三氧化二砷联合5-氟尿嘧啶抗裸鼠人结肠癌移植瘤的作用及其机制的研究

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合5-氟尿嘧啶（5-FU）对裸鼠人结肠癌移植瘤的抗肿瘤作用、作用机制以及药物毒性.方法建立裸鼠人结肠癌模型,随机分为生理盐水组、As2O3组、5-FU组和As2O3联合5-FU组,腹腔分别注射生理盐水、As2O3、5-FU和As2O3 ＋5-FU,观察各组抑瘤作用和裸鼠一般状态的变化,并对体内标本行光镜、电镜、原位末端标记（TUNEL）、免疫组化和血常规检测.结果与单药作用相比,As2O3联合5-FU可显著抑制结肠癌移植瘤的增长,CDI值〈1,并显著增强诱导瘤细胞凋亡作用、调控凋亡相关基因（Bcl-2、Bax、Fas和FasL）表达.联合用药并未增加裸鼠肝、肾和造血系统的毒性.结论 As2O3与5-FU联合应用对结肠癌移植瘤有协同抗肿瘤作用,其机制可能与增强诱导癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因表达有关;同时联合用药对于荷瘤裸鼠的肝、肾和造血系统无明显毒性.     

三氧化二砷的抗大肠癌作用及其机制

目的观察三氧化二砷(As2O3)对大肠癌LS-174T细胞生长及端粒酶活性的影响。方法As2O3作用于大肠癌LS-174T细胞和裸鼠移植瘤后,采用噻唑盐(MTT)比色法检测结肠癌细胞生长抑制情况,电镜检测细胞超微结构的改变,荧光染色观察细胞核形态变化,流式细胞术(FCM)检测As2O3对细胞周期的影响,聚合酶链反应-酶联免疫反应(PCR-ELISA)试剂盒检测细胞中端粒酶活性变化。结果MTT法显示,随着As2O3浓度的升高,LS-174T细胞存活率明显下降,IC50= 5.23μmol/L。As2O3作用于LS-174T细胞24 h即出现凋亡峰,凋亡细胞的数量随着作用时间增加而增加。As2O3对LS-174T细胞提取液端粒酶活性有一定的抑制作用,对癌细胞端粒酶活性抑制作用随作用时间的延长而加强。从实验动物瘤体积和瘤重两个指标分析,As2O3组与对照组相比具有明显的抑癌作用(P<0.05)。结论经体外、体内实验证实,As2O3对结肠癌LS-174T细胞生长和裸鼠移植瘤均有抑制作用,其抗癌机制可能与诱导细胞凋亡和抑制端粒酶活性有关。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的: 探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5 FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法:经不同浓度的As2O3 和(或)5- FU处理Lovo细胞后,采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应;AO/EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化;免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果:与As2O3 或5 -FU单药作用相比,As2O3 与5- FU联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用,联合用药后细胞周期分布发生改变,S期和G2/M期细胞比例下降,G0/G1 期细胞比例上升,癌细胞bcl- 2基因表达明显下降, bax和Fas基因表达显著增强。结论:As2O3与5 -FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用,其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌裸鼠移植瘤细胞分化的研究

背景与目的:既往研究发现三氧化二砷(As2O3)可诱导白血病细胞的分化,但对实体瘤细胞的诱导分化作用报道甚少。本实验拟探讨As2O3对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的影响,重点观察其诱导鼻咽癌细胞分化的作用。方法:以人鼻咽低分化鳞癌鼠移植癌细胞株CSNE-1为研究对象,观察腹腔注射As2O3(5mg·kg-1·d-1连续10天后,每周给药3次,连续3周)对人鼻咽癌移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长情况的影响。用光学显微镜和电子显微镜观察移植瘤细胞形态变化,用免疫组化法检测瘤组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:腹腔注射As2O3后,人鼻咽癌BALB/C裸鼠移植瘤生长被抑制,抑瘤率为75.4%。同时,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。癌细胞PCNA在阴性对照组呈高表达,PI(PCNA阳性细胞指数)为(95.2±5.0)%,而As2O3组癌细胞PCNA表达明显减少,PI为(53.6±7.0)%(P<0.001)。结论:As2O3抑制人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的生长,这种抑制作用可能与其诱导癌细胞向成熟方向分化有关     

三氧化二砷抑制人结肠癌裸鼠肝转移的药效 动力学

 目的　研究三氧化二砷(As2O3 ) 对人结肠癌裸鼠肝转移的抑制作用。方法　BALB/ C2nu/ nu 裸 鼠经脾脏接种人结肠腺癌LS2174 T 细胞建立结肠癌裸鼠肝转移模型,于10 min (早期) 、10 天(中期) 、20 天(晚期) 经尾静脉注射As2O3 ,对照组注射生理盐水。观察各组裸鼠体重变化、肝转移结节的数目、大 小、瘤重以及肝脏肿瘤替代率和荷瘤鼠的生存时间。结果　与对照组相比,早期及中期治疗组裸鼠肝转 移结节的数目、大小、瘤重以及肝脏肿瘤替代率和荷瘤鼠的生存时间差异均有统计学意义( P < 0. 05) ,晚 期治疗组差异无统计学意义( P > 0. 05) 。结论　三氧化二砷对人结肠癌裸鼠肝转移有明显的抑制作用, 早期效果优于中晚期。     

三氧化二砷诱导人鼻咽低分化鳞癌BALB/C裸鼠移植瘤的细胞分化和凋亡的研究

目的 探讨三氧化二砷(As2O3)对人鼻咽低分化鳞癌可移植瘤在BALB/C裸鼠体内生长的抑制作用并探讨其机制,重点观察其对鼻咽癌细胞的分化诱导作用。方法 CSNE-1鼻咽癌细胞株接种于裸鼠体内构建移植瘤模型。腹腔注入As2O3(5 mg/kg)。光镜及电镜观察移植瘤的形态学变化,TUNEL染色计算凋亡率,应用免疫组化法检测PCNA,p53,Bcl-2和bax基因的表达。结果 腹腔注射As2O3后,鼻咽癌BALB/C裸鼠移植瘤生长抑制,瘤组织中癌细胞密度减少,细胞皱缩,胞浆红染,瘤组织分化渐成熟,出现角化细胞和角化珠;间质结缔组织增多。透射电镜下肿瘤细胞出现成熟分化及明显角质化,细胞表面微小突起增多,细胞间桥粒增多并以桥粒互相连接,细胞核浆比例减少,胞浆中出现大量张力原纤维并围绕核周。TUNEL检查提示凋亡细胞增多;用药 后野生型p53及baX高表达,PCNA低表达,Bcl-2无变化。 结论As2O3能诱导人低分化鼻咽裸鼠移植瘤分化和凋亡,可能与p53及bax高表达相关,与Bcl-2无关。     

氧化砷诱导结肠癌细胞凋亡及其分子机制

 目的　观察不同浓度As2O3对结肠癌Lovo、LS-174T细胞株生长的影响。方法　0.125～2μ mo1/L的As2O3与结肠癌细胞株Lovo、LS-174T共同孵育,观察不同浓度As2O3作用不同时间对结肠癌细胞的生长抑制作用、细胞形态学改变、DNA的变化。结果　1～2μ mol/L As2O3作用的结肠癌细胞呈凋亡特征性改变：细胞膜不发生破裂,细胞核出现核浓缩、核碎裂和凋亡小体形成;流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提琼脂糖凝胶电泳呈凋亡特征性条带。结论　1～2μ mol/L As2O3可诱导结肠癌细胞凋亡,肿瘤细胞凋亡与Fas、Fas-L表达有关。     

三氧化二砷联合氟尿嘧啶抗人结肠癌Lovo细胞作用及其机制的研究

目的：探讨三氧化二砷(As2O3)与氟尿嘧啶(5-FU)联合应用对人结肠腺癌细胞株Lovo的影响及其作用机制。方法：经不同浓度的As2O3和(或)5-FU处理Lovo细胞后，采用MTT法测定细胞的增殖抑制效应；AO／EB荧光染色、DNA电泳、电镜和流式细胞术观察细胞凋亡和形态学及细胞周期变化；免疫组织化学法观察凋亡相关基因表达的变化。结果：与As2O3或5-FU单药作用相比，As2O3与5-Fu联合应用可显著增强人结肠癌细胞增殖抑制作用和诱导结肠癌细胞凋亡作用，联合用药后细胞周期分布发生改变，S期和G2／M期细胞比例下降，G0／G1。期细胞比例上升，癌细胞bcl-2基因表达明显下降，bax和Fas基因表达显著增强。结论：As2O3与5-FU联合应用具有显著协同抗大肠癌作用．其机制可能与增强诱导大肠癌细胞凋亡、细胞周期特异性药物与细胞周期调控剂联合增效以及调控凋亡相关基因的表达有关。     

三氧化二砷抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤生长及促凋亡作用

背景与目的:胆囊癌由于缺乏特异性的临床表现确诊时多属晚期,手术切除率较低,且常规化疗药物对胆囊癌的疗效较差,因此需寻找治疗胆囊癌新的有效药物。三氧化二砷(As2O3)在治疗急性早幼粒细胞白血病中取得了突破性成果,近年来它在实体瘤的研究中颇受关注。本研究旨在观察As2O3对人胆囊癌裸鼠移植瘤生长的抑制及促凋亡作用。方法:20只皮下接种移植瘤大小相似的BALB/c裸鼠,随机分为生理盐水(NS)组(n=10)和As2O3组(n=10)。尾静脉注射NS0.2ml/只(NS组)或As2O310mg/kg(As2O3组),每日1次,连续7d。21d时处死所有裸鼠,测量肿瘤的重量和体积,同时用原位末端标记法检测凋亡细胞并计数。结果:NS组瘤重(1.0±0.4)g、体积(1.5±0.6)mm3;As2O3组瘤重(0.53±0.27)g、体积(0.8±0.4)mm3,瘤重和体积明显下降;NS组凋亡细胞计数为22±4,As2O3组升高至58±10(P<0.01)。结论:As2O3能明显抑制人胆囊癌裸鼠移植瘤的生长并促进肿瘤细胞凋亡。     

三氧化二砷联合TNP-470对裸鼠人肝癌移植瘤的影响

目的:探讨三氧化二砷(As2O3)联合烟曲霉的提取物烟曲霉醇(TNP-470)对裸鼠人肝癌移植瘤生长的影响及其作用机制。方法:人肝癌转移模型(HCC)-LCI-D20原位移植瘤裸鼠32只,随机分4组(每组8只)给药:As2O3联合TNP-470组、As2O3组、TNP-470组、生理盐水(NS)对照组,给药21天后,对裸鼠移植瘤大小、肿瘤微血管密度(MVD)、免疫组化、透射电镜结果进行观察。结果:As2O3组、TNP-470组及联合组的平均瘤重及平均瘤体积均低于对照组(P<0.05);计算两药相互作用系数(CDI)值:瘤重CDI(0.95)<1,体积CDI(0.89)<1,两药有协同抑制移植瘤生长的作用。As2O3组抑制移植瘤VEGF、EGFR的表达;TNP-470组抑制移植瘤EGFR的表达,对移植瘤VEGF的表达无影响;联合组明显抑制移植瘤EGFR的表达,抑制移植瘤VEGF的表达作用等同As2O3组。裸鼠原位移植瘤的光镜、电镜下观察结果有意义;各用药组裸鼠原位移植瘤的MVD值均低于对照组(P<0.05)。结论:As2O3联合TNP-470协同抑制裸鼠人肝癌移植瘤的血管新生,能有效抑制移植瘤生长。     

As2O3对人胃癌细胞株SCG-7901裸鼠移植瘤的抗肿瘤机制研究

目的：探讨不同剂量的三氧化二砷（As2O3）对人胃癌细胞株SCG-7901裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤机制。方法：建立人胃癌裸鼠皮下移植瘤模型，随机分为实验组即As2O3低剂量组（1．0mg／kg）、As2O3中剂量组（2．5mg／kg）和As2O3高剂量组（5．0mg／kg），空白对照生理盐水组及阳性对照5-Fu组（20mg／kg），分别腹腔连续给药10天，停药后24小时处死裸鼠，称取瘤重，计算抑瘤率，流式细胞仪检测凋亡率及Caspase-3的活性变化。结果：低剂量As2O3组及5-FU组抑瘤率分别为60．6％及78．2％，与生理盐水组比较均有统计学意义（P〈0．05），低剂量组与5-FU组抑瘤率差异无统计学意义（P〉0．05）；高、中、低剂量As2O3组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰，凋亡率分别为18．32％、17．86％、21．89％，同时伴有Caspase-3活性的增加，其中低剂量As2O3活性增加最显著。结论：低剂量As2O3在体内可通过活化Caspase-3诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用。     

Sialyl Lewis-X抗原在大肠癌肝转移中的作用研究及临床意义

目的探讨SialylLewis-X(SLeX)抗原在大肠癌肝转移中的作用及临床意义。方法采用大肠癌Lovo、HT29细胞与人脐静脉血管内皮及内皮细胞的粘附试验,分别用扫描电镜及透射电镜观察Lovo、HT29细胞与脐静脉血管内皮及内皮细胞的粘附性及SLeX单抗封闭大肠癌细胞后,这种粘附性的改变;采用实验性裸鼠大肠癌肝转移模型分别观察SLeX单抗封闭Lovo、HT29细胞前后对实验性裸鼠大肠癌肝转移的影响。结果高表达SLeX抗原的Lovo细胞与脐静脉血管内皮的粘附性较低表达SLeX抗原的HT29细胞强,Lovo细胞与脐静脉血管内皮细胞的连接方式与HT29细胞明显不同;高表达SLeX抗原的Lovo细胞引起裸鼠肝转移率高于低表达SLeX抗原的HT29细胞。结论大肠癌细胞表面SLeX抗原在大肠癌细胞与脐静脉血管内皮细胞的粘附及实验性裸鼠肝转移中起重要作用,SLeX单抗能有效地抑制肿瘤细胞与脐静脉血管内皮细胞的粘附,并能降低实验性裸鼠肝转移的形成。     

Anti-tumor Effect and Its Mechanisms of Ursolic Acid on Human Esophageal Carcinoma Cell Eca-109 in Vivo

Objective:To investigate the anti-tumor effect and possible mechanisms of ursolic acid on human esophageal carcinoma in vivo.Methods:A transplanted tumor model by injecting Eca-109 cells into subcutaneous tissue of BALB/c nude mice was established.40 nude mice bearing tumors were randomly divided into 4 groups and 0.2 ml saline or 0.2 ml ursolic acid(25-100 mg·kg-1.d-1)was injected into abdominal cavity respectively once everyday and lasted for fourteen days.The changes of tumor volume were measured continuously and tumor inhibition rate was calculated.The morphological changes of apoptosis were observed by electron microscope.The expressions of COX-2,bcl-2 and Bax protein in transplanted tumors were detected by immunohistochemistry.At last the PGE2 level of transplanted tumors was detected by radioimmunoassay.Results:Treatment of nude mice with 25,50,or 100 mg·kg-1.d-1 of ursolic acid significantly inhibited the growth of the human esophageal carcinoma tumor in nude mice and induced Eca-109 cells apoptosis as demonstrated by electron microscopy analyses.The expressions of COX-2 and bcl-2 in the transplanted tumors were decreased in ursolic acid groups,while the Bax increased.The PGE2 level of transplanted tumors was decreased in ursolic acid groups with a dose-related manner.Conclusion:Ursolic acid has anti-tumor effects against human esophageal carcinoma cells in vivo,which are likely mediated via induction of tumor cell apoptosis and inhibition of COX-2 and PGE2.     

新城疫病毒D817对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制作用

目的 观察新城疫病毒DK/HK/817/1980(NDV D817)对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制作用.方法 采用LoVo细胞株建立裸小鼠人结肠癌移植瘤模型,分别给予裸小鼠尾静脉注射PBS、氟尿嘧啶(5-Fu)以及NDV D817高、中、低3个剂量,观察不同剂量NDV D817对移植瘤的抑制作用,病理学观察NDV D817对移植瘤和肝细胞的损伤程度,流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡和坏死情况,酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒检测荷瘤小鼠体内肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,血凝实验检测荷瘤小鼠体内活病毒量.结果 中剂量NDV D817可明显抑制移植瘤的生长,肿瘤抑制率达48.1%.NDV D817对荷瘤小鼠体重和肝脏的损伤较小,且具有诱导肿瘤细胞凋亡和诱导机体产生TNF-α的能力.荷瘤小鼠处死后只在瘤内检测到活病毒,而在血清和其他脏器中并没有检出活病毒.结论 在对裸小鼠人结肠癌移植瘤的抑制过程中,NDV D817有明显的抑瘤效果,适当剂量的NDVD817更安全有效.     

Vascular endothelial growth factor is an in vivo survival factor for tumor endothelium in a murine model of colorectal carcinoma liver metastases

BACKGROUND: Recent studies have suggested that vascular endothelial growth factor (VEGF), in addition to its proangiogenic properties, also functions as a survival factor for endothelial cells. The authors hypothesized that inhibition of VEGF activity by blockade of VEGF receptor-2 (R-2) function prevents angiogenesis and decreases tumor growth in colon carcinoma liver metastases. METHODS: Spleens of mice were injected with human colon carcinoma cells producing liver metastases. After 7 days of tumor growth, groups of mice received either antibody to VEGFR-2 (DC101) or phosphate-buffered saline (control). In a follow-up experiment, a similar treatment regimen was followed except that mice were sacrificed at 1-week intervals to assess the time course of endothelial cell and tumor cell apoptosis. RESULTS: After 21 days of therapy, the authors observed a significant decrease in vessel counts in liver metastases from human colon carcinoma in nude mice after therapy with VEGFR-2 antibody. Tumor cell apoptosis was increased significantly in the tumors of mice receiving DC101. Temporal studies with immunofluorescent double staining for the microvasculature and apoptotic cells revealed an increase in endothelial cell apoptosis that preceded an increase in tumor cell apoptosis. In vitro, treatment of human umbilical vein endothelial cells with antibody to VEGFR-2 produced a > 2.5-fold increase in endothelial cell apoptosis. CONCLUSIONS: Therapy targeting the VEGFR-2 inhibited tumor growth in a murine model of colon carcinoma liver metastasis. Surprisingly, this therapy did not only inhibit angiogenesis but also led to endothelial cell death. These findings suggest that VEGF, via VEGFR-2 signaling, functions as a survival factor for tumor endothelial cells in liver metastases from colon carcinoma.     

三氧化二砷抑制我卵巢癌裸鼠腹腔转移瘤的形成及其机制的初步研究

背景与目的:三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)已成功地应用于急性早幼粒细胞白血病的临床化疗,并已用于治疗肝癌、结肠癌、胃癌等的实验研究。本研究探讨As2O3对人卵巢癌细胞株3AO细胞裸鼠腹腔种植转移的影响及其作用机制。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(methylthiazolyltetrazolium,MTT)法检测不同浓度As2O3作用48h对人卵巢癌细胞株3AO细胞的生长抑制率,并与顺铂(cisplatin,cDDP)进行比较。取4×106个3AO细胞接种于裸鼠腹腔,96h后随机分为5组,分别腹腔内注射生理盐水、3mg/kg顺铂及0.8、1.2、2.4mg/kgAs2O3,观察3AO细胞在各组裸鼠的成瘤率、裸鼠的死亡率及生存期;采用流式细胞术观察As2O3作用后3AO细胞中Fas、FasL、nm23基因表达的变化。结果:As2O3能明显抑制3AO细胞的生长,抑制作用呈浓度依赖性,与顺铂相比差异有显著性(P<0.05);As2O3能明显降低3AO细胞的裸鼠成瘤率及荷瘤鼠的死亡率,延长荷瘤鼠的生存期,与顺铂相比差异有显著性(P<0.05);As2O3使裸鼠腹腔种植瘤Fas基因及nm23基因的表达水平升高(P<0.05),而对FasL基因的表达无影响(P>0.05)。结论:As2O3对人卵巢癌裸鼠腹腔种植具有明显的抑制作用,其机制可能与Fas基因及nm23基因的过度表达有关。