过表达OMA1通过促进线粒体释放细胞色素C诱导肺腺癌A549细胞凋亡

目的:探讨OMA1在肺腺癌中的表达水平及其对肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制。方法:收集2018年01月至2019年10月在本院保存的42例经病理确诊为肺腺癌患者的癌组织样本及其癌旁组织（距离肿瘤边缘≥5 cm）,免疫组化染色法检测癌组织及癌旁组织中OMA1表达情况。体外培养人肺腺癌细胞系NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1、A549及人正常肺上皮细胞BEAS-2B,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平。采用OMA1过表达慢病毒及其空载慢病毒感染A549细胞,分为OMA1过表达慢病毒感染组（OMA1组）和空载慢病毒感染组（Vector组）,另设置空白对照组（Blank组）。采用MTT检测细胞增殖活性;流式细胞术检测细胞凋亡水平;JC-10染色法检测细胞线粒体膜电位变化;qRT-PCR法检测细胞中OMA1 mRNA表达水平;Western blotting法检测细胞中OMA1、cleaved caspase-3、OPA1以及细胞线粒体和胞浆中Cyt C蛋白表达水平。结果:肺腺癌患者癌组织中OMA1表达水平显著低于癌旁组织（P＜0.05）。NCI-H2009、Calu-3、SPC-A-1和A549细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平显著低于BEAS-2B细胞（P＜0.05）。与Blank组或Vector组比较,OMA1组细胞中OMA1 mRNA和蛋白表达水平、细胞凋亡率及cleaved caspase-3蛋白和胞浆中Cyt C蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）,而细胞增殖活性、线粒体膜电位及OPA1蛋白和线粒体中Cyt C蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。结论:OMA1在肺腺癌组织及其细胞系中低表达,过表达OMA1可通过下调OPA1蛋白表达、破坏线粒体膜电位、加速线粒体Cyt C释放而诱导肺腺癌A549细胞凋亡。     

NDV-HN致人肺腺癌A549细胞凋亡的实验研究

摘 要：［目的］ 探讨NDV-HN诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的相关机制。［方法］ （1）构建包含绿色荧光素蛋白（GFP）及NDV-HN的慢病毒sfGFP-HN载体，用293V细胞包装慢病毒Lv-sfGFP-HN，用293V细胞进行空载质粒转染组（空载组）慢病毒包装，命名为Lv-sfGFP；（2）以空载组A549-sfGFP细胞和空白组A549为对照，用慢病毒转染方法建立稳定表达NDV-HN蛋白的A549细胞株，即A549-sfGFP-HN细胞株，RT-PCR、Western blot检测A549细胞NDV-HN蛋白的表达；（3）分别在A549-sfGFP-HN和A549两组细胞中加入顺铂，流式细胞术检测细胞凋亡；（4）在基因水平和蛋白水平上分别用RT-PCR和Western blot检测各组细胞凋亡相关蛋白Bcl-2的表达。［结果］ （1）Lv-sfGFP-HN和Lv-sfGFP慢病毒分别转染A549细胞后，只在转染组A549-sfGFP-HN细胞检测到NDV-HN蛋白。（2）转染组A549-sfGFP-HN细胞凋亡率明显高于空白组A549细胞 (P＜0.01)，转染组A549-sfGFP-HN细胞加入顺铂后，其细胞凋亡率明显增加。（3）转染组A549-sfGFP-HN细胞与空载质粒转染组A549细胞和空白组A549细胞相比，凋亡相关蛋白Bcl-2表达量明显下调(P＜0.01)。［结论］ 慢病毒转染NDV-HN到A549细胞后导致A549-sfGFP-HN细胞出现凋亡，且与Bcl-2下调有关。转染NDV-HN的肺癌细胞联合使用抗癌药物顺铂，增加了肺癌细胞凋亡率。     

CIK细胞对A549肺癌细胞株的诱导凋亡作用的研究

目的研究多种细胞因子诱导的杀伤细胞（cytokine-induced killer cells,CIK）对A549肺癌细胞株诱导凋亡作用,并探讨其作用机制。方法应用末端脱氧核苷酸转移酶﹙TdT﹚介导的脱氧核苷酸缺口末端标志（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL）法检测CIK细胞诱导凋亡的情况;通过免疫组织化学染色法检测A549细胞中凋亡相关基因p53、Fas、caspase-3,caspase-8,caspase-9、survivin蛋白,细胞增殖相关蛋白Ki-67的阳性表达率。结果 （1）TUNEL法检测结果：效靶细胞混合培养后,起初随时间延长凋亡细胞逐渐增多,5-14小时凋亡率明显上升,14-24小时凋亡率下降;（2）免疫组织化学染色结果表明,CIK实验组p53、Ki-67、survivin蛋白随作用时间延长而均下降,Fas、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白表达上调,与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论 （1）CIK细胞对A549肺癌细胞具有抗增殖及诱导凋亡作用;（2）CIK细胞对A549肺癌细胞的抗增殖作用机制可能与下调Ki-67蛋白的表达,使癌细胞处于静止期有关;（3）CIK细胞对A549肺癌细胞的诱导凋亡作用机制可能与下调p53、survivin蛋白的表达,上调Fas、caspase-3、caspase-8、caspase-9蛋白的表达有关,经由细胞凋亡的死亡受体和线粒体通路完成凋亡的启动和执行;（4）CIK细胞是一种新型高效具有较强杀伤体外肺癌细胞的免疫活性细胞,有可能用于临床上晚期肺癌的过继性免疫治疗。     

miR-194-5p调控LMNB1抑制肺腺癌细胞的生长转移

目的:探究miR-194-5p调控LMNB1对肺腺癌细胞生长转移的作用。方法:实时荧光定量PCR（qRT-PCR）实验检测肺腺癌组织和癌旁组织中miR-194-5p、LMNB1表达水平。体外培养肺腺癌细胞A549,分为对照组、miR-194-5p mimics阴性对照组、miR-194-5p mimics组。转染处理后,CCK-8实验检测各组A549细胞增殖情况,比较各组细胞活力;流式细胞实验检测各组A549细胞凋亡率;细胞划痕及Transwell小室侵袭实验分别检测各组A549细胞迁移、侵袭力,比较各组细胞迁移、侵袭数;免疫印迹实验检测各组A549细胞凋亡蛋白caspase-3、Bax和上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）相关蛋白E-cadherin、Vimentin表达;qRT-PCR实验及免疫印迹实验分别检测各组A549细胞miR-194-5p、LMNB1 mRNA表达及LMNB1蛋白表达。结果:相比癌旁组织,肺腺癌组织中miR-194-5p表达水平明显降低（P＜0.05）,LMNB1表达水平明显升高（P＜0.05）。相比对照组,miR-194-5p mimics组A549细胞活力、细胞迁移数、细胞侵袭数、LMNB1 mRNA表达水平、Vimentin和LMNB1蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）,细胞凋亡率、miR-194-5p表达、caspase-3、Bax和E-cadherin蛋白表达水平显著升高（P＜0.05）。miR-194-5p mimics阴性对照组A549细胞上述各指标与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:miR-194-5p可下调LMNB1表达,抑制肺腺癌细胞增殖,促进其凋亡,并降低其迁移及侵袭能力。     

线粒体动态蛋白MiD51在肺癌细胞增殖与凋亡中的调控作用探讨

目的:探讨线粒体动态蛋白(mitochondrial dynamic protein of 51 kDa,MiD51)在肺癌细胞中的表达与生物学作用。方法:分别用qPCR与Western Blot实验,检测MiD51在肺癌组织中的表达。分别用MTT与克隆形成实验,检测下调MiD51表达对肺癌A549细胞增殖的影响。用流式细胞术检测下调MiD51表达对肺癌A549细胞凋亡的影响。结果:MiD51在肺癌组织中表达显著高于癌旁组织。 干涉MiD51表达可抑制肺癌A549细胞的增殖与克隆形成,促进肺癌A549细胞的凋亡。结论:线粒体动态蛋白MiD51在肺癌组织中表达显著升高,进而促进肺癌细胞增殖、抑制凋亡,提示MiD51是潜在的肺癌分子治疗靶标。     

PUMA通过线粒体途径诱导骨肉瘤细胞凋亡的研究

目的:研究p53上调凋亡调控因子(PUMA)对骨肉瘤细胞凋亡的影响及机制。方法:在骨肉瘤细胞F5M2中转染PUMA过表达载体，同时转染对照阴性载体，以qRT-PCR和Western blot法测定转染后细胞中PUMA表达情况，以流式细胞术检测细胞凋亡情况，用JC-1法检测细胞线粒体膜电位，以Western blot法测定线粒体和胞浆中细胞色素C（Cyt C）蛋白表达情况，同时检测细胞中剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水 解酶3（Cleaved Caspase-3）、剪切的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶9（Cleaved Caspase-9）蛋白水平。结果:转染PUMA过表达载体后的F5M2细胞中PUMA mRNA和蛋白水平升高，而转染对照阴性载体对F5M2细胞中PUMA mRNA和蛋白水平没有影响。过表达PUMA后的F5M2细胞凋亡率升高，细胞线粒体膜电位下降，线粒体中Cyt C蛋白水平降低，胞浆中Cyt C蛋白水平升高，同时细胞中Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9蛋白水平也升高，与未做转染的F5M2细胞比，差异有统计学意义（P<0.05）。转染对照阴性载体后的细胞凋亡率、线粒体膜电位、线粒体和胞浆中Cyt C蛋白水平、Cleaved Caspase-3蛋白水平、Cleaved Caspase-9蛋白水平与未做转染的F5M2细胞相比没有明显变化（P>0.05）。结论:PUMA通过促进线粒体中Cyt C释放，降低线粒体膜电位，激活Caspase-3诱导骨肉瘤细胞凋亡。     

上调miR-125a对肺癌A549细胞凋亡的影响及其机制研究

目的 探讨上调microRNA-125a（miR-125a）对肺癌A549细胞凋亡的影响及可能机制。方法 人工合成miR-125a基因序列,将miR-125a基因克隆至真核表达载体pGenesil-1质粒,构建重组质粒pGenesil-miR-125a,同时设计并构建阴性对照质粒pGenesil-control。将以上载体经脂质体介导转染肺癌A549细胞并分为3组：成功转染pGenesil miR-125a的A549细胞（A549-miR-125a组）,成功转染pGenesil-control的A549细胞（A549-control组）,以及未进行转染的A549细胞（A549组）。采用实时定量PCR技术（QPCR）检测各组细胞的miR-125a表达水平,Annexin V-FITC／PI双染流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹法检测p53基因的蛋白水平。结果 经酶切和测序鉴定证明pGenesil-miR-125a重组质粒构建成功。A549-miR-125a组的miR-125a水平为2.72±0.41,高于A549-control组的0.97±0.16和A549组的0.96±0.11（P＜0.01）;A549-miR-125a组的细胞凋亡率为（31.04±2.48）％,高于A549-control组的（6.91±0.72）％和A549组的（6.73±0.56）％（P＜0.05）;A549-miR-125a组的p53蛋白水平为3.91±0.46,高于A549-control组的1.01±0.06和A549组的0.99±0.04（P＜0.01）。结论 上调miR-125a可促进肺癌细胞的凋亡,提示其在肺癌的发生、发展中有重要作用,可能的机制是上调p53的蛋白表达。     

成纤维细胞生长因子 13 通过 ROS/Caspase-3 通路调控非小细胞肺癌A549 细胞的凋亡

[ 摘 要 ] 目的：探讨成纤维细胞生长因子 13（fibroblast growth factor 13,FGF13）对非小细胞肺癌 A549 细胞活性氧（reactive oxygen species,ROS）的生成和凋亡的影响及其调控机制。方法：WB 法检测 FGF13 在人正常肺上皮细胞 BEAS-2B 和肺癌 A549、H460 细胞中的本底表达量。采用 FGF13 过表达载体转染 BEAS-2B 和 A549 细胞;设计两组靶向 FGF13 的 shRNA 序 列,构建慢病毒干扰载体,包装病毒后侵染 A549 细胞,采用 qPCR 和 WB 法检测干扰效果,DCFH-DA 探针结合荧光酶标仪分 析敲减 FGF13 对 A549 细胞内 ROS 水平的影响,MitoSOX 与 WB 法检测对线粒体 ROS 水平及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧 化酶 4（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate oxidase 4,NOX4）蛋白表达量的影响,Annexin V-FITC-PI 双染法检测对细胞 凋亡和 Caspase-3 及 Cleaved Caspase-3 蛋白表达的影响。结果：与 BEAS-2B 细胞相比,FGF13 蛋白在两种肺癌细胞中均高表 达（均 P<0.05）。成功构建 FGF13 过表达、低表达的 A549 细胞系。过表达 FGF13 后,BEAS-2B 和 A549 细胞内 ROS 水平显著 降低（P<0.05）;敲减 FGF13 表达后,A549 细胞内 ROS 水平显著升高（P<0.05）;然而过表达及干扰 FGF13 对 A549 细胞内线粒 体 ROS 水平无显著影响,但 NOX4 蛋白表达量显著下调（P<0.05）及显著上调（P<0.05）。FGF13 干扰后 A549 细胞凋亡率显著 升高（P<0.01）,Caspase-3 及 Cleaved Caspase-3 蛋白表达量显著上调（P<0.05）。结论：FGF13 可能通过 NOX 家族途径调控 ROS 的生成,并通过 ROS/Caspase-3 通路调控 A549 细胞凋亡。     

钙网织蛋白在阿霉素诱导的早期凋亡A549细胞免疫原性中的作用

[目的]研究钙网织蛋白在阿霉素诱导的凋亡人肺癌A549细胞免疫原性中的作用。[方法]体外培养人肺癌A549细胞,将阿霉素加入A549细胞培养液中,使其终浓度分别为1×10^-3g/L、3×10^-3g/L、5×10^-3g/L,12 h后以吖啶橙/溴化乙锭（AO/EB）双染法检测细胞凋亡;应用激光共聚焦显微镜观察凋亡A549细胞表面钙网织蛋白暴露情况。阿霉素3×10^-3g/L作用12 h后诱导的凋亡细胞为抗原组（A组）,A组加入钙网织蛋白阻断蛋白（A-Ca组）,分别刺激外周血单个核细胞,72h后以MTT法检测其对培养的A549细胞的杀伤效果。[结果]阿霉素3×10^-3g/L终浓度作用A549细胞12h后,凋亡率为62.93%±1.70%。经激光共聚焦显微镜检测凋亡A549细胞表面可见钙网织蛋白抗体荧光。外周血单个核细胞杀伤实验MTT检测OD值：A-Ca组0.537±0.056,A组0.437±0.023（P〈0.05）。[结论]阿霉素诱导凋亡的A549细胞表面有钙网织蛋白的暴露。阿霉素诱导的凋亡A549细胞经添加钙网织蛋白阻断蛋白后,其免疫原性下降,表明钙网织蛋白在其免疫原性中起重要作用。     

PSMD7基因在人食管鳞癌组织中的表达及影响癌细胞增殖、凋亡的机制研究

背景与目的：26S蛋白酶体非ATP酶调节亚基7（26S proteasome non-ATPase regulatory subunit 7,PSMD7）作为组成19S蛋白酶体盖子结构的核心成员是否参与肿瘤的发生、发展,以及具体的分子机制尚不清楚。本实验将研究PSMD7基因在人食管鳞癌组织中的表达,以及对癌细胞增殖及凋亡的影响。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR）和蛋白质印迹法（Western blot）检测食管鳞癌及其癌旁正常组织标本中PSMD7的mRNA及蛋白表达情况。在人食管鳞癌细胞系TE-1中,用慢病毒介导的RNA干扰技术下调PSMD7的表达,观察细胞增殖及凋亡的变化,检测线粒体膜电位的变化、细胞质中Cyt C的表达以及凋亡相关因子的表达。结果：PSMD7基因的mRNA和蛋白在食管鳞癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织（P<0.05）,PSMD7蛋白的高表达与淋巴结转移阳性呈正相关（P<0.05）。抑制PSMD7蛋白的表达可使细胞的增殖能力降低（P<0.05）,并促进细胞的凋亡（P<0.05）,同时线粒体膜电位降低,促进Cyt C释放进入细胞质,激活caspase级联反应,说明抑制PSMD7的表达诱导细胞凋亡是通过线粒体信号通路进行的。结论：PSMD7在食管鳞癌中呈高表达,并通过线粒体依赖的方式促进TE-1细胞凋亡。     

GSDMD对肺癌A549细胞增殖和侵袭的生物学作用

目的:探讨GSDMD对肺癌细胞A549生物学表型的影响。方法:利用肺癌组织芯片，通过免疫组化的方法检测了肺癌组织中GSDMD的蛋白表达；利用慢病毒转染技术，分别下调和上调了A549细胞中GSDMD的表达，并通过一系列体外功能试验，探索了GSDMD下调和上调对肺癌细胞A549生物学表型的影响。结果:免疫组化结果提示:GSDMD在肺癌组织中的高表达高于癌旁正常组织，且其主要定位于肺癌的细胞质。利用慢病毒转染技术，构建了稳定下调和上调GSDMD的细胞系A549-siGSDMD和A549-LV-GSDMD。BrdU细胞增殖及CCK8实验表明:下调GSDMD的表达抑制了A549细胞的增殖能力，反之亦然；高内涵细胞运动试验证实:下调GSDMD的表达抑制了A549细胞的运动能力，反之亦然；Transwell迁移和侵袭试验表明:下调GSDMD的表达，抑制了A549细胞的迁移和侵袭能力，而上调GSDMD的表达，则得到了相反的结果。结论:GSDMD促进了肺癌细胞A549的增殖、迁移和侵袭能力。     

慢病毒沉默PRDX4抑制肺癌细胞A549迁移和侵袭及其机制的探讨北大核心

目的:研究慢病毒沉默过氧化物还原酶4(peroxiredoxin 4,PRDX4)对肺癌细胞迁移和侵袭能力的影响,并探讨其分子机制。方法:采用shRNA干扰技术敲低肺癌细胞系A549中PRDX4的表达,Western blot和qRT-PCR验证转染效果;划痕愈合实验检测细胞迁移能力;Transwell细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力;Western blot分析p-ERK1/2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达。结果:成功构建沉默PRDX4的肺癌细胞系;慢病毒感染后A549细胞PRDX4蛋白和mRNA表达水平显著低于对照组(P<0.05);与BC组和NC组相比,Sh组细胞迁移、侵袭能力显著降低(P<0.05);与BC组和NC组相比,Sh组细胞p-ERK1/2、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平显著降低。结论:沉默PRDX4可能通过ERK信号通路抑制肺癌细胞的迁移和侵袭。     

Entinostat影响NK细胞对非小细胞肺癌杀伤作用的体外研究

  目的  观察Entinostat对非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC）细胞A549和HCC-827表面NKG2D配体表达的影响，比较经Entinostat处理前后A549和HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  方法  通过MTT法检测Entinostat对A549和HCC-827细胞增殖的影响，流式细胞术检测NKG2D配体表达的变化，RT-PCR检测配体在mRNA水平的变化，并用ELISA检测细胞培养上清中可溶性MICA的含量。乳酸脱氢酶释放实验检测Entinostat作用后的A549和HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  结果  Entinostat对A549和HCC-827细胞的生长抑制作用具有时间-剂量依赖性。以0.5、1 μmol/L Entinostat诱导A549和HCC-827细胞48h后，细胞表面NKG2D配体表达水平升高，MICA和MICB的mRNA转录水平升高。1 μmol/L Entinostat提高了A549细胞培养上清中可溶性MICA表达水平。0.5、1 μmol/L Entinostat增强了HCC-827细胞对NK细胞杀伤作用的敏感性。  结论  Entinostat通过上调NSCLC NKG2D配体的表达，提高NK细胞对NSCLC的杀伤作用，为探讨NSCLC的治疗提供了新的方法和理论依据。      

IRE1α调控CD155表达影响NK细胞对结肠癌细胞的杀伤敏感性

目的:探讨肌醇的跨膜激酶/核酸内切酶1α（inositol-requiring transmembrane kinase/endonuclease 1α,IRE1α）调控CD155表达对自然杀伤（nature killer,NK)细胞杀伤结肠癌细胞作用的影响。方法:免疫组织化学法检测结肠癌组织及癌旁组织中IRE1α的表达;qRT-PCR与Western blot检测IRE1α与CD155的mRNA及蛋白表达;流式细胞术检测人外周血CD3-CD56+NK细胞百分比及与其纯度和NK细胞表面T细胞免疫球蛋白和ITIM结构域蛋白（T cell immunoreceptor with Ig and ITIM domains,TIGIT)的表达;乳酸脱氢酶释放法检测NK细胞对结肠癌细胞的杀伤率。结果:IRE1α在结肠癌组织和细胞中的表达高于癌旁组织及人正常结肠上皮细胞;结肠癌患者外周血CD3-CD56+NK细胞百分比低于健康者。si-IRE1α组结肠癌细胞的IRE1α表达水平低于si-NC组（P＜0.05）,CD155表达水平高于si-NC组（P＜0.05）,NK细胞对si-IRE1α组结肠癌细胞的杀伤率高于si-NC组的杀伤率（P＜0.05）,NK细胞对si-IRE1α+TIGIT-mcAb组结肠癌细胞的杀伤率高于si-IRE1α组的杀伤率（P＜0.05）。Pc-IRE1α组结肠癌细胞的IRE1α表达水平高于Pc组（P＜0.05）,CD155表达水平低于Pc组（P＜0.05）,NK细胞对Pc-IRE1α组结肠癌细胞的杀伤率低于Pc组的杀伤率（P＜0.05）。Pc-IRE1α+si-CD155组结肠癌细胞CD155表达水平高于Pc-IRE1α+si-NC组（P＜0.05）,NK细胞对Pc-IRE1α+si-CD155组结肠癌细胞的杀伤率高于Pc-IRE1α+si-NC组（P＜0.05）,NK细胞对Pc-IRE1α+si-CD155+TIGIT-mcAb组细胞的杀伤率高于Pc-IRE1α+si-CD155组（P＜0.05）。结论:结肠癌组织和细胞中IRE1α高表达,IRE1α负调控结肠癌细胞CD155的表达,影响NK细胞对结肠癌细胞的杀伤敏感性。     

KCTD10抑制非小细胞肺癌中Hippo通路活性

目的:检测KCTD10在非小细胞肺癌中的表达水平及其对Hippo通路的影响。方法:采用免疫组化方法检测KCTD10在非小细胞肺癌组织标本中的表达；采用Western blot检测YAP、P-YAP、P-LATS1、MMP7、CyclinE在非小细胞肺癌细胞中的表达；采用集落形成实验和Transwell实验检测细胞增殖和迁移。结果:KCTD10在非小细胞肺癌组织及细胞系中高表达；KCTD10过表达促进A549细胞增殖和迁移；过表达KCTD10的A549细胞系YAP的表达总量未见明显变化，但抑制了P-YAP、P-LATS1的表达，促进了MMP7、CyclinE的表达。结论:KCTD10抑制了非小细胞肺癌中Hippo通路活性；KCTD10可能作为非小细胞肺癌防治的一个潜在靶向分子。     

大肿瘤抑制激酶2在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的:检测大肿瘤抑制激酶2（large tumor suppressor kinase 2，LATS2)在非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer，NSCLC)组织和细胞中的表达水平，对NSCLC细胞增殖、侵袭和患者临床特征的影响。方法:收集2017年6月-2019年6月在我院接受手术治疗的NSCLC患者260例，免疫组化实验检测NSCLC和癌旁组织中LATS2的表达水平；卡方检验分析LATS2的表达与患者临床特征的关系；qRT-PCR检测NSCLC组织和癌旁组织中LATS2 mRNA的相对表达水平；转染实验将LATS2质粒转染至A549细胞中；MTT实验检测LATS2对A549细胞增殖的影响；Transwell实验检测LATS2对A549细胞侵袭的影响。结果:LATS2在癌组织中的表达低于癌旁组织；LATS2的高表达率为72.3%（188/260），低表达率为27.7%（72/260）；LATS2高表达组与低表达组患者在性别、肿瘤类型、胸膜侵犯、血管侵犯、淋巴管侵犯和T分期之间无统计学差异，在年龄、肿瘤直径、淋巴转移和病理分级之间有统计学差异（P＜0.05）；NSCLC组织和细胞中LATS2 mRNA的相对表达水平显著低于癌旁组织和人正常肺上皮细胞HPAEpiC；LATS2质粒转染至A549细胞中使其表达水平升高，LATS2高表达组细胞的OD值和发生侵袭的细胞数显著降低。结论:LATS2与患者的年龄、肿瘤直径、淋巴结转移和病理分级有关，其表达水平增加后可显著抑制NSCLC细胞的增殖和侵袭，有可能成为NSCLC治疗的新作用靶点。     

FBXW7调控非小细胞肺癌上皮间质转化的作用机制

目的:研究FBXW7在非小细胞肺癌上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transformation,EMT)过程中发挥的作用。方法:收集100对非小细胞肺癌组织和对应的癌旁组织，利用免疫组化检测FBXW7在癌组织和癌旁组织中的表达。利用Western blot检测FBXW7在细胞系中的表达及FBXW7对EMT部分标志蛋白的影响。利用Transwell实验检测FBXW7对NSCLC细胞迁移能力的影响。免疫共沉淀实验和泛素化的Western blot验证FBXW7与Snail1的关系。结果:FBXW7在NSCLC组织中的表达明显低于对应癌旁组织中的表达。FBXW7在正常肺上皮细胞中的表达也明显高于4种非小细胞肺癌细胞系中的表达。FBXW7过表达显著抑制A549细胞的迁移能力。FBXW7过表达也明显抑制NSCLC细胞的EMT。机制研究发现，FBXW7可以直接结合并泛素化降解Snail1蛋白，并且Snail1部分逆转FBXW7对NSCLC细胞EMT标志蛋白的影响。结论:FBXW7对NSCLC细胞EMT的调控部分依赖于泛素化降解Snail1蛋白。