缝隙连接和卵巢卵泡发育的关系研究进展

卵巢中的卵泡处于无血管的微环境中,因而缝隙连接介导卵母细胞和其周围体细胞(颗粒细胞和卵泡膜细胞)的代谢交换,传递内分泌和旁分泌的生长因子。卵巢卵泡的整个发育过程离不开细胞间的缝隙连接。连接蛋白Cx32、Cx37、Cx43、Cx45和Cx57参与卵泡的发育,其中Cx43和Cx37对卵巢卵泡的发育起了至关重要的作用。现就卵巢卵泡的发育和缝隙连接的关系进行综述。     

间隙连接蛋白Cx43和Cx37在多囊卵巢综合征大鼠卵巢中的表达及意义

目的:建立来曲唑诱导的多囊卵巢综合征(PCOS)动物模型,观察Cx43和Cx37在PCOS大鼠卵巢中的表达变化,探讨PCOS的发病机制。方法:①选择6周龄SD清洁级雌性大鼠60只,随机分为实验组、实验对照组、空白对照组,每组各20只。应用来曲唑灌胃制备PCOS大鼠模型,观察3组大鼠双侧卵巢及子宫大体解剖及组织学改变。②放射免疫法测定血清LH、FSH、E2、P、T水平。③免疫组化法观察卵巢组织中Cx43和Cx37的表达变化。结果:①动情周期:实验组大鼠失去规律性动情周期变化,提示无排卵。②器官重量:卵巢重量实验组显著高于实验对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05);子宫重量实验组显著低于实验对照组及空白对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。③卵巢组织学检查:实验组早期发育的小卵泡及闭锁卵泡,囊状扩张卵泡明显增加,颗粒细胞层数减少至2～3层,卵泡内卵母细胞或放射冠消失,黄体数量明显下降并伴有不完全的黄素化,而对照组镜下见多个黄体及不同发育阶段的卵泡,有排卵表现。④血清性激素水平:实验组血清T、LH、FSH浓度显著高于实验对照组及空白对照组(P<0.05),血清E2、P实验组浓度显著低于实验对照组及空白对照组(P<0.05)。⑤卵巢的颗粒细胞中Cx43的表达水平实验组显著低于实验对照组及空白对照组(P<0.05),卵母细胞与颗粒细胞间Cx37的表达水平实验组显著低于实验对照组及空白对照组(P<0.05)。结论:①来曲唑诱导的大鼠模型是理想的PCOS动物模型。②Cx43和Cx37在实验组卵巢中表达下调,与PCOS的发病密切相关。     

大气细颗粒物对心肌细胞缝隙连接通讯的影响

目的 探讨大气细颗粒物(PM2.5)对原代培养大鼠心肌细胞的急性毒性作用及对缝隙连接通讯的影响.方法 对出生24 h的SPF级SD大鼠乳鼠分离心肌细胞进行原代培养,以不同浓度(0、1、10、100g/μml)的PM2.5染毒24 h,采用划痕染料标记示踪法(SLID)测定细胞缝隙连接通讯(GJIC)水平,采用间接免疫荧光细胞化学方法测定缝隙连接蛋白Cx43分布及密度,采用免疫印迹法测定连接蛋白Cx43的表达.结果 随PM2.5浓度的上升,细胞间荧光扩散面积减少,细胞膜连接处Cx43绿色荧光减弱,Cx43蛋白表达量稍有减少.与对照组比较,10和100μg/ml染毒组细胞间荧光扩散面积减少,差异有统计学意义(P<0.01);10和100 μg/ml染毒组Cx43荧光强度下降,差异有统计学意义(P<0.01).结论 PM2.5可抑制心肌细胞的缝隙连接通讯功能.其机制可能是通过影响心肌细胞的Cx43表达和分布.     

子宫内膜基质细胞的缝隙连接蛋白43及其作用

子宫内膜基质细胞靠缝隙连接传递信号,在月经周期不同的激素调节下,协调一致地呈现周期性变化。缝隙连接蛋白是子宫内膜基质细胞上缝隙连接的基本单位。缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)参与了细胞生长、分化、肿瘤化、血管重塑、凋亡等过程,Cx43的正常表达是发生蜕膜反应的必要条件,直接影响子宫内膜对胚胎的容受性;同时参与子宫内膜异位症、子宫内膜癌等病理反应。由于目前辅助生殖技术的成功率主要受限于较低的胚胎着床率,能够区别容受性与非容受性子宫内膜的生物学标记尚不明确。因此,阐明如何诱导形成容受性子宫内膜,以及如何维持容受性变得尤为重要。本文综述了Cx43如何参与蜕膜反应,与子宫内膜容受性的关系,Cx43的信号调节通路及其与子宫内膜疾病发生的关系,分析了Cx43参与诱导容受性子宫内膜的可能机制。     

缝隙连接蛋白43在生殖中的研究进展

摘要：子宫内膜基质细胞靠缝隙连接传递信号,在月经周期不同的激素调解下,协调一致地呈现周期性的变化。缝隙链接蛋白作为子宫内膜基质细胞上缝隙连接的基本单位,缝隙链接蛋白43（connexion43,Cx43）参与了细胞生长、分化、肿瘤化、血管重塑、凋亡等过程,Cx43的正常表达,是发生蜕膜反应的必要条件,直接影响子宫内膜对胚胎的容受性。同时参与了子宫内膜异位症,子宫内膜癌等病理反应。由于目前辅助生殖技术成功率主要受限于较低的胚胎着床率,能够区别容受性与非容受性子宫内膜的生物标志尚不清楚。因此,阐明如何诱导形成容受性子宫内膜,以及如何维持容受性变得尤为重要。本文综述了Cx43如何参与蜕膜反应,与子宫内膜容受性的关系,Cx43的信号调节通路及其与子宫内膜疾病发生的关系,分析了Cx43参与诱导容受性子宫内膜的可能机制     

微小RNA在卵巢颗粒细胞中的研究进展

微小RNA(microRNAs,miRNAs)是一类内源性非编码RNA,可以在转录后水平通过对靶基因的调控,影响蛋白质的表达,其参与调节各个环节的细胞生命活动。特定的miRNAs低表达、过表达或者变异都可能引起细胞功能的异常。卵巢颗粒细胞是卵泡中最重要的体细胞,其围绕在卵母细胞周围,可合成多种激素及生长因子,并表达其受体,通过缝隙连接调控卵泡膜细胞和卵母细胞的生长、分化和成熟,进而调控卵泡的发育。MiRNAs在卵泡发育过程中的作用除了miRNAs对卵母细胞的直接作用外,其在颗粒细胞中的调控作用也尤为重要。研究发现,miRNAs在卵巢颗粒细胞的增殖与分化、凋亡、性激素分泌等过程中发挥重要的作用。本文综述近年卵巢颗粒细胞中miRNAs的研究进展。     

PCOS患者糖脂代谢特点及其相关细胞因子参与卵泡发育的研究现状北大核心CSCD

多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是常见的女性内分泌、代谢紊乱性疾病,其糖脂代谢异常与生殖功能障碍密切相关。卵巢是能量代谢活跃的器官,颗粒细胞的增殖,卵母细胞的发育成熟及排卵,都是耗能的过程,需要足够的能量供应。糖、脂类在颗粒细胞中被分解,通过缝隙连接为卵母细胞发育提供能量。PCOS患者糖脂代谢异常表现在卵巢颗粒细胞和卵泡液中信号分子及细胞因子、卵泡液中代谢产物的变化,影响卵泡发育及卵母细胞质量。本文就PCOS患者糖脂代谢特点及与糖脂代谢相关的细胞因子对卵泡发育和卵细胞质量的影响进行综述,为临床提供参考。     

缝隙连接蛋白43及26mRNA在自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺组织中的表达

目的 研究自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者甲状腺组织中缝隙连接蛋白(Cx)43、Cx26基因表达的变化.方法 外科手术收集76例甲状腺组织,均经病理诊断.其中Graves病(CD)30例(GD组),桥本甲状腺炎(HT)30例(HT组),甲状腺腺瘤旁正常甲状腺组织16例(正常组).应用反转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)技术,以GAPDH为内参照分析三组甲状腺组织中Cx43、Cx26mRNA表达的差异.结果 正常及AITD甲状腺组织中均表达Cx43及Cx26 mRNA;Cx43及Cx26mRNA在GD组甲状腺组织中的表达明显高于正常组(0.9307±0.0716比0.5938±0.0484,0.7371±0.0463比0.3431±0.0399)(P＜0.01),在HT组中的表达明显低于正常组(0.3581±0.0458比0.5938±0.0484,0.3150±0.0218比0.3431±0.0399)(P＜0.01或＜0.05).结论 Cx43、Cx26 mRNA在人甲状腺组织中有所表达,且其表达在AITD患者甲状腺组织中有明显变化,提示缝隙连接与AITD发生有关.     

牛磺酸对青春前期大鼠睾丸缺血再灌注Cx43蛋白表达的影响

正睾丸扭转是导致睾丸损伤的泌尿外科急症之一,尤以青少年多发,常为单侧,在25岁以下的男性中发病率高达1/4000[1]。众多学者认为其过程主要是缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,IRI)。缝隙连接(gapjunction,GJ)在细胞之间起着重要的电和生物化学分子信号传递的作用,睾丸组织中GJ通道主要由缝隙连接蛋白43(connexin 43,Cx43)构成[2]。目前关于     

缝隙连接蛋白43在长波紫外线诱发人皮肤光老化中的作用

目的 探讨缝隙连接蛋白43（connexin 43，Cx43）在长波紫外线（ultraviolet A，UVA）诱发人皮肤光老化中的作用。方法（1）体外培养原代人皮肤成纤维细胞（human dermal fibroblasts，HDFs），分为对照组、UVA照射组，采用CCK-8实验筛选出安全条件后，使用5 J/cm2 UVA照射实验组细胞1 h；在照射后0 h、6 h、12 h、24 h分别收集细胞及培养上清液，采用ELISA法检测细胞上清中基质金属蛋白酶-1（matrix metalloproteinases-1，MMP-1）和MMP-9的水平；采用qRT-PCR法和Western blot法检测细胞内Cx43 mRNA和蛋白的表达水平。（2）瞬时转染Cx43-siRNA，采用ELISA法检测细胞上清中MMP-1和MMP-9的水平。（3）将HDFs分为对照组、UVA组、UVA+TNF受体1中和抗体组，经UVA照射后，采用qRT-PCR和ELISA法检测细胞中Cx43 mRNA表达和上清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）和MMP-1水平。结果（1）与对照组相比，UVA组MMP-1和MMP-9水平呈时间依赖性上升（P<0.001），同时Cx43 mRNA和蛋白表达水平均明显下降（P<0.01）；（2）Cx43-siRNA显著下调Cx43表达后，MMP-1和MMP-9水平显著上升（P<0.001）；（3）与对照组相比，UVA组TNF-α和MMP-1水平显著上升（P<0.01），同时UVA+TNF受体1中和抗体组Cx43和MMP-1水平无明显升高。结论 Cx43可能参与介导了UVA通过诱导TNF-α信号通路引发的皮肤光老化过程，这种介导作用可能是通过Cx43对皮肤中MMP-1的调控得以实现。