食管癌患者外周血中自然杀伤性T细胞含量的检测及其临床意义

 　目的　研究食管癌患者外周血中自然杀伤性（NK）T细胞在手术前后的表达情况。方法　采用流式细胞术（FCM）分析59例食管癌患者手术前后外周血中CD3、CD56、CD4、CD8抗体的表达,研究NKT细胞及其亚群的表达情况及所占比例。结果　随着CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4的比值逐渐升高,Ⅲ～Ⅳ期食管癌患者的比例逐渐降低,ANOVA示组间差异有统计学意义（P＜0.05）;CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4的比值与CD+3 CD+56 CD+4 NKT细胞非线性相关;CD+3 CD+56 CD+8 NKT细胞与NK细胞正相关,与CD+3 T细胞负相关。结论　CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4 的比值可能与肿瘤负荷有关,并且有助于判断食管癌患者的疾病程度及预后。     

食管癌切除断端早期残留癌的流式细胞分析及其临床意义

食管癌切除后,其断端残留癌(简称残癌)是影响患者远期生存的重要因素。近年来,对其研究甚多。但多限于临床病理资料的统计分析,经河北省科技情报所国际联机检索,尚未见到对其进行细胞生物学研究。我们采用快速、准确、客观的流式细胞光度术(flow Cytometry),按照吴氏方法,对各种病理学类型残癌的DNA含量(DNA index DI)和增殖指数(Proliferative index,PI)进行了定量研究。试     

CD44V6在食管癌中的表达及临床意义

[目的]探讨细胞黏附分子CD44V6在食管癌组织及食管正常黏膜中的表达及其意义.[方法]应用流式细胞免疫荧光技术,分别检测CD44V6在50例食管癌及食管正常黏膜中的表达.[结果]CD44V6在食管癌组织中的阳性表达率72%,高于食管正常黏膜的阳性表达率20%,差异有显著性意义(P<0.05).CD44V6蛋白的表达与患者年龄、性别、病变部位、病变长度,大体病理类型及细胞分化程度无明显关系,但与癌浸润深度及淋巴结转移具有相关性.[结论]CD44V6是判断食管癌侵袭转移的指标,对食管癌淋巴结转移及预后判断上具有较高的临床应用价值.     

食管癌、贲门癌患者外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义

Objective To evaluate the clinical diagnostic application and operative efficacy of the expression of NKG2D in peripheral blood CD+8 NKT cell and its ligand sMICA in patients with esophageal or cardiac carcinoma.Methods The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage was concomitantly determined by flow cytometry in 53 preoperative patients including 29 postoperative patients with esophageal or cardiac carcinoma and 30 healthy controls.The serum sMICA was determined by ELISA.Results The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage in patients was significantly lower than that in controls [(77.632±8.972) % vs (89.053±6.515) %] (t = -6.113,P ＜0.05); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it decreased significantly in order (F = 99.251,P ＜0.01);with lymph node metastasis lower than that without lymph node metastasis (t = -10.384,P ＜0.01); squamous carcinoma was higher than adenocarcinoma (t =9.899,P ＜0.01); postoperative was significantly higher than preoperative (t =-4.319,P ＜0.01).The level of serum sMICA in patients was significantly higher than that in controls [(326.28±85.407) pg/ml vs (210.00±92.560) pg/ml](t =7.292,P ＜0.01); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it increased significautly in order (F =63.355,P ＜0.01); with lymph node metastasis higher than that without lymph node metastasis (t =7.770,P ＜0.01); squamous carcinoma was lower than adenocarcinoma (t =-7.593,P＜0.01); postoperative was significantly lower than preoperative (t =7.027,P ＜0.01).Serum sMICA could inhibit peripheral blood CD+8 NKT cell activation receptor NKG2D (F =142.773,P ＜0.05),determination coefficient R2 = 0.7368.Conclusion The level of peripheral blood CD+8NKT cell activation receptor NKG2D and serum sMICA in patients could be an assistant indicator for     

食管癌、贲门癌患者外周血CD+8NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义

Objective To evaluate the clinical diagnostic application and operative efficacy of the expression of NKG2D in peripheral blood CD+8 NKT cell and its ligand sMICA in patients with esophageal or cardiac carcinoma.Methods The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage was concomitantly determined by flow cytometry in 53 preoperative patients including 29 postoperative patients with esophageal or cardiac carcinoma and 30 healthy controls.The serum sMICA was determined by ELISA.Results The peripheral blood NKG2D positive CD+8 NKT cell percentage in patients was significantly lower than that in controls [(77.632±8.972) % vs (89.053±6.515) %] (t = -6.113,P ＜0.05); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it decreased significantly in order (F = 99.251,P ＜0.01);with lymph node metastasis lower than that without lymph node metastasis (t = -10.384,P ＜0.01); squamous carcinoma was higher than adenocarcinoma (t =9.899,P ＜0.01); postoperative was significantly higher than preoperative (t =-4.319,P ＜0.01).The level of serum sMICA in patients was significantly higher than that in controls [(326.28±85.407) pg/ml vs (210.00±92.560) pg/ml](t =7.292,P ＜0.01); with stage Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ,it increased significautly in order (F =63.355,P ＜0.01); with lymph node metastasis higher than that without lymph node metastasis (t =7.770,P ＜0.01); squamous carcinoma was lower than adenocarcinoma (t =-7.593,P＜0.01); postoperative was significantly lower than preoperative (t =7.027,P ＜0.01).Serum sMICA could inhibit peripheral blood CD+8 NKT cell activation receptor NKG2D (F =142.773,P ＜0.05),determination coefficient R2 = 0.7368.Conclusion The level of peripheral blood CD+8NKT cell activation receptor NKG2D and serum sMICA in patients could be an assistant indicator for     

食管癌患者外周血调节性T细胞亚群格局变化及其临床意义

[目的]分析食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(Treg)占CD4+T细胞的比例变化.[方法]采用流式细胞仪检测104例食管癌患者和68例健康及良性疾病对照者外周血中CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例,分析其与临床分期、淋巴结转移及外膜受侵的关系.[结果]食管癌患者与对照组的外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞比例分别为(5.19％±1.82％)和(4.56％±1.16％),两组比较差异有统计学意义(t=2.544,P=0.012).Ⅱa期CD4+CD25+CD 127-Treg细胞比例分别与Ⅱb期和Ⅲa期比较,差异均有统计学意义(P＜0.01);不同年龄、淋巴结及外膜受侵状况患者的外周血CD4+CD25+CD127-Treg细胞比例变化比较无统计学差异(P＞0.05).[结论]食管癌患者外周血CD4+CD25+CD127-Treg占CD4+T细胞的比例明显升高,且分期高患者升高更为明显,提示可能与食管癌免疫逃逸和免疫耐受有关.     

食管癌、贲门癌患者外周血CD+8 NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测的临床意义

 目的 　探讨外周血CD+8 NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA检测在食管癌、贲门癌诊断及术后疗效评价中的临床意义。方法　对53例患者确诊后（29例手术患者术前14 d及术后14 d）及30名健康对照组采用流式细胞术对外周血CD+8 NKT细胞中活化受体NKG2D阳性细胞百分比测定,应用酶联免疫吸附法进行sMICA含量测定,并各自进行差异性分析,同时对两者进行依从性分析。结果　患者外周血CD+8 NKT细胞中NKG2D阳性细胞百分比为（77.632±8.972）%,明显低于对照组的（89.053±6.515）%（t＝-6.113,P＜0.05）;TNM分期Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次降低（F＝99.251,P＜0.01）;有区域淋巴结转移者均低于无区域淋巴结转移者（t＝-10.384,P＜0.01）;鳞状细胞癌高于腺癌（t＝9.899,P＜0.01）;术前均低于术后（t＝-4.319,P＜0.01）。患者血清sMICA的含量为（326.28±85.407）pg／ml,明显高于对照组的（210.00±22.560）pg／ml（t＝7.292,P＜0.01）;Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期患者依次增高（F＝63.355,P＜0.01）;有区域淋巴结转移者均高于无区域淋巴结转移者（t＝7.770,P＜0.01）;鳞状细胞癌低于腺癌（t＝-7.593,P＜0.01）;术前均高于术后（t＝7.027,P＜0.01）。血清sMICA对外周血CD+8 NKT细胞活化受体NKG2D有抑制作用（F＝142.773,P＜0.05）,决定系数R2＝0.7368。结论　外周血CD+8 NKT细胞活化受体NKG2D及其分泌性配体sMICA含量的测定有助于食管癌、贲门癌分期的临床辅助诊断,对判断其生物学行为及预后有重要临床意义,并可作为患者手术治疗效果指标。     

食管癌手术上下切缘及癌灶细胞DNA含量的流式细胞术分析

本文作者采用流式细胞术对５１例食管癌手术患者上下切缘和癌灶组织１４７个样品的ＤＮＡ倍体进行了分析，结果表明，切缘和癌灶均出现了ＤＮＡ异常倍体，其检出率分别为５０．０％、６３．０％和７０．６％，均以非整倍体为主。上下切缘的ＤＮＡ指数明显低于癌灶（Ｐ＜０．０１）。超二倍体细胞比率和Ｓ期细胞百分比，各组均高于正常粘膜组（Ｐ＜０．０１），而各组间均无显著差异（Ｐ＞０．０５）。     

树突状细胞在食管癌T细胞抗肿瘤免疫中的作用

目的：研究食管癌组织中树突状细胞（ＤＣｓ）在肿瘤浸润性Ｔ淋巴细胞激活中的作用,方法：用免疫组化和ＲＴ－ＰＣＲ的方法,检测４６例食管癌手术标本中ＤＣｓ（ＣＤ１ａ）、Ｔ细胞亚群（ＣＤ３、ＣＤ４、Ｃ人刺激因子Ｂ７。结果：癌组织中的ＤＣｓ与ＣＤ３（＋）、ＣＤ４（＋）Ｔ细胞有相关性,与ＣＤ８（＋）、ＣＤ２５（＋）Ｔ细胞无明显关系,且Ｂ７ｍＲＮＡ表达均为阴性,结论：食管癌中ＤＣｓ不一定能有效地激活Ｔ细胞,其中Ｂ７基因表达受抑制,可能是不能有效激活Ｔ淋巴细胞产生免疫耐受的重要原因之一。     

食管癌切除标本断端组织的流式细胞分析及其临床意义

为探讨食管癌切除标本断端组织的细胞生物学特性与术后复发的关系，本文应用流式细胞术（ｆｌｏｗ，ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ），对３３例食管癌术后标本的断端组织的ＤＮＡ含量（ＤＮＡｉｎｄｅｘ，ＤＩ）、倍体类型和细胞增殖指数（ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｖｅｉｎｄｅｘ，ＰＩ）进行了定量研究。结果发现，切距（主体癌上缘与上切缘之间的距离）＜５厘米的断端，不典型增生性断端及癌残留断端的ＰＩ值显著高于切距≥５厘米断端和正常食管粘膜；随访资料表明，上述三类断端患者的术后五年生存率也显著低于切距≥５厘米切除的患者。尤其有意义的是，１２例切距＜５厘米断端样品中，９例ＰＩ＞２０％，占７５％；且有２例异倍体ＤＮＡ含量出现。提示切距＜５厘米切除者（尤其是术后ＦＣＭ检测，高ＰＩ和高ＤＮＡ含量者），断端不典型增生者及断端癌残留者，都可能成为术后复发的高危人群，应密切随防。文中对残癌与其主体癌之间的ＦＣＭ参数也进行比较研究，从而为残癌的术后放、化疗提供了细胞生物学依据。     

流式细胞术对食管癌组织中四种细胞周期调控蛋白的定量检测及意义

目的 探讨细胞周期调控蛋白cyclin E、cyclin D1、CDK4和D27在食管癌的表达及其与食管癌的分化和淋巴结转移的关系。方法 采用流式细胞术对65例食管鳞状细胞癌组织中cyclin E、cyclin D1、CDK4和p27的表达强弱进仃定量检测,结果 用荧光指数F1表示。结果 cyclin E、cyclin D1和CDK4在低分化型鳞癌的表达量显著高于分化型鳞癌(P值分别为0．0275,0．0001和0．0174);而p27在低分化型鳞癌的表达量显著低于分化型鳞癌(P=0．0042)。cyclin D1与cyolin E,cyclin D1与CDK4之间呈显著正相关;而cyclin D1与p27呈显著负相关。4种基因蛋白的表达与淋巴结转移均无相关性。结论 cyclhi E、cyclin D1、CDK4和p27的表达与食管癌的分化密切相关;正负性细胞周期调控蚩白表达的失衡是导致癌变的重要原因之一。     

P-糖蛋白和肺耐药蛋白在浸润性乳腺癌中的表达及其临床意义

目的探讨P-糖蛋白(P-gp)和肺耐药蛋白(LRP)在浸润性乳腺癌中的表达情况及其临床意义。方法采用搓网法获取乳腺癌手术切除标本制成的完整单细胞悬液,再用流式细胞技术对40例乳腺癌组织及相应癌旁组织中P-gp、LRP的表达情况进行定量分析。结果乳腺癌组织P-gp、LRP表达与相应癌旁组织比较,差异均有统计学意义(P-gp:t=-7.777,LRP:t=-9.861,P均0.050)。在不同年龄、肿瘤大小、病理类型、临床分期、分化程度和雌、孕激素受体状态的患者间,两种耐药相关蛋白的表达差异均无统计学意义(P0.050)。有淋巴结转移组P-gp表达与无淋巴结转移组比较,差异无统计学意义(t=0.102,P=0.919)。有淋巴结转移组LRP的表达为(41.2±18.5)%,无淋巴结转移组为(30.1±15.4)%,有淋巴结转移组LRP表达显著高于无淋巴结转移组(t=2.074,P=0.045)。乳腺癌组织P-gp与LRP的表达间存在正相关性(r=0.698,P0.001)。结论本研究结果可为寻找浸润性乳腺癌的有效辅助化疗药物提供参考。     

树突状细胞疫苗与食管癌免疫治疗

随着树突状细胞(DC)体外扩增技术和肿瘤抗原制备、负载体系等DC疫苗制备技术的发展,与食管癌治疗相关的多种DC疫苗相继出现,包括多肽负载DC疫苗、食管癌细胞-DC融合疫苗、核酸负载DC疫苗、自体肿瘤抗原负载DC疫苗等,其中多肽负载DC疫苗及凋亡的自体肿瘤细胞负载DC疫苗等在临床应用中已取得较好疗效.     

肺癌患者免疫功能变化测定及其临床意义

目的 探讨肺癌患者机体免疫功能变化及临床意义.方法 采用流式细胞术测定68例肺癌患者治疗前及20例健康志愿者外周静脉血中CD+3T、CD+4T、CD+8T、NK细胞以及Th1类细胞因子干扰素(INF)-γ、白细胞介素(IL)-2、肿瘤坏死因子(TNF)-α;Th2类细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的水平.结果 肺癌患者外周血中CD+3T、CD+4T细胞、CD4/CD8值下降;CD+8T、NK细胞升高;TNF-α、IL-4、IL-6、IL-10水平均升高,Th1/Th2值降低,与对照组比较差异均有统计学意义,(P分别＜0.05～0.001).肺癌患者NK与CD3、CD4、CD8均呈负相关;CD4与Th2类细胞因子呈负相关.化疗前肺癌患者外周血淋巴细胞,Th1、Th2类细胞因子水平与病理类型、淋巴结转移、远处转移无关均(P＞0.05).结论 肺癌患者细胞免疫功能普遍低下,其中CD+4T细胞的数量和功能降低比较显著,其功能的降低可能与Th1/Th2因子失衡有关.     

HER4在人食管癌组织中的表达及其临床意义

目的:分析人表皮生长因子受体- 4(human epidermal growth factor receptor 4,HER4)和肿瘤转移相关蛋白MMP-9在食管鳞癌组织中的表达及其与临床病理特征之间的关系.方法:应用免疫组织化学技术检测45例食管癌组织标本中HER4和MMP-9的表达,采用统计学方法分析HER4阳性表达与临床病理指标和MMP-9表达之间的关系.结果:HER4在45例食管癌组织、癌旁组织和正常食管组织中的阳性表达率分别为73.3%、33.3%和2.2%.HER4的阳性表达与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01 ),而与组织学分级无关(P>0.05).MMP-9的表达与T分期、TNM分期、肿瘤大小及淋巴结转移有关(P<0.05 ). 结论:HER4在食管癌组织、癌旁组织和正常食管组织中的表达水平存在明显差异,HER4阳性表达与食管鳞癌的TNM分期和淋巴结转移相关,也与MMP-9的阳性表达具有相关性.     

后程加速超分割放射加顺铂治疗对食管癌患者细胞免疫功能的影响

目的：探讨后程加速超分割放射治疗同期给予单药顺铂化疗对食管癌患者细胞免疫功能的影响。方法：将符合入选条件的104例食管鳞癌患者随机分为A、B2个组。A组53例为后程加速超分割放射治疗组（简称后超组）；B组51例为后超加顺铂组。放射治疗方法2个组相同，顺铂于放射治疗第1、5周分别给予20mg/d，连续5d。治疗前和结束时分别采取外周血，用流式细胞术测定淋巴细胞CD4、CD8、CD56抗原的阳性率。结果：治疗后CD4与CD8比值较治疗前明显下降（A组P＜0．01，B组P＜0．01），CD56阳性率则升高（A组P＜0．01，B组P＜0．01），但上述2项指标的变化在2个组间差异无显著性意义（P＞0．05）。结论：后程加速超分割放射治疗加顺铂治疗后可使食管癌患者的细胞免疫水平（CD4／CD8）降低，而NK细胞（CD56）免疫监视活性部分恢复或增强。     

食管贲门癌患者血清sMICA检测的临床意义

目的评价可溶性人类MHC-1类分子链相关基因A蛋白（sMICA）检测对食管贲门癌患者的临床诊断价值。方法应用酶联免疫法对50例术前食管贲门癌患者和其中27例术后患者及20名健康人血清sMICA含量进行测定，并对血清sMICA含量的差异进行分析。结果食管癌患者血清sMICA含量为（322．42±9．09）pg／ml，明显高于健康人的（176．00±11．69）pg／ml，差异有统计学意义（P〈0．01）；在TNM分期中，sMICA含量Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期依次增高（P〈0．05）；有淋巴结转移患者的sMICA含量均高于无淋巴结转移的患者（P〈0．01）；在组织病理分型中，腺癌患者血清sMICA含量高于鳞状细胞癌患者（P〈0．01）；Ⅲ期患者术前血清sMICA含量均高于术后，差异有统计学意义（P〈0．01）。结论血清sMICA的检测有助于食管贲门癌的临床辅助诊断，对判断食管贲门癌生物学行为及预后有一定临床意义，sMICA可能成为新的肿瘤标志物指标之一。     

食管癌患者外周血CD+4 CDHi25 CDLow127 调节性T细胞的表达及其临床意义

 目的　探讨食管癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLow127 调节性T细胞（Treg细胞）水平的变化及其与临床病理特征的关系。方法　采用流式细胞术检测80例食管癌患者和20名健康志愿者外周血中Treg占CD+4细胞的比例,结合临床及病理资料进行分析。结果　食管癌患者外周血中Treg细胞表达为（5.70±1.96）%,显著高于健康对照组的（3.36±1.14）%（P<0.01）。Treg细胞表达在淋巴结转移阳性患者组为（5.96±1.36）%（n＝40）,显著高于淋巴结转移阴性组的（4.23±1.18）%（n＝30）（P <0.01）。食管癌外周血Treg细胞和TNM分期有着负相关性,TNM分期越晚,Treg细胞表达率越高。结论　Treg细胞在食管癌患者的外周血中表达较健康对照组显著增高,并与临床病理特征存在显著相关性。食管癌发病和分期与免疫功能受抑有密切关系。     

食管癌同期放化疗与血管内皮生长因子表达的关系

目的探讨食管癌同期放化疗与血管内皮生长因子表达水平的关系.方法将70例中、上段食管癌患者随机分为2组,研究组35例接受同期放化疗,对照组35例接受单纯放射治疗.运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组患者治疗前、后血清中血管内皮生长因子(S-VEGF)水平,分析其与疗效的关系及临床意义.结果 2组患者治疗前后S-VEGF水平有显著性差异,研究组治疗前(548.65±253.94)pg/mL,治疗后(191.29±159.24)pg/mL(P<0.001);对照组治疗前(622.83±231.47)pg/mL,治疗后(412.26±263.86)pg/mL(P<0.001);治疗组与对照组治疗后的S-VEGF表达水平也有显著性差异(P<0.001).结论食管癌患者放射治疗后S-VEGF水平较治疗前明显降低;同期放化疗较单纯放疗后的S-VEGF水平显著降低;抗VEGF疗法在放疗中的应用值得研究.