β-榄香烯诱导K562白血病细胞凋亡

目的 探讨β-榄香烯诱导人红白血病K562细胞株凋亡作用的机制。方法 采用Hoechst33342和PI荧光染色电镜、DNA电泳、免疫组化以及流式细胞术分析法,对K562细胞凋亡的定性与定量以及凋亡抑制基因编码蛋白bcl-2在肿瘤细胞内的表达进行检验。结果 经β-榄香烯处理的K562细胞出现核固缩,染色质边集, 凋亡小体形成,琼脂糖凝胶电泳呈现出细胞凋亡特征性的DNA梯状带,凋亡细胞发生率与药物浓度和作用时间呈正相关,即药物浓度为40ug/ml(48h),凋亡细胞的发生率从2.3%上升至58.4%,经β-榄香烯处理的K562细胞的bcl-2表达较对照组降低。结论 β-榄香烯对肿瘤细胞的杀伤主要是通过诱导细胞凋亡,其抑制细胞内Bcl-2的表达,是诱发肿瘤细胞凋亡的主要机制之一。     

JNK/SAPKs信号转导通路在榄香烯抗肝癌效应中的作用

目的:探讨JNK/SAPKs信号转导通路在榄香烯抗肝癌效应中的作用,为阐明榄香烯抗癌效应的分子机制提供参考.方法:气相色谱法检测榄香烯在Hca-F肝癌细胞内的分布.透射电镜观察SMMC7721凋亡细胞的超微结构变化.利用Western-blotting对榄香烯处理的HepG2肝癌细胞JNK/SAPKs进行的活性分析.利用RT-PCR检测榄香烯处理的SMMC7721肝癌细胞的DAXX基因表达.结果:榄香烯标准品在8.42 min时出现洗脱峰.榄香烯处理3 h后,SMMC7721细胞开始发生具有凋亡特征的变化.榄香烯处理组HepG2细胞的JNK/SAPKs激酶活性次于热休克处理组,高于对照组.榄香烯处理的SMMC7721细胞组未见DAXX基因的表达.结论:榄香烯能够进入细胞内.其引起的肿瘤细胞凋亡可能是通过活化JNK/SAPKs来诱导的.DAXX传人途径在榄香烯诱导的JNK/SAPKs活化过程中可能不起主要作用.     

榄香烯注射液抗肿瘤作用基础研究的现状和进展

榄香烯（Ｅｌｅｍｅｎｅ）是从传统中草药姜科植物温郁金（温莪术）中提取获得的萜烯类化合物。榄香烯注射液以β 榄香烯为主要成分,并含有少量γ 和δ 榄香烯及其它萜类化合物,通过实验研究和临床试验已于１９９４年作为国家二类抗肿瘤新药上市应用。多年来,有关榄香烯注射液进一步的基础研究层出不穷,研究结果充分表明该药对多种肿瘤细胞具有显著的抑杀作用,能够诱导肿瘤细胞凋亡和分化,逆转肿瘤细胞多药耐药和抗肿瘤转移,与放化疗联合具有增敏减毒、提高机体免疫力以及毒副反应轻微等显著特点。     

榄香烯抗癌作用与诱发肿瘤细胞凋亡

榄香烯是从中药莪术中提取的抗癌有效成分，实验药理学和临床试验都证实该制剂对肿瘤有确切疗效。作者应用ＭＴＴ方法，分析了榄香烯对白血病细胞生长的影响。结果显示：榄香烯明显抑制白血病ＨＬ－６０和Ｋ５６２细胞的生长，对ＨＬ－６０细胞的半数生长的抑制剂量（ＩＣ５０）为２７．５μｇ／ｍｌ，对Ｋ５６２细胞的ＩＣ５０为８１μｇ／ｍｌ，而对正常人外周血白细胞（ＰＢＬ）的ＩＣ５０为２５４．３μｇ／ｍｌ。流式细胞术证实，榄香烯能阻滞肿瘤细胞从Ｓ期进入Ｇ２Ｍ期，并诱发其细胞凋亡。ＤＮＡ凝胶电泳及透射电镜超微结构观察都发现了榄香烯诱发肿瘤细胞凋亡所导致的生化与形态变化。结果表明，榄香烯诱导肿瘤细胞凋亡是其抗肿瘤作用机制的重要方面之一。     

β-榄香烯抗肿瘤及逆转耐药机制的研究进展

β-榄香烯是国产抗癌药,主要通过直接杀伤肿瘤细胞、诱导细胞凋亡、诱导分化、细胞周期阻滞、抑制信号转导及抑制血管生长等方式参与抗肿瘤。近年有学者提出β-榄香烯可有效逆转化疗药物耐药,与放化疗联合增敏等功效,且因其广谱、安全、有效、价廉等突出优点而具有良好的应用前景。现就β-榄香烯抗肿瘤及逆转耐药机制的相关研究作一综述,为榄香烯更好地应用于临床提供理论基础。     

榄香烯或／和热休克对肿瘤细胞凋亡的影响

为了进一步研究榄香烯的抗癌和诱导肿瘤主动免疫效应及其分子机制 ,我们设想它可能与榄香烯作为一种应激原(stressor)诱导肿瘤细胞产生热休克蛋白 (heatshockprotein ,HSP)及HSP -肿瘤肽之间有一定的关系。因此我们对小鼠H2 2腹水型肝癌细胞和L6 15白血病细胞进行不同浓度的榄香烯 (elemene)或 /和不同时间的热休克 (4 2℃ )处理 ,用光镜和透射电镜观察其对形态结构变化的影响 ,并分别采用直接免疫荧光法流式细胞术检测肿瘤细胞凋亡百分率。结果表明 ,不同浓度的榄香烯和不同温度、不同时间的热休克处理对肿瘤细胞的形态、结构的影响不…     

榄香烯联合紫杉醇诱导肺癌细胞凋亡和调控细胞周期的体外研究

目的：观察榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞的诱导凋亡和周期调控作用。方法：榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫印迹法检测蛋白的表达。结果：榄香烯（20μg/ml、80μg/ml）和紫杉醇（2μg/ml）两种药物联合作用A549细胞时,产生协同的增殖抑制作用。榄香烯只诱导A549细胞少量凋亡,紫杉醇使细胞阻滞在G2/M期。榄香烯和紫杉醇联合应用时,细胞凋亡率提高,并检测到PARP的裂解。榄香烯没明显改变survivin的表达,紫杉醇能上调survivin表达。低浓度榄香烯和紫杉醇联合后survivin仍高表达,而高浓度榄香烯和紫杉醇联合后,sur-vivin表达明显下调。结论：榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞有诱导凋亡和调控细胞周期的作用。     

榄香烯联合紫杉醇诱导肺癌细胞凋亡和调控细胞周期的体外研究

目的:观察榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞的诱导凋亡和周期调控作用。方法:榄香烯和紫杉醇单独及联合作用于肺癌A549细胞,MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,免疫印迹法检测蛋白的表达。结果:榄香烯(20μg/ml、80μg/ml)和紫杉醇(2μg/ml)两种药物联合作用A549细胞时,产生协同的增殖抑制作用。榄香烯只诱导A549细胞少量凋亡,紫杉醇使细胞阻滞在G2/M期。榄香烯和紫杉醇联合应用时,细胞凋亡率提高,并检测到PARP的裂解。榄香烯没明显改变survivin的表达,紫杉醇能上调survivin表达。低浓度榄香烯和紫杉醇联合后survivin仍高表达,而高浓度榄香烯和紫杉醇联合后,sur-vivin表达明显下调。结论:榄香烯和紫杉醇对肺癌A549细胞有诱导凋亡和调控细胞周期的作用。     

榄香烯诱导神经胶质瘤细胞凋亡作用的剂量和时间依赖性研究

神经胶质瘤是目前最顽固的恶性肿瘤之一,我们应用榄香烯治疗胶质瘤取得了较为显著的疗效。在临床应用中,我们发现榄香烯的治疗效果与使用途径和用药剂量有很大关系。前期体外研究已经证实,榄香烯能抑制胶质瘤细胞的恶性增殖,并诱导凋亡。我们采用流式细胞分析方法,进一步探讨榄香烯诱导凋亡与药物浓度和作用时间的关系。     

树突细胞联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗的实验研究

背景与目的：树突细胞（Dendritic cells，DC）是目前发现的功能最强大的肿瘤抗原专职免疫递呈细胞，DC疫苗是目前最具临床应用潜能的治疗性疫苗。肿瘤细胞凋亡小体被DC的MHC—1分子提呈并诱导的特异性CTL免疫反应抗癌作用显著。本研究探讨了DC负载凋亡癌细胞抗原后诱导的免疫应答联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗作用。方法：制备C57BL／6小鼠骨髓源性DC并鉴定，负载肿瘤抗原后制备成疫苗。分别观察DC诱导的CTL和β-榄香烯对胰腺癌细胞的杀伤作用。体内观察DC疫苗联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌的抑制作用。结果1经电镜及流式细胞鉴定可获得典型的具有抗原加工及递呈作用的DC，利用TNF-α可使成熟的树突状细胞比例增加，MHC-Ⅱ、CD83、CD86等表面分子的表达较单纯DC组显著增强。负载凋亡抗原后DC诱导的特异性CTL体外对胰腺癌细胞有显著杀伤作用，效靶比30：1时，诱导的CTL对胰腺癌细胞抑制率达93％。β-榄香烯对癌细胞增殖抑制明显，DC疫苗与β-榄香烯联合治疗可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长，使其生存期延长，联合治疗组生存期为49．4天，与单纯β-榄香烯组（24．8天）、DC疫苗（38．5天）、DC组（20．7天）及对照组（17．5天）相比有显著差异（P〈0．05）。结论：经凋亡肿瘤细胞致敏的DC回输荷瘤小鼠可激发宿主针对特异肿瘤的Th1及CTL免疫应答，以DC、介导的免疫反应联合中药的治疗方法可成为抗肿瘤的崭新且有效手段。     

榄香烯和恩度对原发性肝癌细胞增殖和凋亡影响的研究

目的:探讨榄香烯和恩度对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法:用噻唑蓝还原法(MTT法)观察榄香烯和恩度对HepG2细胞活性的影响,流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Annexin V/PI双染在流式细胞仪上检测对细胞凋亡的影响。结果:榄香烯和恩度能抑制HepG2细胞的活性,呈现时间和剂量依赖性;榄香烯和恩度主要作用肝癌细胞周期的G1期;榄香烯和恩度可诱导细胞发生早期凋亡,并呈现时间和剂量的依赖性。结论:榄香烯和恩度都能抑制HepG2细胞的增殖和诱导细胞的凋亡,两种药物联合对于肝癌细胞抑制生长和诱导凋亡表现出协同作用。     

榄香烯治疗原发性肝癌的研究进展

榄香烯作为传统中药温郁金（莪术）的有效成分之一,具有非常显著的抗肝癌作用。榄香烯可诱导肝癌细胞凋亡、阻断肝癌细胞周期及抑制肝癌细胞的增殖和侵袭转移,还可抑制肝癌细胞血管生成并调节免疫功能。榄香烯注射液是国家批准为二类抗肿瘤新药,临床已广泛应用于肝癌的治疗。本文就榄香烯注射液治疗原发性肝癌的作用机制及临床应用进展进行综述。     

β-榄香烯对肾细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究

目的:探讨β-榄香烯对肾细胞癌786-0细胞的抗肿瘤作用及机制.方法:浓度为50,100,150,200和250 μg/ml β-榄香烯作用于肾癌786-0细胞24、48和72h,MTT法检测细胞活力.50,150μg/ml β-榄香烯作用于786-0细胞24h,流式细胞术碘化丙啶(PI)染色检测细胞凋亡和周期分布,免疫印迹法检测PARP裂解和凋亡相关蛋白的表达.结果:β-榄香烯对肾癌786-0细胞的抑制作用随着浓度和时间的增加而增强.流式细胞术结果提示β-榄香烯可诱导细胞凋亡,而对细胞周期分布无明显影响.β-榄香烯可裂解PARP,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达.结论:β-榄香烯可能通过诱导细胞凋亡发挥对肾癌786-0细胞的抗肿瘤作用.     

β-榄香烯对肾细胞癌的抗肿瘤作用及机制研究

目的：探讨β-榄香烯对肾细胞癌786-0细胞的抗肿瘤作用及机制。方法：浓度为50,100,150,200和250μg/mlβ-榄香烯作用于肾癌786-0细胞24、48和72h,MTT法检测细胞活力。50,150μg/mlβ-榄香烯作用于786-0细胞24h,流式细胞术碘化丙啶（PI）染色检测细胞凋亡和周期分布,免疫印迹法检测PARP裂解和凋亡相关蛋白的表达。结果：β-榄香烯对肾癌786-0细胞的抑制作用随着浓度和时间的增加而增强。流式细胞术结果提示β-榄香烯可诱导细胞凋亡,而对细胞周期分布无明显影响。β-榄香烯可裂解PARP,并下调抗凋亡蛋白Bcl-2和Survivin的表达。结论：β-榄香烯可能通过诱导细胞凋亡发挥对肾癌786-0细胞的抗肿瘤作用。     

不同剂型β-榄香烯类药物抗癌疗效及其机制的研究

目的观察不同剂型β-榄香烯类药物的抗癌疗效及其作用机制。方法本实验采用MTT方法、流式细胞术分析法,检测二者对人红白血病K562细胞生长抑制的影响。结果β-榄香烯乳剂和β-榄香烯吗素均能明显抑制K562细胞生长,其作用机制主要是诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期(G1期细胞升高,S期细胞下降)。结论β-榄香烯乳剂和β-榄香烯吗素抗癌疗效及其作用机制相似。     

榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡及对端粒酶活性和hTERT表达影响的研究

目的：探讨榄香烯诱导人脑胶质瘤U251细胞凋亡及其影响端粒酶活性及其催化亚单位人端粒酶逆转录酶（hTERT）表达的机制。方法：将榄香烯处理人脑胶质瘤U251细胞株后，用MTT法检测细胞增殖抑制率．并求出半数抑制浓度（IC50），倒置显微镜和电镜观察经榄香烯处理的U251细胞形态。流式细胞仪和原位末端标记技术检测细胞周期及细胞凋亡率的变化，免疫荧光技术观簪凋亡小体．流式细胞仪测定bcl-2表达水平．端粒重复扩增（TRAP）法测定端粒酶活性的变化，RT—PCR检测bcl-2和hTERT的表达。结果：榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用，呈剂量和作用时间的依赖性，IC50为0.062mg／ml，倒置显微镜下可见榄香烯组细胞皱缩、变小，电镜下可见具有典型新月形核的凋亡细胞和凋亡小体，流式细胞仪检测榄香烯阻滞U251细胞周期中S期向G2／M期的转变过程，减少有丝分裂，并引起细胞凋亡，免疫荧光技术观察凋亡小体，TRAP法发现榄香烯可以降低端粒酶活性的变化＋呈时间和剂量依赖型。RT—PCR分别证实榄香烯降低bcl-2和hTERT基因表达水平。结论：榄香烯诱导人脑胶质瘸U251细胞凋亡，并抑制U251细胞端粒酶的活性，榄香烯作用于胺质瘤的分子生物学机制可能通过抑制bc1-2表达，下调hTERT基因，降低端粒酶的活性，从而诱导细胞调亡。     

榄香烯抑制人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达及其影响细胞凋亡机制的研究

目的:探讨榄香烯对人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达及其影响细胞凋亡的机制.方法:应用榄香烯处理人脑胶质瘤U251细胞株,应用MTT法检测细胞增殖抑制试验,并求出半数致死浓度(IC50),倒置显微镜和电镜观察经榄香烯处理的U251细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期的变化,凝胶电泳检测凋亡梯度,免疫荧光技术观察凋亡小体,免疫组织化学检测c-myc蛋白和RT-PCR检测c-myc基因的表达.结果:榄香烯对U251细胞株增殖具有抑制作用,呈剂量和作用时间的依赖性,IC50为0.062mg/ml,倒置显微镜下可见榄香烯组细胞皱缩、变小,电镜下可见具有典型新月形核的凋亡细胞和凋亡小体,流式细胞仪检测榄香烯阻滞U251细胞株周期中S期向G2/M期的转变过程,减少有丝分裂,并引起细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳获得清晰的凋亡特征性梯形条带,免疫荧光技术观察凋亡小体,免疫组织化学和RT-PCR分别证实榄香烯抑制c-myc蛋白和c-myc基因的表达.结论:榄香烯可抑制人脑胶质瘤U251细胞株c-myc癌基因表达,并通过下调U251细胞株的凋亡途径,促进肿瘤细胞凋亡,抑制细胞增殖.     

不同剂型β—榄香烯类药抗癌疗效及其机制的研究

目的：观察不同剂型β－榄香烯类药抗癌疗效及其作用机制。方法：本实验采用MTT方法,流细胞术分析法,检测二者对人红白血病K562细胞生长抑制的影响。结果：β－榄香烯乳剂和β－榄香烯吗素均能明显抑制562细胞生长,其作用机制主要是诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期,（G1期细胞升高,S期细胞下降）。结果β－榄香烯乳剂和β－榄香烯吗素抗癌疗效及其作用机制相似。     

榄香烯乳对恶性肿瘤患者T细胞亚群、可溶性白细胞介素-2受体影响的研究

榄香烯乳系我国自行开发研制的二类抗肿瘤药物，其对肿瘤细胞生长有直接抑制作用，能阻滞肿瘤细胞从S期进G；＋M期，降低了肿瘤细胞的分裂繁殖能力，抑制了其增殖而受药物影响的肿瘤细胞迅速凋亡，最终被杀灭。同时，榄香烯乳还有增加多种免疫功能的作用，但有关这方面的临床资料尚少，本文着重研究了榄香烯乳对恶性肿瘤患者T细胞亚群和可溶性白细胞介素一2受体的影响，为榄香烯乳对免疫功能的作用作进一步探讨。1临床资料与方法1·l临床资料病例选择均为1996年1月～1997年1月住院的各种恶性肿瘤患者64例，随机分为治疗组和对照组。治疗组…     

β-榄香烯诱导小鼠黑色素瘤B16细胞凋亡的研究

 目的 研究β-榄香烯（β-E） 诱导小鼠黑色素瘤B16 细胞发生凋亡的作用。方法 应用透射电镜和TdT介导的脱氧核苷酸缺口末端标记（TUNEL） 技术。结果 表明10-40ugmlβ-E作用12-48 小时,可使B16 细胞发生凋亡,且凋亡指数与β-E 的剂量及作用时间有关。结论 诱导肿瘤细胞凋亡的作用是β-E抗癌作用的重要机制之一。