)。结论米氏凯伦藻提取物具有明显的细胞毒性,对人类健康存在潜在威胁。米氏凯伦藻提取物在细胞膜上作用靶点比较复杂。     

沙尘暴细颗粒物致大鼠肺泡巨噬细胞DNA损伤

[目的]探讨沙尘暴和正常天气细颗粒物(PM2.5)及其水提取物和有机提取物对大鼠肺泡巨噬细胞的细胞毒性和DNA的损伤作用。[方法]沙尘暴和正常天气PM2.5于2004年3月采集自甘肃省武威市和内蒙古自治区包头市。细胞毒性用四甲基偶氮唑盐(MTT)分析法观察,细胞DNA损伤用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术检测。[结果]沙尘暴和正常天气PM2.5及其水提取物和有机提取物均对大鼠肺泡巨噬细胞产生一定的细胞毒性,且随剂量的增大而增强;然而,沙尘暴与正常天气之间除了包头沙尘暴PM2.5有机提取物之外,余差异均无显著性。正常天气PM2.5和沙尘暴PM2.5水提取物和有机提取物均可引起细胞DNA损伤,且随剂量增加而损伤增大;正常天气PM2.5比沙尘暴PM2.5水提取物和有机提取物对细胞DNA损伤作用更大。不论正常天气PM2.5还是沙尘暴PM2.5,其有机提取物对DNA的损伤作用均比水提取物作用更强,表明PM2.5中引起DNA损伤的主要化学物是有机化合物种类。武威与包头两城市工业水平不同,大气污染程度不同,但两地沙尘暴PM2.5及其水提取物和有机提取物对细胞DNA的损伤作用,在两地之间并无明显差异。[结论]正常天气PM2.5和沙尘暴PM2.5及其水提取物和有机提取物均可引起DNA损伤,且正常天气PM2.5的损伤作用更强;然而不同地方沙尘暴PM2.5毒性作用未见差异,推测其所含遗传毒性化学物可能类似。     

自来水及水源水有机提取物对巨噬细胞的损伤作用

目的 探讨城市供水有机提取物对巨噬细胞的影响。方法 小鼠腹腔巨噬细胞染毒有机提取物后,应用MTT实验,乳酸脱氢酶泄漏实验及形态学观察等方法进行检测。结果 某水厂的水源水及出厂水在所选的各浓度均引起巨噬细胞的损伤,并有明显的剂量－反应关系;在相同浓度下,出厂水的有机提取物引起细胞的损伤程度大于源水。拟建水源水只在高剂量下引起巨噬细胞损伤。结论 无论源水或出厂水,尽管有机污染物的组成成分不同,但均含有损伤巨噬细胞的物质。有机提取物对巨噬细胞 的毒性作用 与其潜在致癌作用有关。     

蓝藻提取物对原代培养大鼠肝细胞的毒性作用研究

用蓝藻提取物处理大鼠肝细胞,通过测定乳酸脱氢酶渗出率、显微镜直接观察细胞形态改变及吖啶橙／溴乙啶联合染色后观察细胞核的改变来评价其毒性作用及方式。结果：乳酸脱氢酶渗出率呈明显的剂量和时间效应式增加;细胞形态改变包括收缩、变圆、变小、出现胞膜包;细胞核的改变有碎裂、浓缩、染色质收缩等,发生这类改变的细胞占总细胞数的比例随剂量和时间的增加而增加。结论：蓝藻提取物对原代培养大鼠肝细胞有明显的毒作用,其主要作用方式是引起凋亡     

中药金叶败毒改善豚鼠巨细胞病毒所致细胞线粒体膜电位损伤的体外研究

目的:通过检测线粒体膜电位的变化,探讨巨细胞病毒对线粒体膜电位的影响以及药物对线粒体膜电位的保护作用。方法:制备细胞飞片,用共聚焦显微镜检测正常对照组、病毒组、金叶败毒组和更昔洛韦组的细胞线粒体膜电位。结果:正常对照组各时相线粒体膜电位无明显变化。病毒组12h线粒体膜电位增高,48h线粒体膜电位开始降低,72h膜电位明显降低,部分细胞脱落。金叶败毒组和更昔洛韦组与正常细胞组相比差异无显著性,与病毒对照组比较24h、48h和72h3个时相差异具有显著性。结论:豚鼠巨细胞病毒感染可以导致线粒体膜电位降低,诱导细胞凋亡;金叶败毒和更昔洛韦对豚鼠巨细胞病毒所诱导的线粒体膜电位损伤有保护作用。     

Cytotoxicity screening of several tomato extracts

The cytotoxic effects of extracts of the tomato variety "Racimo" have been evaluated through the use of the 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) assay at several concentrations. Three extracts-ethanol-water, petroleum ether, and in vitro digested tomato-exhibited in vitro cytotoxicity against the proliferation of the cultured cancer cell line HT-29. The concentration that caused 50% inhibition of cancer cell growth occurred (GI(50)) of the different extracts for HT-29 cells was 62.5?μg/mL for the petroleum ether extract and 87.0?μg/mL for the digested tomato extract. For the ethanol-water extract, it was not possible to determine this parameter at the assayed extract concentrations. These results clearly indicate that after the digestion process, the less polar substances, such as carotenoids and sterols, are bioavailable as active species against cancer cells. The GI(50) levels for tomato extracts are similar to those values reported for medicinal plants. The results of the MTT assay on nonmutagenic CCD-18 cells showed a lack of negative effect on cell growth, which indicates that tomato extracts act selectively on HT-29 tumor cells. (1)H-Nuclear magnetic resonance spectra confirmed the presence of known compounds with accepted cytotoxic activity against tumor lines (lycopene and β-carotene). The high cytotoxicity for HT-29 cells showed by the petroleum ether extract might be due to the simultaneous presence in the extract of both carotenoids and glyceryl esters of fatty acids. The results of this work clearly indicate the importance of carotenoid consumption on colon tumor proliferation and prevention, and also the importance of the dietary fats in carotenoid bioavailability.