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相似文献
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1.
目的 探讨蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在白细胞介素-1β(IL-1β)所促发的细胞移动中的作用.方法 构建重组质粒SHP-2-GFP以及SHP-2C>S-GFP并分别转入MCF-7乳腺癌细胞中,建立SHP-2-GFP-MCF-7和SHP-2C>S-MCF-7细胞株.采用荧光显微镜技术观察细胞移动情况;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹法检测钙黏蛋白和金属蛋白酶的变化情况,确定蛋白磷酸酶SHP-2在细胞移动中的作用.结果 E-钙黏蛋白在IL-1β刺激的SHP-2转染的乳腺癌细胞株中的表达量是最低的,而金属蛋白酶MMP-9的表达量最高.结论 SHP-2参与IL-1β促发的细胞移动,并且通过减少E-钙黏蛋白的表达以及增强金属蛋白酶MMP-9的分泌来发挥作用.  相似文献   

2.
目的:探讨含2个Src同源区2的蛋白酪氨酸磷酸酶(Src homology 2 domain-containing tyrosine phosphatase,SHP-2)在乳腺癌MCF-7细胞体内外移动和转移中的作用.方法:首先构建重组质粒SHP-2-绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因及SHP-2C>S-GFP(SHP-2突变体),并分别转入乳腺癌MCF-7细胞中,建立2种细胞,即SHP-2-GFP-MCF-7和SHP-2C>S-MCF-7.利用荧光显微镜技术观察细胞移动情况,动物实验观察不同细胞移植组裸小鼠的肿瘤生长情况,从而确定蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2在乳腺癌细胞移动、侵袭和转移中的作用.结果:SHP-2转染的乳腺癌MCF-7细胞的体外移动能力增强,且在注射此组细胞的裸鼠中有肿瘤生长;而转染了SHP-2C>S-GFP的乳腺癌MCF-7细胞的移动能力明显减弱,且注射此组细胞的裸鼠未发现肿瘤生长.结论:SHP-2可促进乳腺癌MCF-7细胞在体外的移动及体内的侵袭和转移.  相似文献   

3.
冀峰 《现代肿瘤医学》2017,(20):3225-3228
目的:建立乳腺癌阿霉素耐药细胞株,命名为MCF-7/ADM,探讨耐药细胞的上皮间质化(EMT)现象及机制,为耐药乳腺癌的治疗奠定基础.方法:中等浓度间歇法建立乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADM.采用MTT和Transwell实验分别检测耐药对细胞增殖、迁移与转移能力的影响;荧光定量PCR检测MCF-7/ADM细胞EMT相关分子标志物E-钙黏蛋白及间质细胞分子标记N-钙黏蛋白、波形蛋白、纤维连接蛋白等的表达.ELISA检测TGF-β的表达,Western blot检测TGF-β及Smad2/3在蛋白水平的表达.结果:乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/ADM的耐药指数为32.2,对5-氟脲嘧啶、顺铂、环磷酰胺产生交叉耐药性.与MCF-7细胞相比,MCF-7/ADM细胞迁移和转移能力明显增强,E-cadherin表达降低而N-cadher-in表达显著增高,细胞上清中TGF-β1表达增加,细胞内TGF-β及磷酸化Smad2/3在蛋白水平表达升高.结论:乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/ADM发生EMT现象,可能与经典TGF-β通路激活有关.  相似文献   

4.
目的:研究赖氨酰氧化酶样蛋白-2(lysyl oxidase like-2 protein,LOXL2)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭转移的影响。方法:利用脂质体法将构建好的Flag-LOXL2质粒转染到乳腺癌MCF-7细胞中,应用Western blot检测转染效率,Transwell侵袭实验检测乳腺癌MCF-7细胞的体外侵袭力,并进一步使用Western blot检测LOXL2蛋白对金属蛋白酶MMP2/MMP9表达的影响。结果:在乳腺癌MCF-7细胞中瞬时转染FlagLOXL2,LOXL2蛋白表达明显增加,并促进MCF-7细胞的侵袭能力,上调金属蛋白酶MMP2和MMP9蛋白的表达。结论:LOXL2促进MCF-7细胞的侵袭能力,并影响金属蛋白酶MMP2以及MMP9的表达。  相似文献   

5.
王捷  王岩  朱芸 《癌症进展》2018,16(5):584-586,590
目的 探讨他莫昔芬(TAM)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力的影响及其作用机制.方法 采用对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,以无血清无酚红高糖DMEM培养基对其进行24 h的培养,然后将其分别接种并分为对照组(无血清无酚红高糖DMEM培养基)、TAM组(含有1μmol/L TAM的无血清无酚红高糖DMEM培养基),采用Western blot法、RT-PCR法检测两组MCF-7细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、MMP-2、血管内皮细胞生长因子(VEGF)蛋白及mRNA表达水平,采用Transwell法检测MCF-7细胞的侵袭能力.结果 TAM组MCF-7细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2蛋白表达水平均明显高于对照组,VEGF、MMP-9、MMP-2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01);TAM组MCF-7细胞的侵袭能力相对数明显高于对照组,差异有统计学意义(P﹤0.01).结论 TAM可能发挥类雌激素功能,促进乳腺癌MCF-7细胞侵袭能力,这与其提高MCF-7细胞中VEGF、MMP-9、MMP-2表达水平有关.  相似文献   

6.
目的 比较研究不同温度的热疗对人乳腺癌株MCF-7细胞侵袭转移能力的影响及其相关分子机制.方法 水浴热疗43、45和47℃ 3组MCF-7细胞各30 min,37℃为对照组.采用免疫组织化学染色法检测MCF-7细胞转化生长因子.β1(TGF-β1)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达;明胶酶谱法检测细胞上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9的分泌及活性.结果 热疗对MMP-2、MMP-9的释放和激活均有明显的抑制作用(P<0.05);且对MMP-2活性的抑制作用有明显的温度依赖性,随加热温度增加,抑制作用越明显(P<0.05).各热疗组TGF-β1和VEGF的表达均较对照组显著下降(P<0.05),但不同温度热疗组之间差异无统计学意义(P>0.05);结论 43、45、47 β热疗均可下调MCF-7细胞中TGF-β1、VEGF的蛋白表达及抑制MMP.2、MMP-9的分泌和活性,从而抑制人乳腺癌细胞侵袭转移能力.  相似文献   

7.
目的 探讨乳腺浸润性导管癌组织中上皮间质转化(EMT)分子标记物E 钙黏蛋白、N 钙黏蛋白、基质金属蛋白酶9(MMP 9)和MDM2蛋白的表达及其与临床病理特征和预后的关系。方法 应用免疫组织化学法检测242例乳腺浸润性导管癌患者手术标本中E 钙黏蛋白、N 钙黏蛋白、MMP 9和MDM2蛋白的表达水平,并进行统计分析。结果在乳腺浸润性导管癌组织中,E 钙黏蛋白、N 钙黏蛋白、MMP 9和MDM2的阳性表达率分别为70.7%、2.9%、54.9%和49.6%,其中,E-钙黏蛋白与MMP-9的表达呈正相关(r=0.238,P=0.000),MDM2与MMP-9的表达也呈正相关(r=0.171,P=0.012)。E-钙黏蛋白的表达与肿瘤大小及雌激素受体(ER)状态有关,肿瘤较小及ER阳性者的E-钙黏蛋白阳性表达率高;MDM2的表达与肿瘤大小也存在显著相关性(P=0.028),肿瘤较小者的MDM2阳性表达率高。生存分析显示,肿瘤较大、淋巴结转移及MDM2表达阳性者的术后无病生存期较短,其中淋巴结转移(HR=11.33,95%CI:3.46~37.13,P<0.001)和MDM2表达阳性(HR=5.17,95%CI:1.66~16.10,P=0.005)是乳腺浸润性导管癌患者的独立不良预后因素。结论 MDM2是乳腺浸润性导管癌的不良预后因子之一,MDM2可能通过上调MMP-9的表达,介导EMT发生,导致肿瘤浸润转移影响预后。  相似文献   

8.
目的 探讨乳腺癌转移的机制,为深入研究乳腺癌发生、发展机制提供理论基础.方法 应用不同浓度的弗林蛋白酶(Furin)抑制剂α1-PDX处理乳腺癌MCF-7细胞.用四甲基偶氮唑蓝(MTT)和克隆形成实验检测Furin抑制剂对MCF-7细胞增殖和克隆形成的影响.单层细胞迁移实验和Transwell实验检测MCF-7细胞迁移和浸润能力.Hoechst 33342/PI双染法检测细胞凋亡.酶联免疫吸附法检测细胞培养液中基质金属蛋白酶2(MMP-2)和MMP-9蛋白水平.Western blot检测细胞迁移相关蛋白MT1-MMP、血管内皮生长因子(VEGF)-C和VEGF-D水平.结果 不同浓度α1-PDX作用MCF-7细胞48 h以上时,细胞的生长受到抑制,集落形成降低,细胞凋亡率升高.但在低浓度情况下对细胞迁移和侵袭起抑制作用.α1-PDX降低了细胞内MT1-MMP、VEGF-C、VEGF-D的表达,同时细胞培养液上清中MMP-2和MMP-9浓度也低于对照组.结论 Furin抑制剂通过抑制乳腺癌MCF-7细胞MMP及VEGF表达抑制肿瘤的迁移能力.  相似文献   

9.
目的观察肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)对乳腺癌MCF-7细胞侵袭迁移能力的影响,并初步探索其机制。方法选取人单核细胞系THP-1,体外经佛波酯(PMA)、人白细胞介素-4(IL-4)诱导获得TAMs细胞模型;通过流式细胞术(FCM)检测TAMs表面标记分子CD206表达水平;MCF-7细胞与TAMs共培养后,光学倒置显微镜观察细胞形态;利用Transwell小室分别检测MCF-7细胞的侵袭和迁移能力;蛋白印记法(Western blotting)检测E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、闭合蛋白(Occludin)及波形纤维蛋白(Vimentin)的表达;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞培养上清中转化生长因子-β(TGF-β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和血管内皮生长因子(VEGF)的浓度。结果与TAMs共培养后的MCF-7细胞伪足增多,细胞排列更松散。通过FCM检测到TAMs表面标记物CD206显著表达。Transwell实验结果显示,与TAMs共培养后的MCF-7细胞迁移能力增强,对照组穿过Transwell小室细胞数为(54±2)个,实验组为(110±6)个,差异有统计学意义(P<0.001);其侵袭能力显著增强,对照组穿透基质膜的细胞数为(41±1)个,实验组为(77±4)个,差异亦有统计学意义(P<0.001)。Western blotting检测结果显示,MCF-7细胞与TAMs共培养后,E-cadherin、Occludin蛋白表达较对照组显著降低,而N-cadherin和Vimentin蛋白表达量显著升高(P均<0.05)。ELISA法检测TAMs与MCF-7细胞共培养上清中的TGF-β、TNF-α、VEGF浓度均较对照组升高(P均<0.05)。结论TAMs与乳腺癌MCF-7细胞的浸润转移过程密切相关,TAMs可通过促进MCF-7细胞发生上皮间质转化(EMT)进而促进乳腺癌的浸润转移。  相似文献   

10.
人乳腺癌细胞RECK基因的表达及检测   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:研究人乳腺癌细胞株RECK基因的表达,阐明RECK基因表达水平与乳腺癌细胞侵袭力的关系。方法:采用transwell法,测定HBL-100,MCF-7和MDA-MB-435S三株人乳腺(癌)细胞的体外侵袭能力,同时应用免疫细胞化学技术,Westernblotting和RT-PCR技术分别检测三株细胞株MMP-2,MMP-9和RECK基因蛋白表达水平,及RECK基因mRNA转录丰度。结果:三株细胞中,MDA-MB-435S侵袭力最高(425.20±54.09),HBL-100最低(101.00±63.88),MCF-7居中,为(239.00±91.39),三组细胞的侵袭力比较差异均有显著性(P<0.01)。RECK基因在HBL-100细胞株中蛋白表达水平最高(免疫细胞化学值:3188.24±894.86;Westernblotting值:3.32±0.25),在MDA-MB-435S细胞株中不表达,MCF-7为(免疫细胞化学值:1058.92±336.53,P<0.01;Westernblotting值:2.23±0.59,P<0.05)。且在免疫细胞化学中,RECK基因的蛋白表达与MMP-2,MMP-9的表达水平成负相关。RECK基因在HBL-100细胞株中mRNA水平最高(2.32±0.02),在MDA-MB-435S细胞株中不表达(P<0.001)。结论:RECK基因表达水平与乳腺癌细胞体外侵袭力及MMP-2,MMP-9的表达水平成明显负相关。  相似文献   

11.
目的:研究AQP4在人乳腺癌细胞中的表达,并进一步探讨AQP4对肿瘤细胞增殖的影响及机制。方法:通过 siRNA干扰技术下调乳腺癌细胞T47D 和 MCF-7 细胞系中水通道蛋白4表达,检测这种下调对乳腺癌细胞增殖的影响并初步探讨其作用机制。结果:AQP4表达下降抑制乳腺癌细胞的增殖,可能通过ERK通路/E-钙黏蛋白实现的。结论:AQP4表达水平与乳腺癌细胞增殖正相关,相应的肿瘤抑制剂可以起到控制肿瘤生长作用。  相似文献   

12.
目的:观察缺氧对乳腺癌MCF-7细胞中LOXL2和E-钙粘蛋白表达的影响。方法:使用Westernblot、real—timePCR分别在蛋白和mRNA水平观察缺氧如何调节乳腺癌MCF-7细胞中LOXL2和E一钙粘蛋白的表达。结果:在乳腺癌MCF-7细胞中,缺氧上调LOXL2蛋白和mRNA表达,下调E-钙粘蛋白和mRNA水平。结论:缺氧调节乳腺癌细胞中LOXL2及E-钙粘蛋白基因的表达,为进一步探讨乳腺癌发病机制及治疗提供有力证据。  相似文献   

13.
[摘要] 目的:探讨亮氨酸拉链肿瘤抑制因子2(leucine zipper tumor suppressor 2, LZTS2)基因在人乳腺癌组织和细胞系中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、迁移和EMT的影响及其作用机制。方法:收集2016 年1 月至2016 年12 月开封中心医院乳腺外科收治的50 例女性乳腺癌患者的癌及癌旁组织标本和乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-468 以及正常人乳腺上皮细胞株HBL-100,用qPCR 和Western blotting 检测乳腺癌组织和细胞中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平。构建pcDNA-LZTS2 真核表达载体并采用脂质体转染MCF-7 细胞,同时转染pcDNA3.1 作为阴性对照。用Western blotting 检测转染48~72 h 后MCF-7 细胞中LZTS2 蛋白表达水平;用MTT法、Transwell 小室法检测LZTS2 过表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响,同时用Western blotting检测细胞中EMT相关蛋白Cyclin D1、波形蛋白、神经钙黏蛋白、上皮钙黏蛋白以及PI3K/AKT信号通路中相关蛋白的表达。结果:人乳腺癌组织中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平均明显低于癌旁组织(P<0.05 或P<0.01);乳腺癌MCF-7、MDA-MB-231 和MDA-MB-468 细胞中LZTS2 mRNA和蛋白表达水平显著低于乳腺上皮细胞HBL-100(P<0.05 或P<0.01)。与空白对照组和pcDNA3.1组相比,pcDNA-LZTS2 组MCF-7 细胞中LZTS2 蛋白表达水平明显上调(P<0.01),细胞增殖、迁移和侵袭能力显著受到抑制(P<0.05 或P<0.01),同时过表达LZTS2 细胞中Cyclin D1、波形蛋白和神经钙黏蛋白表达水平均明显降低(P<0.05 或P<0.01)、上皮钙黏蛋白表达水平明显升高(均P<0.01),显示LZTS2 过表达通过降低p-PI3K和p-AKT 表达而抑制PI3K/AKT信号通路。结论:LZTS2 在乳腺癌中低表达,过表达LZTS2 能够抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,可能与抑制细胞EMT过程的PI3K/AKT信号通路有关。  相似文献   

14.
目的:探讨乳腺癌MMP-2、MMP-9表达的临床病理联系及直接阻断MMP-2、MMP-9对乳腺癌细胞增殖、侵袭及细胞周期的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测48例乳腺癌MMP-2、MMP-9的表达。明胶酶谱法检测乳腺癌MCF-7细胞MMP-2、MMP-9的表达。MCF-7细胞接种于预铺BME的Tran-swell小室上室,与MMP-2、MMP-9的阻断剂CTT共孵育16h,观察阻断MMP-2、MMP-9对MCF-7细胞侵袭能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育12h后,MTT法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞增殖能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育24h后,PI染色流式法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:48例乳腺癌组织有MMP-2表达者45例(93.75%),MMP-9表达者38例(79.17%),MMP-2和MMP-9在发生淋巴结转移组明显高表达(P<0.05);组织学分级越高,MMP-2和MMP-9的表达越显著(P<0.05)。明胶酶谱法检测:在MCF-7培养上清中检测到MMP-2、MMP-9的表达。在浓度为100μg/ml和200μg/ml时CTT对MCF-7细胞的侵袭抑制率达到39.5%和61.9%。在终浓度为50、100、200μg/ml时,CTT对MCF-7细胞的增殖率均无明显下降(P>0.05)。CTT处理组MCF-7细胞经流式法检测未见凋亡峰,细胞周期各期未见明显阻滞(P>0.05)。结论:MMP-2、MMP-9与乳腺癌的淋巴结转移密切相关,阻断MMP-2、MMP-9可有效抑制乳腺癌的浸润和转移。  相似文献   

15.
目的:探讨乳腺癌MMP-2、MMP-9表达的临床病理联系及直接阻断MMP-2、MMP-9对乳腺癌细胞增殖、侵袭及细胞周期的影响。方法:应用免疫组织化学方法检测48例乳腺癌MMP-2、MMP-9的表达。明胶酶谱法检测乳腺癌MCF-7细胞MMP-2、MMP-9的表达。MCF-7细胞接种于预铺BME的Tran-swell小室上室,与MMP-2、MMP-9的阻断剂CTT共孵育16h,观察阻断MMP-2、MMP-9对MCF-7细胞侵袭能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育12h后,MTT法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞增殖能力的影响。MCF-7细胞与CTT共孵育24h后,PI染色流式法检测阻断MMP-2、MMP-9对细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:48例乳腺癌组织有MMP-2表达者45例(93.75%),MMP-9表达者38例(79.17%),MMP-2和MMP-9在发生淋巴结转移组明显高表达(P<0.05);组织学分级越高,MMP-2和MMP-9的表达越显著(P<0.05)。明胶酶谱法检测:在MCF-7培养上清中检测到MMP-2、MMP-9的表达。在浓度为100μg/ml和200μg/ml时CTT对MCF-7细胞的侵袭抑制率达到39.5%和61.9%。在终浓度为50、100、200μg/ml时,CTT对MCF-7细胞的增殖率均无明显下降(P>0.05)。CTT处理组MCF-7细胞经流式法检测未见凋亡峰,细胞周期各期未见明显阻滞(P>0.05)。结论:MMP-2、MMP-9与乳腺癌的淋巴结转移密切相关,阻断MMP-2、MMP-9可有效抑制乳腺癌的浸润和转移。  相似文献   

16.
目的 探讨一种新的CD44基因变异体(CD44v17)对人乳腺癌细胞株MCF-7侵袭能力的影响及其机制.方法 以人乳腺癌耐阿霉素细胞株(MCF-7/ADR)cDNA为模板,采用聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段,将其T-A克隆后,进行测序;构建CD44v17质粒真核表达载体(pcDNA3.1-CD44v17);应用脂质体转染法将pcDNA3.1-CD44v17转染入MCF-7细胞中,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及明胶酶谱法测定转染细胞基质金属蛋白酶(MMP)-2和MMP-9的表达;Transwell法检测CD44v17对MCF-7细胞的侵袭力;Western blot检测胞外信号调节蛋白激酶(ERK)及磷酸化蛋白激酶(p-ERK)变化.结果 限制性内切酶消化证实,重组载体已正确克隆;DNA序列分析显示,CD44v17包含CD44基因1~4号外显子、16~17号外显子、18号外显子1~205位碱基(GeneBank NO.FJ216964).MCF-7细胞转染peDNA3.1-CD44v17后,CD44 mRNA表达量和蛋白表达率分别为0.92±0.22和(70.0±2.5)%;透明质酸(HA)处理后,MMP-2 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.72±0.22和1.14.4-0.12,MMP-9 mRNA表达量和蛋白活性分别为0.85±0.19和1.23±0.25,细胞侵袭能力明显增加,侵袭细胞数目为352±33个/视野,而CD44单抗可以阻断这种作用;CD44单抗和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路抑制剂预处理转染细胞后,显著阻断了P-ERK的表达.结论 在MCF-7/ADR细胞中发现CD44v17,并成功克隆和建立pcDNA3.1-CDd4v17;HA与CD44v17受体结合,通过CD44→ras→MAPK信号传导通路调节MMP-2和MMP-9的表达,从而增加MCF-7细胞的侵袭力.  相似文献   

17.
目的:探讨非选择性环氧合酶-2(cyclooxygenese-2,COX-2)抑制剂阿司匹林赖氨酸盐对乳腺癌MDA-MB-231细胞株COX-2、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinaseses-9,MMP-9)蛋白表达的影响。方法:不同浓度的阿司匹林赖氨酸盐作用于MDA-MB-231细胞24h后,HE染色观察细胞形态学的变化;采用MTT法检测阿司匹林赖氨酸盐对MDA-MB-231乳腺癌细胞增殖的抑制作用;应用Western印迹法分别检测阿司匹林赖氨酸盐对人乳腺癌MDA-MB-231细胞株COX-2、MMP-9蛋白表达的影响。结果:光学显微镜下阿司匹林赖氨酸盐处理组的细胞密度减小,细胞变圆,胞核染色变浅。阿司匹林赖氨酸盐对MDA-MB-231乳腺癌细胞的增殖有明显抑制作用(P〈0.01)。与对照组相比,阿司匹林赖氨酸盐可显著抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞COX-2、MMP-9蛋白的表达,并呈剂量-依赖效应(P〈0.05)。结论:阿司匹林赖氨酸盐可抑制MDA-MB-231乳腺癌细胞COX-2、MMP-9蛋白的表达。  相似文献   

18.
目的:探讨Th1类细胞因子IFN-γ和Th2类细胞因子IL-4对MCF-7细胞的成瘤、黏附能力的调节作用及其相关机制。方法:常规体外培养人乳腺癌细胞系MCF-7。以前期工作中筛选出的以有效剂量rhIFN-γ(100 ng/ml)或rhIL-4(10 ng/ml)或细胞因子稀释液分别处理细胞96 h后,应用半定量RT-PCR法、Western blotting技术、双层软琼脂集落形成实验、细胞体外黏附实验等观察IFN-γ和IL-4对细胞VEGF表达、致瘤性和黏附侵袭特性的影响,并对其相关信号通路机制进行分析。结果: IFN-γ或IL-4可分别抑制或促进人乳腺癌细胞MCF-7的成瘤和黏附能力。分子机制研究表明,与对照组相比,rhIFN-γ可抑制MCF-7细胞VEGF、MMP-9的基因转录和蛋白表达水平,抑制Raf/MEK/ERK信号通路;rhIL-4可促进MCF-7细胞的VEGF、MMP-2和MMP-9的基因转录和蛋白表达水平,促进PI3K/AKT、Raf/MEK/ERK 信号通路激活。结论: 肿瘤微环境中,IFN-γ和IL-4可分别抑制和促进人乳腺癌细胞系MCF-7的VEGF表达和体外成瘤、黏附能力,其机制可能与PI3K/AKT、Raf/MEK/ERK 信号通路相关。  相似文献   

19.
目的探讨乳腺癌耐阿霉素细胞株MCF-7/ADM与阿霉素敏感细胞株MCF-7/S中乳腺癌干细胞(BCSCs)含量及乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和P-糖蛋白(P-gp)表达的差异,观察中药β-榄香烯(β-ELE)对BCSCs及BCRP和P-gp表达的影响。方法 应用无血清细胞培养法培养MCF-7/ADM和MCF-7/S细胞株,形态学观察不同细胞株无血清细胞球培养的成球率,RT PCR检测两种细胞株中BCRP和P-gp的mRNA水平,流式细胞仪检测BCRP和P-gp的阳性表达率及CD44+CD24-/low细胞比例。应用15μg/ml β-ELE作用MCF-7/ADM细胞株48h后,检测细胞成球率及BCRP、P-gp基因与蛋白表达的变化。结果 与MCF-7/S细胞比较,MCF-7/ADM细胞的成球率及BCRP、P-gp mRNA水平较高。MCF-7/ADM细胞中BCRP和P-gp蛋白的阳性表达率分别为(77.78±9.55)%和(32.33±5.12)%,CD44+CD24-/low细胞比例为(64.79±11.78)%,均高于MCF-7/S细胞的(3.97±1.51)%、(14.26±2.51)%和(18.79±3.28)%,差异均有统计学意义(P<0.01)。β-ELE能明显抑制MCF-7/ADM细胞的成球率及BCRP、P-gp基因与蛋白的表达(P<0.01)。结论 MCF-7/ADM是BCSCs相对富集的一种耐药细胞株且高表达BCRP和P gp,β-ELE能够抑制MCF-7/ADM细胞中BCSCs比例及其成球率,并降低耐药蛋白的表达。  相似文献   

20.
目的观察紫花牡荆素对乳腺癌MCF-7细胞株增殖与侵袭能力的影响并探讨其分子机制。方法应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法与侵袭实验检测紫花牡荆素对MCF-7细胞增殖与侵袭能力的影响,应用反转录PCR、Western blot法、Tunel法检测紫花牡荆素对基因表达、蛋白表达、细胞凋亡的影响。结果不同浓度紫花牡荆素均抑制MCF-7细胞增殖水平,同未加药对照组比较差异均有统计学意义(P〈0.05),5、10、20μmol/L紫花牡荆素作用后,MCF-7细胞迁移数与未处理组相比分别降低20.3%、44.4%和50.3%(P〈0.05)。以10μmol/L紫花牡荆素处理后,凋亡细胞数增多,可以上调Bax与Caspase-3蛋白的表达水平,下调基质金属蛋白酶(MMP)-2与MMP-9的mRNA和蛋白表达水平。结论紫花牡荆素对于乳腺癌细胞恶性增殖与侵袭能力具有显著抑制作用。  相似文献   

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