肝癌细胞外基质的免疫组化研究

对４０例肝细胞癌（ＨＣＣ）进行纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）及Ⅳ型胶原（ｃｏｌⅣ）免疫组化染色。结果发现三种成分有类似分布。它们的分布与ＨＣＣ分化程度及生长方式密切相关，在高分化ＨＣＣ和膨胀型ＨＣＣ其分布方式主要为连续的索周型，而在低分化ＨＣＣ和浸润型ＨＣＣ则多为中断的索周型。     

大肠癌Col Ⅳ、LN及FN的免疫组化研究

目的：检测基底膜主要成分层粘连蛋白（ＬＮ）、纤维粘结蛋白（ＦＮ）及Ⅳ型胶原纤维（ＣｏｌⅣ）在大肠癌中的表达以及与浸润、转移的关系。方法：免疫组化标记大肠癌组织中ＣｏｌⅣ、ＬＮ及ＦＮ。结果：大肠 工在底膜成分存在不同程度的缺失,表现为Ｃｏｌ、ＬＮ呈不连续片状分布;癌组织分化越低,ＬＮ缺失越明显;ＣｏｌⅣ表达与组织类型有显著低于Ａ期大肠癌;ＦＮ表达与上述因素关系不大。结论：大肠癌基底膜成分的缺失与其     

前列腺癌细胞外基质的免疫组织化学研究

用免疫组化ＡＢＣ法观察２０便前例腺癌及２０例前列腺结节性增生组织内细胞外基质成分（ＥＣＭ）──层粘连蛋白（ＬＮ）、纤维连接蛋白（ＦＮ）、Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原（Ⅰｃ、Ⅲｃ、Ⅳｃ）的分布。结果显示结节性增生组织内基底膜（ＢＭ）呈连续线状完整地分布，Ⅰｃ、Ⅲｃ及ＦＮ含量较少。癌症组织内，癌细胞周围ＢＭ有不同程度的缺失现象，癌细胞分化愈差，ＢＭ丢失愈严重，Ⅰｃ、Ⅲｃ及ＦＮ在间质内分布呈明显的异质性。提示在癌浸润性生长过程中，宿主组织内胶原发生了不均一性的反应，这种改变可能具有限制癌细胞生长的作用。     

胃癌病人血清层粘连蛋白,Ⅳ型胶原含量及临床意义

目的：探讨胃癌病人血清层粘连蛋白、Ⅳ型胶原含量及临床意义。方法：应用放射免疫技术测定了１８例胃癌病人血清层粘连蛋白（ＬＮ）及Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）含量。结果：胃癌病人血清ＬＮ及ＣｏｌⅣ含量显著高于对照组（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１）；有淋巴结转移的进展期胃癌组血清ＬＮ、ＣｏｌⅣ含量明显高于无淋巴结转移的早期胃癌组（Ｐ＜０．０５）。结论：胃癌病人血清ＬＮ、ＣｏｌⅣ含量与肿瘤的浸润及转移过程密切相关；观察血清ＬＮ、ＣｏｌⅣ含量及其变化，对胃癌病人的病情及预后判断有重要的参考价值     

子宫颈鳞状细胞癌细胞外间质改变的免疫荧光抗体法研究

目的：通过对细胞外间质（ＥＣＭ）成分进行检测,探讨间质重构与子宫颈鳞状细胞癌侵袭性生长及播散的关系。方法：应用双重免疫荧光染色技术和激光共聚焦显微镜观察,对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌患者的子宫颈石蜡包埋组织切片纤维结合素（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测。结果：正常子宫颈组织中,ＥＣＭ内可见结构致密的Ⅰ、Ⅲ型胶原和细条索状的ＦＮ蛋白表达,Ⅳ型胶原和ＬＮ蛋白     

胃癌组织bcl-2蛋白表达和DCC基因的杂合性缺失

为了研究ｂｃｌ２蛋白表达和ＤＣＣ基因的杂合性缺失（ＬＯＨ）在胃癌发生中的作用，采用免疫组织化学技术和ＰＣＲ方法检测了胃癌组织ｂｃｌ２蛋白的表达和ＤＣＣ基因的杂合性丢失（ＬＯＨ）。结果发现，胃癌（信息个体）ＬＯＨ发生率为５４．５％（１８／３３），ｂｃｌ２蛋白的表达阳性率为６０．０％（３０／５０），Ⅲ、Ⅳ期胃癌ＬＯＨ发生率（８３．３％，１５／１８）显著高于Ⅰ、Ⅱ期胃癌（２０．０％，３／１５），Ｐ＜０．０１。ｂｃｌ２蛋白的表达和ＤＣＣ基因的ＬＯＨ与胃癌大小、分化程度、淋巴结转移、浆膜浸润、临床分期及Ｌａｕｒｅｎ′ｓ分型无显著相关。结果提示ｂｃｌ２蛋白的高表达参与了胃癌的发生，ＤＣＣ基因的ＬＯＨ与胃癌的进展有关，但其致癌机制有所不同     

导入H—ras癌基因后肝癌细胞转移特性的变化

目的探讨Ｈ－ｒａｓ癌基因与肝癌细胞转移行为的关系。方法应用磷酸钙转染法将Ｈ－ｒａｓ癌基因导入人肝癌细胞株ＳＭＭＣ７７２１,通过进行粘附试验、运动试验、Ⅳ型胶原酶（ｃⅣａｓｅ）的分泌、表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）的表达等转移相关指标的测定,观察转染前后细胞转移特性的变化。结果转染Ｈ－ｒａｓ的ＳＭＭＣ７７２１细胞对胞外基质成分层粘连蛋白（ＬＮ）、纤维粘连蛋白（ＦＮ）的粘附能力提高,细胞的运动能力增强,ｃⅣａｓｅ的分泌明显增加,ＥＧＦＲ表达有中等程度的增加,且上述变化与Ｈ－ｒａｓ癌基因的蛋白产物ｐ２１的表达有明确的相关关系。结论Ｈ－ｒａｓ癌基因能在体外诱导人肝癌细胞的转移表型的产生,提高肝癌细胞的转移潜能。     

前列腺癌组织中细胞外基质的免疫组织化学研究

应用免疫组化ＡＢＣ法，观察２０例前列腺增生症和３０例前列腺癌组织内细胞外基质成份的分布（ＥＣＭ）。其中包括层粘连蛋白（ＬＮ）、纤维连接蛋白（ＦＮ）、Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白。结果显示：ＬＮ和Ⅳ型胶原分布在上皮基底膜（ＢＭ）内，ＦＮ在基底膜和非基底膜内均有分布，Ⅰ型和Ⅲ型胶原仅分布在间质内。良性病变时ＬＮ、Ⅳ型胶原和ＦＮ（ＢＭ）呈连续线状完整分布，Ⅰ、Ⅲ型胶原含量少，而ＦＮ含量多。癌组织内ＢＭ有不同程度的缺失。Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原分布呈明显的异质性和ＦＮ含量少。上述资料提示前列腺癌组织中ＢＭ明显缺失。Ⅰ、Ⅲ型和Ⅳ型胶原分布呈明显的异质性，这是肿瘤细胞反应的结果，这种改变可能具有限制癌细胞生长的作用。     

血清Ⅳ型胶原及层粘边蛋白在结直肠癌病人中的含量变化及其意义

目的：观察结直肠癌病人血清Ⅳ型胶原（ＣｏｌⅣ）及层粘连蛋白（ＬＮ）的含量变化并探讨其意义。方法：选择结直肠癌病人５１例作观察组（其中４１例行根治术），３２例非肿瘤手术病人作对照组，采用放射免疫法测定ＣｏｌⅣ和ＬＮ。结果：观察组ＣｏｌⅣ和ＬＮ的含量明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），其中ＤｕｋｅｓＢ期及Ｃ期明显高于Ａ期（Ｐ＜０．０１），根治术后ＣｏｌⅣ及ＬＮ较术前下降（Ｐ＜０．０５）。结论：ＣｏｌⅣ及Ｌ     

胃癌组织中层粘连蛋白的分布及其与生物学特性的关系

胃癌组织中层粘连蛋白的分布及其与生物学特性的关系韩静，董聿明，杨光霖我们采用ＡＢＣ法对７５例胃癌层粘连蛋白（ＬＮ）含量和分布作了光镜观察，探讨其与胃癌生物学特性的关系。材料与方法７５例胃癌均为外科手术切除标本。福尔马林固定，石蜡包埋，切片分别做ＨＥ及...     

乳腺肿瘤基膜与间质圆形细胞和S_（－100）阳性细胞浸润关系的研究

应用免疫组化方法以抗层粘连蛋白（ＬＮ），Ⅳ型胶原（ＣｏｌｌⅣ）抗体分别对９８例各类乳腺癌和乳腺良性病变进行了研究。发现ＬＮ和ＣｏｌｌⅣ分布在瘤细胞与间质接邻处，两者的染色结果基本一致；在有密集圆形细胞浸润的癌巢周围，尤见于导管内癌，可见基膜染色变浅或中断；１９／６２例（３０．７％）间质树突状细胞阳性和２／３１例（６．５％）间质树突状细胞阴性连续线状基膜阳性（Ｐ＜０．０５）。本文认为间质中的炎症细胞浸润和树突状细胞分布与基膜改变有密切关系，但尚需深入研究。     

恶性肿瘤体内外生长和发展过程与细胞外基质相关性的研究

目的探讨细胞外基质在肿瘤侵袭转移中的作用。方法利用小鼠肺腺癌细胞母系ＬＡ７９５移植于Ｔ７３９小鼠皮下和肾包膜下,以及人鼻咽癌细胞系ＣＮＥ－２Ｚ移植于裸小鼠皮下等体内移植模型,通过间接免疫酶标和间接免疫荧光技术,测定纤维粘连蛋白（ＦＮ）、层粘连蛋白（ＬＮ）与Ⅳ型胶原（ⅣＣ）在肿瘤移植后不同时间的表达,并利用多种体外实验方法（琼脂糖滴瘤细胞移动实验、软琼脂上瘤细胞集落生长速度测定、斑点杂交等）,分析瘤细胞运动能力、瘤细胞集落生长速度等与ＬＮ、ＦＮ和ⅣＣ之间的关系。结果随着肿瘤的生长,ＦＮ、ＬＮ与ⅣＣ的表达均增强,且呈不同的分布;外源性ＦＮ、ＬＮ及ⅣＣ能提高瘤细胞的体外运动能力和促进瘤细胞集落的体外生长。结论细胞外基质的分布及其合成和降解的变化,与恶性肿瘤的侵袭和转移有关,对预测肿瘤生物学行为有参考价值。观察细胞外基质与瘤细胞侵袭的关系,肾包膜下移植模型较为理想     

细胞外基质和细胞粘附分子在细支气管肺泡癌中的表达与意义

目的：研究细胞外基质（ECM）中层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原（CollⅣ）、纤粘连蛋白（FN）和细胞粘附分子A－CAM在细支气管肺泡癌（BAC）及其三个亚型和肺腺癌（CPA）间的表达下及意义。方法：采用免疫组化LSAB法,检测50例BAC（包括14例粘液型、22型非粘液型和14例硬化型）和6例CPA中ECM分布和A－CAM表达情况。结果：在LN、Coll Ⅳ、FN分布上,粘液型BAC与癌旁肺实质相同,为在基底膜水平只不过连续单层窄线性染色;非粘液型BAC则呈连续、不规则增宽的双层轨道样;硬化型BAC外周区域同非粘液型,中央区域与CPA相似,其内癌性腺体基底膜水平处表现为中继或缺如;A－CAM在BAC和CPA中的阳性率分别为605（30／50）和83％（5／6）（P＞0．05）,在BAC三个亚型中则分别为43％（6／14）、55％（12／22）和865（12／14）,呈递增趋势,粘液型显著低于硬化型（P＜0．05）,硬化型BAC则与CAP十分接近,结论从ECM分布和A－CAM的表达来看,BAC整体应视为CAP的一种亚型,粘液型BAC是真正意义上的BAC;BAC三个亚型间及与CAP间可能存在某种分化关系。     

层粘连蛋白、Ⅳ型胶原与肺癌转移

（目的）探讨肺癌组织中层粘连蛋白（LN）、Ⅳ型胶原的表达与肺癌转移的关系。（方法）运用免疫组织化学方法检测并观察49例肺癌组织和其中伴转移病例中的20例淋巴结转移灶中的LN和Ⅳ型胶原的表达和分布情况，结合临床资料进行分析。〔结果〕LN和Ⅳ型胶原的阳性率分别为73、47％和71．43％，且表达形式极为相似，在癌组织中均呈连续线型、断续线型、碎片到以及完全缺失型四种方式分布，两者分布的相关性检验P＜0．005，共同形成肺癌组织中的基底膜（BM）祥物质；不论腺癌和群癌，BM样物质表达较完整样本组的转移发生率均显著低于不完整组，P值分别为0．019和0．045；样本的分化程度越高，BM样物质表达的完整率亦越高，且临床Ⅰ期样本的BM样物质表达的完整率显著高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期样本，P=0.019.〔结论）肺癌组织中BM样物质的表达形式与肺癌转移密切相关。     

层粘连蛋白与涎腺腺样囊性癌肿瘤生物学特性的关系研究

目的为研究层粘连蛋白与涎腺腺样囊性癌（ＡＣＣ）侵袭和转移的关系。方法用免疫组织化学ＡＢＣ法，观察２５例ＡＣＣ组织中层粘连蛋白（ＬＮ）的表达与分布。结果ＬＮ主要分布在基底膜上以及部分筛状假囊内，腺管内和肿瘤细胞浆内。经统计学检验，发现ＬＮ与病理分型、ＴＮＭ分期和转移有关，即筛状┐管状型、ＴＮＭ早期和无转移者的ＬＮ多阳性表达，而实体型、ＴＮＭ晚期和转移者，ＬＮ多阴性表达。结论ＬＮ表达的高低与ＡＣＣ临床恶性程度侵袭和转移，均有密切关系。     

混合型肝癌的临床病理特点及诊断

用组织化学、免疫组织化学法分析１３０例肝癌，其中肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）９９例，胆管细胞性肝癌（ＣＣ）１５例，混合性肝癌（ＨＣＣ＋ＣＣ）１６例。分析中发现，ＨＣＣ＋ＣＣ的临床及癌旁病变特点均介于ＨＣＣ与ＣＣ之间，ＨＣＣ＋ＣＣ组织学上呈小梁型（４例）、假腺管型（４例）、致密型（３例）及管状腺癌型（５例）。前３型癌以ＨＣＣ为主，ＣＣ区域占１０％以下（ＨＣＣ＋ＣＣⅠ型），间质纤维化不明显。管状腺癌型ＣＣ区占１０％以上（ＨＣＣ＋ＣＣⅡ型），其ＣＣ区间质纤维化明显。ＨＣＣ＋ＣＣ病例之ＣＣ区呈粘液及ＥＭＡ染色阳性。ＨＣＣ区粘液及ＥＭＡ染色阴性，近７０％病例的癌细胞内可见糖原。ＨＣＣ＋ＣＣ的两亚型都可见ＨＣＣ与ＣＣ组织形态的移行区，此处可呈粘液阴性，ＥＭＡ阳性。总之，ＨＣＣ＋ＣＣ由ＨＣＣ区及ＣＣ区组成，分别具有相应的形态学及组织化学特点；粘液及ＥＭＡ染色有助于ＨＣＣ＋ＣＣ的诊断。     

ＴＧＦβ１与Ｓｍａｄ４基因在肝细胞癌中的表达及意义

目的：通过检测ＴＧＦβ１与Ｓｍａｄ４基因在肝细胞癌（ＨＣＣ）中的表达,初步探讨ＴＧＦβ／Ｓｍａｄ信号通路中ＴＧＦβ１与Ｃｏ-Ｓｍａｄ（Ｓｍａｄ４）与ＨＣＣ的发生、发展之间的可能关系。方法：采用免疫组化ＡＢＣ法及原位杂交法（ＩＳＨ）检测４１例ＨＣＣ组织切片中癌与癌旁ＴＧＦβ１、Ｓｍａｄ４蛋白、Ｓｍａｄ４ ｍＲＮＡ的表达,５例外伤性肝破裂手术切除标本作正常对照。比较ＨＣＣ组与对照组及ＨＣＣ癌组织与癌旁组织ＴＧＦβ１与Ｓｍａｄ４蛋白、Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ表达的差异。结果：正常对照组ＴＧＦβ１呈阴性表达,Ｓｍａｄ４蛋白、Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ均呈阳性表达;ＴＧＦβ１在ＨＣＣ组织中阳性表达率为７８.０％（３２／４１）,在癌旁组织中为95.１％（３９／４１）,两者比较差异显著（Ｐ＜０.０５）;Ｓｍａｄ４蛋白在ＨＣＣ组织中阳性表达率为４８.８％（２０／１）,在癌旁组织中为７８.０％（３２／４１）,两者比较有显著差异（Ｐ＜０.０１）;Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ在ＨＣＣ组织中阳性表达率为５１.２％（２１／４１）,在癌旁组织中为７３.１％（３０／４１）,两者比较有显著差异（Ｐ＜００５）;与正常肝组织比较,ＨＣＣ组织中Ｓｍａｄ４蛋白和Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ阳性表达均显著降低（Ｐ＜０.０５）;Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ在ＨＣＣ组织中阳性表达在病理分级Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级之间存在显著差异（Ｐ＜０.０５）,Ⅲ、Ⅳ级阳性表达较Ⅰ、Ⅱ级降低;癌旁组织中Ｓｍａｄ４蛋白的阳性面积百分比、吸光度及Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ的阳性面积百分比均显著高于ＨＣＣ组织中（Ｐ＜０.０５）。ＨＣＣ中Ｓｍａｄ４蛋白、Ｓｍａｄ４ｍＲＮＡ与ＴＧＦβ１比较均存在显著差异（Ｐ＜０.０５）,但均无显著相关性（Ｐ＞０.０５）。结论：ＴＧＦβ１过表达、Ｓｍａｄ４表达缺失可能在ＨＣＣ的发生、发展中发挥重要作用。     

子宫颈鳞状细胞癌细胞外间质改变的免疫荧光抗体法研究

目的：通过对细胞外间质 ECM 成分进行检测，探讨间质重构与子宫颈鳞状细胞癌侵袭性生长及播散的关系。方法：应用双重免疫荧光染色技术和激光共聚焦显微镜观察，对正常人及不同分化程度的子宫颈鳞状细胞癌患者的子宫颈石蜡包埋组织切片纤维结合素 FN、层粘连蛋白 LN 及Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型胶原蛋白的表达进行检测。结果：正常子宫颈组织中，ECM内可见结构致密的Ⅰ、Ⅲ型胶原和细条索状的FN蛋白表达，Ⅳ型胶原和LN蛋白主要呈线状分布于基底膜内。子宫颈鳞状细胞癌组织中，Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ型胶原降解，尤以后者为著，表现为Ⅰ、Ⅲ型胶原结构稀疏，排列紊乱，基底膜内Ⅳ型胶原的线状荧光减弱、断裂甚至缺失，间质和癌细胞浆内FN和LN蛋白表达增多，胶原的降解和FN、LN表达与癌细胞分化程度负相关。结论：子宫颈鳞状细胞癌，间质胶原降解，基底膜断裂，FN及LN表达增多，ECM重构，其程度与癌细胞分化程度呈负相关。     

140例HCC中抗转移抑制基因编码蛋白nm23／NDPK表达的研究

本文应用２种抗转移抑制基因编码蛋白ｎｍ２３／ＮＤＰＫ亚型（Ｈ１－Ｈ２和Ｈ１），免疫组化（ＩＨ）方法定位１４０例人肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌旁组织。结果ｎｍ２３Ｈ１和Ｈ１－Ｈ２阳性检测率分别为６０．７１％（８５／１４０）和７６．４２％（１０７／１４０）。ｎｍ２３亚型均主要表达在细胞浆内，但在核内和胞膜上也可阳性。ＨＣＣ旁伴肝硬化和不典型增生肝细胞有２９％（４０／１４０）呈弱阳性反应。其表达形式呈明显的异质性，阳性细胞或片状或弥散或灶性单个散在分布。２种ｎｍ２３亚型与ＨＣＣ转移和存活期相关。与肿瘤大小，组织学分级，组织学类型，ＨＢＶ感染，ｐ５３蛋白表达无直接的相关性（Ｐ＞０．０５）。Ｈ１与ＨＣＣ复发关系密切（Ｐ＜０．０５），而Ｈ１－Ｈ２无相关性（Ｐ＞０．０５）。ＡＦＰ检测阳性病例与Ｈ１－Ｈ２表达相关（Ｐ＜０．０５）。     

环六亚甲基二乙酰胺对G1期人胃癌MGc—803细胞理化的影响

环六亚甲基二乙酰胺（ＨＭＢＡ）作为一种诱导分化剂，最早用于小鼠红白血病细胞（ＭＥＬＣ）的诱导分化。用ＨＭＢＡ研究人胃癌细胞的诱导分化效应，将有助于了解各种癌症及白血病的发病机理。以人胃癌Ｇ１期ＭＧｃ－８０３细胞经５ｍｍＨＭＢＡ培养液处理后，细胞内环腺苷酸（ｃＡｍｐ）及蛋白激酶Ａ（ＤＫＡ）活性上升，而二酰基甘油（ＤＧ）水平有蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性下降，提示ＨＭＢＡ对细胞诱导分化作用与细胞内信号传导