lncRNASNHG10靶向调控miR-532-3p促进结直肠癌SW620细胞的侵袭和迁移

目的： 探讨lncRNA SNHG10在结直肠癌组织和细胞中的表达情况及其对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响与可能的机制。 方法： 收集2018年1月至2019年12月在河南省人民医院行根治性结直肠癌切除术的78例患者的癌组织及对应癌旁组织标本,采用qPCR法检测结直肠癌组织、结直肠癌细胞（SW480、SW620、HT-29和LoVo）及人正常结直肠黏膜细胞FHC中lncRNA SNHG10和miR-532-3p的表达水平,并分析其与结直肠癌患者临床病理特征的关系及在组织中表达的相关性。采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA SNHG10和miR-532-3p间的靶向关系。向SW620细胞中转染si-SNHG10或miR-532-3p mimic或共转染si-SNHG10+miR-532-3p inhibitor,采用Transwell实验检测其侵袭和迁移能力的改变,采用WB法检测E-cadherin,N-cadherin和vimentin蛋白表达水平变化。 结果： SNHG10 在结直肠癌组织和细胞中呈高表达（P<0.05 或 P<0.01）,其表达水平与TNM分期和远处转移有关（均P<0.05）;miR-532-3p在结直肠癌组织和细胞中呈低表达,其表达水平与TNM分期、淋巴结转移和远处转移有关（P<0.05或P<0.01）,SNHG10和miR-532-3p在结直肠癌组织中的表达呈负相关（r=-0.225, P=0.048）。双荧光素酶报告基因实验证实SNHG10靶向调节miR-532-3p的表达。下调 SNHG10 或上调 miR-532-3p 的表达后,SW620 细胞的侵袭和迁移能力显著降低（P<0.01）,E-cadherin蛋白表达水平升高（P<0.05）、N-cadherin和vimentin蛋白表达水平降低（均P<0.05）。抑制miR-532-3p表达后,敲低lncRNA SNHG10表达对结直肠癌细胞侵袭和迁移的抑制作用被逆转（均P<0.05）。 结论： lncRNA SNHG10在结直肠癌中高表达并与TNM分期和远处转移相关,lncRNASNHG10靶向调控miR-532-3p表达并通过EMT途径影响结直肠癌细胞的侵袭和转移。     

Lnc SNHG16通过调控miR-140-5p/wnt1对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响

摘 要：［目的］ 探讨了Lnc SNHG16通过miR-140-5p/wnt1对结直肠癌细胞增殖和迁移的影响。［方法］ 选取结直肠癌肿瘤组织和癌旁组织各102例，采用荧光定量PCR检测Lnc SNHG16和miR-140-5p表达水平和两者间的关系。采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析Lnc SNHG16和miR-140-5p之间的关系以及靶基因；在结肠癌细胞系SW480建立Lnc SNHG16敲降和miR-140-5p过表达细胞系，采用Western blot分析Lnc SNHG16和miR-140-5p对目的蛋白的影响；采用CCK8分析不同处理结肠癌细胞增殖；采用Transwell分析不同处理的结肠癌细胞的迁移。［结果］ 与癌旁组织相比，结直肠癌组织中Lnc SNHG16表达水平显著增加，而miR-140-5p表达水平显著下调，差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学研究发现Lnc SNHG16调控着miR-140-5p的表达水平，并调控wnt1蛋白的表达，调节WNT/β-Catenin信号通路活性。Lnc SNHG16敲降或过表达miR-140-5p可显著抑制SW480细胞的增殖和迁移，差异均有统计学意义(P<0.05)。［结论］ Lnc SNHG16通过靶向作用于miR-140-5p/wnt1轴进而调节着结直肠癌细胞的增殖和迁移。     

miR-145-5p靶向TAGLN2调控结直肠癌SW620细胞侵袭和迁移的机制探讨

目的:探究微小RNA-145-5p（miR-145-5p）在结直肠癌组织和细胞中的表达情况及其靶向调控肌动蛋白凝胶蛋白2（TAGLN2）对结直肠癌细胞侵袭和迁移能力的影响。方法:采用实时荧光定量PCR（qPCR）技术对48例结直肠癌患者癌组织、配对癌旁组织、结直肠癌细胞株（HCT8、SW620、HCT116、HT-29）及结直肠黏膜细胞FHC中的miR-145-5p和TAGLN2 mRNA表达进行定量分析。将SW620细胞设为空白对照组、miR-145-5p mimics组、mimics-NC组、pcDNA3.1-TAGLN2组、pcDNA3.1-Vector组和miR-145-5p mimics+pcDNA3.1-TAGLN2组,采用qPCR检测miR-145-5p和TAGLN2 mRNA表达,采用Transwell法检测细胞侵袭及迁移能力,采用免疫印迹法（Western blot）检测TAGLN2蛋白及EMT相关蛋白表达,采用双荧光素酶报告实验检测miR-145-5p和TAGLN2间的靶向关系。结果:miR-145-5p在结直肠癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织（P<0.05）,并与结直肠癌患者的TNM分期和淋巴结转移相关（均P<0.05）;TAGLN2在结直肠癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织,并与miR-145-5p表达呈负相关（P<0.05）;miR-145-5p和TAGLN2在结直肠癌HCT8、SW620、HCT116和HT-29细胞中的表达水平显著低于或高于FHC细胞（均P<0.05）。miR-145-5p过表达可降低SW620细胞的侵袭和迁移能力。miR-145-5p靶向调控TAGLN2表达,单独转染TAGLN2阳性质粒可增加SW620细胞的侵袭和迁移能力,与miR-145-5p mimics同时转染后,TAGLN2蛋白、波形蛋白（Vimentin）和神经钙黏素（N-cadherin）表达降低,上皮钙黏素（E-cadherin）表达升高,TAGLN2对SW620细胞侵袭和迁移能力的增强作用被显著抑制。结论:miR-145-5p在结直肠癌中呈低表达状态,其表达水平与结直肠癌患者的TNM分期和淋巴结转移密切相关,miR-145-5p靶向调控TAGLN2抑制结直肠癌细胞的侵袭和迁移能力。     

RNA干扰细胞分裂周期蛋白6基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其机制研究

目的 探讨RNA干扰细胞分裂周期蛋白6(CDC6)基因表达对结直肠癌细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及其作用机制.方法 采用蛋白质印迹法(Western blot)检测永生化结直肠细胞株(FHC)、结直肠癌细胞株(SW620、LOVO、HT29)中CDC6蛋白的表达情况.利用Lipofectamine 2000将CDC6 siRNA转染至SW620细胞,以转染si-con的SW620细胞作为阴性对照,采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移情况.采用Western blot检测Janus激酶2(JAK2)、磷酸化-JAK2(p-JAK2)、信号转导及转录激活因子3(STAT3)及磷酸化-STAT3(p-STAT3)蛋白的表达情况.采用JAK2/STAT3信号通路激活剂colivelin处理转染CDC6 siRNA的SW620细胞,观察其对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结果 永生化结直肠细胞株FHC中CDC6蛋白的相对表达量低于结直肠癌细胞株SW620、LOVO、HT29,差异均有统计学意义(P﹤0.05).转染CDC6 siRNA能够抑制SW620细胞增殖,促进细胞凋亡,减少侵袭细胞数目、迁移细胞数目,降低p-JAK2、p-STAT3蛋白的相对表达量,而对JAK2、STAT3蛋白的相对表达量无明显影响.采用colivelin激活JAK2/STAT3信号通路可以逆转CDC6 siRNA对SW620细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响.结论 转染CDC6 siRNA可通过下调JAK2/STAT3信号通路,抑制结直肠癌细胞的增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡.     

lncRNA SNHG14通过靶向miR-433-3p调控甲状腺癌SW579细胞的恶 性生物学行为

目的：探讨 lncRNA SNHG14 对甲状腺癌 SW579细胞恶性生物学行为的影响及其分子机制。方法：收集2017年10月至2018年12月青海省人民医院收治的20例甲状腺癌患者的癌组织及癌旁组织标本,用qPCR检测甲状腺癌组织和对应癌旁组织中SNHG14与miR-433-3p 的表达;根据转染物的不同,将 SW579 细胞分为 si-NC 组（转染si-NC）、si-SNHG14组（转染si-SNHG14）、miR-NC组（转染 miR-NC）、miR-433-3p mimic 组（转染 miR-433-3p mimic）、si-SNHG14+anti-miR-NC 组（共转染si-SNHG14与anti-miR-NC）和si-SNHG14+anti-miR-433-3p组（共转染si-SNHG14与anti-miR-433-3p）。MTT法、FCM、Transwell 实验分别检测转染后SW579细胞的增殖能力、细胞周期、细胞凋亡率、迁移及侵袭能力的改变;利用双荧光素酶报告基因实验检测SNHG14是否可结合miR-433-3p,qPCR法检测SNHG14与miR-433-3p之间的相互调控关系。结果：SNHG14在甲状腺癌组织中的表达高于癌旁组织（P<0.05）,而miR-433-3p的表达水平低于癌旁组织（P<0.05）。抑制SNHG14的表达或过表达miR-433-3p 可使SW579细胞增殖能力降低（P<0.05）、迁移与侵袭细胞数减少（均 P<0.05）、细胞凋亡率升高（P<0.05）、G1期细胞比例升高（P<0.05）且S期细胞比例降低（P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验证明SNHG14可结合miR-433-3p,抑制SNHG14的表达可提高SW579细胞中miR-433-3p水平（均P<0.05）。同时抑制miR-433-3p 和SNHG14的表达可部分逆转后者对SW579细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭的作用（均P<0.05）。结论：甲状腺癌组织中lncRNA SNHG14呈高表达、miR-433-3p呈低表达,lncRNA SNHG14可通过靶向结合miR-433-3p促进甲状腺癌SW579细胞的增殖、迁移、侵袭而抑制细胞凋亡。     

lncRNA LINC00909靶向miR-548-3p对结直肠癌细胞放射敏感性的研究

目的 探讨lncRNA LINC00909是否通过靶向miR-548-3p而影响结直肠癌细胞放射敏感性。方法 采用qRT-PCR检测结直肠癌组织、癌旁组织中LINC00909、miR-584-3p的表达量;体外培养结直肠癌细胞SW480、SW620,分别将si-NC、si-LINC00909、miR-NC、miR-584-3p mimics、si-LINC00909与anti-miR-NC、si-LINC00909与anti-miR-584-3p转染至SW480、SW620细胞,用4 Gy照射细胞;克隆形成实验检测细胞存活分数及放射增敏比;MTT检测细胞增殖;Transwell小室实验检测细胞迁移及侵袭;双荧光素酶报告实验验证LINC00909、miR-584-3p的靶向关系。裸鼠皮下移植瘤实验检测干扰LINC00909表达或抑制miR-584-3p表达对照射后移植瘤重量的影响。结果 结直肠癌组织中LINC00909的表达水平显著升高(P<0.05),miR-584-3p的表达水平显著降低(P<0.05);干扰LINC00909表达或miR-584-3p过表达后细胞存活分数明显降低(P<0.05),放射增敏比分别为2.017、1.762,并可抑制增殖、迁移及侵袭(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实LINC00909可靶向结合miR-584-3p;干扰LINC00909表达后移植瘤重量显著降低(P<0.05)。共转染anti-miR-584-3p后移植瘤重量显著升高(P<0.05)。结论 干扰LINC00909表达可通过上调miR-548-3p的表达而减弱结直肠癌细胞增殖、迁移及侵袭能力从而增强细胞放射敏感性。     

lncRNA SNHG16 在结直肠癌组织和细胞中表达及其调控结肠癌细胞中GPAM表达的机制

[摘要] 目的：探讨长链非编码RNA（long non-coding RNA,lncRNA）SNHG16 在结直肠癌（colorectal cancer,CRC）组织和细胞中的表达及其通过海绵吸附miR-128-3p 调控结肠癌细胞线粒体甘油3 磷酸酰基转移酶基因（mitochondrial glycerol-3-phosphateacyltransferase,GPAM）表达的分子机制。方法：收集2014 年1 月至2017 年1 月甘肃省人民医院肛肠科手术切除的60 例CRC患者的癌及癌旁组织标本,以及结直肠癌细胞系SW480、SW620、HCT116、Caco-2、DLD-1、HT29 和结肠上皮细胞CCD841,用qPCR法检测CRC组织和细胞系中SNHG16 的表达,分析SNHG16 表达与CRC患者临床病例特征的关系。分别用miR-128-3p模拟物、miR-128-3p 抑制剂、SNHG16 敲降载体转染SW480 细胞后,用qPCR 法检测细胞中miR-128-3p 及SNHG16 mRNA的表达,用Western blotting 法检测GPAM蛋白的表达,用CCK-8 法、克隆形成实验及细胞凋亡实验、Transwell 小室法检测细胞的增殖、凋亡及侵袭。用双荧光素酶报告基因法和RNA免疫共沉淀实验验证SNHG16 和miR-128-3p mRNA靶向结合。构建小鼠SW480细胞移植瘤模型,观察敲降SNHG16 对移植瘤生长的影响。结果：CRC组织及细胞系中SNHG16 高表达（均P<0.01）,其表达水平与CRC淋巴结转移、Duke’s 分期及患者生存期相关（均P<0.01）。敲降SNHG16 可显著抑制SW480 细胞的增殖及侵袭能力,并诱导细胞凋亡（均P<0.01）;敲降SNHG16 后小鼠移植瘤瘤体显著小于对照组(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测及RNA免疫沉淀反应结果显示,miR-128-3p 与SNHG16 相互作用,且在CRC患者中miR-128-3p 与SNHG16 负相关（P<0.01)。SNHG16 通过内源性竞争海绵吸附miR-128-3p 影响其下游靶基因GPAM的表达。结论：SNHG16 在CRC细胞中可通过海绵吸附miR-128-3p 调控GPAM表达,SNHG16及miR-128-3p 可作为CRC诊断及治疗的潜在靶点。     

miR-765靶向ARID1A对结直肠癌细胞侵袭及迁移的影响

目的 探讨微小核糖核酸-765(miR-765)靶向AT丰富结合域蛋白1A(ARID1A)对结直肠癌细胞侵袭及迁移的影响。方法 收集35例结直肠癌患者的结直肠癌组织及癌旁组织,体外培养结直肠癌SW480细胞并分为对照组、siRNA NC组、miR-765 siRNA组、mimic NC组和miR-765 mimic组。qRT-PCR法检测miR-765、ARID1A mRNA表达,Transwell法检测SW480细胞迁移和侵袭情况,蛋白印迹法检测ARID1A、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、血管内皮生长因子(VEGF)蛋白表达,双荧光素酶实验检测miR-765与ARID1A的靶向关系。结果 与癌旁组织相比,结直肠癌组织中miR-765水平显著升高,ARID1A mRNA及蛋白水平显著降低(P＜0.001),且结直肠癌组织中miR-765与ARID1A mRNA呈显著负相关(r=-0.768,P＜0.001);与TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期的患者相比,Ⅲ~Ⅳ期的患者结直肠癌组织中miR-765水平显著升高(P＜0.01),ARID1A蛋白水平显著降低(P＜0.001)。敲减miR-765表达后SW480细胞迁移数、侵袭数、miR-765水平及MMP-9、VEGF蛋白水平显著降低,ARID1A水平显著升高(P＜0.05);过表达miR-765后SW480细胞迁移数、侵袭数、miR-765水平及MMP-9、VEGF蛋白水平显著升高,ARID1A水平显著降低(P＜0.05)。miR-765靶向调控ARID1A表达。结论 miR-765可能通过靶向抑制ARID1A表达,促进结直肠癌SW480细胞的侵袭和迁移过程。     

miR-34a对结肠癌细胞SW480增殖、迁移和侵袭能力的影响及机制探讨

目的 探讨miR-34a对结肠癌细胞株SW480增殖、侵袭和迁移能力的影响及可能的作用机制。方法将miR-34a过表达慢病毒、空病毒载体转染SW480细胞,未做处理细胞作为空白对照组。Real-time PCR检测各组细胞内miR-34a的表达;CCK8法检测细胞增殖能力;划痕实验、Transwell小室实验检测细胞迁移和侵袭能力;Western blot实验检测细胞内E-cadherin和Vimentin蛋白表达。结果 与空病毒载体组及空白对照组相比,转染组细胞中miR-34a的表达增高,且细胞增殖效率、侵袭和迁移能力降低(P＜0.05),miR-34a使E-cadherin蛋白表达增加、Vimentin蛋白表达降低。结论 miR-34a可抑制结肠癌细胞SW480增殖、侵袭和迁移能力,并能影响E-cadherin和Vimentin的表达,miR-34a有望成为干预结肠癌转移和复发的分子靶点。     

miR-126在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:检测miR-126在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达,分析其表达与患者临床病理特征及预后的关系,探讨其过表达对Tca8113细胞恶性生物学行为的影响。方法:选取2016年6月至2018年6月在郑州大学第一附属医院手术治疗的62例OSCC患者的癌及癌旁组织标本,以及人舌鳞癌细胞株Tca8113和人口腔角质细胞株HOK,用qPCR法检测癌组织及细胞中miR-126的表达,分析miR-126表达与患者临床病理特征和预后的关系。利用脂质体转染技术,将miR-126 mimics、miR-NC质粒分别转染进Tca8113细胞,分别采用MTT法、流式细胞术及Trasnwell小室法检测细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭能力,WB法检测凋亡、迁移和侵袭相关蛋白的表达水平。结果:miR-126在OSCC组织和Tca8113细胞中的表达水平明显低于癌旁组织和HOK细胞(均P<0.01)。miR-126表达与OSCC患者的TNM分期、淋巴结转移相关联(均P<0.05),miR-126高表达患者的总生存率显著高于低表达组(P<0.05)。转染miR-126 mimics后,Tca8113细胞的增殖、迁移及侵袭能力明显降低(P<0.05或P<0.01),凋亡率明显升高(P<0.01);细胞中Bcl-2、N-cadherin和vimentin表达水平明显降低(均P<0.01),Bax和E-cadherin表达水平明显升高(均P<0.01)。结论:miR-126在OSCC组织及Tca8113细胞中低表达,上调miR-126可抑制Tca8113细胞的增殖、迁移和侵袭能力,并促进细胞凋亡。     

SNHG11调控miR 154影响结直肠癌细胞#br# 增殖、凋亡、迁移和侵袭的机制研究#br#

ObjectiveTo investigate the effects of long non coding RNA SNHG11 on proliferation, apoptosis, migration and invasion of colorectal cancer cells and its mechanisms. MethodsThe expression levels of SNHG11 and miR 154 in cancer tissues and adjacent tissues from 50 colorectal cancer patients who underwent surgery in Jiaozuo Peoples Hospital from February 2014 to October 2017 were detected by quantitative real time PCR. Small interfering RNA (si SNHG11) andmiR 154 mimics was transfected into colorectal cancer SW1116 cells and quantitative real time PCR was used to detect the levels of SNHG11 andmiR 154 in order to verify transfection efficiency. Cell proliferation was detected by MTT assay. Apoptosis was detected by flow cytometry. The migration and invasion abilities of cells were detected by Transwell. And the expression levels of CyclinD1, p21, Bcl 2, Bax, MMP 2 and E cadherin protein were detected by Western blot. The bioinformatics software were used to predictthe existence of the complementary binding site between the nucleotide sequences of SNHG11 and miR 154. The relationship between SNHG11 and miR 154 was verified by the dual luciferase reporter gene assay. ResultsCompared with adjacent tissues, the expression of SNHG11 in colorectal cancer tissues was significantly increased (P<005), and the expression level of miR 154 was significantly decreased (P<005). After inhibiting SNHG11 or over expressing miR 154, the activity, migration and invasion of SW1116 cells and the expression levels of Cyclin D1, Bcl 2 and MMP 2 protein were reduced(P<005), which the apoptosis rate of SW1116 cells, and the expression levels of P21, Bax and E cadherin protein were increased (P<005). SNHG11 regulated negatively on the expression of miR 154 in SW1116 cells of colorectal cancer.And inhibition of miR 154 expression reversed the effect of SNHG11 on proliferation, apoptosis, migration and invasion of colorectal cancer SW1116 cells. ConclusionsInhibition of SNHG11 may inhibit the proliferation, migration and invasion of colorectal cancer cells and promote apoptosis, with the mechanism of up regulation of miR 154 expression.     

lncRNASNHG11通过吸附miR-193a-5p促进NSCLC细胞A549的恶性生物学行为

目的： 探讨lncRNA SNHG11对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其可能机制。 方法:qPCR检测人胚肺细胞HEL-1和NSCLC细胞A549、H1299、HCC827中lncRNASNHG11和miR-193a-5p的表达水平,向A549细胞中转染SNHG11小干扰RNA（si-SNHG11）、miR-193a模拟物（miR-193a mimic）或miR-193a抑制剂（miR-193a inhibitor）后,CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,Transwell小室和细胞划痕实验检测对细胞侵袭和迁移的影响,WB法检测对细胞增殖抗原Ki67、细胞周期蛋白D1 （cyclin D1）表达的影响,双荧光素酶报告实验验证lncRNASNHG11与miR-193a-5p的靶向关系。 结果： 与人胚肺细胞HEL-1相比,NSCLC细胞A549、H1299、HCC827中lncRNA SNHG11均呈高表达、miR-193a-5p呈低表达（均P<0.05）;沉默lncRNA SNHG11可抑制A549细胞的增殖、侵袭和迁移,降低细胞中Ki67和Cyclin D1蛋白的表达水平（均P<0.05）;过表达miR-193a-5p可抑制A549细胞增殖和侵袭迁移（均P<0.05）。lncRNASNHG11可靶向吸附miR-193a-5p,抑制miR-139a-5p可部分逆转沉默lncRNA SNHG11对A549细胞增殖、侵袭和迁移的作用（均P<0.05）。 结论：lncRNA SNHG11通过吸附miR-193a-5p促进NSCLCA549细胞的增殖、侵袭和迁移。     

Radiosensitivity of lncrna linc00909 targeting mir-548-3p on colorectal cancer cells

Objective To investigate whether lncRNA LINC00909 affected the radiosensitivity of colorectal cancer cells by targeting miR-548-3p. Methods The expression levels of LINC00909 and miR-584-3p in colorectal cancer and adjacent tissues were detected by qRT-PCR. The colorectal cancer cells SW480 and SW620 were cultured in vitro, and transfected with si-NC, si-LINC00909, miR-NC, miR-584-3p mimics, si-LINC00909, and anti-miR-NC and si-LINC00909, and anti-miR-584-3p, respectively. The cells were irradiated with a dose of 4 Gy. The cell survival fraction and sensitization enhancement ratio (SER) were detected by clone formation assay. Cell proliferation was detected by MTT assay. Cell migration and invasion were assessed by Trans well chamber assay. The targeting relationship between LINC00909 and miR-584-3p was confirmed by dual luciferase reporter assay. The effect of interfering with the expression of LINC00909 or inhibiting the expression of miR-584-3p on the weight of the xenograft tumor after irradiation was evaluated by subcutaneous xenograft experiment in nude mice. Results The expression level of LINC00909 in colorectal cancer tissues was significantly up-regulated (P<0.05), whereas the expression level of miR-584-3p was significantly down-regulated (P<0.05). After interfering with the expression of LINC00909 or miR-584-3p overexpression, the cell survival fraction score was significantly reduced (P<0.05), the SERs were 2.017 and 1.762, and cell proliferation, migration and invasion were suppressed (all P<0.05). Dual luciferase reporter assay confirmed that LINC00909 could target and bind to miR-584-3p. After interfering with the expression of LINC00909, the weight of the transplanted tumor was significantly reduced (P<0.05), whereas the weight of the transplanted tumor was significantly increased after co-transfection with anti-miR-584-3p (P<0.05). Conclusion Interfering with the expression of LINC00909 can inhibit the proliferation, migration and invasion ability of colorectal cancer cells by up-regulating the expression of miR-548-3p, thereby enhancing the cell radiosensitivity.     

长链非编码RNARUNX1-IT1通过靶向miR-21对结直肠癌细胞迁移和侵袭的影响

目的：探讨长链非编码 RNA(lncRNA)RUNX1-IT1在结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响机制。方法：收集2017年1月—2019年1月于河北北方学院附属第一医院进行根治性手术切除的结直肠癌组织标本62例及其相应的癌旁正常组织标本,采用荧光定量PCR(qPCR)法检测结直肠癌组织和其相应的癌旁组织中lncRNA RUNX1-IT1的表达。并培养人结直肠癌细胞系(SW480、SW620、HCT-116)和人正常结直肠上皮细胞系(FHC),qPCR检测细胞系中 lncRNA RUNX1-IT1和 miR-21的表达水平,选择最适细胞系用于后续实验。通过上调或下调SW480细胞中lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的表达后,采用qPCR检测lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的表达水平,双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA RUNX1-IT1和miR-21的靶向关系,Transwell实验检测SW480细胞侵袭和迁移能力。结果：qPCR检测结果显示,与癌旁正常组织比较,lncRNA RUNX1-IT1在结直肠癌组织中表达降低(P<0.05),而miR-21在结直肠癌组织中表达升高(P<0.05),且lncRNA RUNX1-IT1与miR-21在结直肠癌组织中的表达呈负相关(r=-0.275,P=0.031)。与正常结直肠 FHC细胞相比,lncRNA RUNX1-IT1在 3种结直肠癌细胞系中的表达水平均显著降低(均为P<0.05),而miR-21均显著升高(均为P<0.05),且SW480细胞最明显,故后续采用SW480细胞系进行实验。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA RUNX1-IT1靶向调节miR-21的表达;与对照组相比,过表达lncRNA RUNX1-IT1可抑制SW480细胞侵袭和迁移能力(P<0.05);抑制 miR-21表达可抑制 SW480细胞侵袭和迁移能力(P<0.05);上调 miR-21表达可逆转过表达 lncRNARUNX1-IT1对 SW480细胞侵袭和迁移的抑制作用(P<0.05)。结论：LncRNA RUNX1-IT1在结直肠癌中表达下调,lncRNARUNX1-IT1通过靶向miR-21调控SW480细胞侵袭和迁移。     

miR-106b-5p靶向调控细胞周期蛋白D1抑制结直肠癌细胞增殖、迁移与侵袭

目的:探讨miR-106b-5p对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞增殖、迁移与侵袭的影响以及其作用机制.方法:实时荧光定量PCR检测miR-106b-5p在CRC组织与相应的癌旁组织、永生化的肠上皮细胞以及肠癌细胞中的表达量;CCK8实验检测DLD1细胞增殖能力;细胞划痕实验检测DLD1细胞的...     

lncRNA XIST 通过miR-32-5p/EZH2 分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为

目的：探讨lncRNA XIST 通过miR-32-5p/果蝇Zeste 基因增强子同源物2（enhancer of zeste homolog 2,EZH2）分子轴调控结直肠癌HCT-8 细胞的恶性生物学行为。方法：收集2014 年7 月至2018 年8 月中南大学湘雅医院直肠肛门外科资料完整的结直肠癌患者28 例癌组织和配对的癌旁组织标本,采用qPCR检测结直肠癌组织及细胞系中lncRNA XIST 和miR-32-5p 的表达水平,双荧光素酶报告基因验证lncRNA XIST、miR-32-5p 和EZH2 的靶向关系,并进一步通过WB检测EZH2 的表达水平。CCK-8、Transwell 及Annexin V-FITC/PI 染色流式细胞术检测HCT-8 细胞增殖、迁移及凋亡情况。结果：lncRNA XIST 在结直肠癌组织及细胞系中高表达,且在HCT-8 细胞中表达最高（P<0.05 或P<0.01）。双荧光素酶报告基因证实,lncRNA XIST 靶向负调控miR-32-5p（P<0.05）,且EZH2 是miR-32-5p 的靶基因。敲降lncRNA XIST 抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡（P<0.05或P<0.01）;进一步实验证明,敲降lncRNA XIST 上调miR-32-5p 的表达水平,从而下调EZH2 表达水平,进而抑制HCT-8 细胞增殖和迁移并诱导其凋亡。结论：lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2 分子轴促进HCT-8 细胞增殖、迁移并抑制细胞凋亡。     

地锦草乙醇提取物通过circRHOT1/miR-29a-3p轴抑制结直肠癌SW480 细胞的恶性生物学行为

目的：探讨地锦草乙醇提取物（EEEH）对人结直肠癌SW480细胞生物学行为的影响及其分子机制。方法：体外培养SW480 细胞,实验分为 Con 组、EEEH-L 组、EEEH-M 组、EEEH-H 组、si-NC 组、si-circRHOT1 组、EEEH-H+pcDNA 组、EEEH-H+pcDNA-circRHOT1组,分别以si-NC、si-circRHOT1、pcDNA、pcDNA-circRHOT1转染SW480细胞,采用CCK-8法、细胞克隆形成实验、Transwell实验分别检测转染后各组细胞的增殖、迁移及侵袭能力,qPCR 法检测转染后各组SW480细胞circRHOT1和miR-29a-3p的表达,WB法检测各组细胞中MMP-2、MMP-9蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测circRHOT1与miR-29a-3p之间的靶向关系。结果：与Con组比较,EEEH-L组、EEEH-M组、EEEH-H组SW480细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达均明显降低（均P<0.05）,circRHOT1的表达均降低（均P<0.05）而miR-29a-3p的表达均升高（均P<0.05）且呈剂量依赖性;细胞的存活率、细胞克隆形成数、迁移及侵袭细胞数均减少（均P<0.05）。circRHOT1可靶向负调控miR-29a-3p的表达。敲减circRHOT1可抑制SW480细胞的增殖、迁移及侵袭能力 ,而过表达 circRHOT1 则可减弱 EEEH对SW480细胞增殖、迁移及侵袭的抑制作用。结论：EEEH可通过调控circRHOT1/miR-29a-3p轴而抑制结直肠癌SW480细胞的增殖、迁移及侵袭能力。