人类细胞系鉴定中高变DNA探针的应用

动物细胞的组织培养和增殖,已广泛地运用于许多学科、如生物学,遗传制图,移植,和基因治疗。在这些领域中,细胞培养技术发展很快,同时,细胞培养中,发生“交叉污染”的危险性也相应增加。因而有必要建立一种快速,可靠的进行细胞系鉴定的方法。 培养细胞中,“交叉污染”的发生率可高达16～35％(Nelson-Rees,1978;Hukku etal.,1984)特别当细胞具有相同表型时,这种污染就难检出。Hela细胞系,一种来自子宫颈癌的细胞,已被90种细胞系污染。(Nelson-Rees amd Flandermeyer,1976;Nelson-Reesetal.,1981)特别一提的是,这     

细胞培养中化学致癌作用的研究进展(文献综述)

早在200年以前,人们就开始注意到化学物质可引起人和动物发生肿瘤。随着工业的发达,人和化学致癌物接触的机会增多,化学致癌物在肿瘤发生中的作用也日益受到重视。近20年来,由于把细胞培养方法引进化学致癌作用的研究工作中,为这方面的工作开辟了广阔的领域,起到了积极的推动作用。本文分三个方面介绍了细胞培养中化学致癌作用的研究进展:一、细胞培养恶性转化的标准;二、研究细胞培养中化学致癌作用的常用细胞系统;三、细胞培养中化学致癌作用的研究动向。前二部分主要介绍细胞培养中化学致癌作用的基本概念与方法,第三部分是本文的重点,着重介绍这一方法在癌变机理、肿瘤的化学病因及预防等方面研究中的应用。     

与肺癌和胃癌转移可能相关的RAB5A基因

目的 研究和分离肿瘤转移相关基因,探讨肺癌及胃癌转移发生的分子基础。方法 应用细胞培养、ｍＲＮＡ差异显示技术、ｃＤＮＡ克隆、测序技术、ＲＴ－ＰＣＲ、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术以及免疫组化技术,分析比较了细胞来源相同,但转移能力不同的人肺腺癌细胞系Ａｎｉｐ９７３和ＡＧＺＹ８３－ａ基因差异表达及其差异表达基因ＲＡＢ５Ａ在临床胃癌和肺癌标本中存在的实际意义。结果 在两细胞系之间确有明显的差异表达基因存     

妇科肿瘤细胞的不同制备手段对AFM分析结果的影响

目的 探讨细胞培养技术、细胞印片技术和液基薄层细胞制片技术对原子力显微镜（AFM）分析人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞微观形貌的影响。方法 采用细胞培养技术制备人低转移卵巢癌细胞株HO-8910和高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM样品,细胞印片技术制备浆液性卵巢癌细胞样品,液基薄层细胞制片技术制备宫颈鳞癌细胞和正常宫颈细胞样品,并采用AFM对3种方法制备的细胞微观形貌进行对比,分析各自特点。结果 3种方法制备的妇科肿瘤细胞样品,AFM观察均显示细胞核增大和胞质分散的形貌特征,以及多个细胞核易聚集和叠加重合,导致细胞尺寸进一步增大的特点。细胞培养技术制备的卵巢癌细胞,细胞呈长方形,整体长度为30～40μm,不能清楚分辨细胞核;细胞印片技术制备的卵巢癌细胞,细胞呈不规则的多边形,胞核为圆形,平均直径为15μm左右;液基薄层细胞制片技术制备的宫颈癌细胞,细胞为裸核、圆形,胞核与周围组织关系孤立,平均直径为30μm。结论 细胞培养技术、细胞印片技术和液基薄层细胞制片技术制备的妇科肿瘤细胞样品均适用于AFM的观察和分析。不同类型的肿瘤细胞受制备方法不同的影响在基底上的形态不同。     

小细胞肺癌的染色体改变及意义

小细胞肺癌(SCLC)以其独特的组织学结构、生长迅速、侵袭力强及早发远处转移的生物学特性而有别于其他非小细胞肺癌(NSCLC).近年来,随着体外细胞培养技术、单克隆抗体技术和分子遗传学技术的广泛应用,SCLC的病因学研究取得了可喜的进展。其中,探索SCLC发生发展的遗传学证据,已成为SCLC研究中一个新兴的重要领域。随着实体瘤染色体分析技术的普遍应用,对SCLC染色体改变的研究正受到愈来愈多的重视。     

利用双层细胞培养技术对粒系造血的探讨

研究造血微环境及基质细胞对造血的影响，在生理和病理造血中均具有重要意义。我们采用以人脐静脉内皮细胞为铺层的双层细胞培养技术，对１０例正常骨髓细胞及１５例再生障碍性贫血（再障）患者粒系造血的情况进行了体外ＣＦＵ－ＧＭ半固体双层细胞培养的观察。１材料与方...     

蚯蚓提取物的紫外光谱特征及细胞毒性作用

本文采用细胞培养技术和紫外分光光度法,研究了各种蚯蚓提取物(912)在热处理及透析后,其在416nm处吸收峰有改变,且细胞毒毒性减低,该吸收峰高低与细胞毒毒性强弱有关。     

获奖著作《组织培养和分子细胞学技术》

《组织培养和分子细胞学技术》是北京市肿瘤研究所鄂征教授历时三载精心编著，由北京出版社出版的技术性参考书。该书共80余万字，分两篇17章；由第一篇细胞培养和第二篇分子细胞学技术组成，两部分内容有承上启下的联系。第一篇系统介绍了组织培养技术，主要内容包括：①细胞在体外的生长、分化和增殖的规律，以及生存条件等理论基础；②细胞培养方法的普遍原则和基本过程；③个别组织细胞的培养方法；④各种研究体外培养细胞的技术方法；⑤培养细胞在各种研究中的应用等。第二篇为应用分子生物学技术研究细胞的方法，包括：①分子细胞学理…     

关节软骨组织工程的现状和趋势

关节软骨缺损修复是骨科一个重要课题,随着细胞培养技术和生物材料的不断提高,采用关节软骨组织工程的方法,可以在体外成功地培养出关节软骨组织,并在动物实验中可修复关节软骨。现将近年来关节软骨组织工程的研究现状和进展作一综述。     

太空培养真实3D癌细胞推进癌症治疗

<正>近期,研究人员尝试用一种名"磁3D细胞培养"的生物打印方法,在太空中培养出与人体内癌细胞结构更为接近的3D癌细胞结构,这将为癌症的治疗提供重要线索。目前,美国宇航局(NASA)的附属研究中心Bio Serve Space Technologies正在开展一个名为"磁性3D细胞培养"的研究项目。该项目使用一种在地球上开发的生物打印技术,     

自制简易CO2温箱在细胞培养实验中的应用

自制简易ＣＯ＿２温箱在细胞培养实验中的应用皮至明，成积儒广西梧州市肿瘤防治研究所免疫室（５４３００２）目前，许多实验室都应用细胞培养技术以开展各种研究工作，但许多细胞都要求培养环境具有恒定地供应一定量的ＣＯ２（容积为５％），以维持培养液ｐＨ值的恒定［...     

巴氏法对异体骨中HIV病毒灭活效果的研究

目的 研究巴氏消毒法对异体骨材料中污染的人免疫缺陷病毒的灭活效果.方法 对连续3批异体骨材料进行浸泡染毒,用巴氏消毒法处理染毒异体骨材料,采用细胞培养法测定处理后的病毒滴度,并对样品进行细胞盲传3代,观察细胞病变情况.结果 用巴氏消毒法处理,染毒异体骨材料中HIV-1 IIIB毒株病毒滴度至少降低了5.67log,对检测标本盲传3代均未出现细胞病变.结论 巴氏消毒法能够有效灭活异体骨材料中污染的人免疫缺陷病毒.     

肿瘤混合粘液核芯肽诱发小鼠免疫反应实验研究

我们采用凝胶过滤和密度梯度离心技术从胰腺癌细胞株SW1990细胞匀浆和细胞培养上清中提取了肿瘤粘液，用无水氧氟酸方法去掉糖链后获得粘液核芯肽，经PAGE和SDS-PAGE及免疫印迹分析表明．从细胞匀浆和细胞培养上清提取的粘液为同一成份。分子量为670kD，亚单位为28kD，以二硫链相连，     

牛血清促进细胞生长活性的鉴定——微量滴定法

在肿瘤科研中,体外细胞培养技术得到了广泛的应用。体外细胞培养的成败往往取决于血清的质量。不同批号的血清质量差异较大,必须先行质量鉴定方可使用。其检测方法虽有多种,但因较为繁琐费时,许多实验室仍在寻求一种既简便易行,又能正确鉴定促进各种不同类型细胞生长活性的常规检测手段。姜述德建立了微量滴定法,我们在此基础上加以改进,现报告如下。 检侧细胞:人喉癌上皮样细胞HEP—2和人胚肺二倍体成纤维细胞SL—7。前者用含10％小牛血清RPMI1640培养液,后者用含10％小牛清血MEM培养液。     

用Cal单克隆抗体以流动细胞计数检测积液中的癌细胞

单克隆抗体与肿瘤细胞的特异反应已为肿瘤抗原的研究提供了一种新方法,并在诊断中客观地识别瘤细胞提供了可能性。CaI 单克隆抗体(CaIMA)是鼠的 IgM 型抗体,系通过注射人喉癌细胞培养物衍生糖蛋白产生的。该抗体能与肿瘤 CaI 抗原决定簇起反应,与非肿瘤细胞则否。CaI 抗原能与 CaIMA 发生免疫沉淀反应,而且可用免疫过氧化酶技术检测多种人类肿瘤,并已成功地用于积液中良、恶性细胞的鉴别。本文提示,CaIMA 可适用于积     

抗肿瘤药物敏感实验试剂盒的建立及其稳定性的观察

目的:为了对MTT法抗肿瘤药物敏感试验方法进行规范,制备成试剂盒,并对试剂盒的稳定性进行了观察。方法:试剂盒组成:(1)预加抗肿瘤药物的细胞培养板,将各种抗肿瘤药物稀释到工作浓度后加入48孔细胞培养板中,冷冻干燥,真空包装。(2)淋巴细胞分离液。(3)含10%牛血清的DMEM培养基。(4)5%的MTT溶液。(5)GKN溶液。以新鲜加抗肿瘤药物的细胞培养板为对照,测定试剂盒的稳定性。结果:由冷冻干燥、真空包装的预加药的细胞培养板组成的试剂盒保存6个月和12个月后,与对照组比较,结果没有显著性差异(P>0.05)。结论:该试剂盒操作简便,稳定性好,利于临床推广使用。     

抗肿瘤药物敏感实验试剂盒的建立及其稳定性的观察

目的：为了对MTT法抗肿瘤药物敏感试验方法进行规范,制备成试剂盒,并对试剂盒的稳定性进行了观察。方法：试剂盒组成：（1）预加抗肿瘤药物的细胞培养板,将各种抗肿瘤药物稀释到工作浓度后加入48孔细胞培养板中,冷冻干燥,真空包装。（2）淋巴细胞分离液。（3）含10%牛血清的DMEM培养基。（4）5%的MTT溶液。（5）GKN溶液。以新鲜加抗肿瘤药物的细胞培养板为对照,测定试剂盒的稳定性。结果：由冷冻干燥、真空包装的预加药的细胞培养板组成的试剂盒保存6个月和12个月后,与对照组比较,结果没有显著性差异（P〉0.05）。结论：该试剂盒操作简便,稳定性好,利于临床推广使用。     

EBV-LMP2A肽诱导的特异性CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用

目的:探讨HLA限制性EB病毒(Epstein-Barr virus,EBV)表位肽EBV-潜伏膜蛋白2A (EBV-latent membrane protein 2A,EBV-LMP2A)诱导的细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用.方法:选用南京大学医学院附属肿瘤医院肿瘤中心HLA-A2阳性胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)、人胃腺癌细胞株(AGS)和人EBV阳性胃腺癌细胞株(AGS-EBV),通过改良的体外细胞培养技术用HLA-A2限制性的EBV-LMP2A抗原肽从人PBMC中诱导扩增出特异性CTL,采用四聚体技术和流式细胞术检测抗原肽诱导产生的特异性CTL的含量,通过FITC-PI标记流式术检测EBV-CTL对EBV阳性和EBV阴性的胃癌细胞的体外杀伤作用.结果:经改良的细胞培养技术和抗原肽双重刺激后EBV-LMP2A抗原肽可以诱导产生出高比例的抗原特异性CTL[EBV-LMP2A-356特异性T细胞占CD8+T细胞的(47.1±5.2)％];EBV-CTL对EBV阳性胃癌细胞的体外杀伤作用较EBV阴性的胃癌细胞明显增强[(45.1±9.3)％s(19.4±2.5)％,P＜0.05].结论:通过改良的细胞培养技术使用EBV-LMP2A抗原肽能诱导产生高比例的EBV特异性CTL,其对EBV阳性胃癌细胞有较强的特异性杀伤作用.     

腹膜后恶性纤维组织细胞瘤4例报道

恶性纤维组织细胞瘤是组织细胞与纤维母细胞构成的低度恶性肿瘤。多发生在四肢软组织,有时发生在骨骼,很少发生在腹膜后。肿瘤细胞呈现多形性,容易与其它软组织恶性肿瘤混淆。现将我院4例恶性纤维组织细胞瘤报道如下:     

与肺癌相关的因素

砷可诱发肺癌 砷是自然界中的一种元素，有时在空气、土壤和水中发现它。被砷污染的水对全球都是威胁，目前影响了超过1亿人。砷诱发癌变，特别是诱发肺癌。英国哥伦比亚癌症研究中心的研究人员分析了一组接触了砷的肺癌患者，认为砷可诱发肺癌。这些研究结果可能有助于预防砷在世界其它地方诱发癌症。